默写39-42(基因工程)及答案.doc
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1、37 课时默写课时默写DNA 重组技术的基本工具重组技术的基本工具 一基因工程的概念:基因工程是指按照 ,进行严格的设计,通过体外 和 等技术,赋予生物以新的 ,创造出更符合人们需要的 新的 和 。由于基因工程是在 水平上进行设计 和施工的,因此又叫做 。 二基因工程的基本操作工具 1限制性核酸内切酶“分子手术刀” (1)来源:主要来自 (2)功能及功能特点:能够识别双链 DNA 分子的某种 ,并且 使每一条链中 的两个核苷酸之间的 断开。 (3)结果: 末端:限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将 DNA 的两条链分别切开; 末端:限制酶在它识别序列的中心轴线处切开。 2 DNA 连接酶“分子缝
2、合针” (1)种类和来源: 只能连接黏性末端:E coliDNA 连接酶,从 中分离出来; 既能连接黏性末端也能连接平末端: ,从 T4噬菌体中分离出来 (2)作用:将双链 DNA 片段“缝合”起来,恢复被 切开的两个核苷酸之间的 。 3基因进入受体细胞的载体“分子运输车” (1)作用:将 送入到受体细胞中 (2)种类: 、 噬菌体的衍生物、动植物 等 (3)最常用载体质粒 特点:有一个至多个 ,供外源 DNA 片段(基因)插入其中; 能在受体细胞中 , 或整合到染色体 DNA 上, 随染色体 DNA 进行同步 ; 有特殊的 ,供重组 DNA 的鉴定和筛选。 课时默写课时默写 40 基因工程的
3、基本操作程序基因工程的基本操作程序 一一基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤: 1 ;2 ; 3 ;4 。 其中,基因工程的核心是 。 二二目的基因的获取目的基因的获取 1目的基因:主要是指 的基因,也可以是一些具有调控作用的因子。 2获取方法 (1)从基因文库中获取目的基因 基因文库:将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段,导入 中储存,各个受体 菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。 种类: 文库:包含一种生物所有的基因; 部分基因文库:包含一种生物的 基因,如 cDNA 文库。 38 提取依据:基因的核苷酸序列、基因的 、基因在
4、染色体上的位置、基因的转录产物 ,以及基因的表达产物 等特性。 (2)利用 PCR 技术扩增目的基因 PCR 的含义:是一项在生物 复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。 目的:短时间内大量扩增目的基因 原理: 过程: 第一步:加热至 90-95, ; 第二步:冷却至 ,引物结合到互补 DNA 链; 第三步:加热至 70-75,热稳定 DNA 聚合酶(Taq 酶)从引物起始进行互补链的合成。 如此重复循环多次。 结果:每一次循环后,目的基因的数量可以增加一倍,即成 形式扩增(约为 2n,n 为扩 增循环的次数) 。 (3)人工合成 如果目的基因较小, 又已知, 可通过 DNA 合成仪用 直接人
5、工合成。 三三基因表达载体的构建基因表达载体的构建 1构建基因表达载体的目的: (1)使目的基因在受体细胞中 ,并且可以 给下一代。 (2)使目的基因能够 和 。 2基因表达载体组成: ; 启动子:位置:目的基因的 ; 功能:是 识别和结合的部位,驱动基因转录出 ; :位置:目的基因的 ; 功能:终止 ; 标记基因:鉴别受体细胞中是否含有 。 3基因表达载体的功能:通过基因表达载体将 导入受体细胞。 四将目的基因导入受体细胞 1转化的概念:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内 的过程。 2将目的基因导入植物细胞 (1) 法:将目的基因导入双子叶植物和裸子植物。 (2) 法:将目的基因导入单
6、子叶植物常用的方法。 (3) 法:我国科学家独创的一种方法。 3将目的基因导入动物细胞 (1)方法: (2)常用受体细胞: 4将目的基因导入微生物细胞 (1)方法:用 处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态(这种 细胞称为 ) 。 (2)受体细胞:原核细胞(使用最广泛的是大肠杆菌细胞) 。 (3)原核细胞的特点:繁殖 ,多为 , 相对较少等。 五目的基因的检测与鉴定 39 1分子水平检测 (1)检测转基因生物 DNA 上是否插入了目的基因。 方法: 杂交技术。 (2)检测目的基因是否转录出 mRNA。 方法: 杂交技术。 (3)检测目的基因是否翻译成蛋白质。 方法:
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