人教版教学课件2007年广东生物科《专题2微生物的培养与应用-微生物的实验室培养(选修一)》-下学期.ppt
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1、专题专题2:2:微生物的培养与应用微生物的培养与应用1特点:特点:结构都相当简单结构都相当简单,个体多数十分微小个体多数十分微小.通常要用通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构胞结构.且体内一般不含有叶绿素且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用不能进行光合作用.微生物包括哪五类微生物包括哪五类:真菌真菌原生动物原生动物 原核生物界原核生物界 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界一、基础知识:一、基础知识:(一一)微生物微生物:是一切肉眼看不见或:是一切肉眼看不见或看不清看不清楚的微小生物的总称楚的微小生物的总称2病毒
2、的结构病毒的结构3病毒病毒 4SARS冠状病毒、冠状病毒、禽流感病禽流感病毒毒5朊病毒(蛋白质病毒)朊病毒(蛋白质病毒)6病毒的增殖:病毒的增殖:7细菌的外形与大小细菌的外形与大小图图1-1 常见的三种细菌典型形态常见的三种细菌典型形态A.球菌球菌 B.杆菌杆菌 C.弧菌弧菌8 有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做形的休眠体,叫做芽孢芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸芽孢,煮沸3 3小时以后才
3、死亡。芽孢又小又轻,可以随小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌孢又可以萌发,形成一个细菌.9菌落:菌落:n单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落形态结构的子细胞群体,叫做菌落。n菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落是鉴定菌种的重要依据。10细菌的营养类型细菌的营养类型 n根据细菌所利用的根据细菌所利用的能源和碳源能源和碳源的不同的不同,将细菌分为
4、两大营养类型。,将细菌分为两大营养类型。n自养菌自养菌:分类分类,举例举例?n异养菌异养菌:腐生菌腐生菌寄生菌寄生菌 大部分病原菌大部分病原菌光合自养型光合自养型:光合细菌光合细菌化能自养型化能自养型:硝化细菌硝化细菌,铁细菌铁细菌,硫细菌硫细菌11菌落细菌的菌落特征细菌的菌落特征因种而异因种而异 121 1、结构:、结构:单细胞原核单细胞原核分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝)分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝)13链霉素、土霉素、四环素、链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素,其中微生物中发现了几千种抗生素,其中2/32/3是是由放
5、线菌产生的由放线菌产生的 应用应用:14真菌真菌15如图是酵母菌电子显微如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构镜下的形态结构酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌青霉青霉16生殖生殖直立菌丝直立菌丝 营养菌丝营养菌丝腐生生活腐生生活孢子生殖孢子生殖1718(二)培养基(二)培养基 培养基(培养液)是培养基(培养液)是由人工方法配由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养混合营养液。液。(1 1)按物理状态分:)按物理状态分:固体培养基固体培养基和和液体培养液体培养基、半固体培养基基、半固体培养基。(2 2)按功能分:)按功能分:选择培养基选择培养基和和鉴别培养基鉴别
6、培养基。(3 3)按成分分:)按成分分:天然培养基天然培养基和和合成培养基合成培养基。1.1.培养基的类型培养基的类型19固体培养基:菌落固体培养基:菌落20液体培养基:液体培养基:表面生长表面生长均匀混浊生长均匀混浊生长沉淀生长沉淀生长21半固体培养基:半固体培养基:无动力无动力 有动力有动力(弥散弥散)222.2.不同的微生物往往需要采用不同的不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方培养基配方 3.3.不管哪种培养基,一般都含有不管哪种培养基,一般都含有水水、碳碳源源、和、和氮源氮源、无机盐无机盐、等等营养物质,另营养物质,另外还需要满足微生物生长对外还需要满足微生物生长对pHpH、特殊特
7、殊营养物质以及氧气的要求营养物质以及氧气的要求234.4.培养基的用途培养基的用途液体培养基:增菌、工业生产液体培养基:增菌、工业生产固体培养基:纯化(分离),鉴定、活固体培养基:纯化(分离),鉴定、活菌计数、保藏菌种菌计数、保藏菌种半固体培养基:动力检测半固体培养基:动力检测24(三)无菌技术(三)无菌技术1.1.无菌技术的概念无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中,无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。所有防止杂菌污染的方法。成功地培养微生物的关键。成功地培养微生物的关键。25()()消毒定义:消毒定义:2.2.消毒与灭菌的概念及两者的区别消毒与灭菌的概念及两
8、者的区别(2 2)灭菌的定义:)灭菌的定义:3.3.常用的消毒与灭菌的方法常用的消毒与灭菌的方法261 1、灼烧灭菌、灼烧灭菌灭菌的方法:灭菌的方法:272 2、干热灭菌:、干热灭菌:160-170 160-170 下加热下加热1-2h1-2h。3 3、高压蒸气灭菌:、高压蒸气灭菌:100kPa100kPa、121 121 下下维持维持15-30min.15-30min.281.1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?外来微生物污染外,还有什么目的?2.2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。请你判断以下材料或用
9、具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。如果需要,请选择合适的方法。(1 1)培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿(2 2)玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管(3 3)实验操作者的双手实验操作者的双手答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答:(答:(1)、()、(2)需要灭菌;()需要灭菌;(3)需要消毒。)需要消毒。291 1、器具的灭菌、器具的灭菌2 2、培养基的配制、培养基的配制3 3、培养基的灭菌、培养基的灭菌4 4、倒平板、倒平板5 5、微生物接种、微生物接种6 6、恒温箱中培养、恒温箱中培
10、养7 7、菌种的保存、菌种的保存30三、实验操作三、实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌用于培养细菌)311 1计算计算、称量称量2 2溶化溶化3 3调调pHpH:pH7pH76 64 4过滤:这一步可以省去。过滤:这一步可以省去。5 5分装:分装过程中注意不要使培养分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。三角烧瓶容积的一半为宜。6 6加塞加塞7 7包扎包扎操作步骤操作步骤32 8 8灭菌灭菌:将将50
11、50mlml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为锅,在压力为100100kPakPa、温度为温度为121121,灭菌,灭菌15153030minmin。将培养基用旧报纸包裹,放入干将培养基用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在热灭菌箱内,在160160170 170 下灭菌下灭菌2 2h h。9 9倒平板倒平板:待培养基冷却到待培养基冷却到50 50 左右时,在酒精灯附左右时,在酒精灯附近倒平板。(倒平板操作见课本)近倒平板。(倒平板操作见课本)2 2d d后观察平后观察平板,无
12、杂菌污染才可用来接种板,无杂菌污染才可用来接种.10 10无菌检查:无菌检查:将灭菌的培养基放入将灭菌的培养基放入3737的温室中培的温室中培养养24482448小时,以检查灭菌是否彻底。小时,以检查灭菌是否彻底。33(二)纯化大肠杆菌(二)纯化大肠杆菌接种方法有:接种方法有:平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法34 平板划线的操作方法平板划线的操作方法交叉划线法交叉划线法连续划线法连续划线法 35平板划线的操作平板划线的操作3637一旦划破,会造成划线不均匀,难一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的;以达到分离单菌落的目的;二是存留在划破处的单个细胞无法二是存留
13、在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落,菌落会沿着划破形成规矩的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。处生长,会形成一个条状的菌落。3839 1.1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?要灼烧接种环吗?为什么?答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种
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