一轮复习ppt课件:专题27 基因工程和生物技术的安全性与伦理问题 -2023新人教版(2019)《高中生物》选择性必修第三册.pptx
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1、考点一基因工程考点一基因工程一、基因工程的基本工具1.限制酶(限制性内切核酸酶)来源主要是原核细胞作用识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开结果形成黏性末端或平末端来源主要是大肠杆菌、T4噬菌体作用将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的磷酸二酯键主要种类E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶,前者只连接黏性末端,后者既可连接黏性末端,又可连接平末端2.DNA连接酶3.载体1)条件:能在受体细胞中复制并稳定保存;具有一至多个限制酶切割位点;具有标记基因等。2)种类:质粒(最常用)、噬菌体、动植物病毒等。3)作用:携带外源DNA片段进入受体细胞
2、。4)特点:可在受体细胞中自我复制或整合到受体DNA上,随受体DNA同步复制。二、基因工程的基本操作程序1.目的基因的筛选与获取1)筛选:从已知结构和功能清晰的基因中筛选。2)获取和扩增目的基因获取目的基因A.通过化学合成法直接人工合成目的基因,如利用DNA合成仪直接人工合成比较小的目的基因。B.通过基因文库(如基因组文库和cDNA文库)获取目的基因。C.直接从细胞中提取DNA或RNA,通过限制酶酶切或RNA的逆转录获得目的基因。PCR扩增目的基因A.原理:DNA半保留复制。B.前提:已知目的基因的一段核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。C.条件:DNA母链、引物(2种)、耐高温的DNA聚合
3、酶和4种脱氧核苷酸。D.E.结果:1个DNA2n个DNA(n为扩增循环次数)。F.鉴定:常用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物。【名师点拨】思考:引物结合位置不在模板链端部时,第几次循环才能出现双链等长的目标DNA片段?提示:第三次循环(如图)。2.基因表达载体的构建1)目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在、表达、发挥作用并可遗传给下一代。2)基因表达载体的构成3.将目的基因导入受体细胞1)植物细胞:农杆菌转化法、花粉管通道法。2)动物细胞:显微注射法。3)原核细胞:常用Ca2+处理原核细胞,使之处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,然后将重组载体导入细胞。【疑难突破】农杆菌内含有Ti质粒,
4、当农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA序列转移到被侵染的细胞,并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。4.目的基因的检测与鉴定1)分子水平2)个体生物学水平:抗性实验。考点二基因工程的应用与蛋白质工程考点二基因工程的应用与蛋白质工程一、基因工程的应用1.农牧业方面:改良动植物品种,提高作物和畜产品的产量等。2.医药卫生领域:利用生物反应器和基因工程菌等获得重要医药产品;培育转基因克隆猪器官,解决人类器官移植时供体器官不足和免疫排斥问题。3.食品工业方面:利用基因工程菌生产食品工业用酶、氨基酸和维生素等。二、蛋白质工程1.出现的缘由:基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质,不能满
5、足人们生产、生活所需。2.手段:改造或合成基因。3.目的:改造现有蛋白质或制造新蛋白质。4.基本思路:预期蛋白质功能设计预期蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新基因获得所需蛋白质。考点三考点三DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定1.实验原理1)DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精。2)沸水浴条件下,DNA与二苯胺反应呈蓝色。2.实验过程:选取DNA含量高的生物组织破碎细胞,获取含DNA的滤液加入体积分数为95%的冷酒精,用玻璃棒搅拌,析出DNA(丝状物)将丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液,用二苯胺鉴定(沸水浴)。考点四生物技术的安全性与伦理
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