第07讲临床专用自动生化分析仪分析技术课件.ppt
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- 07 临床 专用 自动 生化 分析 技术 课件
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1、第七章第七章临床专用自动生化分析仪分析技术临床专用自动生化分析仪分析技术广州医学院医学检验系广州医学院医学检验系 刘忠民刘忠民全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术2教学目标与要求教学目标与要求v掌握:掌握:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪分析技术浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪分析技术的基本原理和方法。
2、的基本原理和方法。v熟悉:熟悉:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的结构组浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的结构组成特点,仪器的维护保养,质量控制和临床应用。成特点,仪器的维护保养,质量控制和临床应用。v了解:了解:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的分类。浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的分类。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术3目目 录录浊度自动化分析技术浊度自动化分析技术1电解质自动化分析技术电解质自动化分析技术2血气自
3、动化分析技术血气自动化分析技术3电泳自动化分析技术电泳自动化分析技术4小结与展望小结与展望5返回总目录返回总目录全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术4全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术5y浊度分析浊度分析通过检测溶液浊度通过检测溶液浊度,对物质含量进行分析的方法。对物质
4、含量进行分析的方法。临床上多用于特定蛋白的分析。临床上多用于特定蛋白的分析。y特定蛋白特定蛋白在机体内在机体内具有某种生理功能,疾病状态时又有着具有某种生理功能,疾病状态时又有着特定的病理生理意义的蛋白质,临床上常被称为特定的病理生理意义的蛋白质,临床上常被称为特定蛋白(特定蛋白(special protein)。)。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术6全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床
5、生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术7y1.1.胶体溶液胶体溶液粒子对光具有反射、折射、散射和吸收等作用。粒子对光具有反射、折射、散射和吸收等作用。y2.2.光透射理论光透射理论朗伯朗伯-比尔(比尔(Lambert-Beer)定律:)定律:y3.3.光散射理论光散射理论雷莱(雷莱(Rayleigh)公式:)公式:KLCA 222240sr)cos1(N8II全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析
6、仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术8该公式来自气溶胶悬浮微粒,用于溶液时需进行校正。该公式来自气溶胶悬浮微粒,用于溶液时需进行校正。当使用高强度光源(如激光)时,液相悬浮颗粒与非偏当使用高强度光源(如激光)时,液相悬浮颗粒与非偏振光源的散射作用公式为:振光源的散射作用公式为:公式可见,散射光强度与颗粒的浓度和分子量有关。公式可见,散射光强度与颗粒的浓度和分子量有关。242220srN)cos1(CM)dCdn(4II全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七
7、章临床专用自动生化分析仪分析技术9y雷莱公式与修正公式雷莱公式与修正公式雷莱公式雷莱公式v仅适合直径仅适合直径110入射光波长的小颗粒入射光波长的小颗粒Debye修正公式修正公式v适合于颗粒直径略小于入射光波长的溶液适合于颗粒直径略小于入射光波长的溶液Mie修正公式修正公式v适合于颗粒直径等于或大于入射光波长的溶液适合于颗粒直径等于或大于入射光波长的溶液全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术10y4.4.免疫浊度分析免疫浊度分析在一定
8、条件下,可溶性抗原与抗体在液相中特异在一定条件下,可溶性抗原与抗体在液相中特异结合,形成有一定大小的抗原结合,形成有一定大小的抗原-抗体免疫复合物抗体免疫复合物颗粒,使反应液出现浊度;颗粒,使反应液出现浊度;当光线通过介质中的复合物颗粒时,可形成光的当光线通过介质中的复合物颗粒时,可形成光的吸收、透射、散射和折射;吸收、透射、散射和折射;通过测量透射光或散射光信号强弱,从而推算出通过测量透射光或散射光信号强弱,从而推算出被测物的量。被测物的量。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分
9、析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术11y浊度分析方法的分类浊度分析方法的分类根据检测器的位置及其接收光信号的性质分:根据检测器的位置及其接收光信号的性质分:v透射免疫浊度法(透射免疫浊度法(turbidimetry immunoassay)v散射免疫浊度法(散射免疫浊度法(nephelometry immunoassay)根据复合物形成速度和测定方式分:根据复合物形成速度和测定方式分:v终点浊度法终点浊度法v速率浊度法速率浊度法根据根据浊度形成的原理浊度形成的原理分分:v沉淀反应免疫浊度法沉淀反应免疫浊度法:灵敏度低:灵敏度低v胶乳凝集比浊(或粒子强化免疫浊度法):灵敏度高胶乳凝
10、集比浊(或粒子强化免疫浊度法):灵敏度高全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术12y1.1.透射免疫浊度法透射免疫浊度法指在光源的光路指在光源的光路0o角方向上测量透射光强度,并角方向上测量透射光强度,并研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。y2.2.散射免疫浊度法散射免疫浊度法指在光路的指在光路的5o90o角的方向上测量散射光强度,角的方向上测量散射光强度,并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法
11、。并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术13全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术14y1.1.终点散射浊度法终点散射浊度法检测反应终点与起始点之间信号变化的方法为终检测反应终点与起始点之间信号变化的方法为终点测定法。点测定法。y2.2
12、.速率散射浊度法速率散射浊度法所谓速率即指在抗原抗体结合反应过程中,单位所谓速率即指在抗原抗体结合反应过程中,单位时间内两者结合成复合物的量。时间内两者结合成复合物的量。速率散射浊度法是在抗原与抗体反应的最高峰测速率散射浊度法是在抗原与抗体反应的最高峰测定其复合物形成的量,该峰值的高低与抗原的量定其复合物形成的量,该峰值的高低与抗原的量成正比。成正比。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术15y粒子强化免疫浊度法粒子强化免疫浊度法为一
13、种带载体的免疫浊度法,其敏感度较高。该为一种带载体的免疫浊度法,其敏感度较高。该方法选择一种大小适中、均匀一致的胶乳颗粒,方法选择一种大小适中、均匀一致的胶乳颗粒,吸附或交联抗体;当遇到相应抗原时,则发生聚吸附或交联抗体;当遇到相应抗原时,则发生聚集。集。单个胶乳颗粒在入射光波长之内,光线可透过。单个胶乳颗粒在入射光波长之内,光线可透过。当两个或更多胶乳颗粒凝聚时,透过光减少,光当两个或更多胶乳颗粒凝聚时,透过光减少,光减少的程度与胶乳凝集量成正比。减少的程度与胶乳凝集量成正比。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版
14、)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术16全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术17y1.1.分光光度仪分光光度仪采用终点法作免疫浊度分析的测定仪。采用终点法作免疫浊度分析的测定仪。y2.2.自动生化分析仪自动生化分析仪目前较流行的大型多通道自动生化分析仪多专门目前较流行的大型多通道自动生化分析仪多专门编有或可自编透射浊度分析程序。编有或可自编透射浊度分析程序。y3.3.散射浊度分析仪散射
15、浊度分析仪应用较为普遍的有固定时间散射分析仪、速率散应用较为普遍的有固定时间散射分析仪、速率散射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪。射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术18y主要由分析系统、计算机系统组成。主要由分析系统、计算机系统组成。分析系统分析系统v用于加样、稀释、保温和测试等;用于加样、稀释、保温和测试等;v包括散射测浊仪、加液系统、试剂转盘、样品转盘、包括散射测浊仪、加液系统、试剂转盘、样
16、品转盘、卡片阅读器以及软盘驱动器等;卡片阅读器以及软盘驱动器等;计算机系统计算机系统v用于输入病人数据、选择程序菜单、计算参考曲线和用于输入病人数据、选择程序菜单、计算参考曲线和储存测试结果;储存测试结果;v包括计算机主机、包括计算机主机、CRT显示屏和键盘等。显示屏和键盘等。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术19全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)
17、(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术20全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术21y1.日保养日保养关机前冲洗管道,以防止管道阻塞。关机前冲洗管道,以防止管道阻塞。开机前应检查注射器,防止漏液。开机前应检查注射器,防止漏液。检查稀释液、缓冲液及抗体试剂中液体的体积。检查稀释液、缓冲液及抗体试剂中液体的体积。检查废液桶中的废液是否已经装满。检查废液桶中的废液是否已经装满。在做标本之前必须对所
18、有光路进行光路校正。在做标本之前必须对所有光路进行光路校正。y2.周保养周保养更换流动比色杯和小磁棒。更换流动比色杯和小磁棒。用纱布蘸用纱布蘸 10%漂白溶液清洁探针的外部。漂白溶液清洁探针的外部。检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况。检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术22y3.月保养月保养更换注射器插杆顶端;更换注射器插杆顶端;空气过滤网冲洗;空气过滤网冲洗;疏通标本和抗体探
19、针的内部。疏通标本和抗体探针的内部。y4.半年保养半年保养更换钳制阀上管道和泵周管道;更换钳制阀上管道和泵周管道;给机械传动部分的螺丝上润滑油。给机械传动部分的螺丝上润滑油。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术23全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术24y免疫浊度分析的基
20、本要求免疫浊度分析的基本要求:始终保持反应体系中抗体适量过剩。始终保持反应体系中抗体适量过剩。y抗原过剩的检测方法:抗原过剩的检测方法:连续监测抗原抗体反应曲线,当抗原过剩时,连续监测抗原抗体反应曲线,当抗原过剩时,反应曲线呈现异常。反应曲线呈现异常。反应体系中追加抗体,如果浊度继续增大则提反应体系中追加抗体,如果浊度继续增大则提示抗原过剩。示抗原过剩。待测标本用两种稀释度测定,浓度高的样本浊待测标本用两种稀释度测定,浓度高的样本浊度反而降低则提示抗原过剩。度反而降低则提示抗原过剩。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第
21、二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术25y伪浊度伪浊度:在反应体系中,除待测抗原抗体免疫复合物产生在反应体系中,除待测抗原抗体免疫复合物产生的浊度外,其它可引起透射光或散射光发生变化的浊度外,其它可引起透射光或散射光发生变化的浊度都称为伪浊度。的浊度都称为伪浊度。y减少产生伪浊度的方法:减少产生伪浊度的方法:1.标本:采用新鲜、合格标本。标本:采用新鲜、合格标本。2.检测体系:保持比色杯和稀释杯清洁。检测体系:保持比色杯和稀释杯清洁。3.试剂:使用合格的抗体试剂。试剂:使用合格的抗体试剂。4.增浊剂浓度:严格控制增浊剂的浓度。增浊剂浓度:严格
22、控制增浊剂的浓度。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术26y无论是散射比浊还是透射比浊,入射光波长的选择无论是散射比浊还是透射比浊,入射光波长的选择原则原则:除了抗原抗体免疫复合物外,反应体系中的其他除了抗原抗体免疫复合物外,反应体系中的其他成分对入射光的干扰应为最小,因为如果反应体成分对入射光的干扰应为最小,因为如果反应体系中其他成分吸收了部分入射光,透射比浊法测系中其他成分吸收了部分入射光,透射比浊法测定结果将使抗原浓度偏高,而
23、散射比浊法测定将定结果将使抗原浓度偏高,而散射比浊法测定将使抗原浓度偏低。使抗原浓度偏低。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术27y1.1.选择合适的校准品选择合适的校准品y2.2.校准曲线的绘制校准曲线的绘制校准曲线的形状取决于抗血清和促聚剂的浓度的校准曲线的形状取决于抗血清和促聚剂的浓度的选择,也与所用免疫浊度法类型、校正方法及校选择,也与所用免疫浊度法类型、校正方法及校准品的质量有关。准品的质量有关。多推荐多推荐5 5点或点或
24、6 6点定标。点定标。选择适当的数学方法进行曲线拟合。选择适当的数学方法进行曲线拟合。全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术28全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术29全国高等医药院校医学检验专业规划教材全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验临床生物化学检验
25、 (第二版)(第二版)第七章临床专用自动生化分析仪分析技术第七章临床专用自动生化分析仪分析技术30y项目项目免疫球蛋免疫球蛋白(白(IgG、IgM、IgA)、补体()、补体(C3、C4)y临床意义临床意义IgG、IgA、IgM检测有助于了解机体抗感染能力,有助检测有助于了解机体抗感染能力,有助于疾病的正确诊断和有效治疗。于疾病的正确诊断和有效治疗。在免疫复合物疾病中,在免疫复合物疾病中,C3、C4检测可以了解其消耗程度。检测可以了解其消耗程度。y适应症适应症免疫力低,反复感染病人;自身免疫性疾病;多免疫力低,反复感染病人;自身免疫性疾病;多发性骨髓瘤;慢性肝病;非何杰金氏淋巴瘤;白发性骨髓瘤;
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