高中生物实验总结汇总(DOC 28页).doc
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1、高中生物实验总结一实验分类物质的鉴定与提取、分离实验:生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定;叶绿体中色素的提取与鉴定。观察类实验:用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质的流动;观察植物细胞的有丝分裂;观察植物细胞的质壁分离与复原;植物向性运动的设计与观察。有关酶的实验:比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率;探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用;探索影响淀粉酶活性的三个条件。生态调查类实验:种群密度的取样调查;设计并制作小生态瓶;观察生态系统的稳定性并设计农业生态系统。二实验方法观察鉴定法:还原性糖、蛋白质、脂肪的鉴定、植物细胞有丝分裂染色体的观察、叶绿体的观察等。 同位素标记法:噬菌体侵染细菌的实验、用1
2、8O和14C追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径、3H标记亮氨酸追踪分泌蛋白的合成和分泌过程等。化学分析法:叶绿体色素的提取与分离。模拟实验法:渗透作用的实验装置、分离定律的模拟实验等。三实验包含的基本技术(1)玻片标本技术压片法:取材 解离 漂洗 染色 制片(压片) 观察例:有丝分裂;低温诱导染色体数目加倍装片法:材料在载玻片水滴中展平;染色放盖玻片从一侧慢慢盖在水滴上,防止气泡产生改变溶液浓度时从一侧滴,另一侧吸水纸吸(引流法)例:观察叶绿体;质壁分离和复原实验;制备细胞膜涂片法 例:观察动物如人体血液中的细胞;观察DNA和RNA在细胞中分布(人体口腔上皮细胞)切片法 例:生物组织中脂肪鉴
3、定(2)染色技术(染色便于观察)龙胆紫(醋酸洋红或改良的苯酚品红溶液))染色体紫色(红色)甲基绿DNA绿色吡罗红RNA红色健那绿(活体染色)线粒体蓝绿色(3)鉴定试剂(鉴定化学反应,是否物质存在)试剂鉴定物质颜色变化斐林试剂还原糖(葡、果、麦芽糖)砖红色(要加热)苏丹()试剂脂肪橘黄色(红色)双缩脲试剂蛋白质紫色碘液淀粉蓝色酸性重铬酸钾溶液酒精橙色灰绿色溴麝香草酚蓝试剂二氧化碳蓝绿黄四斐林试剂和双缩脲试剂的比较斐 林 试 剂双 缩 脲 试 剂鉴定物质可溶性还原性糖蛋白质或多肽成 分甲液乙液A液B液0.1g/mlNaOH溶液0.05g/mlCuSO4溶液0.1g/mlNaOH溶液0.01g/ml
4、CuSO4溶液添加顺序甲、乙两液等量混合均匀后再注入(即现配现用)先加A液1ml,摇匀;再加B液34滴,摇匀反应条件水浴加热不需加热,摇匀即可反应现象砖红色沉淀紫色五盐酸的作用8 在观察DNA和RNA在细胞中的分布中,改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。15 15%的HCl和95%的酒精:解离液在观察根尖分生组织细胞的有丝分裂中,与酒精1:1混合,起解离作用 酶在不同PH下的活性:提供酸性环境(浓度不要求掌握的)六酒精的作用50%:在脂肪的鉴定中,用于洗去苏丹在脂肪上的浮色。70%:在土壤中动物类群丰富度的研究中,用作防腐剂。7
5、5%:用于医学临床上的消毒灭菌。 95%: 在观察植物细胞有丝分裂染色体的变化中,与15%的盐酸溶液等体积混合可用于解离根尖。 在低温诱导植物染色体数目变化中,除用于解离外还可洗去多余的固定液。 100%:在绿叶色素的提取和分离中,用于提取色素。七水浴加热在观察DNA和RNA细胞分布的实验中起水解作用(热水浴7080)探究温度对酶活性的影响(水浴调节温度)用斐林试剂鉴定还原性糖(热水浴) 材料选择要满足实验要求:无色材料:还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 观察细胞中DNA、RNA的分布有色材料: 叶绿体中色素的提取和分离取选择新鲜绿 观察植物细胞的质壁分离与复原 高倍显微镜的使用和观察叶绿体活材料:
6、 观察植物细胞的质壁分离与复原 高倍显微镜的使用和观察线粒体 高倍显微镜的使用和观察叶绿体 (观察植物细胞的有丝分裂) 可溶性还原性糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)鉴定中含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 不宜选择甜菜、甘蔗等,因为这些材料中主要的糖类为不具还原性的蔗糖;(淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。) 观察叶绿体和细胞质流动时,选择菠菜叶下表皮稍带叶肉(叶表皮细胞没有叶绿体,而靠近下表皮的叶肉细胞中含少而较大的叶绿体)或用藓类(叶片薄、叶绿体大),观察时应选择靠近叶脉部位细胞(叶脉附近细胞中水含量丰富,细胞质流动明显);观察有丝分裂实验时,选择幼小根尖或动
7、物 受精卵 (减数分裂选择雄性生殖器官)观察质壁分离和复原实验时,紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),便于观察;显微镜观察实验 实验内容玻片标本制作技能显微镜操作技能观察技能高倍镜的使用和叶绿体观察取材、直接制片低倍镜的使用、低倍镜到高倍镜的转换、熟练使用高倍镜、熟练进行对光、对焦、调节视野光线的强弱等一系列操作明确观察目标观察细胞质流动取材、直接制片正确选择观察的参照有丝分裂观察取材解离漂洗染色制片寻找、识别观察目标观察质壁分离和复原取材、制片观察、对比几种特殊的细胞的判断低等植物:有中心体、叶绿体、细胞壁等,常见类型衣藻、绿藻、水绵根尖分生区细胞:无叶绿体、大液泡(质壁分离实验不适用
8、)根尖成熟区(根毛)细胞:无叶绿体,有大液泡植物表皮细胞:无叶绿体(观察叶绿体的实验不适用)洋葱鳞片叶肉细胞:属于变态茎,因此无叶绿体植物筛管细胞、血小板、哺乳动物成熟红细胞:无细胞核植物导管细胞:死细胞,只有细胞壁小结以下为高中生物的部分实验内容: 检测生物组织中的还原糖 用高倍镜观察线粒体检测生物组织中的脂肪细胞大小与物质运输的关系绿叶中色素的提取和分离观察DNA和RNA在细胞中的分布低温诱导植物染色体数目的变化 探究酵母菌细胞呼吸的方式请用序号回答下列相关问题:(1)在上述实验过程中始终保持生物活性的是。(2)在上述实验中,常用到酒精的实验有。(3)在上述实验过程中,必须借助显微镜才能完
9、成的是, 需要水浴加热的是,为得出结论,需要借助颜色观察的是。(4)常用到盐酸的实验有: 实验详解一、光学显微镜的结构、呈像原理、放大倍数计算方法光学部分:目镜、镜筒、物镜、遮光器(有大小光圈)和反光镜(有平面镜和凹面镜)机械部分:镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(上有通光孔、压片夹)、镜头转换器、粗、细准焦螺旋。注:目镜无旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越小;物镜有旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越大。呈像原理:映入眼球内的是倒立放大的虚像。(物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度)放大倍数:目镜和物镜二者放大倍数的乘积)注:显微镜放大倍数是指直径倍数,即长度和宽度,而不是面积。二、显微镜的使用:置镜(装
10、镜头)对光置片调焦观察1安放。显微镜放置在桌前略偏左,距桌缘810cm处,装好物镜和目镜(目镜5 物镜10)2对光。转动转换器,使低倍镜对准通光孔,选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜,同时把反光镜转向光源,直至视野光亮均匀适度。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜,光线过强,改用较小光圈或用平面反光镜;光线过弱,改用较大光圈或用凹面反光镜。选低倍镜选较大的光圈选反光镜(左眼观察)3观察。将切片或装片放在载物台上,标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋(顺时针),俯首侧视镜筒慢慢下降,直到物镜接近切片(约0.5cm),左眼观察目镜,(反时针)旋转粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升,看到物像时轻微来回旋转细准焦
11、,直到物像清晰。(找不到物像时,可重复一次或移动装片使标本移至通光孔中心)。观察时两眼都要睁开,便于左眼观察,右眼看着画图。侧面观察降镜筒左眼观察找物像细准焦螺旋调清晰4高倍镜的转换。找到物像后,把要观察的物像移到视野中央,把低倍镜移走,换上高倍镜,只准用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,直到物像清楚为止。顺序:移装片转动镜头转换器调反光镜或光圈调细准焦螺旋注:换高倍物镜时只能移动转换器,换镜后,只准调节细准焦和反光镜(或光圈)。问1:低倍镜换为高倍镜后,若看不到或看不清原来的像,可能原因?(ABC) A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反,盖玻片在下面 D、未换目镜问2:放
12、大倍数与视野的关系:放大倍数越小,视野范围越大,看到的细胞数目越多,视野越亮,工作距离越长;放大倍数越大,视野范围越小,看到的细胞数目越少,视野越暗,工作距离越短。故装片不能反放。5装片的制作和移动:制作:滴清水放材料盖片移动:物像在何方,就将载玻片向何处移。(原因:物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反)6污点判断:1)污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上;2)污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;换物镜后消失,则位于物镜;3)污点不随载玻片移动,换镜后也不消失,则位于反光镜上。7完毕工作。使用完毕后,取下装片,转动镜头转换器,逆时针旋出物镜,旋进镜头盒;取出目镜,插进镜头盒,盖
13、上。把显微镜放正。实验一:观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)一实验目的:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法二实验原理:1甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。2盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。三方法步骤:操作步骤注意问题解释取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精
14、灯下烘干防止污迹干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为防止感染,漱口避免取材失败固定装片水解将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中,用300C水浴保温5min改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外的盐酸染色滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min观察先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰后才换用高倍物镜观察使观察效果最佳实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)一实验目的: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二实验原理:某些化学试剂能使生物组织
15、中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。1可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。如:加热葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O(砖红色)+ H 2O,即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色(或被苏丹染液染成红色)。淀粉遇碘变蓝色。3蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。)三实验材料1做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。(因为组织的颜色
16、较浅,易于观察。)2做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡34小时(也可用蓖麻种子)。3做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。四、实验试剂斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液)、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。五、方法步骤:(一)可溶性糖的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释1. 制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组
17、织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。2. 取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu ( OH ) 2在70900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu ( OH ) 2生成。4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色 棕色 砖红色(沉淀)最好用试管
18、夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;缩短实验时间。(二)脂肪的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡34小时,新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。在子叶薄片上滴23滴苏丹或苏丹染液,染色1分钟。染色时间不宜过长。用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观
19、察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上12滴蒸馏水,盖上盖玻片。滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长,油滴会溶解在乙醇中。三、蛋白质的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释制备组织样液。(浸泡、去皮研磨、过滤。)黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定。加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液34滴,摇匀,溶液变紫色。A液和B液也要分开配制,储存。鉴定时先加A液后加B液。CuSO4溶液不能多
20、加。先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。附:淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。碘液不要滴太多以免影响颜色观察实验三 用显微镜观察多种多样的细胞(必修一P7)一实验目的:1)使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点2)运用制作临时装片的方法二实验原理: 利
21、用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:可以看到叶绿体、线粒体等细胞器,从而能够区别不同的细胞。三方法步骤: 第一步:转动反光镜使视野明亮 第二步:在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央 第三步:用转换器转过高倍物镜 问(1)是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?为什么? 提示:低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。 问(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察? 提示:如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察
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