大豆抗原蛋白课件.ppt

1、 1986-1990年（美国）年（美国）“Transient hypersensitivity to soybean meal in the early weaned pig”“Effects of fat source&combinations on starter pig performance,nutrient digestibility&intestinal morphology”“Interrelationship between hypersensitivity to soybean proteins and growth performance in early-weaned p

2、igs”1990-至今（国内）至今（国内）“利用酶联免疫法测定大豆胰蛋白酶抑制因子的研究利用酶联免疫法测定大豆胰蛋白酶抑制因子的研究”“膨化全脂大豆对仔猪抗营养作用机理研究膨化全脂大豆对仔猪抗营养作用机理研究”“大豆寡糖对仔猪抗营养作用机理研究大豆寡糖对仔猪抗营养作用机理研究”“大豆凝集素受体结构及其类似物作用机理研究大豆凝集素受体结构及其类似物作用机理研究”“有效失活大豆抗营养因子特异蛋白酶的筛选有效失活大豆抗营养因子特异蛋白酶的筛选”“大豆抗原蛋白的免疫学特性及其对仔猪的致敏机理研究大豆抗原蛋白的免疫学特性及其对仔猪的致敏机理研究”蛋白酶抑制因子蛋白酶抑制因子脲酶脲酶 凝集素凝集素植酸植酸

3、寡糖寡糖 抗抗 原原 蛋蛋 白白 抗维生素因子抗维生素因子 其其 他他单单 宁宁u 仔猪断奶后腹泻的发生是影响养猪生产性能的一个仔猪断奶后腹泻的发生是影响养猪生产性能的一个 突出问题突出问题u 全国全国80%以上的猪场会发生仔猪腹泻以上的猪场会发生仔猪腹泻u 仔猪腹泻的发生率在仔猪腹泻的发生率在20-50%，死亡率，死亡率20%以上以上u 增重减缓，生长抑制，甚至成为僵猪增重减缓，生长抑制，甚至成为僵猪u 饲料报酬降低，养殖效益下降饲料报酬降低，养殖效益下降u 易发生继发性的疾病易发生继发性的疾病 u对仔猪断奶后腹泻诱因的不同观点：对仔猪断奶后腹泻诱因的不同观点：u上世纪上世纪7070年代以前

4、，以兽医学为代表的一批学者提年代以前，以兽医学为代表的一批学者提出了一种出了一种理论，即病原微生物是引起仔猪断奶后腹理论，即病原微生物是引起仔猪断奶后腹泻的根本原因泻的根本原因u但以营养学为代表的一批学者在后来的研究中提出但以营养学为代表的一批学者在后来的研究中提出了一种新的了一种新的理论理论:日粮抗原日粮抗原是引起仔猪断奶后是引起仔猪断奶后腹泻的先决条件，病原微生物感染只是仔猪断奶后腹泻的先决条件，病原微生物感染只是仔猪断奶后腹泻的继发性原因腹泻的继发性原因 玉米玉米-豆粕型日粮的广泛应用豆粕型日粮的广泛应用大豆中存在多种抗原蛋白大豆中存在多种抗原蛋白大豆抗原蛋白是由大豆抗原蛋白是由 Duk

5、e等（等（1934）首次发现）首次发现 婴儿过敏婴儿过敏Castimapoolas等（等（1968，1969）从大豆中分离出）从大豆中分离出4种抗原蛋白种抗原蛋白:大豆球蛋白（大豆球蛋白（Glycinin）-伴大豆球蛋白（伴大豆球蛋白（-conglycinin）-伴大豆球蛋白（伴大豆球蛋白（-conglycinin）-伴大豆球蛋白（伴大豆球蛋白（-conglycinin）免疫原性最强，占免疫原性最强，占大豆蛋白的大豆蛋白的 65-80%Glycinin 由由6个酸性多肽和个酸性多肽和6个碱性多肽组成的大分子蛋白（个碱性多肽组成的大分子蛋白（360 kDa），占），占 大豆籽实蛋白质总量的大豆籽

6、实蛋白质总量的25-35%，球蛋白总量的，球蛋白总量的40%。-Conglycinin是一种分子量为是一种分子量为180 kDa的糖蛋白，由的糖蛋白，由3个亚基个亚基、组成组成 三聚体（分子量分别为三聚体（分子量分别为72、76、53 kDa），约占大豆籽实蛋白质总量的），约占大豆籽实蛋白质总量的 30%左右。左右。酸性多肽酸性多肽碱性多肽碱性多肽GlycininGlycinin晶体结构晶体结构 大肠杆菌血清型大肠杆菌血清型(株株)奶粉组奶粉组豆粕组豆粕组O149:K9152O141:K85332O138:K8131致病菌致病菌/总数总数4.7917.78腹泻头数腹泻头数/总头数总头数0/64

7、/6Qiao等，等，2003，AJAS,16(1):63-69.Li等，等，1990,1991Li等，等，1990（JAS,68:1790-1799）Li等，等，1990,1991 2000-2003年，吉林农业大学以荷斯坦黑白花牛为试验对年，吉林农业大学以荷斯坦黑白花牛为试验对象，研究了生大豆粉和熟大豆粉对犊牛的生长性能、血清象，研究了生大豆粉和熟大豆粉对犊牛的生长性能、血清抗抗-conglycinin和和glycinin抗体效价、木糖吸收的影响。抗体效价、木糖吸收的影响。结果发现：结果发现：肠道吸收能力和增重明显下降；血清抗肠道吸收能力和增重明显下降；血清抗-conglycinin和和gl

8、ycinin抗体滴度显著升高；粗蛋白和脂肪的消化吸收率抗体滴度显著升高；粗蛋白和脂肪的消化吸收率下降下降。孙泽威等，孙泽威等，2003 2000-2003年，四川农业大学以幼建鲤为试验对象，研究了不年，四川农业大学以幼建鲤为试验对象，研究了不同的大豆蛋白源（大豆分离蛋白同的大豆蛋白源（大豆分离蛋白SPI、去皮豆粕、去皮豆粕DSBM）对幼建）对幼建鲤的生长性能和肠道免疫的鲤的生长性能和肠道免疫的影响。影响。结果发现：结果发现：当饵料中当饵料中SPI替代鱼粉的用量达替代鱼粉的用量达60%时，肠道上皮细胞顶端时，肠道上皮细胞顶端脱落、固有层变宽，脾脏重显著降低，中后肠抗体水平显著升高；脱落、固有层变

9、宽，脾脏重显著降低，中后肠抗体水平显著升高；当饵料中当饵料中DSBM替代鱼粉的用量达替代鱼粉的用量达50%时，肠道上皮细胞顶时，肠道上皮细胞顶端脱落、固有层变宽，脾脏重显著降低，中后肠抗体水平显著升端脱落、固有层变宽，脾脏重显著降低，中后肠抗体水平显著升高。高。张锦秀等，张锦秀等，2003 研究成果：研究成果：和国外研究一样，上述研究从不同的侧面和国外研究一样，上述研究从不同的侧面探讨并证实了大豆抗原蛋白对幼龄动物的过敏反应性，从探讨并证实了大豆抗原蛋白对幼龄动物的过敏反应性，从而为后续研究积累了资料，提供了非常有价值的技术参考。而为后续研究积累了资料，提供了非常有价值的技术参考。存在的问题：

10、存在的问题：由于纯的大豆蛋白难以获得，上述研由于纯的大豆蛋白难以获得，上述研究主要以大豆或大豆制品为材料，尚缺乏对究主要以大豆或大豆制品为材料，尚缺乏对glycinin、-conglycinin单个蛋白分子的致过敏作用的探讨，因此无法单个蛋白分子的致过敏作用的探讨，因此无法排除各种抗营养因子的互作影响。排除各种抗营养因子的互作影响。我们的研究结果我们的研究结果发生过敏反应局部组织病变、养分吸收不良、局部组织病变、养分吸收不良、免疫功能受损、生长抑制免疫功能受损、生长抑制未被降解的大豆未被降解的大豆抗原蛋白抗原蛋白结合到消化道表面受体或穿过结合到消化道表面受体或穿过上皮进入血液循环系统上皮进入血

11、液循环系统蛋白质和碳水化蛋白质和碳水化合物消化率降低合物消化率降低效应细胞释放效应细胞释放炎性介质炎性介质肠道通透性肠道通透性改变改变淋巴细胞分泌淋巴细胞分泌细胞因子细胞因子影响小肠刷影响小肠刷状缘酶活性状缘酶活性产生特异性抗产生特异性抗体（体（IgE,IgG等）等）组织、器官组织、器官增生或萎缩增生或萎缩淋巴细胞过度淋巴细胞过度增殖和分化增殖和分化肥大细胞肥大细胞FcR 受体受体 血液和脾脏中血液和脾脏中CD4淋巴细胞数量及淋巴细胞数量及CD4/CD8显著升高，免显著升高，免疫机能处于紊乱状态疫机能处于紊乱状态 脾脏淋巴细胞及血液中的淋巴细胞过度增殖，导致组织和脾脏淋巴细胞及血液中的淋巴细胞

12、过度增殖，导致组织和器官中淋巴细胞浸润，引起免疫损伤器官中淋巴细胞浸润，引起免疫损伤 脾脏及血液中脾脏及血液中IL-4、IL-5、TNF-含量及含量及 IL-4/IFN-显著显著升高，这些炎性因子进入肠道后，损伤肠道上皮，产生过升高，这些炎性因子进入肠道后，损伤肠道上皮，产生过敏症状敏症状 血清中血清中IgE和和IgG显著升高，发生速发型过敏反应显著升高，发生速发型过敏反应 肠道肥大细胞数量显著增加，脱粒现象明显，组胺等致敏肠道肥大细胞数量显著增加，脱粒现象明显，组胺等致敏因子释放增多，引起肠道局部过敏反应因子释放增多，引起肠道局部过敏反应细胞免疫及体液免疫均受到抑制作用细胞免疫及体液免疫均受

13、到抑制作用（1 1）免疫耐受性理论的应用）免疫耐受性理论的应用 仔猪断奶前饲喂足够的日粮蛋白质才能消除断奶后短暂的过敏反应，仔猪断奶前饲喂足够的日粮蛋白质才能消除断奶后短暂的过敏反应，从而避免吸收不良综合症和临床腹泻的发生。有研究报道，断奶前至少要补从而避免吸收不良综合症和临床腹泻的发生。有研究报道，断奶前至少要补充充600600克含克含2222大豆蛋白质的饲料才能大豆蛋白质的饲料才能“形成形成”一个成熟的不受断奶应激影一个成熟的不受断奶应激影响的消化系统，这对响的消化系统，这对3 3周龄断奶仔猪难以实现，且成本很高，费时多。周龄断奶仔猪难以实现，且成本很高，费时多。MillerMiller等

14、（等（1984b1984b）建议对）建议对3 3周龄断奶仔猪断奶前不宜补料。周龄断奶仔猪断奶前不宜补料。（2 2）饲喂低蛋白质日粮）饲喂低蛋白质日粮低蛋白水平日粮可防止断奶后腹泻症的发生，这样不仅可以降低日粮成低蛋白水平日粮可防止断奶后腹泻症的发生，这样不仅可以降低日粮成本，还可以减轻对肠道的损伤，两者结合足以抵消增重的损失，目前这种方本，还可以减轻对肠道的损伤，两者结合足以抵消增重的损失，目前这种方法已有应用。法已有应用。（3 3）注射免疫佐剂）注射免疫佐剂 皮下注射皮下注射1 1毫升免疫佐剂（一种水油乳剂）能增加仔猪免疫抑制细胞的毫升免疫佐剂（一种水油乳剂）能增加仔猪免疫抑制细胞的生成数量

15、，加速免疫耐受性的形成。生成数量，加速免疫耐受性的形成。大豆抗原蛋白大豆抗原蛋白-Conglycinin项目Items-Conglycinin水平 -Conglycinin levels(mg)SEM 051020日增重Body weight gain(g/d)1.85 a 1.81 b1.71 b1.68 b0.029采食量Food intake(g/d)12.4212.3012.1312.020.187饲料转化率Feed conversion ratio 0.149 a0.147 a0.141 b 0.140 b0.022郭鹏飞、李德发等，郭鹏飞、李德发等，2007正常组：上皮细胞正常组：

16、上皮细胞微绒毛结构清晰微绒毛结构清晰试验组：上皮细胞试验组：上皮细胞微绒毛结构模糊微绒毛结构模糊郭鹏飞、李德发等，郭鹏飞、李德发等，2006对照对照100mg大鼠空肠形态观察大鼠空肠形态观察（10 40）对对照照组组试试验验组组大鼠饲喂大鼠饲喂-conglycinin后小肠后小肠肥大细胞数量显著增加，脱粒现肥大细胞数量显著增加，脱粒现 象明象明显，肥大细胞释放的与过敏有关的细胞因子随之增加，表明大鼠处显，肥大细胞释放的与过敏有关的细胞因子随之增加，表明大鼠处于过敏状态；同时，肥大细胞于过敏状态；同时，肥大细胞组胺的释放率增加，进而引起血管通组胺的释放率增加，进而引起血管通透性增强，使大分子蛋白

17、等营养物质漏入肠腔及水钠交换障碍，造透性增强，使大分子蛋白等营养物质漏入肠腔及水钠交换障碍，造成消化不良或腹泻。成消化不良或腹泻。郭鹏飞、李德发等，郭鹏飞、李德发等，2006总总IgEIgE特异性特异性IgEIgE 灌喂大豆灌喂大豆-conglycinin 时，大鼠血液总时，大鼠血液总IgEIgE和特异性和特异性IgEIgE 显著升高，表明大鼠呈超敏状态显著升高，表明大鼠呈超敏状态郭鹏飞、李德发等，郭鹏飞、李德发等，2006项目项目-conglycinin 水平水平(mg)SEMP-值值051020线性线性二次二次淋巴细胞增殖淋巴细胞增殖血液血液(SI)1.52 1.55 1.66 1.680

18、.0190.0030.283脾脏脾脏(SI)1.15 1.21 1.34 1.36 0.0480.007 0.312血液血液CD4+28.730.845.748.71.09 0.00010.684CD8+29.230.030.731.20.710.0510.088CD4+/CD8+0.99 1.03 1.49 1.560.028 0.00010.728脾脏脾脏CD4+38.440.757.558.11.00 0.0010.422CD8+37.637.838.437.70.46 0.7100.317CD4+/CD8+1.02 1.07 1.50 1.550.031 0.0010.936郭鹏飞、李

19、德发等，郭鹏飞、李德发等，2006项项 目目-conglycinin 水平水平(mg/只只)SEM P 值值 0 5 10 20线性线性二次二次血液血液 白介素白介素-2 pgml-1 71.5 70.8 68.2 68.3 2.25 0.1250.346 白介素白介素-4 pgml-1 42.7 43.5 45.3 47.2 1.31 0.0020.285 白介素白介素-5 pgml-1187.4202.3208.2 211.1 6.41 0.0010.271 TNF-pgml-1192.6218.5258.2255.211.42 0.0010.098 IFN-pgml-1245.6249.

20、4252.5 254.4 5.46 0.0820.554脾脏脾脏 IL-2pgml-1216.6214.2207.9206.313.68 0.6050.938 IL-4 pgml-1422.6431.5435.4444.6 6.92 0.0350.980 IL5 ngml-1 23.4 32.6 40.0 45.8 3.04 0.0010.594 TNF-ngml-1 1.6 2.6 4.1 4.1 0.29 0.0010.118 IFN-pgml-1649.0626.5609.8595.119.25 0.050.842郭鹏飞、李德发等，郭鹏飞、李德发等，2006 日增重日增重 采食量采食量

21、饲料转化率饲料转化率 郝月、李德发等，郝月、李德发等，2008 绒毛高度绒毛高度隐窝深度隐窝深度 郝月、李德发等，郝月、李德发等，2008郝月、李德发等，郝月、李德发等，2008大豆抗原蛋白大豆抗原蛋白 Glycinin孙鹏、李德发等，孙鹏、李德发等，2008 日粮中添加日粮中添加2%以上的以上的glycinin在短期内可显著影响仔猪的生长性能在短期内可显著影响仔猪的生长性能。Glycinin水平水平P-值值0%2%4%8%SEMGlycininLinearQuad0-6 天天ADG,g/d282.75263.72237.39222.3912.830.02 0.0020.88ADFI,g/d3

22、26.61325.17318.89304.0815.690.730.300.67F:G,g/g 1.16 1.23 1.34 1.41 0.060.04 0.0040.970-10 天天ADG,g/d372.41338.82320.38291.2916.130.02 0.0020.89ADFI,g/d423.10412.02396.20381.4823.650.630.200.94F:G,g/g 1.14 1.22 1.24 1.31 0.04 0.003 0.0040.90孙鹏、李德发等，孙鹏、李德发等，2008Glycinin添加水平添加水平0%2%4%8%1-10 d腹泻头数腹泻头数腹泻

23、率腹泻率 11-17 d 腹泻头数腹泻头数腹泻头数腹泻头数腹泻率腹泻率腹泻率腹泻率18-25 d00000022310%11.7%8.3%002009.5%664.3%6652.4%52.4%日粮中添加日粮中添加2%以上的以上的glycinin可不同程度地增加仔猪腹泻的发生率可不同程度地增加仔猪腹泻的发生率。孙鹏、李德发等，孙鹏、李德发等，2008Glycinin水平水平0%2%4%8%SEMP-值值十二指肠十二指肠空空 肠肠回回 肠肠10.5321.0920.1517.172.600.0510.9320.1017.7617.082.010.0410.2519.9714.5410.891.93

24、0.01 日粮中添加日粮中添加 2%或或 4%的的glycinin可显著增加仔可显著增加仔猪空肠、猪空肠、回肠内组胺的释回肠内组胺的释放量。放量。孙鹏、李德发等，孙鹏、李德发等，2008孙鹏、李德发等，孙鹏、李德发等，2008大豆抗原蛋白诱发幼龄动物发生过敏反应，进而影响机体消大豆抗原蛋白诱发幼龄动物发生过敏反应，进而影响机体消 化系统和免疫功能，抑制动物的生长。化系统和免疫功能，抑制动物的生长。大豆抗原蛋白显著升高了动物血浆中的大豆抗原蛋白显著升高了动物血浆中的IgE水平、小肠内肥大水平、小肠内肥大 细胞数量和肠道组胺含量，导致体液免疫功能亢进，从而诱细胞数量和肠道组胺含量，导致体液免疫功能

25、亢进，从而诱 发动物发生速发型过敏反应发动物发生速发型过敏反应大豆抗原蛋白显著提高了动物淋巴细胞转化率和淋巴细胞亚大豆抗原蛋白显著提高了动物淋巴细胞转化率和淋巴细胞亚 群群CD4+细胞数量，淋巴细胞的过度增殖、分化及其分泌的细胞数量，淋巴细胞的过度增殖、分化及其分泌的 炎性介质增多，导致动物细胞免疫功能显著亢进，从而诱发炎性介质增多，导致动物细胞免疫功能显著亢进，从而诱发 迟发型过敏反应迟发型过敏反应 孙鹏等（孙鹏等（2008）研究报道，仔猪每天口服）研究报道，仔猪每天口服 1 g 维生素维生素C可降低过敏仔猪可降低过敏仔猪血清中血清中IgE抗体水平，抑制肠道组胺的释放，减少仔猪过敏性腹泻，促

26、进仔抗体水平，抑制肠道组胺的释放，减少仔猪过敏性腹泻，促进仔猪生长，缓解大豆抗原蛋白猪生长，缓解大豆抗原蛋白Glycinin对仔猪的致敏作用对仔猪的致敏作用大豆抗原蛋白检测大豆抗原蛋白检测大豆产品大豆产品CP(%DM)Glycinin(mg/g CP)-conglycinin(mg/g CP)粗大豆粉粗大豆粉57269.0155.0烘烤大豆粉烘烤大豆粉53175.052.0大豆浓缩蛋白大豆浓缩蛋白6820.425.50热处理大豆浓缩蛋白热处理大豆浓缩蛋白68 30 10膨化大豆浓缩蛋白膨化大豆浓缩蛋白69 30 5大豆分离蛋白大豆分离蛋白77 10 10定量检测：缺乏准确有效的测定方法定量检测

27、：缺乏准确有效的测定方法间接间接 酶联免疫测定（蛋白测定试剂盒）：酶联免疫测定（蛋白测定试剂盒）：抗体缺乏特异性，不准确抗体缺乏特异性，不准确 火箭免疫电泳火箭免疫电泳：具有较高的准确度和灵敏度，但是操作相对繁杂具有较高的准确度和灵敏度，但是操作相对繁杂多克隆抗体检测：多克隆抗体检测：多克隆抗体具有生产成本低，操作简单，抗体产量高等优多克隆抗体具有生产成本低，操作简单，抗体产量高等优点，但是由于这种抗体来源于动物血清，含有较多的杂蛋白质，因此，抗血清的点，但是由于这种抗体来源于动物血清，含有较多的杂蛋白质，因此，抗血清的效果不稳定，重复性较差。效果不稳定，重复性较差。单克隆抗体检测：单克隆抗体

28、检测：抗体制备困难，针对性难评定抗体制备困难，针对性难评定定性检测：定性检测：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳 Wu et al.(2000)：酸碱法分离酸碱法分离glycinin、-conglycinin（沉降系数、等电点）（沉降系数、等电点）Saito et al.(2001):植酸酶降解植酸酶降解 Duranti(2002)：尿素尿素 蛋白变性蛋白变性 亚基色谱分离（意大利专利）亚基色谱分离（意大利专利）Kazunobu et al.(2004)：胃蛋白酶胃蛋白酶 分解分解glycinin-conglycinin木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶分解分解-conglycinin glyci

29、nin 免疫学方法是研究抗原蛋白致过敏机理的一个基本方法免疫学方法是研究抗原蛋白致过敏机理的一个基本方法 抗体制备是抗体制备是免疫学研究的一个常用手段免疫学研究的一个常用手段 抗体：多抗抗体：多抗/单抗单抗 本试验拟以本试验拟以抗大豆抗大豆-conglycinin单克隆抗体单克隆抗体为工具，为工具，建立建立-conglycinin免疫学检测方法（免疫学检测方法（ELISA），并为定量测定和），并为定量测定和研究大豆制品中的抗原蛋白含量奠定基础。研究大豆制品中的抗原蛋白含量奠定基础。游金明、李德发等，游金明、李德发等，2006抗抗-congylcinin单克隆抗体的特性单克隆抗体的特性 属属于于

30、IgG1型抗体型抗体 能能识别识别-conglycinin分子的分子的 和和 亚基亚基Concentration of-conglycinin(ng/ml)OD(492nm)0011010010000.00.20.40.60.81.01.2 大豆大豆-congylcinin定量检测方法的建立定量检测方法的建立 竞争性竞争性ELISAELISA校正曲线的建立校正曲线的建立 IC50为为 4.7 ng/mL 检测限为检测限为 2.0 ng/mL 线性工作范围为线性工作范围为2.0-11.5 ng/mL 单抗的成功制备为进一步研究单抗的成功制备为进一步研究-conglycinin在仔猪小肠上皮细胞上

31、的在仔猪小肠上皮细胞上的吸收与分布情况提供了一个有效的工具；以单抗为基础的定量吸收与分布情况提供了一个有效的工具；以单抗为基础的定量方法的建立方法的建立也为检测大豆、大豆制品中也为检测大豆、大豆制品中-conglycinin的含量，为研究的含量，为研究-conglycinin在体在体内的降解规律和致过敏机理提供了一个科学的分析手段内的降解规律和致过敏机理提供了一个科学的分析手段游金明、李德发等，游金明、李德发等，2006游金明、李德发等，游金明、李德发等，2007对对照照大豆大豆 -congylcinin能广泛结合于仔猪小肠黏膜上皮细胞上能广泛结合于仔猪小肠黏膜上皮细胞上-congylcini

32、n 处理组处理组游金明、李德发等，游金明、李德发等，2006大豆抗原蛋白的消除大豆抗原蛋白的消除 大豆抗原蛋白大豆抗原蛋白glycininglycinin和和-conglycininconglycinin为对热稳定的抗营养因子，直为对热稳定的抗营养因子，直接加热不能彻底破坏。接加热不能彻底破坏。育种：育种：使生物体内的某个基因不起作用，使生物体内的某个基因不起作用，称之为称之为“基因敲除基因敲除”（knock knock outout）沉默）沉默”（silencesilence）。目前，美国科学家成功培育出过敏性低的大豆品）。目前，美国科学家成功培育出过敏性低的大豆品种（尹红，种（尹红，200

33、32003）。日本京都大学也开发出一种不易引起过敏的低变应原大）。日本京都大学也开发出一种不易引起过敏的低变应原大豆（张可喜，豆（张可喜，20022002），），热处理（膨化）：热处理（膨化）：李德发等李德发等(1993)(1993)，LiLi等等(1991b)(1991b)和谯仕彦等和谯仕彦等(1995)(1995)对断奶仔猪对断奶仔猪的试验发现膨化加工的大豆饼粕能降低血清中抗的试验发现膨化加工的大豆饼粕能降低血清中抗GlycininGlycinin和和-ConglycininConglycinin IgGIgG的的效价，并能减轻仔猪对大豆蛋白引起的迟发型过敏反应的程度及肠道损伤程度。效价，

34、并能减轻仔猪对大豆蛋白引起的迟发型过敏反应的程度及肠道损伤程度。化学法处理：化学法处理：有机溶剂提取。有机溶剂提取。乙醇溶液提取和热处理（膨化）过程的组合乙醇溶液提取和热处理（膨化）过程的组合工艺是有效降低大豆抗原蛋白的加工方式（工艺是有效降低大豆抗原蛋白的加工方式（Sisson Sisson 等，等，Rusette,1997Rusette,1997）。）。微生物发酵法：微生物发酵法：提高豆粕蛋白的溶解度，利于消化；有效减小了豆粕中蛋白的分提高豆粕蛋白的溶解度，利于消化；有效减小了豆粕中蛋白的分子量，减少抗原蛋白含量，其中的一部分已达到小肽水平甚至氨基酸水平，可以直子量，减少抗原蛋白含量，其中

35、的一部分已达到小肽水平甚至氨基酸水平，可以直接被动物吸收。接被动物吸收。上海源耀公司，上海源耀公司，20062006 经过几十年的研究，尽管人们对大豆中营养因子的化学结经过几十年的研究，尽管人们对大豆中营养因子的化学结构和理化特性、生理作用、抗营养机制有了一定的了解，抗营构和理化特性、生理作用、抗营养机制有了一定的了解，抗营养因子的钝化技术也有所发展，但是在大豆及大豆制品的实际养因子的钝化技术也有所发展，但是在大豆及大豆制品的实际运用中，还有很多问题没有得到解决。运用中，还有很多问题没有得到解决。就目前研究状况来看，热处理是应用最广泛的方法，但在就目前研究状况来看，热处理是应用最广泛的方法，但在工艺上仍需继续精进，且对于热稳定性高或热加工不足以有效工艺上仍需继续精进，且对于热稳定性高或热加工不足以有效地灭活的抗营养因子，人们必须要不断地研究新的方法加以消地灭活的抗营养因子，人们必须要不断地研究新的方法加以消除。至于化学钝化，与生产应用尚有距离，还应特别关注化学除。至于化学钝化，与生产应用尚有距离，还应特别关注化学钝化试剂的安全性问题。开发新的技术是提高大豆制品营养价钝化试剂的安全性问题。开发新的技术是提高大豆制品营养价值及应用效果的关键。值及应用效果的关键。ThankThank You!You!