MCAO模型教学讲解课件.ppt

1、a1MCAO model杨荣兵a2MCAO是middle cerebral artery occlusion 的缩写形式，中文意思为中脑动脉栓塞。简介a3 心脑血管疾病是危及人类健康的头号杀手。制作模型目的Leading Causes of Death for Asian or Pacific Islander(2002）a4 脑血管病包括缺血性和出血性脑血管病，其中缺血性脑血管病占80-85%。大脑中动脉是常见的出血或梗塞发生部位。制作模拟人脑缺血模型对脑缺血发病机制及药物筛选有重要意义。制作模型目的a5制作原理 大脑中动脉栓塞模型并不是把线栓插进大脑中动脉,而是经颈内动脉入颅并插入大脑前动

2、脉,从而阻塞来自栓塞侧的大脑前动脉的血供,以及堵塞接受后交通动脉血供的的颈内动脉颅内段.供被线栓阻断.大脑前动脉通过前交通动脉和对侧大脑前动脉相连通,颈内动脉通过后交通动脉和基底动脉相连接,从图中可以看出,大脑中动脉的血a6a7a8 动物：大鼠 器械：常规手术器械外，需要钓鱼线，直径0.22mm，一端用火焰灼成钝圆形，距钝圆段18mm做标记（插入深度）麻醉：10%水合氯醛（3ml/kg）实验材料a9 常规麻醉固定大鼠，颈前皮肤消毒实验过程a10 切开颈前皮肤，钝性分离皮下组织，分离颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉a11 结扎颈总动脉、颈外动脉，颈内动脉挂线、夹闭a12 切口、插线a13 结扎固定插

3、入的鱼线a14 缝合a15 评分方法有很多种，这里介绍longalonga评分法 0 0分：分：正常，无神经功能缺损；正常，无神经功能缺损；1 1分：分：左侧前爪不能完全伸展，轻度神经功能缺损；左侧前爪不能完全伸展，轻度神经功能缺损；2 2分：分：行走时，大鼠向左侧（瘫痪侧）转圈，中度神行走时，大鼠向左侧（瘫痪侧）转圈，中度神经功能缺损；经功能缺损；3 3分：分：行走时，大鼠身体向左侧（瘫痪侧）倾倒。重行走时，大鼠身体向左侧（瘫痪侧）倾倒。重度神经功能缺损；度神经功能缺损；4 4分：分：不能自发行走，有意识丧失。不能自发行走，有意识丧失。2h时评分比较明显，24h比较稳定，1-3分造模成功神经

4、行为学评分a16 神经功能的恢复 血清总超氧化物歧化酶（SOD）活性 丙二醛（MDA）含量 梗死体积 病理组织损伤及细胞超微结构改变的影响 进行统计学分析 基质金属蛋白酶类（MMPs）可测指标a17 检 测 腹 动 脉血 血液 流变 学 动 态 变 化；测 定 脑 组 织 白细 胞 介 素 一1(I L一1 )和 肿 瘤 坏 死 因 子 一(T NF )含 量；观 察 脑 细 胞 的 病 理 形 态 学 变 化 并 进 行 细 胞 计 数；检 测 细胞 凋 亡情 况 可测指标a18 TTC（2，3，5氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活

5、性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白脑组织TTC染色a19 动物麻醉，灌注（心脏左心室穿针,剪开右心耳，TTC和WB可以不灌注，若灌注，用生理盐水），取脑。脑切片（切片前可将脑组织在负20度冻20min，方便切割）：一般切成56 片，每隔2mm 切一片。a20 脑片置TTC染液中，37度避光染色30min，间或翻转脑片，使染色均匀。拍照，软件计算梗死体积，统 计学分析不同组间的差异。a21 本次介绍只是比较通用的一些实验方法，实际实验设计中，可以根据实验需要进行综合运用，不断改进！后记a22 注重准备MCAO模型的东西，看关于这个知识的论文。注重英语的学习。前两周总结a23 看关于心脑血管方面的论文。注重英语学习。将看的论文总结并整理。后两周的打算a24致谢