书签 分享 收藏 举报 版权申诉 / 48
上传文档赚钱

类型免疫磁珠分选原理及应用-课件.ppt

  • 上传人(卖家):ziliao2023
  • 文档编号:5954606
  • 上传时间:2023-05-18
  • 格式:PPT
  • 页数:48
  • 大小:1.98MB
  • 【下载声明】
    1. 本站全部试题类文档,若标题没写含答案,则无答案;标题注明含答案的文档,主观题也可能无答案。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
    2. 本站全部PPT文档均不含视频和音频,PPT中出现的音频或视频标识(或文字)仅表示流程,实际无音频或视频文件。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
    3. 本页资料《免疫磁珠分选原理及应用-课件.ppt》由用户(ziliao2023)主动上传,其收益全归该用户。163文库仅提供信息存储空间,仅对该用户上传内容的表现方式做保护处理,对上传内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知163文库(点击联系客服),我们立即给予删除!
    4. 请根据预览情况,自愿下载本文。本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
    5. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007及以上版本和PDF阅读器,压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
    配套讲稿:

    如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。

    特殊限制:

    部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。

    关 键  词:
    免疫 分选 原理 应用 课件
    资源描述:

    1、免疫磁珠分选原理及应用免疫磁珠分选原理及应用1/1 MD0 xxx.01Miltenyi Biotec:免疫磁珠分选技术及应用免疫磁珠分选技术及应用MD0197.02内容内容 MACS技术原理技术原理 MACS技术设备及分选策略技术设备及分选策略 几种特殊的几种特殊的MACS分选分选 分选和分析分选和分析DC细胞细胞 分选各种分选各种T细胞细胞 分选和分析细胞因子分泌细胞分选和分析细胞因子分泌细胞 分选造血干细胞分选造血干细胞 分选人类肿瘤细胞分选人类肿瘤细胞 分选和分析凋亡和死亡细胞分选和分析凋亡和死亡细胞 分选转染细胞分选转染细胞 分子生物学和蛋白生化的分选分子生物学和蛋白生化的分选MD0

    2、347.01MACS技术原理技术原理MACS(Magnetic Activated Cell Sorting):=免疫学免疫学+细胞生物学细胞生物学+磁力学磁力学 基于抗体对抗原的特异性识别基于抗体对抗原的特异性识别 磁性微珠直接或者间接偶联在抗体上,从而与细胞相连磁性微珠直接或者间接偶联在抗体上,从而与细胞相连 在高强度、梯度磁场中达到细胞磁性分离的目的在高强度、梯度磁场中达到细胞磁性分离的目的MD0651.01MACS 磁性分选磁性分选MACS微珠进行磁性标记微珠进行磁性标记未标记的细胞未标记的细胞先行流出先行流出洗脱阳性分选的细洗脱阳性分选的细胞胞MD0197.02分选前标本制备:过滤分

    3、选前标本制备:过滤MACS预选滤器:预选滤器:30 m MD0197.02MACS 技术技术设备与试剂设备与试剂 MACS微珠微珠 MACS分选柱分选柱 MACS 分选器分选器 详细分选方案详细分选方案*MACS技术技术设备与试剂设备与试剂 MACS微珠:微珠:MACS 微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒,可用于目的细胞的磁性标记。磁化微粒,可用于目的细胞的磁性标记。特性:特性:50nm大小大小 对细胞没有毒性对细胞没有毒性 可生物降解可生物降解 不影响细胞特性不影响细胞特性 MD0057.03MACS技术分选的技术分选的CD8+T 细胞细

    4、胞微珠微珠MACS微珠微珠直标微珠直标微珠多选微珠多选微珠间标微珠间标微珠MACS技术技术设备与试剂设备与试剂 MACS分选柱:分选柱:填充有不同规格的铁珠。填充有不同规格的铁珠。铁珠表面有亲水包被,不损伤细胞。铁珠表面有亲水包被,不损伤细胞。无菌包装。无菌包装。可用于分选多种细胞及亚细胞物质、可用于分选多种细胞及亚细胞物质、细菌、病毒、细菌、病毒、mRNA和蛋白质。和蛋白质。专利产品专利产品 将磁场扩大将磁场扩大100010000倍倍高纯度,高回收率高纯度,高回收率 MD0061.02在在MS柱中产生的强大磁场柱中产生的强大磁场 MACS分选柱:MACS技术技术设备与试剂设备与试剂 MACS

    5、分选器:从手动到自动,从实验室到临床分选器:从手动到自动,从实验室到临床MACS技术技术设备与试剂设备与试剂 MACS分选器MACS技术技术设备与试剂设备与试剂autoMACS分选仪分选仪 9种程序,一机完成所有细胞分选种程序,一机完成所有细胞分选 成本低,两个可重复使用的分选柱(成本低,两个可重复使用的分选柱(2周内周内100次)次)快速(快速(310分钟)分钟)重复性好重复性好 全自动分选,仪器操作简单全自动分选,仪器操作简单 适用范围广:适用范围广:从少量标本(从少量标本(105)到大量标本()到大量标本(4X109),),进样量进样量0.5ml-50ml 8种全血微珠,可以做常见细胞的

    6、全血分选,省去了种全血微珠,可以做常见细胞的全血分选,省去了费时的提取单个核细胞过程费时的提取单个核细胞过程MACS技术主要优势技术主要优势 小磁珠小磁珠:50 nm(快速、不活化细胞、不沉淀)快速、不活化细胞、不沉淀)保留细胞功能(直接进行后续实验;无毒性;氧化保留细胞功能(直接进行后续实验;无毒性;氧化 铁和多聚糖组成,可生物降解)铁和多聚糖组成,可生物降解)与流式细胞仪兼容(不影响细胞光学特性、不影响荧与流式细胞仪兼容(不影响细胞光学特性、不影响荧 光抗体标记、与流式细胞仪分选联合使用可以缩短流光抗体标记、与流式细胞仪分选联合使用可以缩短流 式分选时间)式分选时间)快速、简便、无菌快速、

    7、简便、无菌 适用范围广(磁珠种类多、从少量到大量、适用于分适用范围广(磁珠种类多、从少量到大量、适用于分 选各种细胞、亚细胞物质)选各种细胞、亚细胞物质)MD0043.02MACS 细胞分选策略细胞分选策略 阳性分选阳性分选 去除分选去除分选 去除分选后再阳性分选去除分选后再阳性分选 多重分选多重分选MD0044.02MACS细胞分选策略细胞分选策略1 1、阳性分选:阳性分选:根据特异性标志分选细胞根据特异性标志分选细胞:阳性分选是指目的细胞磁性标记阳性分选是指目的细胞磁性标记 后,作为阳性的标记组分直接分选出来。后,作为阳性的标记组分直接分选出来。优点:优点:高纯度,尤其是富集稀有的细胞高纯

    8、度,尤其是富集稀有的细胞 高回收率高回收率 操作简便、迅速操作简便、迅速MD0044.02MD016102阳性分选策略阳性分选策略MACS 微珠磁性标记微珠磁性标记未标记细胞先行流出未标记细胞先行流出将分选柱移出磁场将分选柱移出磁场,洗脱阳性分选细,洗脱阳性分选细胞胞MACS细胞分选策略细胞分选策略2 2、去除分选:去除分选:去除分选是磁性标记非目的细胞,并将其从细胞混合物中去去除分选是磁性标记非目的细胞,并将其从细胞混合物中去 除,即未磁性标记的细胞为目的细胞。除,即未磁性标记的细胞为目的细胞。去除分选策略适用范围:去除分选策略适用范围:去除不需要的细胞去除不需要的细胞 缺乏针对目的细胞的特

    9、异性抗体(如肿瘤细胞)缺乏针对目的细胞的特异性抗体(如肿瘤细胞)不需要抗体和目的细胞结合不需要抗体和目的细胞结合 需进一步通过阳性选择分选细胞亚群需进一步通过阳性选择分选细胞亚群MD0044.02MD0160.02去除分选去除分选磁性标记磁性标记分选未磁性标记细胞分选未磁性标记细胞MACS细胞分选策略细胞分选策略3 3、去除分选后再阳性分选:去除分选后再阳性分选:即先去除非目的细胞,再进行阳性分选。即先去除非目的细胞,再进行阳性分选。适用范围:适用范围:非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原。非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原。要分选非常稀有细胞,先去除非目的细胞再行阳性分选,要分

    10、选非常稀有细胞,先去除非目的细胞再行阳性分选,可获得高纯度的目的细胞。可获得高纯度的目的细胞。MD0044.021.去除非去除非CD4+T 细胞细胞。用生物素化抗体混合物和抗生物素微珠间接磁性标记非用生物素化抗体混合物和抗生物素微珠间接磁性标记非CD4+T 细胞细胞 磁性分选去除标记细胞磁性分选去除标记细胞 先行流出为先行流出为 CD4+T 细胞细胞 2.CD25微珠直接磁性标记微珠直接磁性标记CD25+细胞细胞阳性分选靶细胞阳性分选靶细胞 CD4+CD25+调节性调节性T滞留在分选柱上,离开磁场后洗脱下来滞留在分选柱上,离开磁场后洗脱下来去除后再阳性分选去除后再阳性分选CD4CD4+CD25

    11、CD25+双阳性细胞双阳性细胞MD0652.01多选微珠标记多选微珠标记MACS 分选分选磁性颗粒的酶解离磁性颗粒的酶解离终止解离反应终止解离反应根据第二标志进行磁根据第二标志进行磁珠标记珠标记MACS 分选分选MACS细胞分选策略细胞分选策略4 4、多选微珠:多选微珠:MACS畅销机器与分选柱畅销机器与分选柱 MiniMACS starting kit:1个分选架、个分选架、1个个MiniMACS分选器、分选器、1盒盒MS分选柱、分选柱、1支价值支价值7500元试剂元试剂(15088元):元):可做阳性分选、小量标本、间标去除分选、分子生物学分选可做阳性分选、小量标本、间标去除分选、分子生物

    12、学分选 Mini&MidiMACS starting kit:1个分选架、个分选架、1个个MiniMACS分选器、分选器、1个个MidiMACS分选器、分选器、1盒盒MS分选柱分选柱、1盒盒LS/LD分选柱、分选柱、1支价值支价值7500元试剂元试剂(27838元):可做阳性分选和去除分选元):可做阳性分选和去除分选 MS分选柱:分选柱:1盒盒25个,个,2763元元 LS分选柱:分选柱:1盒盒25个,个,4356元元 LD分选柱:分选柱:1盒盒25个,个,5100元元 uMACS与与u或者或者M分选柱分选柱:分子生物学分选:分子生物学分选 VarioMACS分选仪分选仪 autoMACS自动

    13、分选仪自动分选仪、CliniMACS分选仪分选仪 MD0044.02MACS几种畅销磁珠与抗体几种畅销磁珠与抗体 专利产品:专利产品:CD133、CD303、CD304特殊产品:人类特殊产品:人类DC系列:系列:BDCA-1(CD1c)、BDCA-2(CD303)、BDCA-3(CD141)、BDCA-4(CD304)小鼠小鼠DC系列:系列:mPDCA微珠与抗体微珠与抗体 干细胞产品:干细胞产品:CD133、CD271微珠与抗体微珠与抗体 细胞因子分泌细胞:细胞因子分泌细胞:CSA分选与分析分选与分析 TH2细胞:细胞:CD294(CRTH)微珠与抗体微珠与抗体 分选人类肿瘤细胞:上皮肿瘤:分

    14、选人类肿瘤细胞:上皮肿瘤:CK、HEA 非血液肿瘤:非血液肿瘤:CD45去除去除 死亡细胞去除试剂盒死亡细胞去除试剂盒 分选转染细胞分选转染细胞 分选分选HIV病毒、病毒、mRNA、cDNA top ten:CD133、CD34、人人CD4+CD25+、小鼠小鼠CD4+CD25+CD303/CD304、人类人类NK、小鼠小鼠CD11c、anti-PE 微珠微珠 小鼠干细胞试剂盒(系别阴性小鼠干细胞试剂盒(系别阴性CD117)、)、CD4/CD8 MD0044.02主要竞争对手分析主要竞争对手分析 Dynal:大磁珠大磁珠 主要市场:主要市场:CD4、CD8等高频细胞,等高频细胞,优势:价格优势

    15、:价格 劣势:回收率低(不能做低频细胞、弱表达细胞分选)劣势:回收率低(不能做低频细胞、弱表达细胞分选)磁珠必需剪切(耗时磁珠必需剪切(耗时细胞状态不佳)细胞状态不佳)大磁珠(活化细胞)大磁珠(活化细胞)我们的优势:纯度高、回收率高、细胞活性好我们的优势:纯度高、回收率高、细胞活性好 不活化细胞,不改变细胞功能不活化细胞,不改变细胞功能 省时、省细胞省时、省细胞 产品品种最多,有专利产品产品品种最多,有专利产品 有手动、自动、临床级产品有手动、自动、临床级产品 有强大的技术支持队伍有强大的技术支持队伍 很好的声誉,市场占有率最高很好的声誉,市场占有率最高 MD0044.02主要卖点主要卖点 干

    16、细胞产品:人类:干细胞产品:人类:CD133、CD34、MSC试剂盒(试剂盒(CD271)小鼠:系别阴性试剂盒、小鼠:系别阴性试剂盒、CD117微珠微珠 定向分化培养基定向分化培养基 DC产品:产品:人类:人类:BDCA-1、BDCA-2/4 小鼠:小鼠:CD11c NK产品:产品:人类:人类:NK细胞阴选试剂盒、细胞阴选试剂盒、CD3/CD56 T细胞产品:细胞产品:CD4+CD25+调节性调节性T细胞(人和小鼠)细胞(人和小鼠)CSA系列系列 CD4、CD8微珠及阴选试剂盒微珠及阴选试剂盒 B细胞产品:细胞产品:CD19微珠及阴选试剂盒微珠及阴选试剂盒 肿瘤细胞分选:癌细胞富集试剂盒、肿瘤

    17、细胞分选:癌细胞富集试剂盒、HEA微珠、微珠、CD45阴选阴选 单核细胞分选:单核细胞分选:CD14微珠及阴选试剂盒微珠及阴选试剂盒 间标微珠间标微珠 死细胞去除试剂盒死细胞去除试剂盒 预选滤器、预选滤器、FCR阻断剂、阻断剂、T细胞活化与扩增试剂盒细胞活化与扩增试剂盒 流式细胞仪抗体(价廉、包装量大、优质)流式细胞仪抗体(价廉、包装量大、优质)MD0044.02识别识别DC和和DC亚群亚群 New(CD3,CD14,CD16,CD19,CD20,CD56)DC 亚群特异性标志亚群特异性标志:Blood Dendritic Cell AntigensPE FITCAPCMACS 技术分选与分析

    18、小鼠技术分选与分析小鼠DC细胞细胞 NewMACS 技术分选与分析大鼠技术分选与分析大鼠DC细胞细胞 NewMD0044.02Anti-DC(OX62)Anti-DC(OX62)微珠微珠 用于从大鼠外周血、淋巴和非淋巴组织中分选或者去除OX62+DC。单克隆抗体OX62识别表达于大部分大鼠DC上的整合素E2亚单位(分子量150kDa)。两个主要的树突状细胞亚群:CD4/OX41双阳性和CD4/OX41双阴性亚群。该抗原也表达于表皮TCR/+或/+的T细胞亚群和垂体前叶星状滤泡样(S100+)细胞的一个亚群,但在朗格罕氏细胞和巨噬细胞上不表达。MACS 技术分选与分析功能性技术分选与分析功能性T

    19、细胞细胞MD0044.02NoImageT h 细 胞(C D 4)T c 细 胞(C D 8)调 节 性 T 细 胞(C D 4+C D 2 5+)T C R r/d 细 胞(T C R r/d 微 珠)N K/T 细 胞(C D 5 6 多 选 微 珠 C D 3 微 珠)T 细 胞 亚 群N a iv e T 细 胞(C D 4 5 R O 阴 选)活 化 T 细 胞(C D 6 9、C D 2 5、C D 3 0)效 应 T 细 胞(C D 2 7)记 忆 T 细 胞(C D 4 5 R A 阴 选、C D 4 5 R O 阳 选)T h 2 细 胞(a n ti-C R T H 2)

    20、T 细 胞 功 能 亚 群IF N-rIL-2IL-4IL-1 0T N F-a抗 原 特 异 性 T 细 胞T 细 胞 分 选MD0420.02MACS 细胞因子分泌细胞分析与分选细胞因子分泌细胞分析与分选 New抗原特异性抗原特异性再刺激再刺激细胞因子细胞因子分泌阶段分泌阶段捕获试剂捕获试剂标记标记荧光标记和荧光标记和磁性分选磁性分选Catch ReagentDetection AntibodyAnti-PE MicroBeadscytokine secreting cellsecreted cytokineMD0420.02MACS 细胞因子分泌细胞分析与分选细胞因子分泌细胞分析与分选

    21、New分选前分选前刺激组刺激组分选后分选后未刺激组未刺激组*百分比均为占百分比均为占CD4细胞百分比细胞百分比MD0420.02MACS 细胞因子分泌细胞分析细胞因子分泌细胞分析New刺激组刺激组未刺激组未刺激组 使用PE-CMVpp65/HLA/A2-tetramers 和IFN-g Secretion Assay-Detection Kit(APC)or IL-2 Secretion Assay-Detection Kit(APC)检测 HLA/A2 CMV+患者PBMC。*百分比均为占CD8细胞百分比人类细胞因子分泌细胞人类细胞因子分泌细胞分选与检测试剂盒分选与检测试剂盒 IFN-g g

    22、 分泌细胞分泌细胞 IL-2分泌细胞分泌细胞 IL-4分泌细胞分泌细胞 IL-10分泌细胞分泌细胞 TNF-分泌细胞分泌细胞MACS 细胞因子分泌细胞分析与分选细胞因子分泌细胞分析与分选 New小鼠细胞因子分泌细胞分选与检测试剂盒小鼠细胞因子分泌细胞分选与检测试剂盒IFN-g g 分泌细胞分泌细胞IL-2分泌细胞分泌细胞IL-4分泌细胞分泌细胞IL-5分泌细胞分泌细胞IL-10分泌细胞分泌细胞人类干细胞分选微珠与试剂盒人类干细胞分选微珠与试剂盒 CD34微珠及多选微珠:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选微珠及多选微珠:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选 造血干细胞、内皮前体细胞造血干细胞、内皮前体

    23、细胞 CD133微珠微珠:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选 造血干细胞、内皮前体细胞、多能成体干细胞(造血干细胞、内皮前体细胞、多能成体干细胞(MAPC)CD117微珠:微珠:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选用于从骨髓、外周血、脐带血中分选 造血干细胞、骨髓间充质细胞造血干细胞、骨髓间充质细胞 CD45/GlyA去除分选试剂盒:用于从骨髓中阴选分选去除分选试剂盒:用于从骨髓中阴选分选 多能成体干细胞(多能成体干细胞(MAPC)CD105微珠:微珠:用于从骨髓中分选间充质细胞用于从骨髓中分选间充质细胞 抗成纤维细胞微珠:抗成纤维细胞微珠:用于从骨髓中分选间充质细

    24、胞用于从骨髓中分选间充质细胞 多能成体干细胞(多能成体干细胞(MAPC)MSC分选工具(分选工具(CD271)new:用于从骨髓中分选间充质细胞用于从骨髓中分选间充质细胞 MD0044.02MSC Research Tool Box-CD271(LNGFR)new成分成分:分选分选:CD271(LNGFR)-APCAnti-APC MicroBeadsFcR Blocking 培养培养:NH Expansion Medium(2x500 mL)CytoMix-CD271(LNGFR)质量控制质量控制:NH AdipoDiff Medium(12x8 mL)NH OsteoDiff Medium

    25、(12x5 mL)Introductory offerAds in Blood(April&Mai)MSC Research Tool Box-CD271(LNGFR)人类人类MSC的标准化研究的标准化研究CD271CD271又叫做低亲和力神经生长因子受体又叫做低亲和力神经生长因子受体(LNGFR),(LNGFR),是迄今为是迄今为止发现的最佳止发现的最佳MSCMSC分选标志,可用于直接从人类骨髓中分选分选标志,可用于直接从人类骨髓中分选MSCMSC。分选后分选后CD271(LNGFR)+MSCsCD271(LNGFR)+MSCs是一群均一的是一群均一的MSCMSC细胞群,而细胞群,而CD27

    26、1CD271阴性细胞成分中没有成纤维细胞克隆形成单位阴性细胞成分中没有成纤维细胞克隆形成单位 (CFU-(CFU-F)F)活性。活性。与贴壁培养的与贴壁培养的MSCMSC相比,相比,CD271CD271分选的分选的MSCMSC增殖能力增强增殖能力增强101010001000倍。倍。CD271CD271分选和扩增的分选和扩增的MSCMSC保留了多系分化潜能,具有保留了多系分化潜能,具有分化为脂肪细胞和成骨细胞、软骨细胞、内皮细胞的可塑性分化为脂肪细胞和成骨细胞、软骨细胞、内皮细胞的可塑性。cumulative population doubling(CPD)cumulative populati

    27、on doubling(CPD)Ads in Blood(April&Mai)MSC Research Tool Box-CD271(LNGFR)人类人类MSC的标准化研究的标准化研究Nadia Quirici等,等,Experimental Hematology 30(2002)783791MACSMACS小鼠干细胞分选试剂盒:小鼠干细胞分选试剂盒:Lineage Cell Depletion Kit:Lineage Cell Depletion Kit:去除成熟和分化的造血细去除成熟和分化的造血细胞,预富集造血干祖细胞。胞,预富集造血干祖细胞。CD117 MicroBeadsCD117 M

    28、icroBeads:分选早期和晚期干祖细胞分选早期和晚期干祖细胞。Anti-Sca-1 MicroBeadsAnti-Sca-1 MicroBeads:分选造血干细胞和早期造血祖分选造血干细胞和早期造血祖细胞。细胞。CD117+Sca-1+linCD117+Sca-1+lin细胞也有非造血分化潜能,如分化为细胞也有非造血分化潜能,如分化为肌细胞、内皮细胞、肝细胞、神经系统细胞。肌细胞、内皮细胞、肝细胞、神经系统细胞。CD45/Ter119CD45/Ter119微珠去除分选骨髓细胞,可以得到微珠去除分选骨髓细胞,可以得到MAPCs,MAPCs,也也有体外分化为多种细胞的潜能。有体外分化为多种细胞

    29、的潜能。小鼠骨髓造血干细胞小鼠骨髓造血干细胞(HSC)(HSC)定义为定义为 Sca-1+Sca-1+、CD117+(c-kit)CD117+(c-kit)、Thy-1Thy-1low 和和lin-lin-细胞细胞.MACS 技术分选人类肿瘤细胞技术分选人类肿瘤细胞 NewMD0044.02上皮肿瘤细胞上皮肿瘤细胞 根据表面抗原进行分选与分析:根据表面抗原进行分选与分析:Anti-HEA(EpCAM)MicroBeads Anti-ErbB-2(HER-2/neu)MicroBeads根据细胞内细胞角蛋白分选与分析:根据细胞内细胞角蛋白分选与分析:cytokeratin黑色素瘤细胞分选:黑色素

    30、瘤细胞分选:Anti-melanoma MicroBeads其它非造血系统肿瘤细胞其它非造血系统肿瘤细胞:CD45 MicroBeads去除白细胞去除白细胞骨髓瘤细胞:骨髓瘤细胞:CD138 MicroBeads霍奇金氏淋巴瘤霍奇金氏淋巴瘤/RS细胞:细胞:CD30 MicroBeadsMACS 技术分选凋亡细胞技术分选凋亡细胞 NewMD0044.02刺激、分化、凋亡、脱颗粒、坏死刺激、分化、凋亡、脱颗粒、坏死PS暴露暴露PS暴露细胞被暴露细胞被AnnexinV微珠磁性标记微珠磁性标记磁性标记细胞滞留在分选柱上磁性标记细胞滞留在分选柱上PS暴露细胞被洗脱下来暴露细胞被洗脱下来MACS 技术分

    31、选转染细胞技术分选转染细胞 NewMD0044.02应用于功能基因、信号转导研究、药物筛选和标记技术。应用于功能基因、信号转导研究、药物筛选和标记技术。MACSelect4转染细胞转染细胞分选试剂盒使用分选试剂盒使用pMACS4.1和自己的质和自己的质粒粒转染细胞转染细胞用用MACSelect4微珠微珠标记转染细胞标记转染细胞MACS分选转分选转染细胞染细胞分选后细胞可分选后细胞可用于培养或者用于培养或者分析分析MACS 技术分选转染细胞技术分选转染细胞 NewMD0044.02优点:优点:省时:只需省时:只需2-3小时小时(建立一个稳定的细胞系需数周)(建立一个稳定的细胞系需数周)纯度高,纯

    32、度高,背景低背景低 不影响转染细胞功能和活力不影响转染细胞功能和活力 分选的细胞可直接用于培养或功能检测分选的细胞可直接用于培养或功能检测 可用于:原代细胞可用于:原代细胞&细胞系细胞系 贴壁贴壁&悬浮细胞悬浮细胞 稳定稳定&短暂转染短暂转染MACS分子生物学和蛋白生化的分选分子生物学和蛋白生化的分选 表位蛋白分选:表位蛋白分选:MACS 抗抗His-,HA-,c-myc-,GFP-,GST-蛋白分选蛋白分选.生物素化分子及其靶位分选:生物素化分子及其靶位分选:MACS 链霉亲和素微珠链霉亲和素微珠 MACS 免疫沉淀:免疫沉淀:MACS 蛋白蛋白A、蛋白蛋白G微珠微珠 mRNA分选:分选:从

    33、细胞、组织、外周血、从细胞、组织、外周血、总总RNA中分选中分选mRNA 一步法一步法cDNA合成合成newMD0044.02MACS分子生物学和蛋白生化的分选分子生物学和蛋白生化的分选优点:优点:分选柱上固定分选柱上固定:高纯度利于灵敏的后续实验高纯度利于灵敏的后续实验 作用作用温和,可获得理想的分子复合物温和,可获得理想的分子复合物 分选柱上分子修饰,可以减少细胞损失分选柱上分子修饰,可以减少细胞损失 MACS微珠微珠:敏感,可用于极少量的目的分子敏感,可用于极少量的目的分子 快速:快速:分选分选mRNA仅需仅需15分钟分钟 免疫沉淀只需免疫沉淀只需1-2小时小时 一步法一步法cDNAcDNA合成仅需合成仅需9090分钟分钟 MD0044.02

    展开阅读全文
    提示  163文库所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
    关于本文
    本文标题:免疫磁珠分选原理及应用-课件.ppt
    链接地址:https://www.163wenku.com/p-5954606.html

    Copyright@ 2017-2037 Www.163WenKu.Com  网站版权所有  |  资源地图   
    IPC备案号:蜀ICP备2021032737号  | 川公网安备 51099002000191号


    侵权投诉QQ:3464097650  资料上传QQ:3464097650
       


    【声明】本站为“文档C2C交易模式”,即用户上传的文档直接卖给(下载)用户,本站只是网络空间服务平台,本站所有原创文档下载所得归上传人所有,如您发现上传作品侵犯了您的版权,请立刻联系我们并提供证据,我们将在3个工作日内予以改正。

    163文库