(企鹅辅导)高考生物实验知识点总结.doc
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1、 高考生物实验知识点总结高考生物实验知识点总结 实验一:使用高倍显微镜观察几种细胞(必修一实验一:使用高倍显微镜观察几种细胞(必修一 P7) 1、是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?为什么? 低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的 倍数高。 2、为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍 镜观察? 如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此,需要先 用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。 3、用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行? 不行。用高倍镜观察,只需转动细
2、准焦螺旋即可。转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。 4、使用高倍镜观察的步骤和要点是什么? 答: (1)首先用低倍镜观察,找到要观察的物像,移到视野的中央。 (2)转动转换器,用高倍镜观察,并轻轻转动细准焦螺旋,直到看清楚材料为止。 5、总结:四个比例关系 a.镜头长度与放大倍数:物镜镜头越长,放大倍数越大,而目镜正好与之相反。 b.物镜头放大倍数与玻片距离:倍数越大(镜头长)距离越近。 c.放大倍数与视野亮度:放大倍数越大,视野越暗。 d.放大倍数与视野范围:放大倍数越大,视野范围越小。 实验一 观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布 实验原理:DNA 绿色(甲基绿试剂) ,RNA 红色(吡罗红
3、试剂) 分布:真核生物 DNA 主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的 DNA;RNA 主要分布在细胞质中。 实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 实验二 物质鉴定 还原糖 + 斐林试剂砖红色沉淀 脂 肪 + 苏丹 III 橘黄色 脂 肪 + 苏丹 IV 红色 蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色反应 1、还原糖的检测 (1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。 (2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL 的 NaOH 溶液,乙液:0.05g/mL 的 CuSO4 溶液) , 现配现用。 (3)步骤:取样液 2mL 于试管中加入刚配的斐林试剂 1mL(斐林试剂甲
4、液 和乙液等量混合均匀后再加入)水浴加热 2min 左右观察颜色变化(白色浅蓝色砖 红色) 2、脂肪的检测 (1)材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。 (2)步骤: 制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央 染色(滴苏丹染液 23 滴切片上23min 后吸去染液滴体积分数 50%的酒精洗去 浮色吸去多余的酒精) 制作装片(滴 12 滴清水于材料切片上盖上盖玻片) 镜检鉴定(显微镜对光低倍镜观察高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒) 3、蛋白质的检测 (1) 试剂: 双缩脲试剂 (A 液: 0.1g/mL 的 NaOH 溶液, B 液: 0.01g/mL 的 CuSO4 溶
5、液) (2) 步骤:试管中加样液 2mL加双缩脲试剂 A 液 1mL,摇匀加双缩尿试剂 B 液 4 滴,摇匀 观察颜色变化(紫色) 考点提示: (1)常见还原性糖与非还原性糖有哪些? 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 (2 )还原性糖植物组织取材条件? 含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 (3)研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响? 加石英砂是为了使研磨更充分。 不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少, 使鉴定时溶液颜 色变化不明显。 (4)斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的? 为何要现混现用? 混合后使用;
6、产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。 (5)还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为: 浅蓝色 棕色 砖红色 (6)花生 种子切片为何要薄? 只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。 (7)转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般 是什么? 切片的厚薄不均匀。 (8)脂肪鉴定中乙醇作用? 洗去浮色。 (9) 双缩脲试剂 A、 B 两液是否混合后用?先加 A 液的目的。 怎样通过对比看颜色变化? 不 能混合;先加 A 液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。 实验三 观察叶绿体和细胞质流动 1、材料:新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临
7、时装片 2、原理:叶绿体在显微镜下观察,绿色,球形或椭球形。 用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。 知识概要: 取材 制片 低倍观察 高倍观察 考点提示: (1)为什么可直接取用藓类的小叶,而不能直接取用菠菜叶? 因为藓类的小叶很薄,只有一层细胞组成,而菠菜叶由很多层细胞构成。 (2)取用菠菜叶的下表皮时,为何要稍带些叶肉? 表皮细胞除保卫细胞外,一般不含叶绿体,而叶肉细胞含较多的叶绿体。 (3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度?最适温度是多少? 进行光照、提高水温、切伤部 分叶片;25左右。 (4)对黑藻什么部位的细胞观察,所观察到的细胞质流动的现象最明显? 叶脉附
8、近的细胞。 (5)若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针,则在装片中该细胞的细胞质的实际流 动方向是怎样的? 仍为顺时针。 (6)是否一般细胞的细胞质不流动,只有黑藻等少数植物的细胞质才流动? 否,活细 胞的细胞质都是流动的。 (7)若观察植物根毛细胞细胞质的流动,则对显微镜的视野亮度应如何调节? 视野应适当调暗一些,可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。 (8)在强光照射下,叶绿体的向光面有何变化?叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。 实验四 观察有丝分裂 1、 材料:洋葱根尖(葱,蒜) 2、 2、步骤: (一)洋葱根尖的培养 (二)装片的制作 制作流程:解离漂洗染色制片 1. 解离: 药液
9、: 质量分数为 15%的盐酸,体积分数为 95%的酒精(1 : 1 混合液). 时间: 35min . 目的: 使组织中的细胞相互分离开来. 2. 漂洗: 用清水漂洗约 10min. 目的: 洗去药液,防止解离过度,并有利于染色. 3. 染色: 用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3 5min 目 的: 使染色体着色,利于观察. 4. 制片: 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加 一片载玻片. 然后用拇指轻轻地按压载玻片. 目的: 使细胞分散开来,有利于观察. (三) 观察 1、先在低倍镜下找到根尖分生
10、区细胞:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂。 2、 换高倍镜下观察:分裂中期分裂前、后、末期分裂间期。 (注意各时期细胞内染色体形 态和分布的特点) 。其中,处于分裂间期的细胞数目最多。 考点提示: (1)培养根尖时,为何要经常换水? 增加水中的氧气,防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。 (2)培养根尖时,应选用老洋葱还是新洋葱?为什么? 应选用旧洋葱,因为新洋葱尚在休眠,不易生根。 (3)为何每条根只能用根尖?取根尖的最佳时间是何时?为何? 因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂;上午 10 时到下午 2 时;因为此时细胞分裂活跃。 (4)解离和压片的目的分别是什么?压片时为何要再加一块载玻片
11、? 解离是为了使细胞相互分离开来, 压片是为了使细胞相互分散开来; 再加一块载玻片是为了 受力均匀,防止盖玻片被压破。 (5)若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么? 压片时用力过大。 (6)解离过程中盐酸的作用是什么?丙酮可代替吗? 分解和溶解细胞间质;不能,而硝酸可代替。 (7)为何要漂洗? 洗去盐酸便于染色。 (8)细胞中染色最深的结构是什么? 染色最深的结构是染色质或染色体。 (9)若所观察的细胞各部分全是紫色,其原因是什么? 染液浓度过大或染色时间过长。 (10)为何要找分生区?分生区的特点是什么?能用高倍物镜找分生区吗?为什么? 因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞
12、分裂;分生区的特点是:细胞呈正方形,排列紧 密,有的细胞处于分裂状态;不能用高倍镜找分生区,因为高倍镜所观察的实际范围很小, 难以发现分生区。 (11)分生区细胞中,什么时期的细胞最多?为什么? 间期;因为在细胞周期中,间期时间最长。 (12)所观察的细胞能从中期变化到后期吗?为什么? 不能,因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。 (13)观察洋葱表皮细胞能否看到染色体?为什么? 不能,因为洋葱表皮细胞一般不分裂。 (14)若观察时不能看到染色体,其原因是什么? 没有找到分生区细胞;没有找到处于分裂期的细胞;染液过稀;染色时间过短。 实验五 比较酶和 Fe3+的催化效率 考点提示: (1
13、)为何要选新鲜的肝脏? 因为在不新鲜的肝脏中,过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。 (2)该实验中所用试管应选较粗的还是较细的?为什么? 应选用较粗的,因为在较细的试管中容易形成大量的气泡,而影响卫生香的复燃。 (3)为何要选动物的肝脏组织来做实验,其他动植物的组织的研磨液能替代吗? 因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富; 其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶, 所以能 够替代。 (4)相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液,哪一个催化效果好?为什么? 研磨液效果好;因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。 (5)滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时,可否共用下个吸管?为什么? 不可共用,防止过氧化氢酶与
14、氯化铁混合,而影响实验效果。 实验六 色素的提取和分离 1、 原理: 叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇提取色素 各色素在层析液 中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同分离色素 2、步骤: (1)提取色素 研磨 (2)制备滤纸条 (3)画滤液细线:均匀,直,细,重复若干次 (干了之后) (4)分离色素:不能让滤液细 线触及层析液 (5)观察和记录: 结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色 (叶绿素 a)、黄绿色(叶绿素 b). 考点提示: (1)对叶片的要求?为何要去掉叶柄和粗的时脉? 绿色、最好是深绿色。因为叶柄和叶脉中所含色素很少。 (2)二
15、氧化硅的作用?不加二氧化硅对实验有何影响? 为了使研磨充分。不加二氧化硅,会使滤液和色素带的颜色变浅。 (3)丙酮的作用?它可用什么来替代?用水能替代吗? 溶解色素。它可用酒精等有机溶剂来代替,但不能用水来代替,因为色素不溶于水。 (4)碳酸钙的作用?不加碳酸钙对实验有何影响? 保护色素, 防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。 不加碳酸钙, 滤液会变成黄绿色或褐色。 (5)研磨为何要迅速?要充分?过滤时为何用布不用滤纸? 研磨迅速,是为了防止丙酮大 量挥发;只有充分研磨,才能使大量色素溶解到丙酮中来。色素不能通过滤纸,但能通过尼 龙布。 (6)滤纸条为何要剪去两角? 防止两侧层析液扩散过快。
16、(7)为何不能用钢笔或圆珠笔画线? 因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素,会影响色素 的分离结果。 (8) 滤液细线为何要直?为何要重画几次? 防止色素带的重叠;增加色素量,使色素带的颜色更深一些。 (9) 滤液细线为何不能触到层析液? 防止色素溶解到层析液中。 (10)滤纸条上色素为何会分离? 由于不同的色素在层析液中的溶解度不同,因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不 同。 (11)色素带最宽的是什么色素?它在层析液中的溶解度比什么色素大一些? 最宽的色素 带是叶绿素 a,它的溶解度比叶绿素 b 大一些。 (12)滤纸条上相互间距最大的是哪两种色素? 胡萝卜素和叶黄素。 (13)色素带最窄
17、的是第几条色素带?为何? 第一条色素带,因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。 实验七 观察质壁分离和复原 1、条件:细胞内外溶液浓度差,活细胞,大液泡 2、材料:紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡) ,质量浓度 0.3g/mL 的蔗糖溶液,清 水等。 3、步骤:制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片观察盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另 一侧用吸水纸吸引观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)盖玻片一 侧滴清水, 另一侧用吸水纸吸引观察(质壁分离复原) 4、结论: 细胞外溶液浓度 细胞内溶液浓度,细胞失水 质壁分离 细胞外溶液浓度 细胞 内溶液浓度,细胞吸水 质壁分离复原 知识概要:
18、制片 观察 加液 观察 加水 观察 考点提示: (1)洋葱为何要选紫色的?若紫色过淡怎么办? 紫色的洋葱有紫色的大液泡,便于观察液泡的大小变化;缩小光圈,使视野变暗些。 (2)洋葱表皮应撕还是削?为何? 表皮应撕不能削,因为削的表 实验二实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一 P18) 一实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。 1、可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的 Cu 2O 沉淀。 葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O(砖红色)+ H 2O,
19、即 Cu ( OH ) 2被还原成 Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2、脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色(或 被苏丹染液染成红色) 。淀粉遇碘变蓝色。 3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。 (蛋白质分子中含有很多肽键,在碱 性 NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的 Cu2+作用,产生紫色反应。 ) 二 实验材料 1、做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。 (因为组织的颜色较浅,易于观察。 ) 2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡 34小时(也可用蓖麻种子) 。 3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清
20、。 三、实验注意事项 1、可溶性糖的鉴定 a.应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐 林试剂;斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的 Cu ( OH ) 2在70900C 下分解 成黑色 CuO 和水; b. 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。甲、乙液分别加入时可能会 与组织样液发生反应,无 Cu ( OH ) 2生成。 2、蛋白质的鉴定 a. A 液和 B 液也要分开配制,储存。鉴定时先加 A 液后加 B 液;先加 NaOH 溶液,为 Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B 液混装或同时加入,会导致 Cu2+变成 Cu ( OH
21、 ) 2沉淀,而失效。 b、CuSO4溶液不能多加;否则 CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 c. 蛋清要先稀释;如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会 粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。 3、斐林试剂与双缩脲试剂的区别: 斐林试剂 双缩脲试剂 试剂成分 0.1g/mlNaOH 溶液 0.1g/mlNaOH 溶液(双缩脲试剂 A) 0.05g/mlCuSO4溶液 0.01g/mlCuSO4溶液(双缩脲试剂 B) 是否混合 混合后再滴加 先加双缩脲试剂 A 后加双缩脲试剂 B 是否加热 水浴加热 不加热 实验三:观察实验三:观察 DNA、RNA 在
22、细胞中的分布(必修一在细胞中的分布(必修一 P26) 实验原理: 1 甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同, 甲基绿使 DNA 呈现绿色, 吡罗红使 RNA 呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布。 2盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的 DNA 和蛋 白质分离,有利于 DNA 与染色剂结合。 实验四:体验制备细胞膜的方法(必修一实验四:体验制备细胞膜的方法(必修一 P40) 实验材料: 人和其他哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和众多的细胞器, 用这样的红 细胞做实验材料就只有细胞膜一种
23、膜结构。 实验五:用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体(必修一实验五:用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体(必修一 P47) 一 实验原理: 1.叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。 2.线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。 3.健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色 二 实验材料: 观察叶绿体时选用:藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是:叶子薄而小,叶绿体 清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为实验的首选材料。 若用菠菜叶作实验材料, 要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。 因为表皮细胞不含叶绿体。 三 讨论 1、细胞质基质
24、中的叶绿体,是不是静止不动的?为什么? 答:不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动,这种运动能随时改变椭球 体的方向,使叶绿体既能接受较多光照,又不至于被强光灼伤。 2、叶绿体的形态和分布,与叶绿体的功能有什么关系? 答:叶绿体的形态和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件 下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多,这可以接受更多的光照。 实验六实验六 观察植物细胞的吸水和失水(必修一观察植物细胞的吸水和失水(必修一 P61“探究探究”) 一 实验原理: 1质壁分离的原理:当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用 而失水, 细胞液中的
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