标本采集、运送标准操作规程课件.ppt

1、1.及时采集微生物标本作病原学检查。2.采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低。3.在感染的急性期、使用抗生素前或伤口局部治疗前收集样本。4.收集真正感染的病灶处的样本，且避免邻近区域常居菌群的污染。5.采用专用无菌容器收集标本。6.选择正确的解剖部位，并以适当的技术、方法与容器收集足量的样本，尽量不要以棉花拭子收集样本。7.采样后立即送检，最好在2h内。如不能及时送检，应将标本置于适当的储存环境待送，但存放一般不能超过24h。8.混有正常菌群的标本，不可置肉汤培养。9.每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检验申请单上填写足够的有关临床资料。（要标明病区、病人姓名、住院号、标本来源、采集

2、部位、采集时间等）拒收标准处理方式申请单注明的标本种类与送检标本不符 与原送检部门联系，退回申请单，要求审核并重送符合要求的标本。申请单上填写项目不全或与标本的标签不符或容器上未贴标签与原送检部门联系，要求补充完整申请单或重贴标签或重送标本。检验单上未注明样本来源和培养项目或仅注明身体部位者（如胸、腿）查询申请医师，补足标本信息。仅有申请单而无标本或无菌容器内无标本与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本标本外漏及明显受污染（如开塞）与原送检部门联系，退回申请单，建议重送标本。标本收集不符合采集要求 退回申请单，及时通知临床，告知正确收集方法，要求重送标本样本混入消毒液 或防腐剂退回申请单，

3、及时通知临床，建议重送标本。送检延误，超过要求送检时限与送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。标本量过少或已明显干燥与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。申请项目不适合如血液培养同时要求涂片革兰染色，肛门或直肠标本要求做革兰染色检查淋球菌。联系申请医师，建议删去请求革兰染色项目 送检容器不当或破损渗漏与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。穿刺液标本严重凝固，无菌部位标本（如脑脊液、脓、穿刺液、尿液等）为非无菌管采集。退回申请单，并注明标本不当，要求重送标本。一支拭子同时做细菌、支原体、衣原体及真菌培养 询问医师并补送标本，如不能补送，则按医师要求优先次序处理 同一天同一病人重复送

4、多次同一检测目的的相同样本（血液标本除外）一般只检查一次即可，可与临床医生进行协商。储存环境标本来源4冰箱 痰、尿液、粪便、活检组织、气管冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等室温（25）脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、鼻、喉、血液培养、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本序号检验项目标本送达时限标本接收至进行检验时间标本接收至出报告时间标本检验的周期（标本接收至报告送达时间）1肥达氏反应、肺支抗体、结核抗体、梅毒筛查2小时1小时24小时2天2梅毒确诊试验2小时1小时24小时3天3普通细菌培养+药敏（包括尿、痰、脑脊液、分泌物、粪便、咽拭子等）1小时1小时阴性3天、阳性结果3天以上4血培养立即1小

5、时阳性结果3天以上，阴性结果7天7淋球菌培养30分钟30分钟2天8真菌培养1小时2小时3天后9解脲、人型支原体培养及药敏、衣原体培养1小时2小时2天后11一般涂片革兰氏染色1小时2小时5小时当天下午12涂片找抗酸杆菌1小时2小时5小时当天下午13新型隐球菌墨汁染色1小时1小时5小时当天下午注：1.细菌室正常上班时间为周一至周六全天、周日上午；其他时间（包括中午、夜班、周日下午、）常规培养请送急诊化验室。2各类血清学检测周一至周五做；支原体、衣原体检查周一至周六上午做，其余时间标本一律不接收。3 空气培养、物表监测周六、周日不做，于周一至周五打电话给细菌室告之数量。【目的】规范标本采集，保证实验

6、室检测前标本质量。【范围】微生物实验室所有标本。【职责】采集、运送微生物标本的临床各科室工作人员。【标准操作程序】1.1采集指征：对可疑血流感染患者未进行抗菌药物治疗前，应及时进行血液培养.可疑血流感染患者出现以下一项或几项体征时应及时采集血培养：（1）发热（38）或低温（36）（2）寒战。（3）白细胞增多（计数大于10,000109/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞）。【标准操作程序】（4）粒细胞减少（成熟时我多核白细胞小于1000109/L）。（5）血小板减少。（6）皮肤黏膜出血。（7）昏迷.（8）多器官衰竭（9）血压降低【标准操作程序】在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外，

7、很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁或以下的幼儿）一般出现于门诊，常伴有明显的发热（38.5）和白细胞增多（总数20,000109/L）。老年菌血症患者，可能不发热或低体温，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染心内膜炎的重要信号。【标准操作程序】1.2血培养次数和采血时间：采血应尽量在使用抗菌药之前进行，推荐同时采集23套（不同部位）血培养，以助于提高阳性检出率，区别病原菌与污染菌。（一套血培养为一瓶需氧培养加一瓶厌氧培养。一次静脉采血只能注入到1套培养瓶中）。尽可能选用可中和或吸附抗菌药物的培养基。临床对可疑菌血症患者应立即采集血培养标本

8、，对间歇性寒战或发热可在寒战时或体温高峰到来之前0.51h进行采血。除特殊情况之外（如怀疑细菌性心内膜炎），采集血培养后的2至5天内，无需重复采集血培养。【标准操作程序】1.3特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的建议：1.3.1急性心内膜炎：对于可能的心内膜炎患者，必须在经验使用抗菌药物前30min之内抽取血培养，起始采集3套血培养，如果在24h内仍报告为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共为5套。1.3.2亚急性心内膜炎：需在24h之内连续从不同部位抽取3套血培养，间隔时间30-60min。如24h内为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共为5套。【标准操作程序】1.3.3对于亚急性

9、心内膜炎的评估，皮肤消毒尤为重要，因为其主要的病原菌为皮肤定植菌如凝固酶阴性葡萄球菌。因此，血培养必须取自外周静脉而非留置的静脉导管。取自导管的血培养会伴有很高的污染风险从而导致错误的心内膜炎的结论。建议采用正确的皮肤消毒，从不同的外周静脉部位分别采集血培养，不能从留置的导管采血。1.3.4急性脓毒症：10min内从不同的部位采集23套血培养。1.3.5可疑菌血症但血培养持续阴性，应改变血培养方法，如延长培养时间或增加特殊培养基，以获得罕见的或苛养的微生物（真菌，结核菌等）。1.3.6不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，从不同体位先采集23 套血标本，2436h后估计体温升高之前（通常下

10、午）再采集2套以上【标准操作程序】1.4皮肤消毒程序：1.4.1推荐使用碘酊、次氯酸和洗必太或碘伏。【标准操作程序】1.5 静脉穿刺点皮肤消毒程序：1.5.1 70%酒精消毒皮肤（以采血点为中心，螺旋式用力有内到外直径5cm以上），作用60秒；1.5.2 用碘伏消毒皮肤（以采血点为中心，螺旋式用力有内到外直径5cm以上），作用1.52min；或用碘酊消毒皮肤，作用30秒；1.5.3 再用70%酒精脱碘（以采血点为中心，螺旋式用力有内到外直径5cm以上）；1.5.4 静脉穿刺采血。注：血培养必须特别注意消毒，因许多微生物，尤其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或近表层处，易污染血培养标本。【标准操作程序

11、】1.6培养瓶消毒程序：用70%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘消毒剂），作用60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面残余液体，然后注入血液。1.7采血量：成年患者推荐的采血量为每套不少于10ml，每瓶不少于5ml。婴幼儿患者推荐的采血量，每瓶不少于2ml。1.8培养瓶 推荐使用商品化的培养基。【标准操作程序】1.9静脉穿刺和培养瓶接种程序：穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触刺点。骨髓标本采取对穿刺一侧准备同外科切口。用注射器无菌穿刺取血或骨髓后，直接注入血培养瓶，勿换针头（如果行第二次穿刺，应换针头），或严格按厂商推荐的方法采血。血标本接种到血培养瓶后，轻轻

12、颠倒混匀以防血液凝固，立即送检。【标准操作程序】1.10血培养瓶标识标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类、采集时间。注：病人标识不可覆盖在血液培养瓶的条形码上。1.11标本的运送血培养标本应按要求尽快送往实验室，不能超过2h。如无法及时送检，血标本需室温（20-25度）保存，切勿冷藏。1.12 生物安全防护参见HS-JY-GL-XJ-302生物防护的安全程序。【标准操作程序】2.1采集指征：1)有典型的尿道刺激症状2)肉眼脓尿或血尿3)尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性（几个+号）4)不明原因的发热，无其他局部症状5)留置导尿管时间超过48h的患者出现发热6)膀胱排空功能受损7)泌尿系统

13、疾病手术前。【标准操作程序】2.2采集方法：标本采集应力争在末使用抗菌药物之前，注意避免消毒剂污染标本。清洁中段尿：最好留取早晨清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床,由专业人员指导下采集中段尿标本。尿标本消毒采集程序：【标准操作程序】2.3 采集量510ml。2.4 容器 无菌、带螺旋盖、透明塑料容器。2.5 标本容器标识标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类。2.6 标本运送标本采集后立即盖紧防止泄漏或容器外部留有残留物。及时送检，室温保存下不得超过2小时，否则应置于 4冰箱保存，保存时间不得超过24h。2.7 注直接导尿可能导致尿道菌落进入膀胱，增加医源性感染的危险。8生物安全防

14、护参见HS-JY-GL-XJ-302生物防护的安全程序。【标准操作程序】5.1采集指征：当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养：v粪便涂片镜检白细胞5/HPv体温38.5v重症腹泻v血便或便中有脓液v未经抗菌药物治疗的持续性腹泻病人v来自肠道传染疫区的患者5.2采集时间：尽可能在发病早期和使用抗菌药物之前采集。在不同的时间采集23个标本可以提高致病菌的分离率。【标准操作程序】5.3采集方法：自然排便采集标本时，取有脓血，黏液，组织碎片部分的粪便13g（花生米大小）。水样粪便则取絮状物，一般取13ml，直接装入运送培养基中送检。直肠拭子采集粪便标本：先以肥皂和水，将肛门周

15、围洗净，然后用经无菌盐水湿润的棉式子插入肛门超越肛门括约肌约23cm，与直肠黏膜表面接触，轻轻旋转，必须将棉式子置于运送培养基中送检。5.4 采集量：成形粪便花生米大小13 g，水样便13 ml。5.5容器：粪便标本装于无菌加盖螺旋广口塑料杯；直肠肛拭置于Cary-Bair运送培养基。5.6 标本容器标识应包括病人姓名、病员号、标本种类、检验项目、采集时间。【标准操作程序】5.7标本运送：标本采集后应立即加盖，防止泄漏或容器外部留有残留物。1小时内送检，建议床边接种。高度怀疑霍乱弧菌感染的标本运送必须符合相应的生物安全防护要求。5.8注：住院超过3d或入院诊断不是胃肠炎的患者，应考虑抗菌药物相

16、关腹泻的检测，一般不做常规粪便培养。除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做常规病原检测。有腹部痉挛的患者在发病6h内采集到的血便或水样便的效果最好。疑似致病性大肠埃希菌，气单胞菌，邻单胞菌，弧菌，小肠结肠炎耶尔森菌感染的病人，需要培养时，须另外提出申请。【标准操作程序】9.1采集指征：浅表皮肤黏膜感染，深部组织感染等。9.2采集时间：在使用抗菌药物之前采集。9.3采集方法：根据不同的病变部位，炎症或坏死组织部位，采用相应的方法采集组织标本。9.4采集量：1g。9.5容器：无菌封闭容器，需要加一些无菌盐水保持湿润。9.6标本容器标示:应包括病人姓名，病员号，标本种类，检验项目，采集时间。

17、9.7标本运送:标本采集后正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物，常温1h内送至实验室。9.8注：送检组织的量尽可能多，不要呈送表面简单摩擦的拭子。组织标本不要添加固定液。【标准操作程序】微生物标本采集指南微生物标本采集指南 表表1 1标本类型采集送检时间温度报告时间重复采样限制说明原则装置和最小量转运血培养培养瓶口的消毒：用70%酒精擦拭血培养瓶口橡皮塞，作用60s。用无菌棉签清除橡皮塞表面残留液体，然后注入血液。静脉穿刺点皮肤消毒：1.70%乙醇消毒皮肤（以采血点为中心，螺旋式用力有内到外直径5cm以上），作用60s；2.用碘伏消毒皮肤，作用1.52min;或用碘酊消毒皮肤，作用30s（以

18、采血点为中心，螺旋式用力有内到外直径5cm以上）3.再用70%酒精脱碘（以采血点为中心，螺旋式用力有内到外直径5cm以上）4.静脉穿刺采血。注：血培养须特别注意消毒，因许多微生物，尤其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或近表面或表层处，易污染血培养标本血培养专用瓶成人：5ml/瓶，量大效果更好婴儿：2ml/瓶2h内送至实验室，室温放置7/d3瓶/24h1.急性脓毒症：10min内从不同的部位采23套2.急性心内膜炎：对于可能的心内膜炎患者，必须在经验使用抗菌药物前30min之内抽取血培养，起始采集3套血培养，如果在24h内仍报告为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共为5套。3.亚急性心内膜炎：需在

19、24h之内连续从不同部位抽取3套血培养，间隔时间30-60min。如24h内为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共为5套。注意事项同脑脊液【标准操作程序】微生物标本采集指南微生物标本采集指南 表表2标本类型采集时间温度报告时间重复采样限制说明原则装置和最小量转运尿：女性，中段男性，中段导尿管1用肥皂和水完全清洗尿道区域，用湿纱布垫漂洗2分开阴唇，开始排泄3排除前段后，不停止尿流，采集中段尿1用肥皂和水清洗阴茎头，用湿纱布垫漂洗2回缩包皮，开始排泄3排除前段后，不停止尿流，采集中段尿1用肥皂和水完全清洗尿道区域2将导管无菌插入膀胱3流入15ml尿后，采集尿入无菌容器内无菌容器 30-50ml无菌容器 30-50ml无菌容器 30-50ml2h,室温2h,室温2h,室温5/d5/d5/d1次/天1次/天1次/天该程序可能导致尿道菌落进入膀胱并增加医源性感染的危险阴道1.擦除过多的分泌物和排出液2.用2支无菌拭子从阴道穹隆部黏膜处获取分泌物31支需要涂片，1支拭子做培养转运拭子2h,室温对于子宫内装置，将全部装置放入无菌容器并室温转运，推荐使用革兰染色方法确定细菌性阴道炎。细菌培养往往不准确和容易误导