生物技术在医药和农业领域的应用课件(新修订).ppt
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- 生物技术 医药 农业 领域 应用 课件 修订
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1、 Technologytechnetechne-logos-logos(工艺、技能)(工艺、技能)(词,讲话)(词,讲话)技术就是关于劳动工具的规则(即制作方式与使用方法)体系,是人在改造自然、改造社会,以及改造自我的过程中所用到的一切手段、方法的总和。定义:以现代生命科学为基础,结定义:以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其它基础学科合先进的工程技术手段和其它基础学科的科学原理,按照预先的设计,对生物的科学原理,按照预先的设计,对生物和生物成分进行改造和利用的技术。和生物成分进行改造和利用的技术。美国政府技术顾问委员会美国政府技术顾问委员会(OAT)的定义是:应用生物或来自生物体的
2、物质制造或改进一种的定义是:应用生物或来自生物体的物质制造或改进一种商品的技术,其还包括改良有重要经济价值的植物与动物和利用微生物改良环境的技术。商品的技术,其还包括改良有重要经济价值的植物与动物和利用微生物改良环境的技术。生物技术的本质是什么?生物技术的本质是什么?基因工程、细胞工程、微生物工程、蛋白质(酶)工程:基因工程、细胞工程、微生物工程、蛋白质(酶)工程:此外,基因诊断与基因治疗技术、克隆动物技术、生物芯片技术、生物此外,基因诊断与基因治疗技术、克隆动物技术、生物芯片技术、生物材料技术、生物能源技术等。材料技术、生物能源技术等。生物技术主要内容:生物技术主要内容:直接相关联的学科:直
3、接相关联的学科:分子生物学、微生物学、生物化学、遗传学、细胞生物学、化学工程分子生物学、微生物学、生物化学、遗传学、细胞生物学、化学工程学、医药学等。学、医药学等。对人类和社会生活各方面影响最大的生物技术领域:对人类和社会生活各方面影响最大的生物技术领域:医药生物技术、农业生物技术医药生物技术、农业生物技术、环境生物技术、海洋生物技术等。、环境生物技术、海洋生物技术等。生物技术在医药生物技术在医药领域的应用领域的应用HIV生生 物物 技技 术术 与与 疫疫 苗苗(一)(一)生生 物物 技技 术术 与与 疾疾 病病 诊诊 断断天花病毒天花病毒 疫苗的定义疫苗的定义 疫苗的作用原理疫苗的作用原理
4、疫苗的种类和特点疫苗的种类和特点定义:定义:将病原物(如细菌、立克次体、病毒将病原物(如细菌、立克次体、病毒等)及其代谢产物,经过人工等)及其代谢产物,经过人工减毒减毒、灭活灭活或利或利用用基因工程基因工程等方法制成的,可以通过注射或黏等方法制成的,可以通过注射或黏膜途径接种,并诱导机体产生针对特定致病原膜途径接种,并诱导机体产生针对特定致病原的的特异抗体特异抗体或或细胞免疫细胞免疫,从而使机体获得消灭,从而使机体获得消灭该病原能力的生物制品统称为疫苗。包括蛋白该病原能力的生物制品统称为疫苗。包括蛋白质、核酸、活载体或感染因子等。质、核酸、活载体或感染因子等。疫苗是什么?疫苗是什么?疫苗疫苗V
5、accineVaccineFrom Latin From Latin vaccvaccnus of cowsnus of cows 17961796年,乡村医生爱德华年,乡村医生爱德华.琴纳将牛痘接种于人体用于预防天花琴纳将牛痘接种于人体用于预防天花 疫苗的定义疫苗的定义 疫苗的作用原理疫苗的作用原理 疫苗的种类和特点疫苗的种类和特点疫苗是如何工作的?疫苗是如何工作的?免疫系统的“信号处理器”,捕获抗原、加工抗原信息、传递抗原信息。带有致病原信息的抗原成分,进入机体后被机体识别,继而加工成抗原信息 疫苗的定义疫苗的定义 疫苗的作用原理疫苗的作用原理 疫苗的种类和特点疫苗的种类和特点疫苗的发展疫
6、苗的发展1877-1889,1877-1889,巴斯德发现连续传巴斯德发现连续传代、长时间培养的霍乱细菌、代、长时间培养的霍乱细菌、炭疽病毒、狂犬病毒,炭疽病毒、狂犬病毒,毒力减毒力减弱弱,但是用于接种后可以有效,但是用于接种后可以有效的预防疾病。的预防疾病。Louis PasteurLouis Pasteur18861886年,年,Daniel Salmon Daniel Salmon 和和Theobald SmithTheobald Smith发现发现热杀死热杀死的霍乱杆菌有很好的免疫原的霍乱杆菌有很好的免疫原性,可以用于预防。之后鼠性,可以用于预防。之后鼠疫、伤寒、百日咳等死菌疫疫、伤寒
7、、百日咳等死菌疫苗相继问世。苗相继问世。Theobald SmithTheobald Smith第一代疫苗:以减毒、弱化或灭活的病原体做疫苗第一代疫苗:以减毒、弱化或灭活的病原体做疫苗灭灭 活活 疫疫 苗苗减减 毒毒 活活 疫疫 苗苗亚亚 单单 位位 疫疫 苗苗百白破疫苗、伤寒疫苗、霍乱疫苗、狂犬疫苗,SARS疫苗卡介苗、麻疹疫苗、脊髓灰质炎疫苗、乙型脑炎减毒疫苗流感病毒血凝素疫苗,脑膜炎球菌夹膜多糖疫苗第一代疫苗:以减毒、弱化或灭活的病原体做疫苗第一代疫苗:以减毒、弱化或灭活的病原体做疫苗第二代疫苗:基因工程疫苗第二代疫苗:基因工程疫苗疫苗的发展疫苗的发展 基因工程疫苗基因工程疫苗:使用:使
8、用DNADNA重组技术,重组技术,将病将病原体的抗原(某种蛋白质)原体的抗原(某种蛋白质)基因克隆基因克隆在细菌或在细菌或真核细胞内,使病原体的主要抗原基因在真核细胞内,使病原体的主要抗原基因在细菌细菌或或真核细胞真核细胞中表达,利用表达的中表达,利用表达的蛋白质蛋白质或或多肽多肽作为疫苗。作为疫苗。乙肝表面蛋白重组DNADNA疫苗第一代疫苗:以减毒、弱化或灭活的病原体做疫苗第一代疫苗:以减毒、弱化或灭活的病原体做疫苗第二代疫苗:基因工程疫苗第二代疫苗:基因工程疫苗疫苗的发展疫苗的发展第三代疫苗:核酸疫苗(第三代疫苗:核酸疫苗(DNADNA疫苗疫苗/基因疫苗)基因疫苗)核酸疫苗:指将含有编码病
9、原体核酸疫苗:指将含有编码病原体抗原基因抗原基因序列序列的质粒载体,经肌肉注射或微弹轰击等方的质粒载体,经肌肉注射或微弹轰击等方法导入体内,通过法导入体内,通过宿主细胞宿主细胞表达系统表达表达系统表达抗原抗原蛋白蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。以达到预防和治疗疾病的目的。疫苗使用及研究的现状和问题疫苗使用及研究的现状和问题 质量问题质量问题:质量安全质量安全 (高标准,严要求)(高标准,严要求)技术问题:技术问题:寄生虫病疫苗,寄生虫病疫苗,HIVHIV疫苗均未疫苗均未 研制成功研制成功 有效性及安全问题:有效性及安全问
10、题:核酸疫苗的标准制定和安全评估核酸疫苗的标准制定和安全评估(二)(二)生生 物物 技技 术术 与与 疾疾 病病 诊诊 断断要求:早期、特异、快速、灵敏、操作简便要求:早期、特异、快速、灵敏、操作简便1.ELISA1.ELISA技术技术2.DNA2.DNA诊断技术诊断技术3.3.生物芯片与疾病诊断生物芯片与疾病诊断原理:将原理:将酶酶与与抗体(原)抗体(原)交联交联形成酶形成酶-抗体抗体(原原)复合物;另外复合物;另外将将抗原(体)抗原(体)吸附在以聚苯乙吸附在以聚苯乙稀制成的微孔滴定板上,使之稀制成的微孔滴定板上,使之固相化,免疫反应和固相化,免疫反应和酶促反应酶促反应均在其中进行。利用抗原
11、与抗均在其中进行。利用抗原与抗体的体的特异结合特异结合以及酶将无色底以及酶将无色底物物催化催化成成有色底物有色底物,根据底物,根据底物颜色的有无以及颜色的深浅判颜色的有无以及颜色的深浅判断阴性或阳性反应以及反应强断阴性或阳性反应以及反应强度。度。1.1.免疫学诊断免疫学诊断酶联免疫吸附检测(酶联免疫吸附检测(ELISAELISA)技术)技术2.2.基因诊断基因诊断2.1 基因诊断概述基因诊断概述基因诊断(基因诊断(DNA诊断诊断)的概念:根据)的概念:根据DNA分子碱基互补分子碱基互补配对及变性、复性的原理,利用基因探针杂交、基因体外配对及变性、复性的原理,利用基因探针杂交、基因体外扩增(扩增
12、(PCR)、电泳、)、电泳、DNA测序以及差异显示等分子生测序以及差异显示等分子生物学技术,通过直接检查基因的物学技术,通过直接检查基因的存在状况存在状况及其及其功能功能(基因(基因型的改变)对疾病作出判断的诊断技术。型的改变)对疾病作出判断的诊断技术。蛋白质是生命的体现者,DNA是遗传的物质基础,基因是DNA分子上的功能片段,是遗传的基本单位。人类患各种疾病很大程度是由于执行某一功能的蛋白质分子出现异常。而这种不同和异常取决于控制其合成的基因的不同和异常。传统的疾病诊断是以疾病或病原物的表型为依据。如果能够在基因水平直接检测与某种疾病相关的基因序列,或病原物的特异性基因片段,则可以克服传统诊
13、断的不足,从根本上对疾病作出诊断。2.2 主要的基因诊断技术2.2.1基因探针杂交技术病原物病原物提取病原物提取病原物DNADNADNADNA固定在硝酸纤维膜固定在硝酸纤维膜根据病原物特异DNA序列合成探针用荧光素标记探针探针与膜上探针与膜上DNADNA退火退火根据是否检测到荧光来判断是否根据是否检测到荧光来判断是否有探针所代表的病原物有探针所代表的病原物检测检测病人病人分离分离标本标本基本思路:基本思路:将已知序列的特定基因(微生物、遗传病的特异基因片段)用同位素、荧光素等标记,制备成一种诊断试剂诊断试剂,即基基因探针因探针。由于其在适当条件下可与同源序列互补形成杂交体,因此使基因探针与待检
14、测组织细胞内的基因片段发生杂交反应,通过探针上的标记观察探针是否与标本DNA结合,从而判断标本是否有与探针一致的片段,再对是否有遗传病或病原物感染作出诊断。诊断试剂诊断试剂2.2.2 利用利用PCR或或PCR与与分子杂交标记结合技术分子杂交标记结合技术基本思路基本思路:寻找病原体的特异:寻找病原体的特异DNA序列,以该段序列,以该段DNA序列序列作为靶序列设计作为靶序列设计特异性引物特异性引物;对待测样品进行对待测样品进行PCR扩增扩增,然,然后检测相应的后检测相应的扩增条带扩增条带,有则,有则为阳性反应。为阳性反应。应用应用:已经应用于结核杆菌、:已经应用于结核杆菌、淋球菌、多种致腹泻的肠道
15、传淋球菌、多种致腹泻的肠道传染细菌、人类免疫缺陷病毒、染细菌、人类免疫缺陷病毒、乙肝病毒等的检测。产前诊断、乙肝病毒等的检测。产前诊断、血源筛查、肿瘤基因诊断。血源筛查、肿瘤基因诊断。PCR(聚合酶链反应)技术(聚合酶链反应)技术:体外扩增特异体外扩增特异DNA片段的技术。片段的技术。用于基因工程的基因制备,还用于基因工程的基因制备,还用于某些疾病的诊断。用于某些疾病的诊断。2.3 遗传性疾病的诊断遗传性疾病的诊断临症诊断:临症诊断:指遗传病出现临床症状后所作的诊断。指遗传病出现临床症状后所作的诊断。症状前诊断症状前诊断:指临床症状出现前所作的诊断。:指临床症状出现前所作的诊断。产前诊断:产前
16、诊断:诊断胎儿出生前所做的诊断诊断胎儿出生前所做的诊断(性别、单基因病、性别、单基因病、CS异常异常异常异常)。目前大多数遗传病无有效的治疗方法,因此产前诊断对于降低遗传病的发病率,提高人口素质具有重要的意义。夫妇之一有染色体畸变。35岁以上的高龄产妇。夫妇之一有开放性神经管畸形。夫妇之一有先天性代谢缺陷。X-连锁遗传病基因携带者孕妇。有原因不明的习惯性流产的孕妇。羊水过多的孕妇。夫妇之一有致畸因素接触史的孕妇。有遗传病家族史,又系近亲结婚的孕妇。需要进行产前诊断的对象需要进行产前诊断的对象3.生物芯片与诊断生物芯片与诊断DNA芯片(基因芯片):它们是芯片(基因芯片):它们是DNA杂交探针技术
17、与半导体工业技术相杂交探针技术与半导体工业技术相结合的结晶。该技术系指将大量探针分子固定于支持物上后与带荧光标记结合的结晶。该技术系指将大量探针分子固定于支持物上后与带荧光标记的的DNA样品分子进行杂交,通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而样品分子进行杂交,通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。获取样品分子的数量和序列信息。从生物样品(血液或活组织)中分离纯化从生物样品(血液或活组织)中分离纯化DNA或或mRNA,并对其进行特异,并对其进行特异性扩增;性扩增;对待测样品进行标记(通常用荧光素标记的对待测样品进行标记(通常用荧光素标记的dNTP为底物,通过为底物,
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