环境条件对微生物的影响课件.ppt

1、实验二十实验二十环境条件对微生物的影响环境条件对微生物的影响n目的要求目的要求n实验材料实验材料n试验程序试验程序n思考题思考题 目的要求目的要求n了解物理因素，化学因素及生物了解物理因素，化学因素及生物因素抑制或杀死微生物的作用及因素抑制或杀死微生物的作用及其试验方法。其试验方法。实验材料实验材料n菌种：菌种：枯草杆菌（枯草杆菌（Bacillus subtilisBacillus subtilis)斜面；灵杆菌斜面；灵杆菌（Bacterium prodigiosumBacterium prodigiosum)菌液；黑曲霉（菌液；黑曲霉（AspergillusAspergillus niger

2、niger)；细黄链霉素；细黄链霉素“5406”5406”（StreptomycesStreptomyces microflavusmicroflavus(5406)(5406)。金黄色葡萄球菌（。金黄色葡萄球菌（StaphylococcusStaphylococcus aureusaureus)斜面。斜面。n培养基：培养基：牛肉膏蛋白胨斜面培养基。牛肉膏蛋白胨斜面培养基。牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（10ml10ml）。）。马铃薯蔗糖培养基（马铃薯蔗糖培养基（10mL10mL）淀粉琼脂培养基（淀粉琼脂培养基（10mL10mL）。）。n其它：其它：无菌培养皿、无菌三角玻棒、无

3、菌五角星黑纸、无无菌培养皿、无菌三角玻棒、无菌五角星黑纸、无菌水（菌水（5mL5mL），），0.6cm0.6cm无菌圆形滤纸，镊子。无菌圆形滤纸，镊子。n供试药剂：供试药剂：2.52.5碘酒，碘酒，7575酒精，酒精，0.10.1HgClHgCl2 2,5%,5%石炭石炭酸。酸。实验程序实验程序n温度对微生物的影响温度对微生物的影响n紫外线对微生物的影响紫外线对微生物的影响n化学药剂对微生物的影响化学药剂对微生物的影响n抗生素对微生物的影响抗生素对微生物的影响实验程序实验程序 （温度对微生物的影响）（温度对微生物的影响）n在微生物的生长范围内有最高、最适、最低生在微生物的生长范围内有最高、最适

4、、最低生长温度，一旦超过最低和最高生长温度，微生长温度，一旦超过最低和最高生长温度，微生物均不能生长，或处于休眠状态，甚至死亡。物均不能生长，或处于休眠状态，甚至死亡。n每组取牛肉膏蛋白胨细菌斜面培养基每组取牛肉膏蛋白胨细菌斜面培养基6 6支，在无支，在无菌操作下，用枯草杆菌斜面菌种进行斜面接种。菌操作下，用枯草杆菌斜面菌种进行斜面接种。各取各取2 2支标记支标记28280 0C C、60600 0C C、4 40 0C(C(冰箱）分别放冰箱）分别放入相应温度下培养，入相应温度下培养，48h48h后观察记录并做实验报后观察记录并做实验报告告。实验程序实验程序 （紫外线对微生物的影响）（紫外线对

5、微生物的影响）n紫外线对微生物有明显的致死作用，波长紫外线对微生物有明显的致死作用，波长260nm260nm紫外线具紫外线具有最高的杀菌效应。剂量高、时间长、距离短时就易杀死有最高的杀菌效应。剂量高、时间长、距离短时就易杀死它们。它们。n光复活现象：光复活现象：经紫外线照射后受损害的细胞，如立即暴露经紫外线照射后受损害的细胞，如立即暴露在可见光下，则有一部分仍可恢复正常活力。在可见光下，则有一部分仍可恢复正常活力。n实验方法：实验方法：将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作制成平将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作制成平板板1 1付，用无菌移液管吸取付，用无菌移液管吸取0.1mL0.1mL灵杆菌菌液

6、涂布于平板上灵杆菌菌液涂布于平板上（用无菌三角玻棒）。在无菌室中，将无菌五角星黑纸放（用无菌三角玻棒）。在无菌室中，将无菌五角星黑纸放置于平板，在距离紫外灯的置于平板，在距离紫外灯的30cm30cm处照射处照射20min20min，去黑纸，去黑纸加皿盖（如图）。于加皿盖（如图）。于283028300 0C C温箱中倒置培养温箱中倒置培养48h48h后记录后记录结果。结果。实验程序实验程序 （紫外线对微生物的影响）（紫外线对微生物的影响）实验程序实验程序 (化学药剂对微生物的影响）化学药剂对微生物的影响）n一些化学药剂对微生物生长有抑制或杀死作用，因此在实验一些化学药剂对微生物生长有抑制或杀死作

7、用，因此在实验室中及生产上常利用某些化学药剂进行灭菌或消毒。室中及生产上常利用某些化学药剂进行灭菌或消毒。n1.每组取无菌培养皿两付，在皿底注明处理方法及菌种名每组取无菌培养皿两付，在皿底注明处理方法及菌种名称。称。2.取枯草杆菌和取枯草杆菌和金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌0.2mL放入相应的培养皿中放入相应的培养皿中.n将已熔化冷却至将已熔化冷却至500C左右的细菌培养基分别倒入上述培养左右的细菌培养基分别倒入上述培养皿中，混匀后凝固成平板。皿中，混匀后凝固成平板。n用镊子将分别滴有两滴用镊子将分别滴有两滴0.1%HgCl2，2.5%碘酒，碘酒，75%酒酒精，精，5%石炭酸的小圆形滤纸片，放于

8、每一平板上，盖上皿石炭酸的小圆形滤纸片，放于每一平板上，盖上皿盖，于盖，于28300C的温箱中培养的温箱中培养48h后记录结果。后记录结果。n如果有抑制作用，则滤纸片四周出现无菌生长的抑菌圈，圈如果有抑制作用，则滤纸片四周出现无菌生长的抑菌圈，圈的大小可表示消毒剂抑菌的强弱（的大小可表示消毒剂抑菌的强弱（见图见图-2）。）。实验程序实验程序 (化学药剂对微生物的影响）化学药剂对微生物的影响）实验程序实验程序 (抗生素对微生物的影响）抗生素对微生物的影响）n抗生素的定义抗生素的定义:某些微生物，特别是放线菌，在生命活某些微生物，特别是放线菌，在生命活动过程中产生了一些对其本身无害而能抑制或杀死另

9、动过程中产生了一些对其本身无害而能抑制或杀死另外一些微生物的特异性的代谢产物，这些特异性的代外一些微生物的特异性的代谢产物，这些特异性的代谢产物称为抗生素。产生抗生素的微生物称为抗生菌。谢产物称为抗生素。产生抗生素的微生物称为抗生菌。n抗生素在极低浓度下即能抑制或杀死某些微生物。在抗生素在极低浓度下即能抑制或杀死某些微生物。在抗生菌的筛选中，常以其对某些微生物产生的拮抗作抗生菌的筛选中，常以其对某些微生物产生的拮抗作用所形成的抑菌圈大小来衡量抗生菌作用的强弱和抗用所形成的抑菌圈大小来衡量抗生菌作用的强弱和抗生素的有效浓度生素的有效浓度实验程序实验程序 (抗生素对微生物的影响）抗生素对微生物的影

10、响）n试验方法：试验方法：1.1.将枯草杆菌斜面和黑曲霉斜面各用将枯草杆菌斜面和黑曲霉斜面各用4mL4mL无菌水，以无菌操作无菌水，以无菌操作法制成菌悬液备用。法制成菌悬液备用。2.2.取两付无菌平皿，皿底贴上标签，注明组别及处理，各自用取两付无菌平皿，皿底贴上标签，注明组别及处理，各自用无菌吸管取上述菌悬液各无菌吸管取上述菌悬液各1mL1mL，分别加入相应底培养皿内。，分别加入相应底培养皿内。3.3.取已融化并保持在取已融化并保持在500C500C左右的细菌和真菌培养基各左右的细菌和真菌培养基各1 1管，倒管，倒入相应的培养皿中，轻轻摇匀，制成含菌平板。入相应的培养皿中，轻轻摇匀，制成含菌平

11、板。4.4.用无菌打孔器在长有用无菌打孔器在长有“5406”5406”放线菌的培养皿中，无菌操放线菌的培养皿中，无菌操作垂直钻取连有培养基的菌块。用灭菌镊子将作垂直钻取连有培养基的菌块。用灭菌镊子将“5406”5406”菌块菌块移至平板上，每个平板放四块。移至平板上，每个平板放四块。5.5.培养皿正放在培养皿正放在2828300C300C温箱中培养温箱中培养2 23d3d观察菌块周围的观察菌块周围的透明圈（抑菌圈）大小。并写实验报告。透明圈（抑菌圈）大小。并写实验报告。思思 考考 题题n高温和低温对微生物生长各有何影响？为什么？n紫外线照射时，为什么要除掉皿盖？n简述HgCl2、碘酒、酒精、石炭酸的抑菌机制。实实 验验 二二 十十结结 束束