艾滋病实验室检测技术课件.ppt

1、 艾滋病实验室检测艾滋病实验室检测-检测点检测点HIVHIV的简介的简介HIVHIV抗体检测程序抗体检测程序原始记录原始记录样品的采集、运送样品的采集、运送HIV实验室检测 人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）是一种感染人类免疫系统细胞的反转录病毒。1981年，美国发现第一例获得性免疫缺陷综合 征患者。1982年，这种疾病被命名为“艾滋病”。1985年，一位到中国旅游的外籍人士患病入住北京协和医院后很快死亡，后被证实死于艾滋病，这是我国第一次发现艾滋病病例。HIVHIV简介简介x 主要攻击人体的辅助T淋巴细胞系统，一旦侵入机体细胞，病毒将会和细胞

2、整合在一起终生难以消除；广泛存在于感染者的血液、精液、阴道分泌物、乳汁、脑脊液、有神经症状的脑组织液中，其中以血液、精液、阴道分泌物中浓度最高；感染途径 感染者潜伏期长、死亡率高；艾滋病病毒的基因组比已知任何一种病毒基因都复杂。HIVHIV简介简介酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法化学发光法化学发光法快速免疫法（快速免疫法（RTRT）：）：金标法、硒标法金标法、硒标法其他方法：明胶颗其他方法：明胶颗粒凝集法（粒凝集法（PAPA）蛋白免疫印迹试蛋白免疫印迹试验（验（WB）、放）、放射免疫沉淀试验射免疫沉淀试验（RIPA）筛筛查查试试验验确确证证试试验验试剂试剂反应模式反应模式固相包被固相包被检测目标检

3、测目标窗口期窗口期优缺点优缺点第一代间接法病毒裂解产物HIV-1IgG抗体6-8周抗原制备、纯化抗原比较困难，危险性大可因含宿主细胞成分而出现假阳性反应第二代间接法重组或合成的HIV多肽抗原HIV-1/2IgG抗体4-5周制备安全容易，重复性好，比第一代灵敏，特意度高第三代双抗原夹心法重组或合成的HIV多肽抗原HIV-1/2OIgGIgM抗体3周特意度高于第二代，改善了O群样本的反应性第四代双抗原抗体夹心法重组或合成的HIV多肽抗原P24单克隆抗体HIV-1/2OIgGIgMIgA抗体P24P24抗原抗原2周可同时检测HIV抗原抗体快检试剂的检测方法测试区（T）质控区（C）血清血浆全血快检试剂

4、的检测方法注意事项 试剂的选择；第一种要求灵敏度高，第二种试 剂要求特异性高的。血液样品尽量避免溶血；加样准确；（2人同时操作）缓冲液 结果读取时间 弱阳性结果 包装纸打开后，尽量一小时内使用防止污染；HIVHIV抗体检测程序抗体检测程序原始记录原始记录样品的采集、运送样品的采集、运送HIV实验室检测HIVHIV简介简介HIV抗体检测程序样品样品初筛初筛阳性阳性阴性阴性复检复检一阴一阳一阴一阳均阳均阳均阴均阴送检做确证试验送检做确证试验报告报告HIV-1抗体阴性抗体阴性原有试剂原有试剂+另一不同原理（或厂家）试剂另一不同原理（或厂家）试剂或另两种不同原理（或厂家）试剂或另两种不同原理（或厂家）

5、试剂两次复检两次复检抗体检测试剂（三代试剂）抗体检测试剂（三代试剂）HIV抗体检测程序样品样品初筛初筛阳性阳性阴性阴性复检复检一阴一阳一阴一阳均阳均阳均阴均阴送检做确证送检做确证报告报告HIV-1抗体阴抗体阴性、性、P24抗原阴性抗原阴性两种不同原理（或厂家）抗体两种不同原理（或厂家）抗体检测（三代试剂）试剂复查检测（三代试剂）试剂复查抗原抗体联合检测（四代试剂）抗原抗体联合检测（四代试剂）本单位加做本单位加做HIV-1 P24抗原、抗原、核酸检测试验及随访核酸检测试验及随访HIVHIV抗体检测程序抗体检测程序原始记录原始记录样品的采集、运送样品的采集、运送HIV实验室检测HIVHIV简介简介

6、原始记录原始记录 原始记录表原始记录表 测定方法、原理，试剂厂家，试剂批号，试剂测定方法、原理，试剂厂家，试剂批号，试剂效期，检测人员姓名，复合人员姓名，检测日效期，检测人员姓名，复合人员姓名，检测日期期 西安市疾病预防控中心快检试验西安市疾病预防控中心快检试验 原始记录原始记录 检测项目：检测项目：试验日期：试验日期：实验室温度、湿度：实验室温度、湿度：%RH 试试验依据：验依据：原始记录原始记录HIVHIV抗体检测程序抗体检测程序HIV实验室检测HIVHIV简介简介样品的样品的采集、采集、运送运送样品的采集样品的采集 样品的要求样品的要求 避免溶血避免溶血 避免细菌污染避免细菌污染 避免抗

7、凝不完全避免抗凝不完全 血清血清4 4度保存，度保存，5 5天内完成检测。天内完成检测。样品的运送样品的运送 HIV抗体筛查阳性标本的运送抗体筛查阳性标本的运送 血清、血浆样品运送前血清、血浆样品运送前56305630分钟分钟灭活。灭活。两份血两份血 单位、姓名、日期单位、姓名、日期 采血管与复检单分开放采血管与复检单分开放 检验人员自己送样检验人员自己送样 专车专车 样品的运送样品的运送第一层容器第一层容器上应有明显的标记，标明样装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分

8、开放置。要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。第二层容器第二层容器第三层容器第三层容器包装要求：包装要求：应采用应采用WHOWHO提出的三级包装系统提出的三级包装系统样品的运送 样品的运送 带螺帽、垫圈的血清冻存管带螺帽、垫圈的血清冻存管。样品的运送 禁止使用禁止使用EPEP管管样品的运送 禁止使用内旋盖冻存管禁止使用内旋盖冻存管样品的运送 在冻存管外套一在冻存管外套一50mL50mL离心管或其他带盖容器离心管或其他带盖容器样品的运送 置于带冰袋的保温容器中置于带冰袋的保温容器中样品的运送样品的运送 HIV抗体阳性复检单的填写抗体阳性复检单的填写 HIV抗体复检检测单实验部分不得有空项抗体复检检测单实验部分不得有空项，必，必须按规范要求认真完成初筛、复检（第一次）、须按规范要求认真完成初筛、复检（第一次）、复检（第二次）三次实验。复检（第二次）三次实验。如果使用如果使用ELISAELISA的方法进行检测，请在检测结的方法进行检测，请在检测结果空白处填写送检样品的果空白处填写送检样品的S/COS/CO值，否则不受理值，否则不受理样品。样品。携手共同抵抗艾滋！携手共同抵抗艾滋！