细菌学检验-22-真菌感染的实验室诊断课件.ppt
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- 细菌学 检验 22 真菌 感染 实验室 诊断 课件
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1、总目录下页退出第十八章第十八章 真菌感染的实验室诊断真菌感染的实验室诊断总目录上页退出下页返回退出真菌概述真菌概述u定义定义真菌(fungus)是一类具有细胞壁和典型细胞核,不含叶绿素,不分根、茎、叶的真核细胞型微生物。总目录上页退出下页返回退出真菌概述真菌概述u特点特点1.细胞核高级分化,有核膜核仁,胞质内有完整细胞器,能进行有丝分裂。2.细胞壁由几丁质或纤维素组成,无肽聚糖。3.少数为单细胞,大部分为多细胞并有发达的菌丝体。4.不含叶绿素,不分根、茎、叶。以腐生或寄生的方式摄取养料。5.以无性和有性方式进行繁殖。6.种类繁多,数目大,分布极广。总目录上页退出下页返回退出原核细胞型微生物与真
2、核细胞型微生物比较 原核细胞型微生物 真核细胞型微生物 细胞核结构核膜无 有核仁无 有分裂方式 主要以二分裂 有丝分裂,减数分裂细胞质结构质膜 常缺乏固醇常有固醇 内膜 较简单,有中介体复杂,有内质网和高尔基体核糖体 70S 80S 呼吸系统 质膜或中介体线粒体 细胞壁组成 肽聚糖 几丁质或纤维素总目录上页退出下页返回退出第一节第一节 分类与命名分类与命名一、生物学分类与医学有关的真菌为真菌界真菌门中的四个亚门:接合亚门(Zygomycotina):毛霉目 子囊菌亚门(Ascomycotina):酵母属 担子菌亚门(Basidiomycotina):新生线状黑粉菌 半知菌亚门(Deutermy
3、cotina):多数致病性真菌 假丝酵母菌属(假丝酵母菌属(Candida)隐球菌属(隐球菌属(Cryptococcus)表皮癣菌属(表皮癣菌属(Epidermophton)球孢子菌属(球孢子菌属(Coccidioides)组织胞浆菌属(组织胞浆菌属(Histoplastoma)总目录上页退出下页返回退出二、临床分类 (按致病部位)(按致病部位)浅部感染真菌:浅部感染真菌:侵犯皮肤、毛发、指甲,为慢性,对治疗有顽固侵犯皮肤、毛发、指甲,为慢性,对治疗有顽固性,但影响身体较小。性,但影响身体较小。深部感染真菌:深部感染真菌:可侵犯全身内脏,严重的可引起死亡。可侵犯全身内脏,严重的可引起死亡。三、
4、三、形态学分类 单细胞真菌单细胞真菌 多细胞真菌多细胞真菌 四、命名四、命名 同细菌,采用国际植物命名法规同细菌,采用国际植物命名法规总目录上页退出下页返回退出第二节生物学性状第二节生物学性状u多数对人有益,仅少数导致人类疾病。医学(病原)真菌400种,常见的有50100种。u目前大多数真菌的鉴定,形态学(包括真 菌形态、菌落形态)检查仍有重要意义。总目录上页退出下页返回退出真菌大小不一,比细菌大几倍至几十倍,光镜可见,形态多样,按形态结构可分为:2单细胞真菌:呈圆形或椭圆形酵母菌酵母菌:孢子,无菌丝孢子,无菌丝。由母细胞。由母细胞芽生芽生方式繁殖,方式繁殖,芽体脱离母细胞,成为子细胞(新的繁
5、殖体),其菌落芽体脱离母细胞,成为子细胞(新的繁殖体),其菌落与与细菌菌落相似细菌菌落相似。类酵母菌类酵母菌:芽生孢子,假菌丝。芽生孢子,假菌丝。芽生方式繁殖,芽生方式繁殖,芽体不脱离母细胞并延长伸进培养基中芽体不脱离母细胞并延长伸进培养基中假菌丝假菌丝,菌落,菌落与前者相似,但在培养基内可见假菌丝体。与前者相似,但在培养基内可见假菌丝体。一、真菌形态特征总目录上页退出下页返回退出总目录上页退出下页返回退出类酵母菌类酵母菌白假丝酵母菌白假丝酵母菌孢子孢子假菌丝假菌丝总目录上页退出下页返回退出n多细胞真菌(丝状菌、霉菌(丝状菌、霉菌):由菌丝和孢子组成,交织成团,菌落疏松呈丝状。孢子孢子菌丝菌丝
6、(hypha):成熟孢子在适宜条件下长出芽管,逐渐延长呈丝状生出嫩芽生出嫩芽芽管芽管延长成丝状延长成丝状菌丝菌丝不断生长分支、交织不断生长分支、交织菌丝体菌丝体菌丝为管状结构,内充满细胞浆菌丝为管状结构,内充满细胞浆适宜温适宜温/湿度湿度总目录上页退出下页返回退出菌丝菌丝分类单纯菌丝球拍状菌丝梳状菌丝结节状菌丝鹿角状菌丝螺旋状菌丝按功能按功能营养菌丝:深入培养基营养菌丝:深入培养基气中菌丝气中菌丝/生殖菌丝:生殖菌丝:按结构按结构隔膜有无隔膜有无无隔菌丝无隔菌丝有隔菌丝(大多数病原性真菌)有隔菌丝(大多数病原性真菌)按形态按形态总目录上页退出下页返回退出真菌的菌丝真菌的菌丝 总目录上页退出下页
7、返回退出总目录上页退出下页返回退出总目录上页退出下页返回退出真菌菌丝形态真菌菌丝形态总目录上页退出下页返回退出总目录上页退出下页返回退出u孢子(spore)是真菌的生殖结构,通过产生孢子进行繁殖,孢子由特化的菌丝生殖菌丝产生。孢子也是其鉴定和分离的依据。分类:孢子孢子无性孢子:无性孢子:菌丝上细胞分化生成,不发生细菌丝上细胞分化生成,不发生细胞融合。胞融合。有性孢子:有性孢子:同一同一/不同菌体上两细胞融合减不同菌体上两细胞融合减数分裂而成。数分裂而成。大多真菌行有性大多真菌行有性/无性生殖,病原性真菌多以无性生殖为主。无性生殖,病原性真菌多以无性生殖为主。总目录上页退出下页返回退出真菌的形态
8、构成真菌的形态构成菌菌 丝丝营养菌丝营养菌丝气生菌丝气生菌丝 生殖菌丝生殖菌丝孢孢 子子有性有性孢子孢子由同一菌体或不同菌体上的二个细胞融合由同一菌体或不同菌体上的二个细胞融合形成形成 绝大多数属于非致病绝大多数属于非致病性真菌所具有性真菌所具有 无无 性性 孢孢 子子分生分生孢子孢子分生孢子梗的分生孢子梗的顶端或侧面顶端或侧面大分生孢子大分生孢子小孢子菌属、小孢子菌属、表皮癣菌属表皮癣菌属小分生孢子小分生孢子毛癣菌属毛癣菌属叶状叶状孢子孢子菌丝细胞直接菌丝细胞直接形成形成芽生孢子芽生孢子 隐球菌、念珠菌隐球菌、念珠菌 关节孢子关节孢子 厚膜孢子厚膜孢子 新型隐球菌新型隐球菌孢子囊孢子囊孢子孢
9、子菌丝末端形成膨大的囊状结构即菌丝末端形成膨大的囊状结构即孢子囊,内含很多孢子孢子囊,内含很多孢子 根霉菌根霉菌 总目录上页退出下页返回退出真菌的有性孢子(根霉菌的接合孢子)总目录上页退出下页返回退出真真 菌菌 无无 性性 孢孢 子子 形形 态态芽生孢子芽生孢子厚膜孢子厚膜孢子关节孢子关节孢子小分生孢子小分生孢子大分生孢子大分生孢子1叶状孢子2分生孢子总目录上页退出下页返回退出总目录上页退出下页返回退出芽生孢子芽生孢子总目录上页退出下页返回退出芽生孢子芽生孢子总目录上页退出下页返回退出假丝酵母菌厚膜孢子假丝酵母菌厚膜孢子总目录上页退出下页返回退出关节孢子关节孢子总目录上页退出下页返回退出3、孢
10、子囊孢子总目录上页退出下页返回退出孢子囊孢子总目录上页退出下页返回退出生殖菌丝末端细胞分裂或收缩形成;也可从菌丝侧面出芽形成大分生孢子的形态大分生孢子的形态总目录上页退出下页返回退出总目录上页退出下页返回退出分生孢子梗总目录上页退出下页返回退出真菌孢子和细菌芽胞的区别真菌孢子和细菌芽胞的区别真菌孢子真菌孢子细菌芽胞细菌芽胞抵抗力抵抗力不强,不强,60-70短时间短时间杀死杀死强,煮沸短时间不死强,煮沸短时间不死数目数目一条菌丝可产生多个一条菌丝可产生多个孢子孢子一个细菌体只形成一一个细菌体只形成一个芽孢个芽孢作用作用为繁殖方式之一为繁殖方式之一不是繁殖方式不是繁殖方式形成位置形成位置可在细胞内
11、外形成可在细胞内外形成只在细菌细胞内形成只在细菌细胞内形成形状形状形态、色泽多样形态、色泽多样圆形或椭圆形圆形或椭圆形总目录上页退出下页返回退出u二相型真菌:许多病原性真菌因生活的环境如营许多病原性真菌因生活的环境如营养、温度氧气等的改变,养、温度氧气等的改变,孢子与菌丝两种形态可孢子与菌丝两种形态可以互变以互变,这类真菌称为,这类真菌称为二相性真菌二相性真菌。机体内寄生机体内寄生37单细胞型:单细胞型:多细胞型:多细胞型:含含动物蛋白动物蛋白培养基培养基酵母菌酵母菌沙保氏培养基沙保氏培养基2525普通培养基普通培养基2525丝状菌丝状菌总目录上页退出下页返回退出二相性真菌二相性真菌 总目录上
12、页退出下页返回退出二、真菌的培养特性营养要求不高,常用营养要求不高,常用沙保氏沙保氏(Sabouraud)培养基培养基基本成分:基本成分:葡萄糖、蛋白胨、琼脂;葡萄糖、蛋白胨、琼脂;pH4.06.0 生长条件:生长条件:较高的湿度、较高的湿度、O2浅部真菌浅部真菌:2228,生长缓慢,大多于,生长缓慢,大多于12 周出现典周出现典型菌落。型菌落。深部感染真菌深部感染真菌:37长的最好,生长较快,长的最好,生长较快,34 天即长天即长出菌落。出菌落。培养时间:培养时间:病原性真菌多为病原性真菌多为1-4W。加抗生素(氯加抗生素(氯霉素)抑菌。霉素)抑菌。总目录上页退出下页返回退出(1)酵母型酵母
13、型/类酵母型类酵母型(单细胞真菌菌落形式)(单细胞真菌菌落形式)A、湿润、柔软而致密,形态似一般细菌菌落、湿润、柔软而致密,形态似一般细菌菌落B、镜下:酵母型镜下:酵母型 类酵母型类酵母型卵圆孢子、芽生孢子卵圆孢子、芽生孢子芽生孢子、假菌丝芽生孢子、假菌丝总目录上页退出下页返回退出酵母型酵母型菌落菌落总目录上页退出下页返回退出白假丝酵母菌菌落白假丝酵母菌菌落(类酵母型类酵母型)总目录上页退出下页返回退出(2)丝状菌落丝状菌落(多细胞真菌菌落形式)(多细胞真菌菌落形式)A、棉絮状、绒毛状、粉末状棉絮状、绒毛状、粉末状(气生菌丝体)(气生菌丝体)菌落正背面呈不同颜色(可为鉴定依据)菌落正背面呈不同
14、颜色(可为鉴定依据)B、玻片小培养玻片小培养乳酚棉蓝乳酚棉蓝镜下镜下孢子、菌丝及完整菌丝体孢子、菌丝及完整菌丝体总目录上页退出下页返回退出 曲霉菌曲霉菌总目录上页退出下页返回退出石膏样癣菌总目录上页退出下页返回退出青霉菌青霉菌总目录上页退出下页返回退出三、变异性和抵抗力u真菌易变异:经多次传代或培养时间过久,其形态、结构、菌落性状、色素及毒力等都可以发生改变。用不同的培养基和不同温度培养,其性状也可不同。u抵抗力 真菌真菌对干燥、阳光、紫外线及一般化学消毒剂抵抗力较强对干燥、阳光、紫外线及一般化学消毒剂抵抗力较强;对热敏感,一般对热敏感,一般60 70 1小时可杀死真菌菌丝和孢子小时可杀死真菌
15、菌丝和孢子。对对2.5%碘酒,碘酒,10%福尔马林都敏感,一般可用福尔马林薰蒸被真菌感福尔马林都敏感,一般可用福尔马林薰蒸被真菌感染的房间。染的房间。对抗细菌的抗生素不敏感对抗细菌的抗生素不敏感;灰黄霉素、制霉菌素、二性霉素;灰黄霉素、制霉菌素、二性霉素 克霉唑等克霉唑等对其有抑制作用。对其有抑制作用。总目录上页退出下页返回退出四、致病性与免疫性四、致病性与免疫性u对人致病的真菌分为四类:病原性真菌:浅部真菌、深部真菌病原性真菌:浅部真菌、深部真菌 条件致病性真菌条件致病性真菌 产毒真菌产毒真菌 致癌真菌致癌真菌u所致疾病:真菌性感染真菌性感染 真菌性超敏反应真菌性超敏反应 真菌毒素中毒真菌毒
16、素中毒 总目录上页退出下页返回退出u真菌性感染:引起真菌病(mycoses),由真菌引起的感染。1.原发性感染:球孢子菌(Coccidiodes)皮炎芽生菌(Blastomyoes dermatitidis)组织胞浆菌(Histoplasma)等2.继发性感染:机体免疫功能显著下降时发生。总目录上页退出下页返回退出u目前真菌症呈明显上升趋势的原因目前真菌症呈明显上升趋势的原因:1.抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等的滥用抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等的滥用 2.器官移植、介入性治疗等新技术的开展器官移植、介入性治疗等新技术的开展 3.艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等疾病造成宿主免艾滋病、糖尿病、恶性
17、肿瘤等疾病造成宿主免疫低下疫低下总目录上页退出下页返回退出真菌性超敏反应总目录上页退出下页返回退出总目录上页退出下页返回退出 免疫性由于皮肤癣真菌与腐生性真菌间有共同抗原,因此由于皮肤癣真菌与腐生性真菌间有共同抗原,因此一般不做血清学检查一般不做血清学检查Ab辅助诊断此类真菌感染。辅助诊断此类真菌感染。总目录上页退出下页返回退出真菌的常规检验法实验室检查:标本采集 分离培养 直接镜检 生化反应 染色镜检 免疫学试验以直接镜检和分离培养最重要。总目录上页退出下页返回退出第三节真菌感染的病原学诊断一、一、临床标本的采集种类(1)皮肤的角质性物质皮肤的角质性物质:毛发、指(趾):毛发、指(趾)甲、皮
18、屑等。甲、皮屑等。(2)各种分泌物和排泄物各种分泌物和排泄物:生殖道分泌物、:生殖道分泌物、耳垢、痰、粪便、尿液等。耳垢、痰、粪便、尿液等。(3)血液和体液血液和体液:体液包括胸水、腹水、脑:体液包括胸水、腹水、脑 脊液、淋巴穿刺液等。脊液、淋巴穿刺液等。(4)脓汁及渗出物脓汁及渗出物。总目录上页退出下页返回退出采集标本注意事项(1)采集的标本要适宜采集的标本要适宜 不同真菌感染应采取不同不同真菌感染应采取不同的临床标的临床标 本。怀疑为浅部真菌感染如体癣,应刮本。怀疑为浅部真菌感染如体癣,应刮取病变边缘的痂、皮屑,发癣应取折断了的病发。取病变边缘的痂、皮屑,发癣应取折断了的病发。怀疑为深部真
19、菌感染应取血液、脑脊液、痰、脓怀疑为深部真菌感染应取血液、脑脊液、痰、脓汁等。汁等。(2)在用药前采集标本在用药前采集标本一般真菌标本须在用药一般真菌标本须在用药前采集,对已用药者则需停药一段时间后再采集前采集,对已用药者则需停药一段时间后再采集标本。标本。总目录上页退出下页返回退出采集标本注意事项(3)采集的标本量要足采集的标本量要足 血液和脑脊液标本血液和脑脊液标本5ml,胸腔液胸腔液20ml,皮屑标本两块,活体组织两份(一,皮屑标本两块,活体组织两份(一份送病理科检查,一份作镜检和培养)。份送病理科检查,一份作镜检和培养)。(4)严格无菌操作严格无菌操作在采集标本时严格无菌操作,在采集标
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