第七章-弧菌属与螺杆菌属课件.ppt

1、沈阳医学院沈阳医学院 刘刘 新新第八章弧菌属与螺杆菌属重点难点重点难点重点重点 霍乱肠毒素作用机制霍乱肠毒素作用机制难点难点 霍乱肠毒素作用机制霍乱肠毒素作用机制第一节第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌目录目录一、生物学性状一、生物学性状二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性三、微生物学检查原则三、微生物学检查原则四、防治原则四、防治原则五、特殊护理措施五、特殊护理措施概述概述 我国将霍乱定为甲类法定传染病我国将霍乱定为甲类法定传染病。霍乱弧菌霍乱弧菌（Vibrio cholerae）引起烈性传染病霍乱，全引起烈性传染病霍乱，全球曾多次发生过大流行球曾多次发生过大流行：津巴布韦霍乱津巴布韦霍乱（2008）

2、海地霍乱海地霍乱（2010）:感染者超过感染者超过50万，近万，近7000人死人死亡亡形态形态 弧形或逗点状，革兰染色阴性弧形或逗点状，革兰染色阴性 单鞭毛，运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状单鞭毛，运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状一、生物学性状一、生物学性状培养培养 耐碱不耐酸，在耐碱不耐酸，在pH 8.09.0的碱性环境中生长迅速，的碱性环境中生长迅速，常用常用pH8.4的碱性蛋白胨作为选择培养基。的碱性蛋白胨作为选择培养基。在碱性琼脂平板上培养在碱性琼脂平板上培养24小时后，形成圆形、无色、小时后，形成圆形、无色、透明或半透明透明或半透明S型菌落。型菌落。生化反应生化反应 霍乱弧菌能发

3、酵葡萄糖、甘露醇及蔗糖，产酸不产气霍乱弧菌能发酵葡萄糖、甘露醇及蔗糖，产酸不产气 不发酵阿拉伯胶糖不发酵阿拉伯胶糖 能还原硝酸盐为亚硝酸盐能还原硝酸盐为亚硝酸盐 吲哚试验阳性吲哚试验阳性 氧化酶试验氧化酶试验阳性阳性 硝酸盐还原反应硝酸盐还原反应（1）原理：霍乱弧菌能使硝酸盐还原为亚硝酸盐，当加）原理：霍乱弧菌能使硝酸盐还原为亚硝酸盐，当加入硫酸后生成亚硝酸吲哚，呈红色反应。入硫酸后生成亚硝酸吲哚，呈红色反应。（2）方法：将待检菌接种于蛋白胨水中，置）方法：将待检菌接种于蛋白胨水中，置35孵育孵育24h，加入浓硫酸数滴，观察。，加入浓硫酸数滴，观察。（3）结果：呈红色者为阳性。）结果：呈红色者

4、为阳性。根据根据O抗原不同抗原不同抗原构造与分型抗原构造与分型 现已有现已有155个血清群个血清群 其中其中O1群、群、O139群引起霍乱群引起霍乱 根据表型差异根据表型差异O1群霍乱弧菌可分为两个生物型群霍乱弧菌可分为两个生物型古典生物型古典生物型El Tor生物型生物型抵抗力抵抗力 El Tor生物型和其他非生物型和其他非O1群霍乱弧菌在外环境中的生群霍乱弧菌在外环境中的生存力较古典型为强存力较古典型为强 本菌不耐酸，不耐热本菌不耐酸，不耐热 鞭毛运动：有助于细菌穿过肠黏膜表面黏液层而接近鞭毛运动：有助于细菌穿过肠黏膜表面黏液层而接近肠壁上皮细胞。肠壁上皮细胞。普通菌毛：是细菌定居于小肠所

5、必须的因子。普通菌毛：是细菌定居于小肠所必须的因子。1.鞭毛、菌毛鞭毛、菌毛致病物质致病物质二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性2.霍乱肠毒素（霍乱肠毒素（choleratoxin）:活性亚单位活性亚单位 B亚单位（亚单位（ctxB）A亚单位（亚单位（ctxA）与受体介导与受体介导A亚亚单位进入细胞单位进入细胞1A+5B B亚单位与小肠黏膜上皮细胞亚单位与小肠黏膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结神经节苷脂受体结合，介导合，介导A亚单位进入细胞。亚单位进入细胞。霍乱肠毒素作用机制霍乱肠毒素作用机制 A亚单位裂解为亚单位裂解为A1和和A2两条多肽，两条多肽，A1亚单位发挥毒性亚单位发挥毒性作用。作用

6、。G蛋白蛋白 Gs 活化腺苷酸环化酶活化腺苷酸环化酶ATP cAMPA1 胞内胞内cAMP，导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进，分泌，导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进，分泌Na+、K+、HCO3-和水，大量水和电解质在肠腔堆积，和水，大量水和电解质在肠腔堆积，引起剧烈腹泻与呕吐。引起剧烈腹泻与呕吐。所致疾病所致疾病霍乱霍乱 传染源：病人及无症状感染者传染源：病人及无症状感染者 传播途径传播途径：主要是通过污染的水源或食物经口摄入：主要是通过污染的水源或食物经口摄入二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 临床表现临床表现 上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）大

7、量水分和电解质丧失大量水分和电解质丧失 低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达60%）O139型更严重型更严重 感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力免疫性免疫性标本标本直接镜检直接镜检分离培养分离培养涂片见涂片见G-性弧菌，鱼群状排列性弧菌，鱼群状排列悬滴法观察细菌呈穿梭样运动悬滴法观察细菌呈穿梭样运动 碱性蛋白胨水增菌碱性蛋白胨水增菌 选择培养基为选择培养基为TCBS 玻片凝集反应玻片凝集反应 病人粪便，肛拭（流行病学调查包括水样）病人粪便，肛拭（流行病学调查包括水样）三、微生物学检查三、微生物学检查 严密隔离、观察病情、及时发现

8、并纠正休克。严密隔离、观察病情、及时发现并纠正休克。最可靠、有效的预防措施是改善卫生条件，特别是供最可靠、有效的预防措施是改善卫生条件，特别是供水卫生。水卫生。应用应用O1群霍乱弧菌死疫苗皮下注射为主要特异性预防群霍乱弧菌死疫苗皮下注射为主要特异性预防措施，但保护力不强措施，但保护力不强（50%左右左右），且持续时间短，且持续时间短。治疗应选择使用四环素或环丙沙星抗菌药物治疗应选择使用四环素或环丙沙星抗菌药物。补液，预防失水导致的休克和酸中毒是关键。补液，预防失水导致的休克和酸中毒是关键。四、防治原则四、防治原则 患者需按消化道传染病严密隔离，严格遵守消毒隔离患者需按消化道传染病严密隔离，严格

9、遵守消毒隔离制度，消毒患者用物及排泄物，以防交叉感染。制度，消毒患者用物及排泄物，以防交叉感染。重症患者要绝对卧床，针对剧烈泻吐应暂停饮食，呕重症患者要绝对卧床，针对剧烈泻吐应暂停饮食，呕吐停止及腹泻缓解可行流质饮食。吐停止及腹泻缓解可行流质饮食。补液为霍乱的基础治疗，补液原则：早期、迅速、适补液为霍乱的基础治疗，补液原则：早期、迅速、适量，先盐后糖，先快后慢。量，先盐后糖，先快后慢。注意纠正酸中毒、补钙，必要时补钾。注意纠正酸中毒、补钙，必要时补钾。五、霍乱特殊护理措施五、霍乱特殊护理措施第二节第二节副溶血弧菌副溶血弧菌概述概述 副溶血性弧菌副溶血性弧菌（Vparahemolyticus）沿

10、海地区流行沿海地区流行 根据菌体根据菌体O抗原不同，现已有抗原不同，现已有13个血清群个血清群 主要引起食物中毒主要引起食物中毒第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌 某家庭周末某家庭周末食海鲜后食海鲜后，餐后约，餐后约6小时一家三口相继出现恶小时一家三口相继出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻。腹泻次数不等，大便多为心、呕吐、腹痛、腹泻。腹泻次数不等，大便多为水便水便，白细胞数均为正常，经常规治疗白细胞数均为正常，经常规治疗3d后均恢复正常。后均恢复正常。思考题：思考题：1根据上述情况，你认为属哪种细菌性食物中毒？根据上述情况，你认为属哪种细菌性食物中毒？2引起食物中毒的细菌有哪些？主要鉴别要点是什么？引

11、起食物中毒的细菌有哪些？主要鉴别要点是什么？案例案例第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌 雷同于其他引起人类感染的弧菌雷同于其他引起人类感染的弧菌 特征：嗜盐（特征：嗜盐（halophilic），培养以含），培养以含3.5%8%NaCl为宜为宜 抵抗力：不耐热，抵抗力：不耐热，90 C1分钟即被杀死分钟即被杀死 不耐酸，不耐酸，50%食醋中食醋中1分钟死亡分钟死亡 神奈川现象（神奈川现象（Kanagawa phenomenon，KP）生物学特性生物学特性第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌 副溶血性弧菌在普通血平板上不溶血或只产生副溶血性弧菌在普通血平板上不溶血或只产生溶血溶血,在特定条件下，某些

12、菌株在含高盐（在特定条件下，某些菌株在含高盐（70g/L）的人）的人O型型血或兔血及以血或兔血及以D-甘露醇作为碳源的甘露醇作为碳源的wagatsuma琼脂平琼脂平板上可产生板上可产生溶血。溶血。来自患者的菌株中来自患者的菌株中96.5%为为KP+，而来自海产品及海水，而来自海产品及海水的菌株仅的菌株仅1为为KP+阳性。阳性。神奈川现象（神奈川现象（Kanagawa phenomenon,KP）第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌副溶血性弧菌引起的食物中毒副溶血性弧菌引起的食物中毒烹饪不当的海产品：常见的为海蜇、海鱼、海虾及各烹饪不当的海产品：常见的为海蜇、海鱼、海虾及各种贝类。种贝类。盐腌制品

13、盐腌制品p 因食物容器或砧板生熟不分污染后，发生食物中毒。因食物容器或砧板生熟不分污染后，发生食物中毒。潜伏期潜伏期572小时，可从自限性腹泻至中度霍乱样小时，可从自限性腹泻至中度霍乱样病症。病症。免疫力不强。免疫力不强。第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌 标本采集：患者粪便、肛拭或剩余食物标本采集：患者粪便、肛拭或剩余食物 分离培养：分离培养：SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板琼脂平板或嗜盐菌选择平板 嗜盐性试验与生化反应嗜盐性试验与生化反应 诊断血清进行鉴定诊断血清进行鉴定诊断诊断-+-+-+-0 0 NaclNacl胨水胨水3 3 NaclNacl胨水胨水7 7 NaclNacl胨水胨水11

14、11 NaclNacl胨胨水水葡葡乳乳麦麦甘甘蔗蔗第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌 治疗可用抗菌药物治疗可用抗菌药物 严重病例需输液和补充电解质严重病例需输液和补充电解质 防治防治第三节第三节幽门螺杆菌幽门螺杆菌幽门螺杆菌幽门螺杆菌（Helicobacter pyloriHelicobacter pylori）第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌一、生物学性状一、生物学性状 G-细长弯曲、细长弯曲、S型或海鸥展翅状，有多根鞭毛型或海鸥展翅状，有多根鞭毛 营养要求高营养要求高、一定湿度、一定湿度 细小、针尖状、半透明菌落细小、针尖状、半透明菌落第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌 不分解糖，氧化酶

15、（不分解糖，氧化酶（+）过氧化氢酶（过氧化氢酶（+）快速尿素酶（快速尿素酶（+）（表达细胞毒相关基因编码蛋白和空泡毒素）（表达细胞毒相关基因编码蛋白和空泡毒素）（不表达（不表达）第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌 1.鞭毛与鞭毛与尿素酶尿素酶 2.黏附素黏附素 3.脂多糖脂多糖 4.毒素（空泡毒素毒素（空泡毒素VacA、细胞毒素相关、细胞毒素相关CagA）二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性（一）致病物质（一）致病物质第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌（二）（二）所致疾病所致疾病（人是唯一肯定传染源）（人是唯一肯定传染源）功能性消化不良、慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃功能性消化不良、慢性胃炎、

16、消化性溃疡、胃癌、胃淋巴瘤、胃肠道外疾病。淋巴瘤、胃肠道外疾病。（三）免疫性（三）免疫性（IgA和和IgG感染或疾病的标志）感染或疾病的标志）第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌1.标本：胃镜采集组织活检标本标本：胃镜采集组织活检标本2.分离培养与鉴定：分离培养与鉴定：37，3天，微需氧，湿润天，微需氧，湿润3.快速诊断快速诊断 组织学染色、快速尿素酶试验组织学染色、快速尿素酶试验 血清学、分子生物学血清学、分子生物学 尿素呼吸试验、粪便抗原测定尿素呼吸试验、粪便抗原测定三、微生物学检查法三、微生物学检查法亚甲蓝染色：海鸥状菌体亚甲蓝染色：海鸥状菌体 无有效预防无有效预防 尚无单一药物根除尚无单一药物根除 抗酸分泌剂、铋剂、两种抗生素联合使用抗酸分泌剂、铋剂、两种抗生素联合使用第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌四、防治原则四、防治原则