血液学检验及临床应用课件.ppt

1、血液学检验及临床应用 绿洲医院检验科1阴道分泌物检查阴道分泌物检查1Major Objectives 掌握掌握阴道分泌物理学检查、病原生物学检验阴道分泌物理学检查、病原生物学检验 熟悉熟悉细菌性阴道病的发病机理和阴道分泌物检查细菌性阴道病的发病机理和阴道分泌物检查的质量控制的质量控制 了解了解生理状态下，女性阴道的组织解剖学、生理生理状态下，女性阴道的组织解剖学、生理学特点和阴道分泌物标本的采集学特点和阴道分泌物标本的采集 重点重点阴道分泌物理学和病原生物学检验阴道分泌物理学和病原生物学检验 难点难点阴道分泌物病原微生物形态学特征阴道分泌物病原微生物形态学特征上页1概概 述述为女性生殖系统分泌

2、的液体，主要由阴道粘膜渗为女性生殖系统分泌的液体，主要由阴道粘膜渗出液、宫颈腺体及子宫内膜分泌物混合而成，总出液、宫颈腺体及子宫内膜分泌物混合而成，总称阴道分泌物，又称称阴道分泌物，又称“白带白带”(1eukorrhea)。阴道分泌物阴道分泌物(vaginal discharge)上页1 不同时期女性阴道的结构和功能特点：不同时期女性阴道的结构和功能特点：1 1、阴道的组织解剖学特点阴道的组织解剖学特点卵巢子宫输卵管阴道上页阴道上皮层固有层1青春期：青春期：雌激素雌激素上皮增厚，层次上皮增厚，层次2、生物化学作用、生物化学作用 表层中层底层 绝经期：绝经期：雌激素缺乏雌激素缺乏上皮变薄上皮变薄

3、上页1 表层细胞角化的阴道鳞状上皮表层细胞角化的阴道鳞状上皮（10100）上页1 中层阴道鳞状上皮细胞中层阴道鳞状上皮细胞（1040）返回上页1第一节第一节 标本采集与处理标本采集与处理-采集前采集前24h禁止性交、盆浴、阴道灌洗及局部用禁止性交、盆浴、阴道灌洗及局部用药等药等-采样所用器具必须清洁干燥、无菌、无化学药品采样所用器具必须清洁干燥、无菌、无化学药品或润滑剂或润滑剂-应根据不同的检查目的来选择应根据不同的检查目的来选择采集采集部位部位-应根据不同检测方法进行应根据不同检测方法进行阴道分泌物阴道分泌物涂片的制备涂片的制备-采集后立即送检采集后立即送检阴道分泌物采集要求：阴道分泌物采集

4、要求：返回上页1标本采集及处理标本采集及处理阴道分泌湿片显微镜检查阴道分泌湿片显微镜检查【标本采集【标本采集】1.插入窥器，暴露阴道和宫颈后，观察分泌物插入窥器，暴露阴道和宫颈后，观察分泌物的色泽，用灭菌试子从阴道上的色泽，用灭菌试子从阴道上1/3处取分泌物。处取分泌物。【方法与结果【方法与结果】在载培片上加在载培片上加1滴或滴或2滴生理盐水，将阴道分滴生理盐水，将阴道分泌物与生理盐水混合成悬液，加盖玻片后，在泌物与生理盐水混合成悬液，加盖玻片后，在显微镜下检查。显微镜下检查。将阴道分泌物加生理盐水作涂片，用高倍镜检将阴道分泌物加生理盐水作涂片，用高倍镜检查，主要依靠上皮细胞、杆菌与球菌的比例

5、、查，主要依靠上皮细胞、杆菌与球菌的比例、白细胞的数量划分清洁度。白细胞的数量划分清洁度。1标本采集及处理标本采集及处理 在低倍镜（在低倍镜（1010）下检查，寻找呈典型晃动运）下检查，寻找呈典型晃动运动的毛滴虫。动的毛滴虫。在高倍镜（在高倍镜（1040）下检查，观察假丝酵母菌）下检查，观察假丝酵母菌（孢子和假菌丝）和毛滴虫，以及线索细胞。线（孢子和假菌丝）和毛滴虫，以及线索细胞。线索细胞为阴道上皮细胞表面吸附或聚集着许多球索细胞为阴道上皮细胞表面吸附或聚集着许多球杆菌，是细胞呈颗粒状外观，细胞边缘模糊不清杆菌，是细胞呈颗粒状外观，细胞边缘模糊不清呈锯齿状。呈锯齿状。注：将标本溶于一滴生理盐水

6、，并加入一滴注：将标本溶于一滴生理盐水，并加入一滴10%KOH溶液，更容易识别假丝酵母菌，因为溶液，更容易识别假丝酵母菌，因为KOH能将其他细胞溶解。能将其他细胞溶解。1标本采集及处理标本采集及处理【临床意义【临床意义】阴道分泌物清洁度分级的临床意义阴道分泌物清洁度分级的临床意义 湿片检查见到活动滴虫，可诊断滴虫性阴湿片检查见到活动滴虫，可诊断滴虫性阴道炎，但其敏感性仅道炎，但其敏感性仅38%-82%，尤其是对，尤其是对无症状的滴虫感染者诊断率较低。无症状的滴虫感染者诊断率较低。湿片中观察到假丝菌或芽生孢子支持假丝湿片中观察到假丝菌或芽生孢子支持假丝菌性阴道病的诊断，菌性阴道病的诊断，10%K

7、OH湿片检查的湿片检查的敏感性敏感性85%。1标本采集及处理标本采集及处理一般认为当线索细胞占全部上皮细胞的一般认为当线索细胞占全部上皮细胞的20%-96%以上时为线索细胞阳性。根据以上时为线索细胞阳性。根据线索细胞能准确诊断线索细胞能准确诊断85%至至95%的细菌性的细菌性阴道病。阴道病。卵巢功能不足、雌激素减低、阴道上皮增卵巢功能不足、雌激素减低、阴道上皮增生较差时可见到阴道杆菌减少，易感染。生较差时可见到阴道杆菌减少，易感染。当清洁度为当清洁度为-度时常可同时发现病原度时常可同时发现病原微生物微生物,提示存在感染引起的阴道炎和提示存在感染引起的阴道炎和/或或宫颈炎宫颈炎/盆腔炎。盆腔炎。

8、1标本采集及处理标本采集及处理【判断结果【判断结果】在油镜下（在油镜下（fOX100）下检查涂片、观察阴道菌群）下检查涂片、观察阴道菌群的情况及有无线索细胞。正常阴道菌群以乳酸杆的情况及有无线索细胞。正常阴道菌群以乳酸杆菌占优势，可能有少量的球菌和棒状杆菌。乳酸菌占优势，可能有少量的球菌和棒状杆菌。乳酸杆菌为大的革兰阳性杆菌，末端钝圆或平齐，呈杆菌为大的革兰阳性杆菌，末端钝圆或平齐，呈单根、链状或栅栏状排列。细菌性阴道炎是乳酸单根、链状或栅栏状排列。细菌性阴道炎是乳酸杆菌减少或消失，而其它细菌增多，呈混合菌群。杆菌减少或消失，而其它细菌增多，呈混合菌群。阴道加德纳菌为革兰染色不定性球杆菌，厌氧

9、菌阴道加德纳菌为革兰染色不定性球杆菌，厌氧菌包括动弯杆菌、普氏杆菌或阳性球菌。包括动弯杆菌、普氏杆菌或阳性球菌。1标本采集及处理标本采集及处理 2、阴道分泌物涂片革兰染色显微镜检查、阴道分泌物涂片革兰染色显微镜检查【标本采集【标本采集】插入窥器，暴露阴道和宫颈后，观察分泌插入窥器，暴露阴道和宫颈后，观察分泌物的外观，用棉拭子从阴道壁上物的外观，用棉拭子从阴道壁上1/3处取分处取分泌物。阴道分泌物标本采集前泌物。阴道分泌物标本采集前24小时（最小时（最好好72小时）内禁止性交、盆浴、阴道灌洗小时）内禁止性交、盆浴、阴道灌洗及局部用药等，以免影响检查结果。分泌及局部用药等，以免影响检查结果。分泌物

10、经固定于革兰染色后，置于显微镜下观物经固定于革兰染色后，置于显微镜下观察。察。1标本采集及处理标本采集及处理【临床意义【临床意义】革兰染色镜检观察细菌的染色性、形态和革兰染色镜检观察细菌的染色性、形态和排列，观察假丝酵母菌孢子和假菌丝。革排列，观察假丝酵母菌孢子和假菌丝。革兰染色镜检观察阴道分泌物中线索细胞的兰染色镜检观察阴道分泌物中线索细胞的敏感性和特异性高于湿片法，分别为敏感性和特异性高于湿片法，分别为89%和和93%。1标本采集及处理标本采集及处理3.宫颈分泌物涂片革兰染色显微镜检查宫颈分泌物涂片革兰染色显微镜检查【标本采集【标本采集】插入窥器，暴露阴道和宫颈后，如果宫插入窥器，暴露阴道

11、和宫颈后，如果宫颈口外面的分泌物较多，先用灭菌拭子颈口外面的分泌物较多，先用灭菌拭子清楚过多的分泌物。将女用取材拭子插清楚过多的分泌物。将女用取材拭子插入宫颈管内入宫颈管内1-2cm，稍用力转动，停留，稍用力转动，停留10-30秒后取出。分泌物经固定于革兰染秒后取出。分泌物经固定于革兰染色后，置于显微镜下观察。色后，置于显微镜下观察。1标本采集及处理标本采集及处理【临床意义【临床意义】宫颈分泌物涂片革兰染色镜检多形核白细宫颈分泌物涂片革兰染色镜检多形核白细胞数胞数I15/HPF，或油镜下可见每视野多形，或油镜下可见每视野多形核白细胞核白细胞10个提示有宫颈感染，为诊断个提示有宫颈感染，为诊断粘

12、液脓性宫颈炎的指标之一。粘液脓性宫颈炎的指标之一。革兰染色诊断宫颈淋病奈瑟球菌感染于培革兰染色诊断宫颈淋病奈瑟球菌感染于培养的符合率养的符合率50%-70%，确诊需做淋病奈瑟，确诊需做淋病奈瑟菌培养。菌培养。1标本采集及处理标本采集及处理 检查方法检查方法 取材部位及法取材部位及法 检查目的检查目的阴道分泌物湿片显微镜阴道分泌物湿片显微镜检查检查 阴道上阴道上1/3处处检查有无滴虫、假菌丝或芽检查有无滴虫、假菌丝或芽生孢子生孢子阴道分泌涂片革兰染色阴道分泌涂片革兰染色显微镜检查显微镜检查阴道侧壁上阴道侧壁上1/3处处线索细胞及清洁度线索细胞、线索细胞及清洁度线索细胞、加德纳菌、厌氧菌、假菌丝加

13、德纳菌、厌氧菌、假菌丝或芽生孢子乳杆菌等宫颈分或芽生孢子乳杆菌等宫颈分泌物涂片革兰染色显微镜检泌物涂片革兰染色显微镜检查、查、宫颈分泌物涂片革兰染宫颈分泌物涂片革兰染色显微镜检查色显微镜检查宫颈管内宫颈管内1-2cm取取分泌物，停留分泌物，停留10-30min后取出后取出中性粒细胞、淋病耐瑟菌中性粒细胞、淋病耐瑟菌1第二节第二节 阴道分泌物理学检查阴道分泌物理学检查 一、颜色与性状一、颜色与性状 二、阴道清洁二、阴道清洁度度三、阴道分泌物三、阴道分泌物pH测定测定 上页1一、颜色与性状一、颜色与性状白色稀糊状、白色稀糊状、透明似蛋清，透明似蛋清，无气味、量少等无气味、量少等。正常阴道分泌物正常

14、阴道分泌物:上页1异常阴道分泌物异常阴道分泌物:常见于应用雌激素药物后 卵巢颗粒细胞瘤 2.脓性：泡沫状脓性 黄色、黄绿色，味臭 多见于滴虫 化脓性细菌感染常见于滴虫性阴道炎 1.大量无色透明粘性：上页1白色豆腐渣样豆腐渣样或凝乳状小碎块 4.血性 分泌物内混有多少不定的血液，有特殊臭味 真菌性阴道真菌性阴道炎的特征炎的特征 可见于宫颈息肉宫颈息肉、子宫粘膜下肌瘤子宫粘膜下肌瘤等 3.豆腐渣样 上页异常阴道分泌物异常阴道分泌物:1返回5.黄色水样 病变组织变性、坏死所致常见于子宫粘膜下肌子宫粘膜下肌瘤、宫颈癌瘤、宫颈癌等 稀薄均匀粘度很低见于细菌性阴道病细菌性阴道病（bacterial vag

15、inosis，BV）6.灰白色 奶油样 上页异常阴道分泌物异常阴道分泌物:1二、阴道清洁度二、阴道清洁度根据阴道分泌物生理盐水涂片，高倍镜根据阴道分泌物生理盐水涂片，高倍镜下观察下观察白细胞、上皮细胞、乳酸杆菌与杂菌白细胞、上皮细胞、乳酸杆菌与杂菌的多少初步判断的多少初步判断。上页1阴道分泌物清洁度分级阴道分泌物清洁度分级 清洁度清洁度 阴道杆菌阴道杆菌杂菌杂菌上皮细胞上皮细胞 白细胞白细胞临床意义临床意义度度+-满视野满视野 0-50-5正常正常度度+-12视野视野 6-156-15正常正常度度-+-16-3016-30提示有炎症提示有炎症度度-+-3030多见于严重的多见于严重的阴道炎和阴

16、道炎和/或或宫颈炎、盆腔宫颈炎、盆腔炎炎 上页1返回正常阴道分泌物正常阴道分泌物:l 阴道乳酸杆菌阴道乳酸杆菌l 上皮细胞上皮细胞l 大量白细胞大量白细胞l 细胞内革兰阴性双球菌细胞内革兰阴性双球菌 异常阴道分泌物异常阴道分泌物:上页1三、阴道分泌物pH测定一般采用一般采用pHpH试纸测定法试纸测定法正正 常：常：阴道分泌物呈酸性阴道分泌物呈酸性 pH4.5(多在多在pH 44.5之间之间)pH值增高：值增高：正常正常见于幼女和绝经期妇女见于幼女和绝经期妇女 异常异常见于各种阴道炎见于各种阴道炎 返回上页1第三节第三节 阴道分泌物病原生物学检验阴道分泌物病原生物学检验一、一、阴道毛滴虫阴道毛滴

17、虫(trichomonas vaginalis,TV)(trichomonas vaginalis,TV)二、细菌二、细菌1.1.阴道加德纳菌阴道加德纳菌(gardnerella vaginalis(gardnerella vaginalis，GV)GV)2.2.弯曲弧菌弯曲弧菌（MobilancusMobilancus）3.3.淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌（Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae）三、阴道真菌三、阴道真菌（vaginal fungusvaginal fungus）上页1阴道毛滴虫阴道毛滴虫 阴道的致病性厌氧寄生阴道的致病性厌氧寄生原虫，虫

18、体为原虫，虫体为8 845 45 mm，呈梨形或椭圆形，呈梨形或椭圆形，无色透明，大小多为无色透明，大小多为WBCWBC的的2 23 3倍倍细胞核 前鞭毛 后鞭毛 波动膜 轴 柱 上页1 阴道毛滴虫形态（生理盐水涂片阴道毛滴虫形态（生理盐水涂片）上页1 阴道毛滴虫形态（革兰染色）阴道毛滴虫形态（革兰染色）梨形梨形园形、三角形园形、三角形无色透明环无色透明环 上页1 阴道毛滴虫形态（革兰染色）阴道毛滴虫形态（革兰染色）皱缩形皱缩形异形异形上页1阴道加德纳菌阴道加德纳菌(gardnerella vaginalis，GV)为为革兰阴性革兰阴性或或染色不定染色不定（有时可呈革兰阳性）的（有时可呈革兰阳

19、性）的球杆菌，有细胞壁，无鞭毛，不形成荚膜和芽胞球杆菌，有细胞壁，无鞭毛，不形成荚膜和芽胞 兼性厌氧兼性厌氧 最适温度最适温度3537 最适最适pH6.06.5，pH4.5时不易生长时不易生长，pH4.0不生不生长长上页1革氏染色：革氏染色：大小大小：O.5m1.5m2.5m；形态：形态：具有多形性，呈具有多形性，呈小杆状小杆状或或球状球状；排列：排列：呈单个或成双排列。呈单个或成双排列。正常：正常：无此菌无此菌或或仅见少许仅见少许。细菌性阴道病：可见到大量的加德纳菌。细菌性阴道病：可见到大量的加德纳菌。上页1革兰染色阳性或阴性小杆菌革兰染色阴性球菌返回上页1弯曲弧菌弯曲弧菌(Mobilanc

20、us)(Mobilancus)为厌氧菌为厌氧菌 革兰氏阴性弧菌革兰氏阴性弧菌 形态：形态：呈弧形，两端尖细；呈弧形，两端尖细；排列：排列：呈单个或呈双排列。呈单个或呈双排列。正常：正常：无此菌无此菌或仅见少许。或仅见少许。细菌性阴道病：细菌性阴道病：除除最常见的是加德纳菌外，其次最常见的是加德纳菌外，其次是动弯杆菌是动弯杆菌。上页1革兰氏阴性弧菌革兰氏阴性弧菌上页1线索细胞线索细胞（clue cell）是诊断是诊断BV的重要指标之一的重要指标之一 定义：定义：是阴道鳞状上皮细胞的胞质表面粘附大量是阴道鳞状上皮细胞的胞质表面粘附大量GV及及Mobilancus或其他厌氧菌，其边缘不整齐，或其他厌

21、氧菌，其边缘不整齐，呈锯齿状，为线索细胞呈锯齿状，为线索细胞。上页1粘附大量加德纳菌（革兰染色）粘附大量加德纳菌（革兰染色）粘附大量弯曲弧菌（革兰染色）粘附大量弯曲弧菌（革兰染色）上页1 粘附大量细菌（美兰盐水湿片染色法）美兰盐水湿片染色法）上页1附：细菌性阴道病 阴道生态环境的改变，阴道生态环境的改变，GV和大量致病性厌氧菌增多，和大量致病性厌氧菌增多，GV可产生丙酮酸和氨基酸，脱羧基生成的胺促使阴道可产生丙酮酸和氨基酸，脱羧基生成的胺促使阴道 pH值升高；精液可使阴道值升高；精液可使阴道pH值升高，在此环境下值升高，在此环境下GV逐渐形成优势菌。逐渐形成优势菌。厌氧菌产生的胺可导致上皮细胞

22、脱落和大量分泌物排厌氧菌产生的胺可导致上皮细胞脱落和大量分泌物排出，阴道分泌物中氨增加，产生特殊腥臭味，导致出，阴道分泌物中氨增加，产生特殊腥臭味，导致BV的发病。的发病。BVBV属属STDSTD。GVGV还还可引起早产、产褥热、新生儿败血症。可引起早产、产褥热、新生儿败血症。上页1阴道分泌物阴道分泌物增多，灰白色增多，灰白色稀薄均匀稀薄均匀如奶油样如奶油样分泌物分泌物的的pH值值4.5胺试验阳性胺试验阳性(即有鱼腥气味即有鱼腥气味)线索细胞阳性线索细胞阳性。(以线索细胞检出以线索细胞检出20为阳性为阳性)，革，革兰染色见特定菌群分布兰染色见特定菌群分布第第4项加上项加上前前3项中项中2项即可

23、诊断项即可诊断BV返回实验室诊断标准：实验室诊断标准：上页1淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌（Neisseria gonorrhoeae）l俗称俗称淋球菌淋球菌l人类是淋球菌的唯一宿主，人类是淋球菌的唯一宿主，主要主要引起泌尿生殖系引起泌尿生殖系统粘膜的急性或慢性化脓性感染统粘膜的急性或慢性化脓性感染l淋病是发病率较高的性传播疾病之一淋病是发病率较高的性传播疾病之一l临床上多表现为急性症状，少数为慢性过程临床上多表现为急性症状，少数为慢性过程上页1l为革兰阴性双球菌为革兰阴性双球菌l形态：形态：似肾形或咖啡豆状似肾形或咖啡豆状l排列：排列：常成双排列，凹面相对常成双排列，凹面相对l急性淋病患者的急性淋病患

24、者的淋球菌淋球菌常被吞噬于中性粒细胞内常被吞噬于中性粒细胞内l慢性淋病患者的慢性淋病患者的淋球菌淋球菌多分布在细胞外多分布在细胞外上页1细胞内细胞外上页1涂片革兰染色法涂片革兰染色法 将分泌物将分泌物涂片作革兰氏涂片作革兰氏染色后染色后，选择细胞均匀部位，油，选择细胞均匀部位，油镜镜观察；观察；白白细胞内或细胞外呈肾形或细胞内或细胞外呈肾形或咖啡豆状咖啡豆状，成对排列，成对排列，凹面相凹面相对的对的革兰氏阴性双球菌；革兰氏阴性双球菌；报告：找到报告：找到“细胞内或细胞外革兰氏阴性双球菌细胞内或细胞外革兰氏阴性双球菌”。检查方法及方法学评价：检查方法及方法学评价：上页1涂片革兰染色法涂片革兰染色

25、法 简便、快速，阳性结果结合不洁性生活史及症状，简便、快速，阳性结果结合不洁性生活史及症状，即可作出初步诊断。即可作出初步诊断。但病情较轻者，涂片中淋球菌较少，形态不典型，但病情较轻者，涂片中淋球菌较少，形态不典型，又位于细胞之外时，则往往难以下结论。又位于细胞之外时，则往往难以下结论。还必须从形态上与其他革兰阴性双球菌还必须从形态上与其他革兰阴性双球菌鉴别。鉴别。上页检查方法及方法学评价：检查方法及方法学评价：1淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌形态鉴别形态鉴别 淋球菌 其他革兰阴性双球菌上页 最终靠培养鉴定1培养法培养法 是诊断淋病的重要手段是诊断淋病的重要手段 对于涂片检查呈阴性的可疑患者，可作淋球菌

26、培对于涂片检查呈阴性的可疑患者，可作淋球菌培养养 上页检查方法及方法学评价：检查方法及方法学评价：1淋球菌直接玻片协同凝集反应淋球菌直接玻片协同凝集反应 淋球菌的抗体致敏具有淋球菌的抗体致敏具有SPASPA的金黄色葡萄球菌可以的金黄色葡萄球菌可以和分泌物中的淋病奈瑟球菌抗原发生凝集反应。和分泌物中的淋病奈瑟球菌抗原发生凝集反应。简便、快速、特异性高简便、快速、特异性高。上页检查方法及方法学评价：检查方法及方法学评价：1多聚酶链反应多聚酶链反应(PCR)法法 可检测到微量的淋球菌可检测到微量的淋球菌 DNA，敏感性较高。，敏感性较高。但也正由于敏感性很高，所取标本即使仅有极微但也正由于敏感性很高

27、，所取标本即使仅有极微量的污染，也可显示为阳性量的污染，也可显示为阳性。上页检查方法及方法学评价：检查方法及方法学评价：1直接荧光抗体染色法直接荧光抗体染色法 将抗淋球菌抗体用荧光素标记以后，加到可疑病人将抗淋球菌抗体用荧光素标记以后，加到可疑病人的涂片上，如为阳性，则可在荧光显微镜下见到发的涂片上，如为阳性，则可在荧光显微镜下见到发特异荧光的淋球菌。特异荧光的淋球菌。简便、快速，对死菌也可呈现阳性。简便、快速，对死菌也可呈现阳性。返回上页检查方法及方法学评价：检查方法及方法学评价：1阴道真菌阴道真菌 一种条件致病菌，一种条件致病菌，约约10101515的健康妇女阴道的健康妇女阴道内寄居有念珠

28、菌，平时并不致病内寄居有念珠菌，平时并不致病 当阴道抵抗力降低或局部环境改变时，容易引起当阴道抵抗力降低或局部环境改变时，容易引起真菌性阴道炎，属于性传播疾病真菌性阴道炎，属于性传播疾病 使人类致病的阴道真菌使人类致病的阴道真菌85%85%为白色念珠菌为白色念珠菌上页1 找到真菌为诊断真菌性阴道炎的依据找到真菌为诊断真菌性阴道炎的依据 可直接作阴道分泌物涂片检查。采用湿片法、染可直接作阴道分泌物涂片检查。采用湿片法、染色法或培养法色法或培养法 上页检查方法：检查方法：1湿片法：湿片法：取取10氢氧化钾或氢氧化钾或盐水涂片盐水涂片镜检，找到镜检，找到单个或成单个或成群群卵圆形卵圆形、无色透明的、

29、无色透明的孢子或假菌丝或菌丝孢子或假菌丝或菌丝，即，即可报告可报告“找到真菌找到真菌”；该法在识别该法在识别孢子或假菌丝或菌丝上较染色法困难。孢子或假菌丝或菌丝上较染色法困难。上页1阴道真菌（湿片法：真菌孢子、菌丝）上页1革氏染色法：革氏染色法：取少许阴道分泌物涂片，风干后革兰染色，油镜下取少许阴道分泌物涂片，风干后革兰染色，油镜下寻找革氏阳性的孢子、菌丝或假菌丝寻找革氏阳性的孢子、菌丝或假菌丝孢子孢子 菌丝菌丝 孢子孢子上页1真菌和加德纳菌的混合感染真菌和滴虫的混合感染返回 阴道真菌常可与其他阴道真菌常可与其他病原生物病原生物 发生混合感染发生混合感染上页1革兰氏染色法 革兰氏染色法一般包括

30、初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：载玻片固定。在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，固定。草酸铵结晶紫染1分钟。自来水冲洗，去掉浮色。用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。1革兰氏染色法 用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。用复红染液复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。1革兰氏染色法 革兰氏染色步骤革兰氏染色步骤：加结晶紫12滴1分钟后自来水冲洗加碘液12滴30秒后自来水冲洗加脱色液1滴1530秒内自来水冲洗加复红1滴5

31、15秒内自来水冲洗。1第四节第四节 阴道分泌物检查的阴道分泌物检查的质量控制质量控制 严格做好实验前质量控制，把好标本采集送检关严格做好实验前质量控制，把好标本采集送检关 严格做好实验中质量控制，把好标本的检测关严格做好实验中质量控制，把好标本的检测关 严格做好实验后质量控制，把好检测结果报告关严格做好实验后质量控制，把好检测结果报告关 上页1一、严格做好实验前质量控制一、严格做好实验前质量控制 把好标本采集送检关把好标本采集送检关 及时告知患者正确做好采样前的准备；及时告知患者正确做好采样前的准备；严格按照阴道分泌物采集要求进行采样送检严格按照阴道分泌物采集要求进行采样送检 在寒冷天气，检查

32、在寒冷天气，检查TV的标本要采取保温措施送检，防止的标本要采取保温措施送检，防止TV活动能力明显减低或死去，使湿片法检出率降低；活动能力明显减低或死去，使湿片法检出率降低；淋球菌易自溶，可使阳性标本变成阴性结果，因此，采样淋球菌易自溶，可使阳性标本变成阴性结果，因此，采样后应及时送检，立即涂片风干染色镜检后应及时送检，立即涂片风干染色镜检。上页1二、严格做好实验中质量控制二、严格做好实验中质量控制 把好标本检测关把好标本检测关 建立统一的操作程序，严格控制各种影响因素；建立统一的操作程序，严格控制各种影响因素；做好专业培训，掌握好方法学的各个环节，掌握做好专业培训，掌握好方法学的各个环节，掌握

33、不同检查方法阴道分泌物中正常和异常各种有形不同检查方法阴道分泌物中正常和异常各种有形成分的辨认和相应的临床意义；成分的辨认和相应的临床意义；做好标本的收集、编号、登记等工作，严防做好标本的收集、编号、登记等工作，严防“张张冠李戴冠李戴”的差错发生。的差错发生。上页1三、严格做好实验后质量控制三、严格做好实验后质量控制 把好检测结果报告关把好检测结果报告关湿涂片法以高倍视野报告，染色法用油镜视野报告，湿涂片法以高倍视野报告，染色法用油镜视野报告，结果应力求准确可靠，报告方式要力求一致。结果应力求准确可靠，报告方式要力求一致。有条件时，可采用图文方式报告，提供检测结果的有条件时，可采用图文方式报告，提供检测结果的依据，防止医疗纠纷的发生。依据，防止医疗纠纷的发生。上页11