药物分析药物鉴别试验课件.pptx

1、药物分析主要有三大项：鉴别、检查和含量测定。依据：根据药物的化学结构和它的理化性质，分别采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物的真伪。适用范围：已有标识标识的已知药物已知药物的真伪第1页/共44页一、性状1 1、外观：聚集状态、晶形、色泽以及臭、味等例：药典对盐酸吗啡的描述为：本品为白色，有丝光针状结晶或结晶性粉末，无臭，遇光易变质2 2、溶解性：在一定程度上反映了药物的纯度第2页/共44页溶解度测定方法：溶解度测定方法：准确称取研成细粉的供试品或量取液体供试品（准确度为2%2%），加入一定量的溶剂，在252522下，每隔5min5min强力振摇3030秒，观察30min30min内的溶解情

2、况，如看不到溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解 药典中采用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶、几乎不溶或不溶”描述药品在不同溶剂中的溶解性能。第3页/共44页3 3、物理常数、物理常数（1 1）熔点定义：熔点是指一种物质按照规定方法测定，由固体熔化成液体固体熔化成液体的温度、熔融同时分解熔融同时分解的温度、或在熔化时从初熔到全熔熔化时从初熔到全熔的一段温度。重要的指标第4页/共44页适用范围：测定熔点的药品应该是遇热晶型不转化、它的初熔点和终熔点容易分辩的药品。某些药品具有一定的熔点。测定方法：第一种：易粉碎的固体药品第二种：不易粉碎的固体药品第三种：凡士林或其他类似的物质 测定熔点的装

3、置、升温速度、药品放入传温液中时的温度、熔点测定管内径的大小、药物的干燥程度、传温液、观察的要求等不同都会影响熔点测定的结果。未注明者指第一法 严格按药典规定要求操作 第5页/共44页注意事项：毛细管管径的影响：测温用温度计要校正 注意加热方式 三个定义：初熔初熔供试品在毛细管内开始局部液化，出现明显液滴时的温度 全熔全熔供试品全部液化时的温度 熔融同时分解熔融同时分解指某一个药品在一定温度产生气泡、变色或浑浊等现象 第6页/共44页（2 2）比旋度）比旋度基本概念 旋光度:直线偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，旋转的度数，称为旋光度

4、。比旋度:偏振光透过长ldmldm且每lmllml中含有旋光性物质1g1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。比旋度的应用 A A、用于鉴别药物或检查药物的纯杂程度 B B、用于含量测定第7页/共44页基本原理中国药典 (2005(2005年版)规定：采用钠光谱的D D线 (589.3nm)(589.3nm)测定旋光度，除另有规定外，测定管长度为1dm1dm，测定温度为2020。公式一公式一：对液体供试品，则:公式二公式二：对固体样品,则：ldD20 lCD10020d：液体的相对密度C：每100ml溶液中含有被测物质的中重量，g第8页/共44页测定方法 读数方法:用相同法读取旋

5、光度3 3次，取3 3次的平均数，按公式计算供试品的比旋度。注意事项 重复校正 温度：调节温度至20200.50.5 保证溶液澄清 第9页/共44页（3 3）折光率测定）折光率测定基本原理 i i光的入射角 r r折射角 可进行鉴别、检查纯杂程度或测定其含量。测定方法注意事项 采用钠光D D线 (589.3nm)(589.3nm)测定供试品相对于空气的折光率 ，除另有规定外，供试品温度为2020 折光计读数至0.00010.0001，测量范围:1.3:1.31.71.7rintDsinsin温度温度2O2O25254040水的折光率水的折光率1.33301.33301.33251.33251.

6、33051.3305第10页/共44页(4)(4)粘度测定粘度测定 粘度：粘度系指流体对流动的阻抗能力。中国药典把粘度分为以下三种:动力粘度、运动粘度、特性粘数。平氏粘度计：适于测定牛顿流体的 动粘度或动力粘度测定方法 旋转式粘度计：适于测定非牛顿流 体的动力粘度 乌氏粘度计：适于测定高聚物溶液 的特性粘度第11页/共44页第12页/共44页(5)(5)吸收系数吸收系数在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。是吸光物质的重要物理常数 有两种表示方式:摩尔吸收系数和百分吸收系数第13页/共44页(6)pH(6)pH值的测定值的测定温度温度苯二甲酸

7、盐苯二甲酸盐磷酸盐磷酸盐硼砂硼砂5 54.004.006.956.959.409.4015154.004.006.96.99.289.2820204.004.006.886.889.239.2325254.014.016.866.869.199.19第14页/共44页注意事项：（1）测定前，按各品种项下的规定，选择两种pH 值约相差3 个pH 单位的标准缓冲液，并使供试液的pH 值处于两者之间。（2）取与供试液pH 值较接近的第一种标准缓冲液对仪器进行校正（定位），使仪器示值与表列数值一致。（3）仪器定位后，再用第二种标准缓冲液核对仪器示值，误差应不大于0.02pH 单位。若大于此偏差，则应小

8、心调节斜率，使示值与第二种标准缓冲液的表列数值相符。重复上述定位与斜率调节操作，至仪器示值与标准缓冲液的规定数值相差不大于0.02pH 单位。第15页/共44页（4）每次更换标准缓冲液或供试液前，应用纯化水充分洗涤电极，然后将水吸尽，也可用所换的标准缓冲液或供试液洗涤（5）配制标准缓冲液与溶解供试品的水，应是新沸过并放冷的纯化水，pH 值应为5.57.0（6）标准缓冲液一般可保存23 个月，但发现有浑浊、发霉或沉淀等现象时，不能继续使用第16页/共44页二、一般鉴别试验二、一般鉴别试验一般鉴别试验：是依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪真伪。特点为：是证实药品

9、是某一类药物的依据 是根据药物所具有的性质或结构进行药物的真伪鉴别 例：无机药物根据其组成的阴、阳离子的特殊反应 有机药物采用典型官能团反应只能确定供试品为某一类药物，而不能证实它是哪一种药物 第17页/共44页一般鉴别试验的项目一般鉴别试验的项目丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、无机金属盐类（钠盐、钾盐、锂盐、钙盐、钡盐、铵盐、镁盐、铁盐、铝盐、锌盐、铜盐、银盐、汞盐、铋盐、锑盐、亚锡盐）、有机酸盐（水杨酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、苯甲酸盐、酒石酸盐）、无机酸盐（亚硫酸盐或亚硫酸氢盐、硫酸盐、硝酸盐、硼酸盐、碳酸盐与碳酸氢盐、醋酸盐、磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物）第18页/

10、共44页有机氟化物的鉴别有机氟化物的鉴别第一步：有机氟化物无机氟化物第二步：无机氟化物+不同试液呈色的配位化合物例：F F-+西素氟蓝 +硝酸亚铈 蓝紫色配位化合物（pH4.3pH4.3）注意：必须做空白对照试验，消除干扰。氧瓶燃烧法碱性溶液吸收茜素氟蓝、硝酸亚铈第19页/共44页有机酸盐：（有机酸盐：（1 1）水杨酸盐（）水杨酸盐（两种方法两种方法）第一法：三氯化铁的呈色反应 鉴别方法 注意：A.A.该反应极灵敏 B.pHB.pH值对反应的呈色有影响中性时呈红色弱酸性时呈紫色强酸性溶液中，溶液褪色。第20页/共44页有机酸盐（有机酸盐（1 1）水杨酸盐（）水杨酸盐（两种方两种方法法）第二法：

11、沉淀生成反应反应原理：利用水杨酸盐和水杨酸溶解性质的差异来鉴别提示：提示：苯甲酸盐和水杨酸盐属于同类药物，试验方法相似。苯甲酸盐和水杨酸盐属于同类药物，试验方法相似。第21页/共44页有机酸盐（有机酸盐（2 2）酒石酸盐）酒石酸盐反应原理:鉴别方法:取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在试管内壁成银镜。中性第22页/共44页芳香第一胺类芳香第一胺类 反应原理：-奈酚试液要现用现配 不同的供试品，会生成橙黄色到猩红色沉淀 第23页/共44页无机金属盐无机金属盐-钠盐、钾盐、钙盐的鉴别试钠盐、钾盐、钙盐的鉴别试验验(1)(1)焰色反应测定原理：不同的

12、金属离子的火焰光谱的谱线不同，所以呈色有所区别：金属离子金属离子主要谱线主要谱线呈色呈色NaNa+589.0nm,589.6nm589.0nm,589.6nm黄色黄色K K+766.49nm,769.90nm766.49nm,769.90nm紫色紫色CaCa+622nm,544nm,622nm622nm,544nm,622nm砖红色砖红色鉴别方法:取铂丝，用盐酸湿润后，在无色火焰中燃烧不呈色后，再蘸取供试品，燃烧，火焰即显各离子的特征颜色 第24页/共44页无机金属盐（无机金属盐（2 2）其它鉴别试）其它鉴别试验验 钠盐：供试品 +醋酸氧铀锌试液 黄色沉淀 钾盐供试品 +0.1%+0.1%四苯

13、硼钠溶液与醋酸 白色沉淀 钙盐 供试品 +草酸铵试液 白色沉淀 不溶于醋酸 溶于盐酸中性溶液炽灼，以除去可能含有的铵盐甲基红指示液2 2滴，用氨试液中和，再滴加盐酸至呈酸性分离，pH4pH4第25页/共44页三、专属鉴别试验三、专属鉴别试验 根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应，来鉴别药物真伪的。是证实药物是某一种药物的依据 能区别同类药物或具有相同化学结构部分的各药物单体，达到最终确认药物真伪的目的第26页/共44页例：巴比妥类药物的鉴别：一般的鉴别试验：利用药物所具有丙二酰脲母核 专属的鉴别试验：各种药物的取代基不同，可用于鉴别 苯巴比妥含

14、有苯环，可以和NaNONaNO2 2-H-H2 2SOSO4 4反应 司可巴比妥含有双键，可以使碘液褪色 硫喷妥钠含有硫原子，有硫元素的反应第27页/共44页一、化学鉴别法1 1、干法鉴别 焰色反应：利用药物中所含有的某些元素所具有的特异焰色，使火焰显出特殊的颜色。加热分解:在适当的温度条件下，加热使供试品分解，生成有特殊气味的气体。第28页/共44页2 2、湿法鉴别、湿法鉴别（1 1）利用呈色反应鉴别三氯化铁呈色反应:含有酚羟基或水解后产生酚羟基的药物异羟肟酸铁反应:芳酸及其酯类、酰胺类药物茚三酮呈色反应:化学结构中含有脂肪氨基药物重氮化-偶合反应:含有芳伯氨基或能产生芳伯氨基的药物氧化还原

15、显色反应及其它颜色反应。第29页/共44页2 2、湿法鉴别、湿法鉴别（2 2）沉淀生成反应鉴别法与重金属离子的沉淀反应:与硫氰化铬铵(雷氏盐)的沉淀反应:其它沉淀反应第30页/共44页2 2、湿法鉴别、湿法鉴别（3 3）利用气体生成反应鉴别可经强碱处理后加热产生氨气：用于胺类、酰脲类以及某些酰胺类药物 可经强酸处理后加热产生硫化氢气体：用于化学结构中含硫的药物 经直火加热，可生成紫色碘蒸气：含碘有机药物 经硫酸水解后加醇可产生醋酸乙酯的香味：含醋酸酯和乙酰胺类药物第31页/共44页2 2、湿法鉴别、湿法鉴别(4)(4)荧光反应鉴别法药物本身可在可见光下发射荧光药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见光

16、下发射荧光 药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光 药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其它反应后，发射荧光。第32页/共44页二、光谱鉴别法二、光谱鉴别法1 1、紫外光谱鉴别法(1)(1)测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长（max=max=？min=min=？）(2)(2)规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸收度（在C C和maxmax处，A A应为某一值）(3)(3)规定吸收波长和吸收系数法;（在某处，E E或应为某一值）(4)(4)规定吸收波长和吸收度比值法;（A A1 1/A/A2 2应在某一范围内）(5)(5)经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性 第33页/共44页

17、2 2、红外光谱鉴别法、红外光谱鉴别法 红外光谱法专属性高、特征性强，是用于鉴别单一组分、结构明确的原料药的首选方法。尤其适用于同类药物的不同药物单体的鉴别 标准图谱对照法：中国药典（20052005年版）制样方法：压片法、糊法、膜法、溶液法第34页/共44页三、色谱鉴别法三、色谱鉴别法原理：利用不同物质在不同色谱条件下，有各自不同的特征色谱行为(保留时间或保留体积)进行鉴别试验。（1 1）薄层色谱鉴别法：（2 2）高效液相色谱和气相色谱鉴别法（3 3）质谱法（4 4）高效毛细管电泳法第35页/共44页四、生物学法四、生物学法 生物学法是利用微生物或实验动物进行鉴别的方法。第36页/共44页1

18、 1、溶液的浓度例：对离子反应颜色：如被测离子的浓度太低，与试剂作用产生的颜色太浅，不易鉴别 可以浓缩 如供试品的浓度太高，与试剂作用产生的颜色过深，也不易鉴别 可以稀释 水杨酸及盐与三氯化铁反应，供试品浓度过大时，颜色不易判断，要稀释。第37页/共44页2 2、溶液的温度、溶液的温度 温度对化学反应的影响主要通过改变反应的速率产生的。一般温度每升高1010，可以使反应速度增加2 24 4倍。第38页/共44页3 3、溶液的酸碱度、溶液的酸碱度 适宜的酸碱度的目的是使反应物处于反应的活化状态，而生成物处于稳定和易于观测的状态。例：沉淀反应从酸性溶液中不可能析出能溶于酸的沉淀从碱性溶液中不可能析

19、出能溶于碱的沉淀对于一些能溶于酸、碱溶液中的生成物，只能在中性条件下测定第39页/共44页4 4、试验时间、试验时间无机反应：是离子反应，依靠离子间的静电引力，所以结合比较快有机反应：一般是分子间的反应，反应速度决定于分子间不规则的碰撞，所以比较慢。除此之外，有机反应比较复杂，有时要加催化剂才能完成。5 5、干扰成分的存在、干扰成分的存在第40页/共44页第五节第五节 鉴别试验的灵敏度鉴别试验的灵敏度一、反应灵敏度 反应灵敏度是指在一定条件下，能在尽可能稀的溶液中观测出尽可能少量的供试品，反应对这种要求所能满足的程度，以最低检出量和最低检出浓度作为衡量指标的第41页/共44页 最低检出量（检出限量）(以m m表示)，指在一定的条件下，应用某一反应能够观测出试验结果的供试品的最小量，以gg计。最低检出浓度（界限浓度）：指在一定条件下，应用某一反应;能够观测出供试品的最低浓度。第42页/共44页二、提高反应灵敏度的方法二、提高反应灵敏度的方法1 1、提取浓集2 2、改进观测方法3 3、进行空白试验第43页/共44页感谢您的观看！第44页/共44页