采血前初筛检验课件.ppt
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- 采血 前初筛 检验 课件
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1、湘潭市中心血站 张锦泉2023-5-101湘潭市中心血站 张锦泉2023-5-102采血前初筛检验采血前初筛检验湘潭市中心血站湘潭市中心血站 质管科质管科 张锦泉张锦泉湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-103主要内容主要内容&一、一、ABOABO血型鉴定血型鉴定&二、乙肝表面抗原(二、乙肝表面抗原(HBsAgHBsAg)检测)检测&三、血红蛋白含量检测三、血红蛋白含量检测&四、四、ALTALT检测检测湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-104一、一、ABOABO血型鉴定血型鉴定F ISBT ISBT认可的血型系统有认可的血型系统有2929个,个,221
2、221个抗原。个抗原。v血型系统:血型系统:ABOABO、Rh(D)Rh(D)、MNSMNS、P P、kellkell、lewislewis、DuffDuff以及以及kiddkidd等。等。v临床上与输血关系密切的有临床上与输血关系密切的有ABOABO血型系统和血型系统和Rh(D)Rh(D)血型系统。血型系统。血型血型(blood group)(blood group)是指红细胞膜上是指红细胞膜上特异抗原特异抗原的类的类型。型。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-105vABOABO血型系统的分型是由体内血型系统的分型是由体内A A、B B抗原和抗体两者共抗原和抗体两者共同
3、决定的。同决定的。v人体内的人体内的ABOABO血型抗原不仅存在于红细胞膜上,而且血型抗原不仅存在于红细胞膜上,而且广泛地存在于很多组织细胞膜和体液、分泌液中【唾广泛地存在于很多组织细胞膜和体液、分泌液中【唾液、胃液、精液等】。液、胃液、精液等】。v人体人体ABOABO血型抗体最多的是血型抗体最多的是IgMIgM类天然抗体,在类天然抗体,在ABOABO母母婴血型不合的妊娠或输婴血型不合的妊娠或输ABOABO不相容的血液后可产生不相容的血液后可产生IgGIgG类免疫抗体。类免疫抗体。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-106湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-
4、5-107ABO血型系统的抗原和抗体血型系统的抗原和抗体血型血型红细胞上的抗原红细胞上的抗原血清中的抗体血清中的抗体A型型A1A+A1抗抗BA2A抗抗B+抗抗A1B型型B抗抗AAB型型A1BA+A1+B无抗无抗A,无抗无抗A1,无抗无抗BA2 BA+B抗抗A1O型型无无A,无无B抗抗A+抗抗B湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-108ABOABO血型鉴定原理:血型鉴定原理:根据根据IgMIgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理,用已知结合能出现凝集反应的原理,用已知IgMIgM类特异性标类特异性标准抗准抗A
5、A和抗和抗B B血清来测定红细胞上有无相应的血清来测定红细胞上有无相应的A A抗原或抗原或(和)(和)B B抗原,同时用已知标准抗原,同时用已知标准A A型红细胞和型红细胞和B B型红细型红细胞来测定血清中有无相应的天然胞来测定血清中有无相应的天然IgMIgM类抗类抗A A或(和)抗或(和)抗B B。v红细胞凝集的本质是红细胞凝集的本质是抗原抗原-抗体反应。抗体反应。正向定型:正向定型:标准血清标准血清 +被检红细胞被检红细胞反向定型:反向定型:标准红细胞标准红细胞 +被检血清被检血清湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-109含某种抗含某种抗原的红细原的红细胞胞+含相应含相
6、应抗体的抗体的血清血清红细胞凝集反应红细胞凝集反应(agglutination)实验原理:实验原理:血型不相容的两人血液血型不相容的两人血液混合混合,则红细胞可凝集成簇则红细胞可凝集成簇抗抗A抗抗B湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1010结果判定结果判定抗抗A型标准血清型标准血清抗抗B型标准血清型标准血清A型型抗抗A型标准血清型标准血清抗抗B型标准血清型标准血清B型型抗抗A型标准血清型标准血清抗抗B型标准血清型标准血清抗抗A型标准血清型标准血清抗抗B型标准血清型标准血清O型型AB型型湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1011血型鉴定错误的原因血型鉴
7、定错误的原因v当献血者较多时,献血者急于离开,缩短了抗原、当献血者较多时,献血者急于离开,缩短了抗原、抗体的反应时间,抗原较弱者没有出现结果就判读。抗体的反应时间,抗原较弱者没有出现结果就判读。v责任心:由于工作人员责任心不强,把抗责任心:由于工作人员责任心不强,把抗A A、抗、抗B B交交叉搞错等。叉搞错等。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1012v技术因素:当标本采集技术技术因素:当标本采集技术(手指采血手指采血)不过关时,不过关时,样本血量不足而致抗原量的不足再加反应时间不充分样本血量不足而致抗原量的不足再加反应时间不充分时,初筛时易导致时,初筛时易导致A A型、
8、型、B B型错查成型错查成O O型,或型,或ABAB型错查型错查成成A A型或型或B B型型;甚至采集手指血时因局部挤压过重因大甚至采集手指血时因局部挤压过重因大量组织液的产生而致引起血型的假凝,如量组织液的产生而致引起血型的假凝,如O O型错查成型错查成ABAB型或型或A A型或型或B B型型;少数操作手法不良人员在将血清与少数操作手法不良人员在将血清与血球混匀过程中造成污染,致使血球混匀过程中造成污染,致使A A型或型或B B型错查成型错查成ABAB型。型。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1013v实验中温度过高或过低、时间太长、水分蒸发时容实验中温度过高或过低、时
9、间太长、水分蒸发时容易出现串钱状现象。或者某些肝肾疾病,传染病或红易出现串钱状现象。或者某些肝肾疾病,传染病或红细胞沉降速度增快的病人,血中纤维蛋白原增高或为细胞沉降速度增快的病人,血中纤维蛋白原增高或为异常蛋白血症,输代血浆血中含大量高分子右旋糖酐,异常蛋白血症,输代血浆血中含大量高分子右旋糖酐,都能使红细胞形成串钱状,被误认为凝集。都能使红细胞形成串钱状,被误认为凝集。v亚型因素:亚型因素:A A、B B抗原较弱、正定型检测时凝集很弱抗原较弱、正定型检测时凝集很弱或不出现凝集,或不出现凝集,B B弱亚血型,加上街头采血点只做正弱亚血型,加上街头采血点只做正定型,不做反定型,一些抗原较弱的定
10、型,不做反定型,一些抗原较弱的ABOABO亚型难于检亚型难于检测,而误判为不凝集。测,而误判为不凝集。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1014v试剂效价低:标准血清效价太低,亲和力不强,造试剂效价低:标准血清效价太低,亲和力不强,造成定型不准确。如抗成定型不准确。如抗A A血清效价不高可将血清效价不高可将A A2 2型误为型误为O O型,型,A A2 2B B型误为型误为B B型。型。v某些受肠道革兰阴性杆菌感染的病人某些受肠道革兰阴性杆菌感染的病人(大肠杆菌大肠杆菌O86O86败血症败血症)红细胞获得了类红细胞获得了类B B抗原,抗原,A A型病人可误定为型病人可误定
11、为ABAB型,型,O O型误定为型误定为B B型。因此,近期感染过肠道致病菌的型。因此,近期感染过肠道致病菌的不宜献血。不宜献血。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1015v流程合理性欠缺:留样贴签过程控制不严密,当工流程合理性欠缺:留样贴签过程控制不严密,当工作人员同时采集两个献血者、注意力又不集中、事先作人员同时采集两个献血者、注意力又不集中、事先又把标签预贴在流样管上时就会导致错型。事实上这又把标签预贴在流样管上时就会导致错型。事实上这种错误不仅是错型原因之一,还对检测结果的正确判种错误不仅是错型原因之一,还对检测结果的正确判断带来严重的后果,且当同型试管倒错时更难
12、于发现,断带来严重的后果,且当同型试管倒错时更难于发现,潜在危害更大,严重威胁到血液的安全性。潜在危害更大,严重威胁到血液的安全性。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1016预防措施预防措施v加强对血型初筛人员的业务理论和技术操作培训,加强对血型初筛人员的业务理论和技术操作培训,增强责任心和质量意识,提高检测技能。增强责任心和质量意识,提高检测技能。v抗抗A A抗抗B B都是蛋白质,其效价及亲和力会随着时间的都是蛋白质,其效价及亲和力会随着时间的推移和保存温度过高而下降,标准血清不用时立即冷推移和保存温度过高而下降,标准血清不用时立即冷藏保存。藏保存。v要有足够的耐心确保
13、反应时间,选择灵敏度高、特要有足够的耐心确保反应时间,选择灵敏度高、特异性好的试剂,以减少亚型漏检。异性好的试剂,以减少亚型漏检。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1017v使用质量合格的试剂及细心观察结果,就可避免使用质量合格的试剂及细心观察结果,就可避免很多不必要的错误。很多不必要的错误。v献血人员较多时,要保证有足够的工作人员,安献血人员较多时,要保证有足够的工作人员,安排足够的初筛人员及时做好献血人群的分流安排。排足够的初筛人员及时做好献血人群的分流安排。v强化采前、采中、采后核对制度。强化采前、采中、采后核对制度。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉202
14、3-5-1018v优化流程,明确贴签程序与步骤。优化流程,明确贴签程序与步骤。v从空间和时间上制造隔离带,防止同时采集留样从空间和时间上制造隔离带,防止同时采集留样带来的错型。带来的错型。v总之,只要精力集中,工作认真细致,严格按照标总之,只要精力集中,工作认真细致,严格按照标准操作程序进行操作,就可以避免定型错误。准操作程序进行操作,就可以避免定型错误。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1019二、乙肝表面抗原(二、乙肝表面抗原(HBsAgHBsAg)检测)检测原理:原理:采用胶体金免疫技术在玻璃纤维上预包被金标采用胶体金免疫技术在玻璃纤维上预包被金标抗抗HBsAgHB
15、sAg单抗单抗(Au-sAbl)(Au-sAbl)、硝酸纤维素膜上检测线和对照、硝酸纤维素膜上检测线和对照线上分别包被抗线上分别包被抗HBsAgHBsAg单抗单抗(sAb2)(sAb2)和单抗鼠和单抗鼠IgGIgG。检测时。检测时样本血清中样本血清中HBsAgHBsAg可与胶体金可与胶体金-抗体结合形成复合物,由抗体结合形成复合物,由于层析作用复合物沿纸条向前移动,如为阳性样本,则于层析作用复合物沿纸条向前移动,如为阳性样本,则与检测线预包被的抗体结合形成与检测线预包被的抗体结合形成“Au-sAb1-HBsAg-sAb2”“Au-sAb1-HBsAg-sAb2”夹心物而凝聚显色,则该试纸条在检
16、测线和对照线位置夹心物而凝聚显色,则该试纸条在检测线和对照线位置出现两条紫红线。如为阴性,试纸条只在对照线位置出出现两条紫红线。如为阴性,试纸条只在对照线位置出现一条紫红线。现一条紫红线。湘潭市中心血站湘潭市中心血站 张锦泉张锦泉2023-5-1020v全血金标法增加了血细胞滤过膜,该膜只允许血清通全血金标法增加了血细胞滤过膜,该膜只允许血清通过,而阻止血细胞的渗透,避免了血细胞的干扰,使过,而阻止血细胞的渗透,避免了血细胞的干扰,使检验结果更加准确。全血金标法取末梢手指血检验结果更加准确。全血金标法取末梢手指血8080100L100L,滴加到试纸条样品加入端。如果血样过于粘,滴加到试纸条样品
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