DNA重组技术的基本工具高中生物公开课课件.ppt

1、三色紫罗兰三色紫罗兰玫瑰玫瑰(目的基因目的基因)(受体细胞受体细胞)基因工程的概念 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程实质结果提供的材料提供的材料1、一段含有三色紫罗兰蓝色素基因的、一段含有三色紫罗兰蓝色素基因的DNA片段片段2、受体细胞、受体细胞-玫瑰体细胞玫瑰体细胞 要实现三色紫罗兰的蓝色素基因在玫要实现三色紫罗兰的蓝色素基因在玫瑰体细胞内表达从而获得相应性状，我瑰体细胞内表达从而获得相应性状，我们该怎么做呢

2、？们该怎么做呢？1.1 DNA重组技术的基本工具基本工具：限制性核酸内切酶“分子手术刀”DNA连接酶“分子缝合针”基因进入受体细胞的载体“分子运输车”（一）（一）“分子手术刀分子手术刀”限制性核酸内切限制性核酸内切酶酶1 1、来源：、来源：主要来自原核生物主要来自原核生物2 2、特点：、特点：特异性特异性表现在两方面：表现在两方面：(1)(1)识别双链识别双链DNADNA中中特定核苷酸序列特定核苷酸序列(2)(2)切割特定序列中的切割特定序列中的特定位点特定位点3 3、作用：、作用：特定部位的两个核苷酸之间特定部位的两个核苷酸之间的的磷酸二酯键磷酸二酯键断开断开4 4、结果：、结果：产生黏性末

3、端产生黏性末端或或平末端平末端 限制酶切割限制酶切割DNA后形后形成的末端成的末端黏性末端、黏性末端、平末端是如何形成的？平末端是如何形成的？黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端平末端平末端平末端平末端 用同一种限制性酶处理不同用同一种限制性酶处理不同DNADNA片段，会形片段，会形成同样的黏性末端，可进行重组。成同样的黏性末端，可进行重组。（二）（二）“分子缝合针分子缝合针”DNADNA连接酶连接酶1 1、种类：、种类：EcoliEcoli DNA DNA连接酶连接酶 T4 DNAT4 DNA连接酶连接酶2 2、作用：、作用：G A A T T C C T T A

4、 A G GP AP类型以以DNADNA的一条链为模板合成的一条链为模板合成DNADNA双链双链DNADNAAG T AC A A A T AGCTGACGGTTT游离的游离的脱氧脱氧核糖核苷酸核糖核苷酸AG T AC A A A T AGCTGACGGTTTDNADNA 聚合酶聚合酶AG T AC A A A T AGCGACGGTTTTAG T AC A A A T GCGACGGTTTTAAG T AC A A A T GCGACGTTGTTAAG T AC A A A T GCGACGTGTTATAG T AC A A A T GCGACGGTT AT TAG T AC A A A T

5、 GCGACGGTTAT TAAG T AC A A A T GCGCGGTTAT TA TAG T AC A A A T GGCGGTTAT TA T CAG T AC A A A T GGCGGTTAT TA T CDNADNA具有连接单链具有连接单链DNADNA的本领的本领,连接连接成一条互补的成一条互补的DNA链链只可以连接双链只可以连接双链DNADNA（三）（三）“分子运输车分子运输车”运载体运载体2 2、种类：、种类：1 1、需要具备的条件：、需要具备的条件：（1）在受体细胞中稳定存在，能自我复制）在受体细胞中稳定存在，能自我复制（2）有一个或多个切割位点）有一个或多个切割位点（3

6、）有标记基因）有标记基因（4）对受体细胞无害）对受体细胞无害质粒、质粒、噬菌体衍生物、动植物病毒等噬菌体衍生物、动植物病毒等最常用的质粒最常用的质粒大肠杆菌的质粒大肠杆菌的质粒试分析其作为载体的优点？试分析其作为载体的优点？质粒是一种裸质粒是一种裸露的、结构简露的、结构简单独立于细菌单独立于细菌染色体之外、染色体之外、具有自我复制具有自我复制能力的双链环能力的双链环状状DNA分子。分子。1 1、关于限制酶说法中，正确的是（、关于限制酶说法中，正确的是（）A A限制酶是一种酶，只识别限制酶是一种酶，只识别GAATTCGAATTC碱碱 基序列基序列B BEcoRIEcoRI切割的是切割的是GAGA

7、之间的氢键之间的氢键C C限制酶一般不切割自身的限制酶一般不切割自身的DNADNA分子，分子，只切割外源只切割外源DNADNAD D限制酶只存在于原核生物中限制酶只存在于原核生物中课堂反馈课堂反馈C2.（多选）（多选）有关基因工程的叙述中，错有关基因工程的叙述中，错误的是误的是 （）A A、基因工程技术能定向地改造生物的、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种遗传性状，培育生物新品种B B、重组、重组DNADNA的形成在细胞内完成的形成在细胞内完成C C、目的基因须由运载体导入受体细胞、目的基因须由运载体导入受体细胞D D、质粒都可作为运载体、质粒都可作为运载体B D下课了!什么叫磷酸二酯键？PPGA