害虫抗药性原理课件.ppt

1、第四章第四章 抗药性原理抗药性原理 迄今至少有迄今至少有500多种昆虫及螨、多种昆虫及螨、150多种植物病多种植物病原菌、原菌、180多种杂草生物型产生了抗药性。多种杂草生物型产生了抗药性。了解有害生物抗药性形成的机理及抗药性治理了解有害生物抗药性形成的机理及抗药性治理的策略，对于正确合理地使用农药及研制新农药都的策略，对于正确合理地使用农药及研制新农药都有重要意义。有重要意义。.害虫抗药性害虫抗药性病原菌抗药性病原菌抗药性杂草抗药性杂草抗药性第四章第四章 抗药性原理抗药性原理.一、害虫抗药性的概念和定义一、害虫抗药性的概念和定义二、害虫抗药性的发展概况二、害虫抗药性的发展概况三、我国农业害虫

2、抗药性现状三、我国农业害虫抗药性现状四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性的形成五、影响抗性发展的因子五、影响抗性发展的因子六、害虫抗药性治理六、害虫抗药性治理.一、害虫抗药性的概念和定义一、害虫抗药性的概念和定义1.定义定义 世界卫生组织（世界卫生组织（WHO）：）：昆虫具有耐受杀死正常种群大部昆虫具有耐受杀死正常种群大部分个体的药量的能力在其种群中发展起来的现象分个体的药量的能力在其种群中发展起来的现象。Sawicki：抗药性是指害虫能够降低田间防效的一种反应，抗药性是指害虫能够降低田间防效的一种反应，这是对毒物选择作出的一种遗传上的改变。这是对毒物选择作出的一种遗传上的改变。其特点是：（其特

3、点是：（1）抗药性是对有害生物群体而言的）抗药性是对有害生物群体而言的（种群（种群性）性）；（；（2）是针对某种特定的药剂而作出的反应）是针对某种特定的药剂而作出的反应（特定性）（特定性）；（3）是药剂选择的结果）是药剂选择的结果（选择性）（选择性）；（；（4）是可以在群体中遗传）是可以在群体中遗传的的（可遗传性）（可遗传性）；（；（5）是相对于敏感种群或正常种群而言的）是相对于敏感种群或正常种群而言的（相对性）（相对性）。此外，应注意不要将。此外，应注意不要将“抗药性抗药性”和和“自然耐药性自然耐药性”相混淆。相混淆。.2.几个基本概念几个基本概念 自然耐药性自然耐药性(natural re

4、sistance)：指一种昆虫在不同发育阶段、：指一种昆虫在不同发育阶段、不同生理状态及所处的环境条件的变化对药剂产生不同的耐药力。不同生理状态及所处的环境条件的变化对药剂产生不同的耐药力。也叫自然抗性。也叫自然抗性。交互抗性（交互抗性（cross resistance）：昆虫的一个品系由于相同抗：昆虫的一个品系由于相同抗性机理或相似作用机理或类似化学结构，对于选择药剂以外的其性机理或相似作用机理或类似化学结构，对于选择药剂以外的其他他从未使用过的从未使用过的一种药剂或一类药剂也产生抗药性的现象。一种药剂或一类药剂也产生抗药性的现象。负交互抗性负交互抗性(negative resistance

5、)：指昆虫对一种杀虫剂产生：指昆虫对一种杀虫剂产生抗性后，反而对另一种药剂变的抗性后，反而对另一种药剂变的更为敏感更为敏感的现象。的现象。一、害虫抗药性的概念和定义一、害虫抗药性的概念和定义.表 6.1 负交互抗性的昆虫和杀虫剂 虫 种 负交互的杀虫剂 N丙基氨基甲酸酯、拟除虫菊酯、残杀威和丙虫磷 抗有机磷和氨基甲酸酯的黑尾叶蝉 西维因和丙虫磷 抗马拉硫磷褐稻虱 杀灭菊酯 抗敌百虫淡色库蚊 拟除虫菊酯 抗马拉硫磷灰稻虱 杀灭菊酯 抗有机磷二点叶螨 杀灭菊酯 抗 DDT 果蝇 硫脲 抗有机磷二点叶螨 抗螨脒 抗有机磷二点叶螨 杀虫脒 .多抗性多抗性(multiple resistance)：昆虫

6、的一个品系由于存在：昆虫的一个品系由于存在多种不同的抗性基因或等位基因，能对几种或几类药剂都多种不同的抗性基因或等位基因，能对几种或几类药剂都产生抗性。产生抗性。选择性选择性：指不同昆虫对药剂敏感性的差异。：指不同昆虫对药剂敏感性的差异。抗性倍数（抗性倍数（R/S）：R的的LD50（LC50）/S的的LD50（LC50），如果），如果5，轻度抗性；，轻度抗性；10，明显抗药性。，明显抗药性。一、害虫抗药性的概念和定义一、害虫抗药性的概念和定义.二、害虫抗药性的发展概况二、害虫抗药性的发展概况表表 6.2 6.2 节肢动物对一种和几种药剂产生抗性的情况（节肢动物对一种和几种药剂产生抗性的情况（1

7、980198019861986）年份 种类数 年份 种类数 1908 1 1965 185 1928 5 1967 224 1938 7 1975 224 1948 14 1975 364 1954 25 1977 392 1957 76 1980 432 1960 137 1984 447 1963 157 1986 500 .二、害虫抗药性的发展概况二、害虫抗药性的发展概况 447 447种抗性节肢动物中，种抗性节肢动物中，59%59%是重要的农业害虫是重要的农业害虫(264(264种种)，38%38%是重要的卫生害虫是重要的卫生害虫(171(171种种)，3%3%是寄生性或捕食性天敌是寄

8、生性或捕食性天敌(12(12种种)。.二、害虫抗药性的发展概况二、害虫抗药性的发展概况.三、我国农业害虫抗药性现状三、我国农业害虫抗药性现状 抗性已遍及粮、棉、茶、菜、果。抗性已遍及粮、棉、茶、菜、果。我国蔬菜上抗性水平较高的害虫主要有：小菜蛾、甜菜夜蛾、我国蔬菜上抗性水平较高的害虫主要有：小菜蛾、甜菜夜蛾、菜青虫、斜纹夜蛾、菜蚜、棉铃虫、烟青虫、盲蝽蟓、温室白菜青虫、斜纹夜蛾、菜蚜、棉铃虫、烟青虫、盲蝽蟓、温室白粉虱等。粉虱等。小菜蛾：小菜蛾：有机氯、有机磷、拟除菊酯类。有机氯、有机磷、拟除菊酯类。19951995年，速灭杀丁年，速灭杀丁 1646.81646.8倍；亚胺硫磷倍；亚胺硫磷 5

9、12.2512.2倍倍 19921992年，年，BT 35BT 35倍；抑太保倍；抑太保70.970.9倍；阿维菌素倍；阿维菌素30.330.3倍倍温室白粉虱：温室白粉虱：1988年，敌杀死年，敌杀死6289.1；速灭杀丁速灭杀丁1941.7；马拉硫磷马拉硫磷66.2倍；倍；斜纹夜蛾：斜纹夜蛾：有机氯、有机磷、拟除菊酯类、有机氯、有机磷、拟除菊酯类、BTBT等等 19981998年，菊酯类年，菊酯类10010027002700倍倍 对对BTBT的抗性比家蚕高的抗性比家蚕高25002500倍倍.四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性的形成1.抗药性的形成抗药性的形成 昆虫对杀虫剂产生抗性的问题，实质

10、上是一个种群遗传学的昆虫对杀虫剂产生抗性的问题，实质上是一个种群遗传学的问题。问题。选择学说选择学说 认为抗药性是一种前适应现象（认为抗药性是一种前适应现象（preadaptive phenomenon），完全取决于杀虫剂的选择作用。），完全取决于杀虫剂的选择作用。诱导变异学说诱导变异学说 认为昆虫种群中原来不存在抗性基因。而是认为昆虫种群中原来不存在抗性基因。而是由于杀虫剂的直接作用，使昆虫种群内某些个体发生突变，产生由于杀虫剂的直接作用，使昆虫种群内某些个体发生突变，产生了抗性基因。了抗性基因。药剂不是选择者而是诱导者药剂不是选择者而是诱导者。后适应现象。后适应现象。.基因重复学说：基因重

11、复学说：即基因复增学说即基因复增学说gene duplication theory。它与一般的选择学说不同，虽然它承认本来就有抗性基因的存它与一般的选择学说不同，虽然它承认本来就有抗性基因的存在，但它认为某些因子（如杀虫剂等）引起了基因重复，即一在，但它认为某些因子（如杀虫剂等）引起了基因重复，即一个抗性基因拷贝为多个抗性基因，这是抗性进化中的一种普遍个抗性基因拷贝为多个抗性基因，这是抗性进化中的一种普遍现象。现象。染色体重组学说：染色体重组学说：因染色体易位和倒位产生改变的酶或蛋因染色体易位和倒位产生改变的酶或蛋白质，引起抗性的进化。白质，引起抗性的进化。抗性的形成实际上是一种进化现象，至少

12、包括3个因素：（1）变异。（2）遗传。（3）选择。选择起了定向的作用，即使基因频率向一个方向发展，逐代累加。四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性的形成1.抗药性的形成抗药性的形成.抗性是杀虫剂选择的结果。产生抗性的原因有多种，按其由抗性是杀虫剂选择的结果。产生抗性的原因有多种，按其由遗传引起的种群特征的变化，或形态、生理生化特性的变化，可遗传引起的种群特征的变化，或形态、生理生化特性的变化，可分为行为抗性和生理生化抗性。分为行为抗性和生理生化抗性。四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性的形成2.抗药性形成的机制抗药性形成的机制.2.1 生理生化抗性生理生化抗性 生理抗性：生理抗性：包括表皮和神经膜穿

13、透作用降低，脂肪体等惰性包括表皮和神经膜穿透作用降低，脂肪体等惰性部位贮存杀虫剂的能力增强、排泄作用增强，围食膜特别发达，部位贮存杀虫剂的能力增强、排泄作用增强，围食膜特别发达，或能引起呕吐、或分泌大量水分而引起水泻，加速将药剂排出体或能引起呕吐、或分泌大量水分而引起水泻，加速将药剂排出体外等。外等。生化抗性：生化抗性：主要是指由解毒作用增强、代谢加速而引起的，主要是指由解毒作用增强、代谢加速而引起的，故又称为代谢抗性。故又称为代谢抗性。四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性的形成2.抗药性形成的机制抗药性形成的机制.简单地说，昆虫对各类杀虫剂涉及的主要生理生化抗性机简单地说，昆虫对各类杀虫剂涉及

14、的主要生理生化抗性机理有以下几个方面：理有以下几个方面：（1）穿透速率降低。）穿透速率降低。包括两种类型：一是杀虫剂穿透昆虫表包括两种类型：一是杀虫剂穿透昆虫表皮的速率降低，二是杀虫剂对神经系统穿透作用降低；皮的速率降低，二是杀虫剂对神经系统穿透作用降低；（2）代谢抗性）代谢抗性：涉及到的酶有，细胞色素：涉及到的酶有，细胞色素P450酶系、水解酶酶系、水解酶（主要是酯酶）、谷胱甘肽转移酶、（主要是酯酶）、谷胱甘肽转移酶、DDT-脱氯化氢酶等；脱氯化氢酶等；（3）靶标部位敏感度降低）靶标部位敏感度降低等。等。四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性的形成2.抗药性形成的机制抗药性形成的机制2.1 生理

15、生化抗性生理生化抗性.Forgash Forgash等（等（19621962）首先提出，一个多抗性的家蝇品系对二）首先提出，一个多抗性的家蝇品系对二嗪农的穿透率降低。狄氏剂和嗪农的穿透率降低。狄氏剂和DDTDDT在抗性家蝇中的穿透作用降低。在抗性家蝇中的穿透作用降低。并命名为并命名为ORGANOTIN-rORGANOTIN-r，其，其突变基因命名为突变基因命名为tintin(或或pen)pen)。表皮穿透降低实际上是表皮穿透降低实际上是穿透常数降低穿透常数降低，即杀虫剂穿透昆虫，即杀虫剂穿透昆虫表皮的速率降低，而延缓杀虫剂到达靶标部位的时间。在这一表皮的速率降低，而延缓杀虫剂到达靶标部位的时间

16、。在这一时期内使抗性昆虫有更多的机会来降解这这些化合物。时期内使抗性昆虫有更多的机会来降解这这些化合物。表皮穿透降低对杀虫剂无专一性，已报道的杀虫剂有表皮穿透降低对杀虫剂无专一性，已报道的杀虫剂有DDTDDT、狄氏剂、对硫磷、西维因、二嗪农、马拉硫鳞、敌百虫、氯硫狄氏剂、对硫磷、西维因、二嗪农、马拉硫鳞、敌百虫、氯硫磷和其它杀虫剂。磷和其它杀虫剂。2.1.1 2.1.1 穿透作用降低穿透作用降低（1）表皮穿透作用降低）表皮穿透作用降低2.1 生理生化抗性生理生化抗性.2.1.1 2.1.1 穿透作用降低穿透作用降低（2）神经系统穿透作用降低）神经系统穿透作用降低2.1 生理生化抗性生理生化抗性

17、.tintin基因，是一个修饰基因，也就是说单独起作用时，对基因，是一个修饰基因，也就是说单独起作用时，对抗性影响不大，但与其它因子，特别是各种代谢基因一起作用抗性影响不大，但与其它因子，特别是各种代谢基因一起作用时，抗性就会显著加强，所以又称时，抗性就会显著加强，所以又称penpen基因为强化基因或增效基基因为强化基因或增效基因。因。穿透作用降低，作为一个抗性因子单独起作用时对抗性影穿透作用降低，作为一个抗性因子单独起作用时对抗性影响较小。但若与其他抗性因子，比如解毒代谢因子互做时，抗响较小。但若与其他抗性因子，比如解毒代谢因子互做时，抗性就会大大加强。性就会大大加强。例如，在抗例如，在抗D

18、DTDDT的家蝇中发现，由于的家蝇中发现，由于MFOMFO活性增高，产生活性增高，产生5050倍的抗性，表皮穿透作用降低，产生倍的抗性，表皮穿透作用降低，产生2 2倍的抗性，那么这倍的抗性，那么这2 2个因个因子共同起作用时，其抗性水平可达子共同起作用时，其抗性水平可达900900倍。倍。2.1.1 2.1.1 穿透作用降低穿透作用降低 2.1 生理生化抗性生理生化抗性.有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的靶标乙酰胆碱酯酶 DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂的主要靶标钠通道 环戊二烯类杀虫剂的靶标GABA受体。2.1.2 2.1.2 作用靶标部位敏感性降低作用靶标部位敏感性降低 2.1 生理生化抗性生理生化抗

19、性四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性的形成2.抗药性形成的机制抗药性形成的机制.AChE AChE的不敏感性主要由AchE变构引起，而AchE的变构则是结构基因的点突变造成的。例如，果蝇中的AChE是由一个独特的位点Ace编码的。Ace中的一个T突变为A将导致AChE的苯丙氨酸（368）突变为酪氨酸后改变了AChE的催化特性，结果降低了对杀虫剂的敏感性。点突变可以发生在不同的部位，从而导致不同的抗性型。从果蝇的田间品系中发现了4种突变型：苯丙氨酸（115）变为丝氨酸；异亮氨酸（199）变为缬氨酸或苏氨酸；甘氨酸（303）变为丙氨酸。一个突变型的AChE中几个点突变的组合不但会导致产生不同的抗性

20、型，而且对抗性有明显的增强作用，即高抗性有可能来自几个低抗性点突变的组合。AChE敏感性下降，除了AChE质的改变，即上述变构AChE外，AChE量的增加即AChE基因表达调控也可能对抗性产生影响。.钠通道钠通道 钠通道的改变，引起对杀虫剂敏感度下降，结果产生钠通道的改变，引起对杀虫剂敏感度下降，结果产生击倒击倒抗性（抗性（Knockdown resistance，简称，简称Kdr），包括抗性水平更高，包括抗性水平更高的超的超Kdr因子。因子。Kdr型抗性通常具有如下的特点：型抗性通常具有如下的特点：（1）Kdr基因是隐性基因，即只有在纯合子状态下才表现抗基因是隐性基因，即只有在纯合子状态下才

21、表现抗性，杂合子状态并不表现抗性；性，杂合子状态并不表现抗性；（2）Kdr基因对基因对DDT和拟除虫菊酯杀虫剂引起神经敏感度降和拟除虫菊酯杀虫剂引起神经敏感度降低；低；（3）对所有拟除虫菊酯和）对所有拟除虫菊酯和DDT都有交互抗性；都有交互抗性；（4）对拟除虫菊酯产生很高的抗性，特别是在有超）对拟除虫菊酯产生很高的抗性，特别是在有超Kdr基因基因存在时，可产生数千倍的抗性。存在时，可产生数千倍的抗性。.Kdr型的分子机理：型的分子机理：神经膜磷脂双分子层的变异；钠通道数量的改变；钠通道质神经膜磷脂双分子层的变异；钠通道数量的改变；钠通道质的改变。的改变。膜上的脂对膜蛋白和酶的结构与功能起重要作

22、用，如果神经膜上的脂对膜蛋白和酶的结构与功能起重要作用，如果神经膜脂蛋白或脂类组成发生变化，或由于脂诱导而造酶的构型发生膜脂蛋白或脂类组成发生变化，或由于脂诱导而造酶的构型发生变化，最后都会导致神经敏感性下降。变化，最后都会导致神经敏感性下降。昆虫对拟除虫菊酯的毒性昆虫对拟除虫菊酯的毒性反应有很大差异的原因可能是由于不同昆虫的神经膜中的脂质比反应有很大差异的原因可能是由于不同昆虫的神经膜中的脂质比例不同而引起的。例不同而引起的。钠通道数量的改变与产生击倒抗性有或无关；钠通道数量的改变与产生击倒抗性有或无关；钠通道钠通道.Kdr的本质是钠通道的变异。的本质是钠通道的变异。通过对敏感和抗性品系中通

23、过对敏感和抗性品系中位于第二染色体上的果蝇钠通道位于第二染色体上的果蝇钠通道Sch等位基因克隆化和测序，等位基因克隆化和测序，发现位于同源结构阈发现位于同源结构阈的的S5和和S6连接片段的一个位点发生了连接片段的一个位点发生了突变，导致敏感品系突变，导致敏感品系Sch序列中序列中1172位的天冬氨酸残基在抗性位的天冬氨酸残基在抗性品系中被天冬酰胺取代，使连接片段失去一个负电荷，此负品系中被天冬酰胺取代，使连接片段失去一个负电荷，此负电荷的丧失是产生电荷的丧失是产生Kdr机制的原因。机制的原因。在拟除虫菊酯抗性烟草夜蛾体内是单个碱基发生了突变在拟除虫菊酯抗性烟草夜蛾体内是单个碱基发生了突变（T到

24、到A），而该突变基因能将亮氨酸改变为组氨酸，从而引），而该突变基因能将亮氨酸改变为组氨酸，从而引起钠通道蛋白改变造成击倒抗性。起钠通道蛋白改变造成击倒抗性。Kdr型的分子机理：型的分子机理：.-氨基丁酸（氨基丁酸（GABA）受体）受体 果蝇对环戊二烯类的抗性是由位于第果蝇对环戊二烯类的抗性是由位于第染色体臂的单个主要染色体臂的单个主要基因（基因（Rdl）控制的。在家蝇中）控制的。在家蝇中Rdl基因位于第基因位于第染色体。染色体。环戊二烯抗药性是由环戊二烯抗药性是由GABAA受体受体-氯离子通道复合体上环戊氯离子通道复合体上环戊二烯和木防己苦毒宁（二烯和木防己苦毒宁（PTX）结合部位敏感度下降所

25、致。）结合部位敏感度下降所致。Ffrench-Constant等首先从野生型对环戊二烯类杀虫剂有高等首先从野生型对环戊二烯类杀虫剂有高抗性的果蝇品系中克隆了环戊二烯抗性基因抗性的果蝇品系中克隆了环戊二烯抗性基因Rdl。在。在Rdl基因基因 中，中，仅发现在仅发现在302位的丙氨酸变为丝氨酸，正是这一突变与环戊二烯位的丙氨酸变为丝氨酸，正是这一突变与环戊二烯/PTX结合部位的不敏感度有关。结合部位的不敏感度有关。.昆虫在杀虫剂的选择压力下，通过增强体内解毒酶的活力和昆虫在杀虫剂的选择压力下，通过增强体内解毒酶的活力和提高酶蛋白与杀虫剂分子的亲和性以及加强各种形式的酶促结合提高酶蛋白与杀虫剂分子的

26、亲和性以及加强各种形式的酶促结合等方式，加速对进入昆虫体内的杀虫剂的解毒代谢作用而使昆虫等方式，加速对进入昆虫体内的杀虫剂的解毒代谢作用而使昆虫表现出的抗药性，表现出的抗药性，就是就是代谢抗性代谢抗性，简单地说就是，简单地说就是解毒能力增强解毒能力增强。参与代谢作用并与抗性有关的酶系主要有细胞色素参与代谢作用并与抗性有关的酶系主要有细胞色素P450酶酶系、谷胱甘肽转移酶和水解酶（主要是脂族酯酶、系、谷胱甘肽转移酶和水解酶（主要是脂族酯酶、DDT-脱氯化脱氯化氢酶等）等。氢酶等）等。2.1.3 2.1.3 代谢作用增强代谢作用增强2.1 生理生化抗性生理生化抗性四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性

27、的形成2.抗药性形成的机制抗药性形成的机制.细胞色素细胞色素P450酶系与抗药性酶系与抗药性 P450 P450酶系也叫多功能氧化酶、细胞色素酶系也叫多功能氧化酶、细胞色素P450P450酶系、加单氧酶系、加单氧酶系、芳香烃羟化酶和药物代谢酶等。酶系、芳香烃羟化酶和药物代谢酶等。细胞色素细胞色素P450P450的化学本质是蛋白质，它不是一种蛋白而是的化学本质是蛋白质，它不是一种蛋白而是分子质量在分子质量在46-60Kda46-60Kda（黄俊勇和冷欣夫，（黄俊勇和冷欣夫，19911991）的结构类似而）的结构类似而又不尽相同，性质类似而又有差异的一族蛋白质（唐振华，又不尽相同，性质类似而又有差

28、异的一族蛋白质（唐振华，1990a1990a）。主要包括两类细胞色素：细胞色素）。主要包括两类细胞色素：细胞色素P P450450和细胞色素和细胞色素b b5 5；二种黄素蛋白，即二种黄素蛋白，即NADPH-NADPH-细胞细胞P450P450还原酶和还原酶和NADH-NADH-细胞色素细胞色素b b5 5还还原酶；还含有磷脂等。原酶；还含有磷脂等。P450P450蛋白种类的多样性及其底物的重叠性使蛋白种类的多样性及其底物的重叠性使P450P450酶系可以酶系可以催化多种类型的反应，不仅对许多外来物质如杀虫剂及其它环催化多种类型的反应，不仅对许多外来物质如杀虫剂及其它环境有毒化合物具有代谢作用

29、，还参与一些重要的生理功能内源境有毒化合物具有代谢作用，还参与一些重要的生理功能内源性物质如激素、脂肪酸的代谢，在生物体中起十分重要的作用。性物质如激素、脂肪酸的代谢，在生物体中起十分重要的作用。.细胞色素细胞色素P450酶系与抗药性酶系与抗药性 P450酶系对杀虫剂代谢作用的增强是大多数重要害虫对杀酶系对杀虫剂代谢作用的增强是大多数重要害虫对杀虫剂产生高水平抗性和交互抗性的主要原因虫剂产生高水平抗性和交互抗性的主要原因（Scott,1996）。）。其其直接证据来自直接证据来自MFO的离体测定的离体测定，主要是通过：，主要是通过：a 杀虫剂氧化代谢的直接测定；杀虫剂氧化代谢的直接测定；b 模型

30、底物氧化代谢的测定；模型底物氧化代谢的测定；c 对对MFO酶系中酶系中P450水平的测定；水平的测定；d P450光谱特征的变化。光谱特征的变化。研究结果表明，抗性的发展普遍与微粒体氧化作用增强有关。研究结果表明，抗性的发展普遍与微粒体氧化作用增强有关。.其其间接证据间接证据是通过研究一些增效剂的作用发现的。是通过研究一些增效剂的作用发现的。增效醚增效醚（pbo）是）是MFO的专一性抑制剂的专一性抑制剂，并对抗性品系的增效作用大，并对抗性品系的增效作用大于敏感品系。于敏感品系。利用利用pbo的增效作用来判断的增效作用来判断MFO是否参与害虫抗是否参与害虫抗药性形成，是研究抗药性性生理生化机制的

31、常用工具之一药性形成，是研究抗药性性生理生化机制的常用工具之一。昆虫抗药性除与昆虫抗药性除与MFO中的细胞色素中的细胞色素P450水平有关外，还水平有关外，还和其他组分，特别是和其他组分，特别是P450还原酶和细胞色素还原酶和细胞色素b5水平有关。水平有关。MFO解毒能力增强解毒能力增强：P450量的增加，量的增加，P450质的改变。质的改变。另外，另外，MFO活性增强可能也是造成交互抗性的原因之一。活性增强可能也是造成交互抗性的原因之一。细胞色素细胞色素P450酶系与抗药性酶系与抗药性.酯酶与昆虫抗药性酯酶与昆虫抗药性 酯酶是能够水解酯键的一类水解代谢酶。酯酶是能够水解酯键的一类水解代谢酶。

32、昆虫中的酯酶主要是昆虫中的酯酶主要是B类酯酶类酯酶，包括胆碱酯酶、磷酸酯酶和，包括胆碱酯酶、磷酸酯酶和羧酸酯酶。羧酸酯酶。与抗性有关的主要是羧酸酯酶。与抗性有关的主要是羧酸酯酶。羧酸酯酶实际上是由许多同功酶组成的。例如棉铃虫幼虫体羧酸酯酶实际上是由许多同功酶组成的。例如棉铃虫幼虫体内有内有10个羧酸酯酶同功酶。个羧酸酯酶同功酶。羧酸酯酶解毒能力的增强在某些昆虫羧酸酯酶解毒能力的增强在某些昆虫对有机磷杀虫剂的抗对有机磷杀虫剂的抗性中起重要作用性中起重要作用，对，对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性中起一定的作用拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性中起一定的作用，而对而对氨基甲酸酯类杀虫剂氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性主要是

33、的抗性主要是MFO的作用，羧酸酯酶的作用，羧酸酯酶的的作用很小作用很小。.酯酶活力增强主要有两个方面的原因：一是质的改变，酯酶活力增强主要有两个方面的原因：一是质的改变，即某一个或某一些同功酶发生了变构；二是量的改变，即酶即某一个或某一些同功酶发生了变构；二是量的改变，即酶量的增加。量的增加。酯酶量的增加又有三种途径：一是基因扩增；二是基因酯酶量的增加又有三种途径：一是基因扩增；二是基因表达调控的改变；三是这两个途径兼而有之。表达调控的改变；三是这两个途径兼而有之。酯酶在昆虫对杀虫剂的抗药性机制中起两方面的作用：酯酶在昆虫对杀虫剂的抗药性机制中起两方面的作用：一方面是催化杀虫剂酯键断裂，代谢解

34、毒；另一方面是作为一方面是催化杀虫剂酯键断裂，代谢解毒；另一方面是作为结合蛋白和进入体内的杀虫剂结合，从而减少到达作用靶标结合蛋白和进入体内的杀虫剂结合，从而减少到达作用靶标的量。的量。酯酶与昆虫抗药性酯酶与昆虫抗药性.谷胱甘肽转移酶（谷胱甘肽转移酶（GSTs）与昆虫抗药性）与昆虫抗药性 催化亲电子物质与内源的还原性谷胱甘肽（催化亲电子物质与内源的还原性谷胱甘肽（GSH）反应（主）反应（主要是将底物中的某个基团转移到要是将底物中的某个基团转移到GSH的硫原子上）的一类酶称为的硫原子上）的一类酶称为谷胱甘肽谷胱甘肽S转移酶转移酶，简称，简称GSTs。依所转移的基团种类将。依所转移的基团种类将GS

35、Ts分为分为5类：烷基转移酶、芳基转移酶、芳烷基转移酶、链烯转移酶和类：烷基转移酶、芳基转移酶、芳烷基转移酶、链烯转移酶和环氧化物转移酶。环氧化物转移酶。在昆虫抗性机制中主要涉及到烷基转移酶和芳基转移酶在昆虫抗性机制中主要涉及到烷基转移酶和芳基转移酶。研究表明，研究表明，GSTs代谢能力增强是家蝇对有机磷的抗性机制之代谢能力增强是家蝇对有机磷的抗性机制之一一。如抗二嗪农的家蝇品系较敏感酶系的。如抗二嗪农的家蝇品系较敏感酶系的GSTs代谢强度高代谢强度高5.2倍。倍。此外，谷胱甘肽（此外，谷胱甘肽（GSH）是）是GSTs催化结合反应的辅助因子，催化结合反应的辅助因子，GSH的含量对的含量对GST

36、s的催化有很大影响。已有实验证明某些昆虫的催化有很大影响。已有实验证明某些昆虫的抗性与的抗性与GSH含量增加有关。含量增加有关。GSTs结合杀虫剂后，增强了杀虫剂分子的水溶性，因此有利结合杀虫剂后，增强了杀虫剂分子的水溶性，因此有利于被害虫排出体外，从而使杀虫剂解毒于被害虫排出体外，从而使杀虫剂解毒。.DDT-脱氯化氢酶脱氯化氢酶及硝基还原酶及硝基还原酶 昆虫体内的昆虫体内的DDT在在DDT-脱氯化氢酶的作用下，将脱氯化氢酶的作用下，将DDT转转化为无毒的化为无毒的DDE。DDT-脱氯化氢酶有称为脱氯化氢酶有称为DDT酶，存在于各酶，存在于各种组织，包括化感器，保护神经系统免受积累过多的种组织

37、，包括化感器，保护神经系统免受积累过多的DDT。大。大量的研究表明昆虫对量的研究表明昆虫对DDT的抗性程度由于的抗性程度由于DDT酶活性存在正相酶活性存在正相关性。关性。有机磷杀虫剂中有硝基结构的化合物如对硫磷、杀螟硫磷有机磷杀虫剂中有硝基结构的化合物如对硫磷、杀螟硫磷及苯硫磷等，可以被硝基还原酶代谢为无毒化合物。及苯硫磷等，可以被硝基还原酶代谢为无毒化合物。总之，代谢抗性的化学本质是杀虫剂代谢活性的增强，归总之，代谢抗性的化学本质是杀虫剂代谢活性的增强，归因于相关酶在数量或质量上的改变，可能涉及的机制包括基因因于相关酶在数量或质量上的改变，可能涉及的机制包括基因扩增、酶基因突变以及基因转录的

38、增强等。扩增、酶基因突变以及基因转录的增强等。.2.2 行为抗性行为抗性 行为抗性就是指在药剂的选择压力下，那些有利于昆虫生存的行为得以保存和发展，从而使昆虫种群中具有这些行为的个体增多。四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性的形成2.抗药性形成的机制抗药性形成的机制.昆虫抗药性机理昆虫抗药性机理 加速代谢加速代谢（解毒酶）（解毒酶）杀杀 虫虫 剂剂 昆昆 虫虫 选选 择择 行为抗性行为抗性 生理抗性生理抗性 代谢抗性代谢抗性 穿透作用穿透作用降低降低 活化活化 惰性部位惰性部位贮存贮存 靶标部位敏靶标部位敏感度降低感度降低 AchE 敏感敏感度降低度降低 神经敏感神经敏感度降低度降低 加速排泄加

39、速排泄 水水 解解 Na+通道敏通道敏感度降低感度降低GABA受体受体敏感度降低敏感度降低.必须指出，某一种群对某一杀虫剂的抗性，其机制往往必须指出，某一种群对某一杀虫剂的抗性，其机制往往不是单一的，即使是酶活性提高，也不一定就是某种酶活性不是单一的，即使是酶活性提高，也不一定就是某种酶活性提高，可能是几种解毒酶活性都提高的结果。提高，可能是几种解毒酶活性都提高的结果。四、害虫抗药性的形成四、害虫抗药性的形成.五、影响抗性发展的因子五、影响抗性发展的因子遗传学因子遗传学因子生物学因子生物学因子操作操作 因子因子.5.1 遗传学因子遗传学因子 (1)原始抗性基因频率：原始抗性基因频率：决定抗性速

40、度的主要因素决定抗性速度的主要因素 (2)抗性基因是显性还是隐性抗性基因是显性还是隐性一是涉及到抗性形成的速度问题；二是涉及到抗性种群的纯度一是涉及到抗性形成的速度问题；二是涉及到抗性种群的纯度。（3）抗性基因之间的相互作用）抗性基因之间的相互作用 抗性若是单基因，则难以形成高抗性。二个抗性基因结合时抗性若是单基因，则难以形成高抗性。二个抗性基因结合时对抗性的影响是倍增，而不是简单的相加作用。对抗性的影响是倍增，而不是简单的相加作用。此外，抗性基因的相对适合度、抗性基因的共适应及抗性基此外，抗性基因的相对适合度、抗性基因的共适应及抗性基因在染色体上的位置等遗传学因子也对抗性的发展影响很大。因在

41、染色体上的位置等遗传学因子也对抗性的发展影响很大。.5.2 生物学因子生物学因子昆虫世代周期昆虫世代周期繁殖方式繁殖方式昆虫行为昆虫行为.5.3 操作因子操作因子 操作因子包括人们操作和控制的因子。主要指选择压的强度和范围，包括施药的剂量、次数、范围等。另外，长期使用作用机理相近的或结构相近的药剂容易产生抗药性；对同一种药剂，使用面积大或空间范围大的也容易产生抗药性；防治指标低的较防治指标高的容易产生抗药性；在田间施药时，要求的防效偏高而致使用药量大的易产生抗药性；长期单一使用的药剂也易产生抗药性。这些操作因子均是延长药剂对害虫的选择时间，从而增大了选择压，造成抗药性的产生。上述三种因子并不是独立起作用的，而是相互影响的。上述三种因子并不是独立起作用的，而是相互影响的。.