(实验六)果蝇双因子.ppt

1、实验五实验五 实验六实验六 果蝇的双因子实验果蝇的双因子实验（2学时）一、教学基本要求一、教学基本要求 1、掌握实验果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。2、正确理解分离定律的实质。二、教学内容二、教学内容 目的和要求 通过这一实验要求学生正确理解分离定律的实质，掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。实验原理实验原理 自由组合定律的实质是基因的分离是独立的，而在配子中非等位基因自由组合，产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型，比例为9：3：3：1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状：长翅与残翅、黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅

2、灰体残翅黑檀体的双因子杂交实验，旨在验证自由组合定律 材料和方法 黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）的突变品系黑檀体突变型，ebony（e）位于第三染色体 残翅突变型，vestigial（vg）位于第二染色体 双筒解剖镜，大指管，麻醉瓶，磁板，海绵板，解剖针，毛笔，镊子。红糖，麸皮，琼脂，干酵母等。实验说明 1.性状特征：黑檀体果蝇（e）的体色乌黑，与黑体（b）相似，但是它们是不同染色体上基因所决定。与（e）相对应的野生型性状是灰体。（e）的座位是第3染色体70.7。残翅果蝇（vg）的双翅几乎没有，只有少量残痕，与（vg）相对应的野生型是长翅。（vg）的座位是第二染色体

3、67.0。2.交配方式：由于（e）和（vg）是在不同对的染色体上，两对因子杂种在形成生殖细胞时会产生四种不同类型配子，比例为1111，如子一代个体相互交配，则通过、配子相互结合，在子二代可得到16种组合，其中9种灰长，3种黑长，3种灰残，1种黑残。如下图所示:整理后：整理后：1+1+，2+e+,2+vg,4+e+vg,2+e+,2+vg,4+e+vg,共共9 9种种+1+vgvg,2+evgvg,1+vgvg,2+evgvg,共共3 3种种+vg+vg1ee+,2ee+vg,1ee+,2ee+vg,共共3 3种种e+e+1eevgvg,1eevgvg,共共1e vg1e vg所以表型比例是所以

4、表型比例是9 9331331。若用反交：即若用反交：即vg vg+e e其结果应该与前其结果应该与前面正交相同，但因残翅果蝇不能飞，只能爬行，所面正交相同，但因残翅果蝇不能飞，只能爬行，所以作雌体亲本比较好，若作雄亲本，得到的子代将以作雌体亲本比较好，若作雄亲本，得到的子代将减少很多，因而在本例中反交比正交好减少很多，因而在本例中反交比正交好 实验步骤 1收集收集雌果蝇品系的处女蝇。雌果蝇品系的处女蝇。2.2.准备好培养基，把已准备好培养基，把已麻醉麻醉的残翅、的残翅、果蝇和黑檀体、果蝇，按正、反交果蝇和黑檀体、果蝇，按正、反交方式，分别放入不同培养瓶内，进行杂方式，分别放入不同培养瓶内，进行

5、杂交，贴好标签，标签形式如下：交，贴好标签，标签形式如下：36-7天后，见到有天后，见到有F1幼虫出现，可除去亲本（除幼虫出现，可除去亲本（除干净！）。干净！）。4再过再过3-4天，检查天，检查F1成蝇的性状，应该是灰体、长成蝇的性状，应该是灰体、长翅（正、反交相同）。若性状不符，表明实验有差错，翅（正、反交相同）。若性状不符，表明实验有差错，不能再进行下去。发生差错的原因可能是亲本雌果蝇不能再进行下去。发生差错的原因可能是亲本雌果蝇不是处女蝇：不是处女蝇：F1幼虫出现后亲本未倒干净；杂交时雄幼虫出现后亲本未倒干净；杂交时雄蝇选择有误；以及亲本原种不线纯等等。蝇选择有误；以及亲本原种不线纯等等

6、。5按原来的正、反交各选按原来的正、反交各选5-6对对F1成蝇（成蝇（、），），换新的培养瓶，继续饲养（此时不需要处女蝇）换新的培养瓶，继续饲养（此时不需要处女蝇）66-7天，天，F2代成蝇出现，麻醉后（可以深度麻醉）代成蝇出现，麻醉后（可以深度麻醉）倒在白瓷板上，进行倒在白瓷板上，进行统计统计，每隔两天统计一次，连续，每隔两天统计一次，连续统计统计6-7天（当天（当F3出现就失去意义了）。出现就失去意义了）。实验结果 自由度自由度=4-1=3=4-1=3若若P P 0.050.05，说明实验符合二对因子自由组合的，说明实验符合二对因子自由组合的假说。假说。若若P 0.05，说明这个实验数据不能用二对因子的，说明这个实验数据不能用二对因子的自由组合解释，也就是否定了原来的假设，即不自由组合解释，也就是否定了原来的假设，即不能认为是自由组合能认为是自由组合。作作 业业 根据统计结果做根据统计结果做2检验，并对检验结果做解释。检验，并对检验结果做解释。实实验验原原理理 实验仪器 麻醉瓶 实验操作 倒倒亲亲本本实验操作麻麻醉醉实验操作记记数数