医学精品课件：肿瘤病理诊断.ppt

1、肿瘤病肿瘤病理学诊理学诊断断 吉林大学中日联谊医院吉林大学中日联谊医院/吉林大学白求恩第三医院吉林大学白求恩第三医院 王丽萍王丽萍 15843127717 15843127717病理科病理科 主要内容主要内容第一节第一节 概述概述第二节第二节 肿瘤的病理学诊断分类肿瘤的病理学诊断分类第三节第三节 肿瘤病理学诊断常用技术及应用肿瘤病理学诊断常用技术及应用第四节第四节 肿瘤病理学诊断临床应用范例肿瘤病理学诊断临床应用范例一、肿瘤病理学诊断发展历程一、肿瘤病理学诊断发展历程二、病理学诊断在肿瘤诊断中作用二、病理学诊断在肿瘤诊断中作用三、病理学诊断局限性三、病理学诊断局限性 四、肿瘤的命名及分类四、肿

2、瘤的命名及分类五、肿瘤的病理分级和分期五、肿瘤的病理分级和分期第一节第一节 概概 述述一、肿瘤病理学诊断发展历程一、肿瘤病理学诊断发展历程解剖学解剖学意大利解剖学家意大利解剖学家 1818世纪中叶世纪中叶 器官（大体）病理学器官（大体）病理学 德国病理学家德国病理学家 1919世纪中叶世纪中叶 组织（细胞）病理学组织（细胞）病理学 德国物理学家德国物理学家 2020世纪世纪3030年代年代 超微结构病理学超微结构病理学 奥地利医学家奥地利医学家 2020世纪世纪5050年代年代 免疫病理学免疫病理学 分子生物学分子生物学 2020世纪世纪7070年代年代 分子病理学分子病理学随着医学技术的发展

3、，现在肿瘤病理学诊断已趋向随着医学技术的发展，现在肿瘤病理学诊断已趋向于于MICMMICM的综合诊断的综合诊断-形态学（形态学（morphology,Mmorphology,M）免疫学（免疫学（immunologyimmunology,I,I）细胞遗传学（细胞遗传学（cytogenetics,Ccytogenetics,C）病因学诊断的前提病因学诊断的前提 分子生物学（分子生物学（Molecule Molecule biologybiology，M M）-肿瘤病理学发展二、病理诊断在肿瘤诊断中作用二、病理诊断在肿瘤诊断中作用主要作用有：主要作用有：明确疾病性质；明确疾病性质；判断肿瘤来源；判断

4、肿瘤来源；对肿瘤进行组织学分类、分型；对肿瘤进行组织学分类、分型；评价肿瘤恶性程度或分化程度；评价肿瘤恶性程度或分化程度；确定术后肿瘤病理分期；确定术后肿瘤病理分期；确定有无肿瘤复发、转移；确定有无肿瘤复发、转移；为个体化治疗及靶向药物选择提供依据；为个体化治疗及靶向药物选择提供依据；为为肿瘤患者提供预后信息肿瘤患者提供预后信息；常规病理诊断流程常规病理诊断流程病理诊断工作流程病理诊断工作流程手术切除或活检标本接收、固定取材、包埋切片、染色、封片组织学阅片免疫组化/分子生物学综合诊断外科或肿瘤医生医生/技术人员医生/技术人员技术人员病理医生医生和技术人员病理医生技术相关因素人员相关因素病理诊断

5、局限性正确的病理诊断是病理医生和病理技术员集体劳动和智慧的结晶正确的病理诊断是病理医生和病理技术员集体劳动和智慧的结晶影响病理诊断的因素影响病理诊断的因素三、病理诊断局限性三、病理诊断局限性技术方面技术方面：标本固定正确及时；组织处理流程合理；制片质标本固定正确及时；组织处理流程合理；制片质量达到要求；特染及免疫组化操作规范量达到要求；特染及免疫组化操作规范人员方面人员方面：标本获取（临床医生、病理医生）适当；病理医：标本获取（临床医生、病理医生）适当；病理医生的经验和水平等使得病理诊断有生的经验和水平等使得病理诊断有主观性和经验性主观性和经验性疾病自身：疾病自身：疾病是发展变化的，有的疾病只

6、有在一定阶段才疾病是发展变化的，有的疾病只有在一定阶段才显示具有诊断意义的特征性改变，而镜下改变则是静止于某显示具有诊断意义的特征性改变，而镜下改变则是静止于某一时刻的画面，只反映疾病某一阶段的病理变化，有一时刻的画面，只反映疾病某一阶段的病理变化，有局限性局限性。检查自身：检查自身：病理检查属于抽样检查（送检病理检查属于抽样检查（送检/取材取材/切片）有时切片）有时不能代表整个病变（穿刺不能代表整个病变（穿刺/镜检组织等），具有镜检组织等），具有片面性片面性准确病理诊断需要详细病史和临床资料，有时还需结合免疫组准确病理诊断需要详细病史和临床资料，有时还需结合免疫组化、超微结构、细胞遗传学和分

7、子生物学特征等。化、超微结构、细胞遗传学和分子生物学特征等。暂时不能明确诊断的需要随访观察。暂时不能明确诊断的需要随访观察。1、肿瘤的概念致瘤因素克隆性增生肿瘤肿瘤正常细胞正常细胞局部组织、细胞在致瘤因子作用下，在基因水平上失去正常调局部组织、细胞在致瘤因子作用下，在基因水平上失去正常调控而致相对无限制增生，形成肿块控而致相对无限制增生，形成肿块特点：特点：异常增生新生物，相对无限制性生长，失去成熟分化异常增生新生物，相对无限制性生长，失去成熟分化 能力，与机体需要不相适应能力，与机体需要不相适应良性肿瘤分化好，生长缓慢，不易复发，对机体影响小良性肿瘤分化好，生长缓慢，不易复发，对机体影响小恶

8、性肿瘤生长迅速，浸润生长，易复发和转移，对机体危害大恶性肿瘤生长迅速，浸润生长，易复发和转移，对机体危害大四、肿瘤分类与命名四、肿瘤分类与命名肿瘤分类：肿瘤分类：根据肿瘤特性及其对机体影响和危害：根据肿瘤特性及其对机体影响和危害：良性、交良性、交界性和恶性界性和恶性根据组织学分化方向：根据组织学分化方向：上皮、间叶上皮、间叶根据病因、组织分化、病理形态和肿瘤发展阶段根据病因、组织分化、病理形态和肿瘤发展阶段等分类等分类根据临床、根据临床、IHCIHC表型和分子遗传学改变分类表型和分子遗传学改变分类2、肿瘤分类及命名、肿瘤分类及命名 良、恶性肿瘤区别良、恶性肿瘤区别 肿瘤异型性（肿瘤异型性（At

9、ypiaAtypia）概念）概念：差异肿瘤组织 起源正常组织任何肿瘤组织无论在细胞形态上或组织结构上都与其起任何肿瘤组织无论在细胞形态上或组织结构上都与其起源的正常组织有不同程度差异源的正常组织有不同程度差异，这种差异称肿瘤这种差异称肿瘤异型性异型性其其决定肿瘤性质，异型性大的肿瘤恶性程度高决定肿瘤性质，异型性大的肿瘤恶性程度高异型性表现为异型性表现为-结构异型性；细胞异型性；核异型性结构异型性；细胞异型性；核异型性-肿瘤的分类及命名肿瘤的分类及命名-结构异型结构异型结构异型：结构异型：肿瘤失去正常结构，细胞排列紊乱，数目增多，无极性肿瘤失去正常结构，细胞排列紊乱，数目增多，无极性-肿瘤的分类

10、及命名肿瘤的分类及命名肿瘤组织异型性肿瘤组织异型性-细胞异型细胞异型 细胞异型性细胞异型性：肿瘤：肿瘤细胞大小、细胞大小、形态不一致，可见瘤巨细胞。形态不一致，可见瘤巨细胞。分化好的瘤细胞异型性小，分化差的异型性大分化好的瘤细胞异型性小，分化差的异型性大-肿瘤的分类及命名肿瘤的分类及命名肿瘤组织异型性肿瘤组织异型性-核异型性核异型性 大、多、怪、粗、深、病理性核分裂-肿瘤的分类及命名肿瘤的分类及命名核异型性：核异型性：核大深染，染色质粗糙核大深染，染色质粗糙，核浆比，核浆比增大，核仁大，增大，核仁大，多核及病理性核分裂像。多核及病理性核分裂像。良性肿瘤异型性小，恶性肿瘤异型性大良性肿瘤异型性小

11、，恶性肿瘤异型性大 良、恶性肿瘤区别良、恶性肿瘤区别良性肿瘤良性肿瘤恶性肿瘤恶性肿瘤细胞分化及异型细胞分化及异型核分裂核分裂生长方式生长方式与周围组织关系与周围组织关系包膜及边界包膜及边界生长速度生长速度继发改变继发改变复发与转移复发与转移对机体影响对机体影响分化好、异型性小分化好、异型性小无无/少少外生性，膨胀性外生性，膨胀性推挤性推挤性常有包膜，界清常有包膜，界清较慢较慢出血坏死及钙化少见出血坏死及钙化少见无无/极少极少较少较少分化差、异型性大分化差、异型性大多多/病理性核分裂病理性核分裂侵袭性（浸润性）侵袭性（浸润性）破坏性破坏性无包膜、界不清无包膜、界不清快快/短期迅速生长短期迅速生长

12、出血坏死出血坏死/溃烂常溃烂常见见常见常见较大，甚至危及生较大，甚至危及生命命-肿瘤的分类与命名肿瘤的分类与命名 良性肿瘤良性肿瘤一般称为一般称为“瘤瘤”部位部位+组织来源组织来源+“+“瘤瘤”如：背部脂肪瘤如：背部脂肪瘤 部位部位+形态形态+“+“瘤瘤”如：皮肤乳头状瘤如：皮肤乳头状瘤 部位部位+形态形态+组织来源组织来源+“+“瘤瘤”如：卵巢浆液性乳头状囊腺瘤如：卵巢浆液性乳头状囊腺瘤 交界性肿瘤交界性肿瘤肿瘤的命名：肿瘤的命名：定义定义:介于良性与恶性之间的一类肿瘤介于良性与恶性之间的一类肿瘤命名：在原有良性名称前加命名：在原有良性名称前加“交界性交界性”肿瘤命名肿瘤命名 原则：原则：肿

13、瘤性质、组织来源、发生部位及特殊形态肿瘤性质、组织来源、发生部位及特殊形态-肿瘤的分类与命名肿瘤的分类与命名 恶性肿瘤命名恶性肿瘤命名 上皮组织来源上皮组织来源-癌（癌（carcinomacarcinoma）部位部位+组织来源组织来源+癌癌 如：皮肤鳞状细胞癌如：皮肤鳞状细胞癌 间叶组织来源间叶组织来源-肉瘤肉瘤(sarcoma)(sarcoma)部位部位+组织来源组织来源+肉瘤肉瘤 如：皮下纤维肉瘤如：皮下纤维肉瘤 幼稚组织来源幼稚组织来源-母细胞瘤母细胞瘤 部位部位+（组织来源组织来源）+母细胞瘤母细胞瘤 如：肾母细胞瘤如：肾母细胞瘤，腹膜后神经母细胞瘤腹膜后神经母细胞瘤 其它沿用或习惯名

14、称其它沿用或习惯名称 如如:恶性畸胎瘤恶性畸胎瘤/Ewings tumor/精原细胞瘤精原细胞瘤转移性肿瘤命名转移性肿瘤命名：转移部位转移部位+转移性转移性+组织来源组织来源 如：肝转移性腺癌如：肝转移性腺癌 -肿瘤的分类与命名肿瘤的分类与命名 1 1、分级、分级（GradGradinging）：）：目的：确定肿瘤恶性程度，为临床治疗和预后判断提目的：确定肿瘤恶性程度，为临床治疗和预后判断提供依据供依据标准：按肿瘤分化程度、异型性、核分裂数和类型等标准：按肿瘤分化程度、异型性、核分裂数和类型等方法：多采用方法：多采用3 3级分级法，级分级法，也有也有4 4级法或级法或2 2级法级法五、肿瘤病理

15、分级和分期五、肿瘤病理分级和分期腺癌分级：高分化 中分化 低分化-肿瘤的分级与分期 2.2.分期（分期（staging)staging)目的：评估肿瘤扩散程度，制定治疗方案、评价疗效、目的：评估肿瘤扩散程度，制定治疗方案、评价疗效、判断预后及医师之间信息交流判断预后及医师之间信息交流 方法：方法：TNMTNM分期法分期法【美国癌症联合会（美国癌症联合会（AJCCAJCC）制定制定】原则：原则：肿瘤部位；肿瘤大小以及数目；肿瘤部位；肿瘤大小以及数目；淋巴结受侵情况；远处转移。淋巴结受侵情况；远处转移。T:（tumor）原发瘤大小、浸润深度、范围、邻近器官原发瘤大小、浸润深度、范围、邻近器官 累及

16、（累及（1-41-4）N N:（lymph nodelymph node）有无局部淋巴结转移（有无局部淋巴结转移（0-30-3）M M:（metastasismetastasis）有无远处转移（）有无远处转移（0-10-1）不同不同肿瘤肿瘤TNMTNM分期具体标准，由各专业会议协定分期具体标准，由各专业会议协定 不同不同TNMTNM组合，代表组合，代表不同期别不同期别第二节第二节 肿瘤病理学诊断分类肿瘤病理学诊断分类肿瘤组织病理学诊断：肿瘤组织病理学诊断：指活检或切除组织，经过组织处理、浸蜡包埋、切片指活检或切除组织，经过组织处理、浸蜡包埋、切片 镜下观察作出诊断。镜下观察作出诊断。最理想的诊

17、断方法。最理想的诊断方法。肿瘤细胞病理学诊断：肿瘤细胞病理学诊断：依据脱落细胞学、穿刺细胞学以及外周血涂片检查依据脱落细胞学、穿刺细胞学以及外周血涂片检查 而作出的诊断。而作出的诊断。可靠性不能等同于组织病理学诊断。可靠性不能等同于组织病理学诊断。获取标本方法获取标本方法标本处理标本处理肿瘤大体形态观察肿瘤大体形态观察制片类型和适用范围制片类型和适用范围病理诊断报告书病理诊断报告书病理会诊病理会诊一、肿瘤组织病理学诊断一、肿瘤组织病理学诊断1 1、获取标本方法、获取标本方法-标本类型标本类型 穿刺活检穿刺活检（core needle biopsycore needle biopsy）钳取活检钳

18、取活检（bite biopsybite biopsy）切开活检切开活检（incisionalincisional biopsy biopsy）切除活检切除活检（excisionalexcisional biopsy biopsy）2 2、标本处理、标本处理-标本固定标本固定 标本固定是病理诊断的前提和基础。标本固定是病理诊断的前提和基础。离体后半小时内固定离体后半小时内固定 固定液：固定液：1010中性缓冲福尔马林中性缓冲福尔马林 固定液体积：组织固定液体积：组织/固定液为固定液为1/5-101/5-10 固定时间：固定时间：6 64848小时（穿透能力小时（穿透能力1mm/h1mm/h）较大

19、标本还应剖开后再固定较大标本还应剖开后再固定-肿瘤组织病理学检查3、标本大体观察、标本大体观察 部位部位：不同肿瘤有其特定的好发部位不同肿瘤有其特定的好发部位 数目数目：多少不一：多少不一 大小大小：取决与肿瘤的性质、生长时间和部位，有些肿：取决与肿瘤的性质、生长时间和部位，有些肿 瘤体积是判断良恶性的重要指标（如瘤体积是判断良恶性的重要指标（如GISTGIST）颜颜色色：取决与肿瘤组织细胞及其代谢产物的颜色：取决与肿瘤组织细胞及其代谢产物的颜色-脂肪瘤、血管瘤、黑色素瘤、绿色瘤脂肪瘤、血管瘤、黑色素瘤、绿色瘤 如如变性、出血、坏死可改变原有颜色变性、出血、坏死可改变原有颜色 质地质地：取决与

20、肿瘤组：取决与肿瘤组织及织及间质间质成分多少成分多少-肿瘤组织病理学检查肿瘤肿瘤形状形状及生长方式：及生长方式：对识别肿瘤良恶性意义对识别肿瘤良恶性意义重大重大 良性：膨胀性、境界清楚生长慢；恶性：浸润性、生长快良性：膨胀性、境界清楚生长慢；恶性：浸润性、生长快-肿瘤组织病理学检查肿瘤生长方式、发生部位、组织来源和肿瘤良恶性密切相关肿瘤生长方式、发生部位、组织来源和肿瘤良恶性密切相关 4、病理切片类型和适用范围、病理切片类型和适用范围常规石蜡切片常规石蜡切片：是最常用的制片方法。一般需要是最常用的制片方法。一般需要2 2天完成。天完成。优点：取材全面，质量稳定，结构清晰。优点：取材全面，质量稳

21、定，结构清晰。适用于各种标本的组织学检查。适用于各种标本的组织学检查。快速石蜡切片快速石蜡切片：通过加热或微波方法减少组织处理时间，通过加热或微波方法减少组织处理时间，适用于小标本快速诊断。适用于小标本快速诊断。不适宜进行免疫组化和分子病理等进一步检查。不适宜进行免疫组化和分子病理等进一步检查。-肿瘤组织病理学检查冷冻切片冷冻切片：新鲜组织，用恒冷切片机制作切片，：新鲜组织，用恒冷切片机制作切片，3030分钟完成报告。常用于术中手术方案选择。分钟完成报告。常用于术中手术方案选择。只能作为参考性意见，最终以常规石蜡切为准。只能作为参考性意见，最终以常规石蜡切为准。适应证：适应证：确定病变性质，决

22、定手术方案肿瘤确定病变性质，决定手术方案肿瘤/非非肿瘤，良性肿瘤，良性/恶性恶性/交界性肿瘤；交界性肿瘤；了解肿瘤播散情了解肿瘤播散情况，是否侵犯邻近组织，有无区域淋巴结转移。况，是否侵犯邻近组织，有无区域淋巴结转移。确定手术切缘有无肿瘤浸润。确定手术切缘有无肿瘤浸润。确定切除组织确定切除组织印片印片：将可疑病变组织与玻片接触，制成印片染色：将可疑病变组织与玻片接触，制成印片染色后观察，属细胞学诊断，常与冷冻切片同用，提高后观察，属细胞学诊断，常与冷冻切片同用，提高术中诊断的确诊率，也可作为无法进行冷冻切片时术中诊断的确诊率，也可作为无法进行冷冻切片时的应急措施。的应急措施。-肿瘤组织病理学检

23、查5 5、病理诊断报告病理诊断报告 病理学诊断报告书（病理诊断报告）是关于疾病病理学诊断报告书（病理诊断报告）是关于疾病诊断的重要医学文书诊断的重要医学文书应由具有执业资格的注册主治医师以上（含主治应由具有执业资格的注册主治医师以上（含主治医师）的病理医师签发医师）的病理医师签发低年资病理科住院医、进修医师和非病理学专业低年资病理科住院医、进修医师和非病理学专业的医师不得签署病理学诊断报告书的医师不得签署病理学诊断报告书当涉及医、患间医疗争议时，相关的病理学诊断当涉及医、患间医疗争议时，相关的病理学诊断报告具有法律意义报告具有法律意义-临床技术操作规范临床技术操作规范病理学分册病理学分册 第一

24、章第四条第一章第四条-肿瘤组织病理学检查病理报告基本内容病理报告基本内容（1 1）患者基本信息：患者基本信息：（2 2）肉眼和显微镜所见：）肉眼和显微镜所见：（3 3）其他相关检查结果：）其他相关检查结果：（4 4）附注、补充说明或讨论：附注、补充说明或讨论：（5 5）建议：）建议：-肿瘤组织病理学检查 病理报告解读病理报告解读由于病理诊断有主观性、经验性、片面性和局限性等原因，由于病理诊断有主观性、经验性、片面性和局限性等原因，依依据病理医生对病理诊断的把握程度据病理医生对病理诊断的把握程度病理诊断分下列几种形式：病理诊断分下列几种形式：（1 1）明确或基本明确的诊断）明确或基本明确的诊断：

25、基本明确的病理诊断是指病变性：基本明确的病理诊断是指病变性质已明确，病理确诊或基本确诊的病例，临床可按其进行诊质已明确，病理确诊或基本确诊的病例，临床可按其进行诊治，如果有误病理医生应负责。治，如果有误病理医生应负责。（2 2）不能完全肯定或有所保留的诊断）不能完全肯定或有所保留的诊断：指由于各种原因，不易：指由于各种原因，不易判定病变性质，特别对那些仅具备部分诊断标准的病变常以判定病变性质，特别对那些仅具备部分诊断标准的病变常以此诊断形式表述，在诊断前加上不同含义的修饰词，此时临此诊断形式表述，在诊断前加上不同含义的修饰词，此时临床医生应根据自己掌握的实际情况结合病理诊断，作出诊断床医生应根

26、据自己掌握的实际情况结合病理诊断，作出诊断和治疗；或者再进一步检查或观察。和治疗；或者再进一步检查或观察。（3 3）描述性诊断）描述性诊断：送检组织不能满足诊断要求，病理医生只能：送检组织不能满足诊断要求，病理医生只能进行描述。这样的诊断多数对临床帮助很小，还需要进一进行描述。这样的诊断多数对临床帮助很小，还需要进一步步检查确诊。检查确诊。-肿瘤组织病理学检查病理会诊病理会诊 病理学诊断十分重要，常有讨论和会诊的需求。病理学诊断十分重要，常有讨论和会诊的需求。病理会诊可在病理诊断报告书签发前和签发后。病理会诊可在病理诊断报告书签发前和签发后。病理会诊包括病理会诊包括 个人会诊（个人会诊（per

27、sonal consultationpersonal consultation）是因为未能）是因为未能明确病理诊断或病理医师意见不统一，患者或临明确病理诊断或病理医师意见不统一，患者或临床医师要求会诊；床医师要求会诊；医院会诊（医院会诊（institutional consultationinstitutional consultation）是病）是病人转院治疗时，需要新单位的病理医师复查原有人转院治疗时，需要新单位的病理医师复查原有病理切片并给出报告。病理切片并给出报告。会诊咨询意见仅供初诊病理医师参考会诊咨询意见仅供初诊病理医师参考-肿瘤组织病理学检查二、肿瘤细胞病理学检查二、肿瘤细胞病理

28、学检查1 1、常用方法、涂片制作及应用、常用方法、涂片制作及应用脱落细胞学检查脱落细胞学检查：适用于宫颈刮片、痰、各种内镜适用于宫颈刮片、痰、各种内镜 刷片、胸水、腹水、尿液、乳头溢液等。刷片、胸水、腹水、尿液、乳头溢液等。细针穿刺细胞学检查：细针穿刺细胞学检查：适用于内镜检查不能达到、适用于内镜检查不能达到、又不能进行脱落细胞检查的某些器官或肿瘤。又不能进行脱落细胞检查的某些器官或肿瘤。浅表肿瘤直接穿刺，深部肿瘤超声或浅表肿瘤直接穿刺，深部肿瘤超声或X X线引导下穿刺。线引导下穿刺。标本制作：取材后立即涂片，厚薄均匀，涂片干燥前标本制作：取材后立即涂片，厚薄均匀，涂片干燥前立即置于立即置于9

29、5%95%乙醇或乙醇乙醚混合液固定乙醇或乙醇乙醚混合液固定1515分钟分钟染色方法有巴氏（染色方法有巴氏（PapanicoloauPapanicoloau）法，瑞氏（）法，瑞氏（WrightWright）法、吉姆萨（法、吉姆萨（GiemsaGiemsa）法和）法和HEHE法等法等 2 2、细胞病理学诊断细胞病理学诊断基本内容：同组织病理，注明涂片制作及染色方法基本内容：同组织病理，注明涂片制作及染色方法诊断报告基本分类诊断报告基本分类（1 1）直接表述性诊断直接表述性诊断：根据形态学观察实际情况，作出：根据形态学观察实际情况，作出诊断。包括诊断。包括肯定性诊断、意向性诊断、描述性诊断、无肯定性

30、诊断、意向性诊断、描述性诊断、无法作出细胞学诊断法作出细胞学诊断（2 2）The Bethesda SystemThe Bethesda System（简称（简称TBSTBS）报告系统）报告系统：用于：用于宫颈细胞学诊断或甲状腺细针穿刺细胞学诊宫颈细胞学诊断或甲状腺细针穿刺细胞学诊（3 3）间接分级性诊断间接分级性诊断：三级法：分阳性、可疑和阴性。三级法：分阳性、可疑和阴性。巴氏法：分为恶性、高度可疑恶性、可疑恶性、巴氏法：分为恶性、高度可疑恶性、可疑恶性、非典型性和阴性五级。非典型性和阴性五级。-肿瘤细胞病理学检查3、细胞病理学报告解读、细胞病理学报告解读 细胞病理学诊断作为诊断病理学的重要

31、分支，在细胞病理学诊断作为诊断病理学的重要分支，在疾病诊治上具有与组织病理学相似的重要地位和作用，疾病诊治上具有与组织病理学相似的重要地位和作用，不允许出现差错和对检查结果任意解读。不允许出现差错和对检查结果任意解读。WHO WHO建议使用直接表述性诊断报告模式，弃用巴建议使用直接表述性诊断报告模式，弃用巴氏五级法和三级法等数字式分级诊断方式。氏五级法和三级法等数字式分级诊断方式。对于特殊类别检查则推荐使用相应的报告系统，对于特殊类别检查则推荐使用相应的报告系统，比如宫颈细胞学和甲状腺细针穿刺细胞学使用各自的比如宫颈细胞学和甲状腺细针穿刺细胞学使用各自的TBSTBS报告系统。报告系统。-肿瘤细

32、胞病理学检查4、细胞病理学检查优点和局限性、细胞病理学检查优点和局限性优点：取材方便，损伤小；所需设备简单；操作、优点：取材方便，损伤小；所需设备简单；操作、制片和检查过程快速；易于推广和重复检查。制片和检查过程快速；易于推广和重复检查。对难以获取组织进行病理诊断的病例，细胞学诊断具对难以获取组织进行病理诊断的病例，细胞学诊断具有重要价值。有重要价值。是一种理想肿瘤筛查及普查方法是一种理想肿瘤筛查及普查方法局限性：局限性：假阴性：受取材等因素影响，一般有假阴性：受取材等因素影响，一般有1010左右假阴性左右假阴性 因此，细胞学检查阴性不代表没有肿瘤。因此，细胞学检查阴性不代表没有肿瘤。假阳性：

33、在非恶性肿瘤患者标本中查见恶性细胞。假假阳性：在非恶性肿瘤患者标本中查见恶性细胞。假 阳性率阳性率1%1%。因此细胞学诊断应密切结合临床因此细胞学诊断应密切结合临床可靠性较组织病理学诊断差，可靠性较组织病理学诊断差，不能显示肿瘤确切部位不能显示肿瘤确切部位-肿瘤细胞病理学检查一、组织化学技术及应用一、组织化学技术及应用二、免疫组织化学技术及应用二、免疫组织化学技术及应用三、细胞遗传学和分子生物学技术三、细胞遗传学和分子生物学技术四、流式细胞术四、流式细胞术五、电子显微镜技术五、电子显微镜技术六、图像分析技术六、图像分析技术七、生物信息学七、生物信息学第三节第三节 肿瘤病理学诊断常用技术及应用肿

34、瘤病理学诊断常用技术及应用-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 一、组织化学技术及应用一、组织化学技术及应用组织化学（组织化学（histochemistryhistochemistry）技术又称技术又称特殊染色特殊染色 是应用某些能与细胞内化学成分特异结合的显色试剂是应用某些能与细胞内化学成分特异结合的显色试剂 原位显示病变细胞特殊化学成分（蛋白、核酸、糖类原位显示病变细胞特殊化学成分（蛋白、核酸、糖类和脂类等）。和脂类等）。常用特染有：常用特染有：PASPAS染色、网状纤维染色、淀粉染色、染色、网状纤维染色、淀粉染色、抗酸染色、脂肪染色、黏液染色、六胺银染色等。抗酸染色、脂肪染色、黏液染色、六胺银

35、染色等。用途：协助诊断。如抗酸杆菌、真菌检测等在诊断结核、用途：协助诊断。如抗酸杆菌、真菌检测等在诊断结核、真菌感染方面有较重要意义；真菌感染方面有较重要意义；PASPAS可显示腺泡状软组可显示腺泡状软组织肉瘤细胞质内的结晶。织肉瘤细胞质内的结晶。血管周细胞瘤网染血管周细胞瘤网染腺泡状软组织肉瘤腺泡状软组织肉瘤 PAS染色染色特殊染色特殊染色-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 二、免疫组织化学技术及应用二、免疫组织化学技术及应用免疫组织化学（免疫组织化学（immunohistochemistryimmunohistochemistry，IHCIHC）技术是技术是利用抗原利用抗原-抗体特异性结合原理

36、，用已知抗体或抗原抗体特异性结合原理，用已知抗体或抗原检测和定位组织中待测物质的一种技术。检测和定位组织中待测物质的一种技术。1 1、优点：、优点：特异性强、敏感性高、定位准确，将形态、特异性强、敏感性高、定位准确，将形态、功能和代谢密切结合一起。是病理诊断中最重要的、功能和代谢密切结合一起。是病理诊断中最重要的、必不可少的常规技术。必不可少的常规技术。2 2、抗体选择：、抗体选择：多克隆抗体：敏感性高，但非特异性交叉反应较多多克隆抗体：敏感性高，但非特异性交叉反应较多 单克隆抗体：抗原特异性强，但敏感性较低单克隆抗体：抗原特异性强，但敏感性较低 目前使用兔源性单克隆抗体敏感性高目前使用兔源性

37、单克隆抗体敏感性高-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 3 3、检测方法：、检测方法：链霉亲和素生物素（链霉亲和素生物素（LSABLSAB）法；葡聚糖）法；葡聚糖 聚合物（聚合物（LDPLDP）法；两步）法；两步LDPLDP法（法（En VisionEn Vision法），法），4 4、局限性：、局限性：没有绝对特异抗体，一种抗原可在多种没有绝对特异抗体，一种抗原可在多种肿瘤中表达；相当数量肿瘤缺乏特异抗原表达；部肿瘤中表达；相当数量肿瘤缺乏特异抗原表达；部分肿瘤因分化极低不表达相关抗原；有时不同抗体滴分肿瘤因分化极低不表达相关抗原；有时不同抗体滴度有不同阳性结果；内源性生物素可导致假阳性；度有不同

38、阳性结果；内源性生物素可导致假阳性；不同实验室间结果不一定完全一致；定性检查，还不不同实验室间结果不一定完全一致；定性检查，还不能进行定量分析能进行定量分析 实验室质量控制和规范化正确技术操作是免疫组实验室质量控制和规范化正确技术操作是免疫组化结果可靠的前提及保障化结果可靠的前提及保障-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 5、免疫组化应用、免疫组化应用辅助肿瘤分类；辅助肿瘤分类；内分泌肿瘤功能检测，确定诊断及功能分类；内分泌肿瘤功能检测，确定诊断及功能分类；辅助判定病变性质；辅助判定病变性质；发现微小转移灶，寻找转移性肿瘤原发灶；发现微小转移灶，寻找转移性肿瘤原发灶；辅助肿瘤分期：判断肿瘤是原位还是

39、浸润，有无血管、辅助肿瘤分期：判断肿瘤是原位还是浸润，有无血管、淋巴管侵犯与肿瘤分期密切相关；淋巴管侵犯与肿瘤分期密切相关；指导治疗和预后：与预后有关标记：类固醇激素受指导治疗和预后：与预后有关标记：类固醇激素受体：体：ERER、PRPR、ARAR等表达预后好；肿瘤基因标记：癌等表达预后好；肿瘤基因标记：癌基因基因HER-2HER-2表达预后差；细胞增殖标记：如表达预后差；细胞增殖标记：如Ki-67Ki-67、PCNAPCNA等高表达提示肿瘤生长快。靶向治疗标记：等高表达提示肿瘤生长快。靶向治疗标记：HER-HER-2 2、CD20CD20、CD117CD117、EGFREGFR、KrasKr

40、as、BRAFBRAF基因等基因等-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 PRER5252岁岁 F F 纵隔淋巴结肿大纵隔淋巴结肿大-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 老年女性肺部包块老年女性肺部包块-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 三、细胞遗传学和分子生物学技术三、细胞遗传学和分子生物学技术细胞遗传学与分子病理学诊断在增加肿瘤诊断准确性、指导肿细胞遗传学与分子病理学诊断在增加肿瘤诊断准确性、指导肿瘤治疗及预后评估中具有重要意义。瘤治疗及预后评估中具有重要意义。1 1、核型分析、核型分析（karyotypekaryotype analysis analysis）细胞遗传学常用分析方细胞遗传学常用分析方法，用

41、形态学方法研究染色体数目及结构异常，是肿瘤诊断法，用形态学方法研究染色体数目及结构异常，是肿瘤诊断一种辅助方法。需要新鲜组织一种辅助方法。需要新鲜组织2 2、荧光原位杂交、荧光原位杂交（FISHFISH）用荧光素标记已知用荧光素标记已知DNADNA探针与组织切探针与组织切片上肿瘤组织杂交，在荧光显微镜下观察，片上肿瘤组织杂交，在荧光显微镜下观察，显示与其相应染显示与其相应染色体某个区段或整条染色体。色体某个区段或整条染色体。适用于染色体易位、缺失和扩适用于染色体易位、缺失和扩增的检测，增的检测，对肿瘤确诊和治疗有重要意义。对肿瘤确诊和治疗有重要意义。新鲜组织新鲜组织/石蜡石蜡切片。缺点：荧光易

42、淬灭，不能长期保存。切片。缺点：荧光易淬灭，不能长期保存。3 3、比色原位杂交、比色原位杂交（CISHCISH）用酶代替荧光检测，在保持肿瘤结用酶代替荧光检测，在保持肿瘤结构和细胞学特点下分析染色体改变。构和细胞学特点下分析染色体改变。最常用于基因扩增。最常用于基因扩增。优点：不需要荧光显微镜、照相设备和分析软件，且价格更优点：不需要荧光显微镜、照相设备和分析软件，且价格更低廉，组织切片能长期保存。低廉，组织切片能长期保存。缺点：敏感性不如缺点：敏感性不如FISHFISH法。法。-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 4 4、比较基因组杂交、比较基因组杂交（CGHCGH）将消减杂交、荧光原位杂交相结合

43、，将消减杂交、荧光原位杂交相结合，检测检测DNADNA序列拷贝数变异并将其定位在染色体上的方法。序列拷贝数变异并将其定位在染色体上的方法。优点：优点：仅需微量肿瘤细胞仅需微量肿瘤细胞DNADNA，一次实验就可对整个基因组中所有遗一次实验就可对整个基因组中所有遗传物质异常进行分析。传物质异常进行分析。可用新鲜标本、石蜡包埋标本甚至福尔可用新鲜标本、石蜡包埋标本甚至福尔马林固定标本。缺点：对缺失的检出需由其他方法加以证实，马林固定标本。缺点：对缺失的检出需由其他方法加以证实，对结构重排不能检出。灵敏度和分辨率有待提高对结构重排不能检出。灵敏度和分辨率有待提高5 5、SouthernSouthern

44、印迹杂交印迹杂交（Southern blot hybridizationSouthern blot hybridization）是进行是进行基因组基因组DNADNA特定序列定位的通用方法。在特定序列定位的通用方法。在DNADNA图谱分析及图谱分析及PCRPCR产产物分析等方面有重要价值。优点：检测抗原受体基因所有的重物分析等方面有重要价值。优点：检测抗原受体基因所有的重排。缺点：操作复杂、费时排。缺点：操作复杂、费时6 6、聚合酶链反应（、聚合酶链反应（PCRPCR）是指在是指在DNADNA聚合酶催化下，以母链聚合酶催化下，以母链DNADNA为为模板，体外复制出与母链模板模板，体外复制出与母链

45、模板DNADNA互补的子链互补的子链DNADNA的过程。如果的过程。如果提取肿瘤细胞中提取肿瘤细胞中mRNAmRNA，经反转录酶作用，合成，经反转录酶作用，合成cDNAcDNA，再以此为，再以此为模板进行聚合酶链反应，称为模板进行聚合酶链反应，称为反转录反转录PCR(RT-PCR)PCR(RT-PCR)。优点：技。优点：技术操作简便、快速、敏感性高，已作为常规分子生物学检测方术操作简便、快速、敏感性高，已作为常规分子生物学检测方法，广泛应用于肿瘤诊断、治疗及预后判断。法，广泛应用于肿瘤诊断、治疗及预后判断。-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 7 7、生物芯片、生物芯片技术技术（biochipbio

46、chip）：是近年发展起来的高新技术，按是近年发展起来的高新技术，按生物芯片上样品储存的不同类型信息，可分为：生物芯片上样品储存的不同类型信息，可分为：基因芯片基因芯片：在临床上可用于肿瘤的诊断、筛查及抗肿瘤药物的选择；在临床上可用于肿瘤的诊断、筛查及抗肿瘤药物的选择；蛋蛋白质芯片：白质芯片：在临床上可用于肿瘤的诊断、筛查及抗肿瘤药物在临床上可用于肿瘤的诊断、筛查及抗肿瘤药物的选择；的选择；组织芯片：组织芯片：是将数十个至数百个小的组织片排列在是将数十个至数百个小的组织片排列在载体上而成的组织微阵列。是一种高通量、大样本以及快速载体上而成的组织微阵列。是一种高通量、大样本以及快速的分子水平的分

47、析工具。的分子水平的分析工具。8 8、DNADNA单链构象多态性单链构象多态性技术技术 （SSCPSSCP）是一种基于单链是一种基于单链DNADNA构象差构象差别来检测点突变方法。广泛用于肿瘤诊断和研究别来检测点突变方法。广泛用于肿瘤诊断和研究9 9、DNADNA测序技术测序技术（DNA sequencingDNA sequencing）能可靠地检测出发生点突能可靠地检测出发生点突变的变的DNADNA核苷酸。第二代测序技术通过捕捉新合成的末端标核苷酸。第二代测序技术通过捕捉新合成的末端标记来确定记来确定DNADNA的序列。比新一代测序平台通量更高、速度更的序列。比新一代测序平台通量更高、速度更

48、快。快。可以开展全基因表达图谱分析，临床医师可以通过全基可以开展全基因表达图谱分析，临床医师可以通过全基因组图谱，了解肿瘤患者整体遗传信息，对诊断、治疗和用因组图谱，了解肿瘤患者整体遗传信息，对诊断、治疗和用药提供指导性意见药提供指导性意见。-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 四、流式细胞术（四、流式细胞术（flow flow cytometrycytometry）用流式细胞仪进行快速细胞定量分析和分类的新技术用流式细胞仪进行快速细胞定量分析和分类的新技术优点：速度快，精确性和灵敏性高，可同时测定优点：速度快，精确性和灵敏性高，可同时测定6 68 8个参数。个参数。缺点：新鲜组织细胞悬液。缺点：新

49、鲜组织细胞悬液。应用：应用：分析肿瘤细胞增殖周期，评估肿瘤生物学行为；分析肿瘤细胞增殖周期，评估肿瘤生物学行为；分析细胞增殖与凋亡；分析细胞增殖与凋亡；分析细胞分化、辅助良恶性鉴别；分析细胞分化、辅助良恶性鉴别；肿瘤相关基因定量分析，为预后判断提供依据；肿瘤相关基因定量分析，为预后判断提供依据；多药耐药基因产物的定量，为化疗药物选择提供依据；多药耐药基因产物的定量，为化疗药物选择提供依据；肿瘤疗效监测，残存肿瘤细胞检测判定肿瘤有无复发。肿瘤疗效监测，残存肿瘤细胞检测判定肿瘤有无复发。-肿瘤病理学诊断常用技术及应用 五、电子显微镜技术五、电子显微镜技术（electron microscopyel

50、ectron microscopy）是病是病理诊断和研究的基本技术。能清楚显示细胞微细结理诊断和研究的基本技术。能清楚显示细胞微细结构。构。用于疾病病因和发病机制研究，及诊断和鉴别用于疾病病因和发病机制研究，及诊断和鉴别诊断。诊断。六、图像分析技术（六、图像分析技术（image analysisimage analysis）利用图像分析利用图像分析仪或图像分析系统，客观地测量组织特征。仪或图像分析系统，客观地测量组织特征。主要用主要用于核形态参数的测定（包括细胞核直径、周长、面于核形态参数的测定（包括细胞核直径、周长、面积和体积）、积和体积）、DNADNA倍体测定和定量分析，有时还可倍体测定和