高三一轮复习2012-专题2-微生物的培养与应用课件(高三复习).ppt
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- 一轮 复习 2012 专题 微生物 培养 应用 课件
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1、选修1 专题2 微生物的培养与应用专题专题2微生物的培养与应用微生物的培养与应用选修1 专题2 微生物的培养与应用判断下列说法是否正确:判断下列说法是否正确:1分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源氮源()2利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数计数()3消毒和灭菌实质是相同的消毒和灭菌实质是相同的()选修1 专题2 微生物的培养与应用一、培养基及无菌技术一、培养基及无菌技术1种类:液体培养基、固体培养基。种类:液体培养基、固体培养基。2营养成分:一般都含有水、营养成分:
2、一般都含有水、无机盐和生长、无机盐和生长因子。因子。3无菌技术无菌技术消毒方法:消毒方法:、巴氏消毒法和化学药剂消毒。、巴氏消毒法和化学药剂消毒。灭菌法:灼热灭菌、干热灭菌、灭菌法:灼热灭菌、干热灭菌、灭菌。灭菌。碳源碳源氮源氮源煮沸消毒法煮沸消毒法高压蒸汽高压蒸汽选修1 专题2 微生物的培养与应用二、微生物培养的基本技术二、微生物培养的基本技术1配制培养基:称量配制培养基:称量混合混合溶化溶化调调pH分装分装包扎。包扎。2灭菌:加水灭菌:加水加培养基加培养基密封密封排冷气排冷气维持压力维持压力取取出倒平板出倒平板(或搁置斜面或搁置斜面)。选修1 专题2 微生物的培养与应用接种环、涂布器接种环
3、、涂布器 平板划线平板划线 稀释涂布稀释涂布 选修1 专题2 微生物的培养与应用1.高温无菌的原理是什么?高温无菌的原理是什么?提示:提示:高温可以使菌体细胞内的蛋白质、核酸变性失高温可以使菌体细胞内的蛋白质、核酸变性失活,从而达到灭菌的目的。活,从而达到灭菌的目的。2用酒精消毒时,为什么用酒精消毒时,为什么70%的酒精杀菌效果最好?的酒精杀菌效果最好?提示:提示:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。选修1 专题2 微生物的培养与应用三、土壤中分解尿素的细
4、菌的分离与计数三、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1分离原理:土壤中细菌之所以能分解尿素,是由于它们分离原理:土壤中细菌之所以能分解尿素,是由于它们能合成能合成 ,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。作用。2统计菌落数目:统计样品中的活菌一般用统计菌落数目:统计样品中的活菌一般用 法。法。3实验流程:土壤取样实验流程:土壤取样制备制备 微生物的培养与观微生物的培养与观察察细菌的计数。细菌的计数。脲酶脲酶稀释涂布平板法、显微镜直接计数稀释涂布平板法、显微镜直接计数稀释液稀释液选修1 专题2 微生物的培养与应用刚果红刚果红 纤维二糖和葡萄糖纤
5、维二糖和葡萄糖 选修1 专题2 微生物的培养与应用3实验流程:土壤取样、实验流程:土壤取样、梯度稀释、将样品涂、梯度稀释、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上、挑选产生布到鉴别纤维素分解菌的培养基上、挑选产生 的菌落。的菌落。选择培养选择培养透明圈透明圈选修1 专题2 微生物的培养与应用3.分离微生物的方法有哪些?分离微生物的方法有哪些?提示:提示:从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种:种:(1)利用该分离对象对某一营养物质有利用该分离对象对某一营养物质有“嗜好嗜好”的原理,专的原理,专门在培养基中加入该营养物质,从而使它成为一种加富培养门在培养
6、基中加入该营养物质,从而使它成为一种加富培养基。基。(2)利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性,在混合培养物利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性,在混合培养物中加入该抑制物,经培养后,原来占优势的微生物生长受抑中加入该抑制物,经培养后,原来占优势的微生物生长受抑制,而分离对象却可乘机大大增殖,在数量上占优势。制,而分离对象却可乘机大大增殖,在数量上占优势。选修1 专题2 微生物的培养与应用1微生物的营养:碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。微生物的营养:碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。2微生物培养的无菌技术微生物培养的无菌技术进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵,重点是消进行无菌操作主要是为了
7、防止外来杂菌的入侵,重点是消毒和灭菌。毒和灭菌。选修1 专题2 微生物的培养与应用三种常用灭菌方法的比较:三种常用灭菌方法的比较:灭菌方法灭菌方法适用材料适用材料或用具或用具灭菌条件灭菌条件灭菌时灭菌时间间灼烧灭菌灼烧灭菌接种环、接种接种环、接种针或其他金属针或其他金属工具工具酒精灯火焰的充分酒精灯火焰的充分燃烧层燃烧层直到烧直到烧红红干热灭菌干热灭菌玻璃器皿玻璃器皿(吸管吸管培养皿培养皿)和金属和金属用具等用具等干热灭菌箱内,干热灭菌箱内,160170 12 h高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌培养基等培养基等高压蒸汽灭菌锅内高压蒸汽灭菌锅内100 kPa,121 1530 min选修1 专题2 微生
8、物的培养与应用3微生物的纯化培养微生物的纯化培养平板划线法与稀释涂布平板法平板划线法与稀释涂布平板法方法方法平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法注注意意事事项项(1)接种环的灼烧接种环的灼烧第一次划线前:接种环上的微第一次划线前:接种环上的微生物,避免污染培养物生物,避免污染培养物每次划线前:杀死残留菌种,每次划线前:杀死残留菌种,保证每次划线菌种来自上次划线保证每次划线菌种来自上次划线末端末端划线结束后:杀死残留菌种,划线结束后:杀死残留菌种,避免污染环境和感染操作者避免污染环境和感染操作者(1)稀释操作时:稀释操作时:每支试管及其中每支试管及其中的的9 mL水、移液水、移液管等
9、均需灭菌;管等均需灭菌;操作时,试管口操作时,试管口和移液管应在离和移液管应在离火焰火焰1 cm2 cm处处选修1 专题2 微生物的培养与应用方法方法平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法注注意意事事项项(2)灼烧接种环之灼烧接种环之后,要冷却后再进后,要冷却后再进行操作,以免温度行操作,以免温度太高杀死菌种太高杀死菌种(3)划线时最后一划线时最后一区域不要与第一区区域不要与第一区域相连域相连(4)划线用力要大划线用力要大小适当,防止用力小适当,防止用力过大将培养基划破过大将培养基划破(2)涂布平板时涂布平板时涂布器用体积分数为涂布器用体积分数为70%酒精消酒精消毒,取出时,让多余酒
10、精在烧杯中毒,取出时,让多余酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃器在酒精灯火焰上引燃不要将过不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精中,以免引燃其中的酒精酒精灯与培养皿距离要合适,移酒精灯与培养皿距离要合适,移液管管头不要接触任何物体液管管头不要接触任何物体选修1 专题2 微生物的培养与应用方法方法平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法目的目的在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子细胞群体细胞群体菌落菌落培养培养平板冷凝后倒置培养,使培养基表面的水平
11、板冷凝后倒置培养,使培养基表面的水分更好地挥发,防止皿盖上水珠落入培养分更好地挥发,防止皿盖上水珠落入培养基造成污染基造成污染选修1 专题2 微生物的培养与应用1下列关于微生物的培养与应用的叙述错误的是下列关于微生物的培养与应用的叙述错误的是()A通过消毒不能杀死物体内所有的微生物通过消毒不能杀死物体内所有的微生物B利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目C微生物所用的培养基的成分和植物组织培养所用的培养微生物所用的培养基的成分和植物组织培养所用的培养基的成分不同基的成分不同D平板划线法和稀释涂布平板法常用于微生物的接种平板划线法和稀释涂布平板法常用于微生物
12、的接种选修1 专题2 微生物的培养与应用解析:解析:消毒是指杀死部分对人体有害的病原微生物,但消毒是指杀死部分对人体有害的病原微生物,但不一定能杀死细菌的芽孢,故不一定能杀死细菌的芽孢,故A正确;统计样品中活菌的数目要正确;统计样品中活菌的数目要用稀释涂布平板法,平板划线法办不到,故用稀释涂布平板法,平板划线法办不到,故B错误;不同的培养错误;不同的培养对象,所需的营养成分不同,培养基中所加入的物质就不同,对象,所需的营养成分不同,培养基中所加入的物质就不同,故故C正确;微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平正确;微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,故板法,故D正确。正
13、确。答案:答案:B选修1 专题2 微生物的培养与应用2如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是下列操作方法正确的是()A操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B划线操作须在火焰上进行划线操作须在火焰上进行C在在5区域中才可以得到所需菌落区域中才可以得到所需菌落D在在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌区域中划线前后都要对接种环灭菌选修1 专题2 微生物的培养与应用解析:解析:本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌
14、方法应是在火焰上灼烧,要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰边进行。在接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中,只要有单个活个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落。细菌,通过培养即可获得所需菌落。答案:答案:D选修1 专题2 微生物的培养与应用1筛选菌株筛选菌株(1)原则:人为提供有利于目的菌生长的条件,同时抑制或原则:人为提供有利于目的菌生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物的生长。阻止其他微生物的生长。选修1 专题2 微生物的培养与应用(2)菌株筛选原理的比较菌株筛选原理的比较土壤中分解尿素的细菌土壤中分解尿素的细菌分解纤维素的微生物分解
15、纤维素的微生物常用选择培养基进行筛常用选择培养基进行筛选,即提供有利于目的选,即提供有利于目的菌株生长的条件,如营菌株生长的条件,如营养、温度、养、温度、pH等,同时等,同时抑制其他微生物的生长抑制其他微生物的生长 刚果红染色法,即在含有纤刚果红染色法,即在含有纤维素的培养基中,加入刚果红维素的培养基中,加入刚果红时,刚果红与培养基中的纤维时,刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素素形成红色复合物。当纤维素被分解后,该复合物不能形被分解后,该复合物不能形成,培养基中出现以纤维素分成,培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈解菌为中心的透明圈选修1 专题2 微生物的培养与应用2.统计菌
16、落数目的方法统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法显微镜直接计数法原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。下计算一定容积的样品中微生物的数量。方法:用计数板计数。方法:用计数板计数。缺点:不能区分死菌与活菌。缺点:不能区分死菌与活菌。选修1 专题2 微生物的培养与应用(2)间接计数法间接计数法(活菌计数法活菌计数法)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,
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