酸性染料比色法盐酸苯海拉明片剂及片剂溶出度测定阴离子表面课件.ppt

1、第二节第二节 苯乙胺类药物的分析苯乙胺类药物的分析一、基本结构与典型药物一、基本结构与典型药物 R1CH CH NH R2OH R3苯乙胺类药物的基本结构苯乙胺类药物的基本结构*HOHOCOHHCH2NHCH3肾上腺素常见的苯乙胺类药物常见的苯乙胺类药物HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲肾上腺素CCCOOHCOOHOHHHHOHOCHOHCH2NHCH3 HCl盐酸去氧肾上腺素HOCHOHCH2NHCH(CH3)2 HClHO盐酸异丙肾上腺素ClH2NClCHOHCH2NH C(CH3)3HCl盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗H2SO42HOCH2OHCHOHCH2NH C(CH3)3硫酸沙丁胺

2、醇硫酸沙丁胺醇 （二）（二）主要化学性质主要化学性质 1.1.脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性 2.2.酚羟基，或两个，易氧化变色，酚羟基，或两个，易氧化变色，与重金属络合成色（三氯化铁反应）与重金属络合成色（三氯化铁反应）3.3.具手性碳原子，具旋光性具手性碳原子，具旋光性 4.4.溶解性溶解性 游离碱难溶于水，易游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水溶于有机溶剂，其盐可溶于水 5.5.取代基：具芳伯氨基的盐酸克取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化仑特罗可用重氮化偶合反应鉴别、偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。亚硝酸钠滴定法测定含量。二、鉴别试验二、鉴别试验（一）

3、三氯化铁反应（一）三氯化铁反应 在碱性溶液中与三价在碱性溶液中与三价FeFe成紫或紫红。成紫或紫红。（二）与甲醛（二）与甲醛硫酸反应硫酸反应(氧化氧化?)?)成醌式有色物（成醌式有色物（P156P156）（三）氧化反应（三）氧化反应 有酚羟基，易被碘，过有酚羟基，易被碘，过氧化氢，铁氰化钾等氧化剂氧化氢，铁氰化钾等氧化剂氧化成不同颜色。氧化成不同颜色。（四）（四）.UV.UV与与IRIR（五）（五）.与亚硝基铁氰化钠反应与亚硝基铁氰化钠反应（RiminiRimini反应），脂肪族伯胺的专反应），脂肪族伯胺的专属反应。属反应。红紫色丙酮亚硝基铁氰化钠重酒石酸间羟胺 NaHCO3HOCHOHCHC

4、H3NH2CH(OH)COOHCH(OH)COOH（六）（六）双缩脲反应双缩脲反应 盐酸麻黄碱，盐酸伪麻黄碱盐酸麻黄碱，盐酸伪麻黄碱侧链具有氨基醇的结构，可显双侧链具有氨基醇的结构，可显双缩脲特征反应。缩脲特征反应。中国药典中国药典20002000盐酸麻黄碱的鉴别：盐酸麻黄碱的鉴别：方法：本品方法：本品1%1%水溶液，水溶液，1 ml1 ml，加，加硫酸铜试液硫酸铜试液2 2滴，滴，20%20%氢氧化钠氢氧化钠1ml1ml，加乙醚，乙醚显紫红，水变兰色。加乙醚，乙醚显紫红，水变兰色。三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查 杂质来源杂质来源 原料为酮体。残存。医学原料为酮体。残存。医学中的酮体的概念是

5、脂肪酸代谢的重要中中的酮体的概念是脂肪酸代谢的重要中间产物，包括：乙酰乙酸，间产物，包括：乙酰乙酸，-羟基丁羟基丁酸和丙酮三种。这些药物是酮体还原而酸和丙酮三种。这些药物是酮体还原而成的成的,还原不完全还原不完全,易引入酮体杂质易引入酮体杂质.（一）酮体的检查（一）酮体的检查检查方法检查方法 比较法（含量测定法）比较法（含量测定法）检查原理检查原理 利用酮体在利用酮体在310nm310nm波长波长处有最大吸收，而药物本身在处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在一定浓度溶液在310nm310nm波长处的波长处的吸收度限制酮体的量。吸收度限制酮

6、体的量。（二）有关物质检查（二）有关物质检查 盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物中的有关杂质进行检查。醇等药物中的有关杂质进行检查。检查方法：检查方法：TLCTLC中高低浓度对比法。中高低浓度对比法。配制两种浓度，稀的作对照，杂质斑配制两种浓度，稀的作对照，杂质斑点不得更深。两液相差点不得更深。两液相差100-200100-200倍。倍。（三）盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查（三）盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 检查方法：纸色谱分离洗脱法。检查方法：纸色谱分离洗脱法。显色后确定位置。与对照一起剪下洗显色后确定位置。与对照一起剪下洗脱。照分光光度法于脱。照分光光度法于23

7、2nm232nm波长处测波长处测定吸收度，控制吸收度定吸收度，控制吸收度0.48,0.48,以控制以控制有关双胍的量。有关双胍的量。四、含量测定四、含量测定 （一）非水溶液滴定法（一）非水溶液滴定法 原料药原料药 脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性,属于酸属于酸碱滴定。所列碱滴定。所列1414种药物中有种药物中有1111中采用中采用此法。此法。1 1 重酒石酸去甲肾上腺素的测定重酒石酸去甲肾上腺素的测定 0.2g0.2g加冰醋酸加冰醋酸10ml10ml，微温溶解，微温溶解，加结晶紫指示剂一滴，高氯酸滴定至加结晶紫指示剂一滴，高氯酸滴定至溶液显蓝绿。空白实验校正。溶液显蓝绿。空白实验校

8、正。1ml1ml高高氯酸滴定液（氯酸滴定液（0 0。1mol/l1mol/l）相当于）相当于3131。93mg93mg。2 2 盐酸克仑特罗的测定盐酸克仑特罗的测定 0.25 g0.25 g加冰醋酸加冰醋酸20ml20ml，微温，微温溶解，加醋酸汞试液溶解，加醋酸汞试液5ml5ml，照电位，照电位滴定法，高氯酸滴定。空白实验滴定法，高氯酸滴定。空白实验校正。校正。1ml1ml高氯酸滴定液（高氯酸滴定液（0 0。1mol/l1mol/l）相当于）相当于3131。37mg37mg。有机碱的盐酸盐不能直接有机碱的盐酸盐不能直接用高氯酸滴定，要加醋酸汞用高氯酸滴定，要加醋酸汞消除氢卤酸的干扰。消除氢卤

9、酸的干扰。游离碱的碱性弱时，终游离碱的碱性弱时，终点突跃不明显，故用电位法点突跃不明显，故用电位法指示终点。指示终点。3 3 硫酸沙丁胺醇的测定硫酸沙丁胺醇的测定 0.4 g0.4 g加冰醋酸加冰醋酸10ml10ml，微温溶解，微温溶解，加醋酸酐加醋酸酐15ml15ml，和结晶紫指示剂一滴。，和结晶紫指示剂一滴。用高氯酸滴定。至溶液显蓝绿。空白用高氯酸滴定。至溶液显蓝绿。空白实验校正。实验校正。游离碱的碱性弱时，终点突跃不游离碱的碱性弱时，终点突跃不明显，故用电位法指示终点。明显，故用电位法指示终点。（二）溴量法（二）溴量法 盐酸去氧肾上腺素及其注射盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺液

10、、重酒石酸间羟胺 反应摩尔比为反应摩尔比为1616HOCH CH2NHCH3OHBr2+3BrBrHOBrCH CH2NHCH3OH+3HBr 在酸性条件。用碘量法滴定剩余在酸性条件。用碘量法滴定剩余的溴。根据消耗硫代硫酸钠的量来计的溴。根据消耗硫代硫酸钠的量来计算。算。测定方法：测定方法：取本品取本品0.1g0.1g，至碘量瓶。加水，至碘量瓶。加水20 20 mlml，精密加溴液，精密加溴液50 ml50 ml，密塞，放置，密塞，放置，振摇。加碘化钾振摇。加碘化钾10ml10ml。硫代硫酸钠。硫代硫酸钠。滴定使淀粉蓝色消失。滴定使淀粉蓝色消失。1ml1ml溴滴定液溴滴定液（0 0。1mol/

11、l1mol/l）相当于）相当于3 3。395mg395mg。（三）比色法（三）比色法 酚羟基与亚铁离子络合显色，酚羟基与亚铁离子络合显色，测定盐酸异丙肾上腺素注射液和盐测定盐酸异丙肾上腺素注射液和盐酸多巴胺注射液的含量。酸多巴胺注射液的含量。比色法测定实例，盐酸克仑特罗栓比色法测定实例，盐酸克仑特罗栓具芳伯氨基，可发生重氮化具芳伯氨基，可发生重氮化偶合反应偶合反应AnmN测定盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗栓乙二胺萘基）（、盐酸氯仿500max1HNaNO2 对照法定量对照法定量 偶合剂偶合剂N N-（1-1-萘基）萘基）-乙二胺乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所

12、以在重氮化后，应加氨基磺酸铵所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂合试剂N N-（1-1-萘基）萘基）-乙二胺。乙二胺。（四）提取酸碱滴定法（四）提取酸碱滴定法 硫酸苯丙胺及其制剂硫酸苯丙胺及其制剂盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质依据性质终点（过量）乙醚层（苯丙胺）苯丙胺硫酸苯丙胺滴定甲基红、低温蒸去乙醚定量过量的乙醚提取、NaOH42NaClNaOHSOH42SOH碱化碱化有机溶剂提取有机溶剂提取（五）荧光分光光度法（五）荧光分光光度法三羟

13、基吲哚，甲基肾上腺红肾上腺素一定条件下653I2N exex410nm410nm、emem520nm520nm处测定荧光强度，处测定荧光强度，对照法定量。对照法定量。（六）（六）HPLCHPLC法法 重酒石酸去甲肾上腺素注射液重酒石酸去甲肾上腺素注射液 离子对反相高效液相色谱法离子对反相高效液相色谱法 内标法定量内标法定量 调节溶液调节溶液pHpH为为3.83.8，加入离子，加入离子对试剂十二烷基磺酸钠对试剂十二烷基磺酸钠（七）衍生化（七）衍生化GCGC法法 10 10 片，研细，称取定量（相片，研细，称取定量（相当于）芬氟拉明当于）芬氟拉明20mg20mg，致，致10 ml10 ml量量瓶中

14、，加水溶解至刻度，过滤，瓶中，加水溶解至刻度，过滤，取取1ml1ml，加乙酸乙酯旋涡提取，取，加乙酸乙酯旋涡提取，取其其0.5ml0.5ml，加氟乙酸酐，加氟乙酸酐0.4ml0.4ml，4040度反应度反应30min30min，6060度吹干，正己烷度吹干，正己烷1ml1ml溶解残渣，美西律作内标，分溶解残渣，美西律作内标，分离度大于离度大于4 4。复复 习习 题题例例1.1.能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为（色反应的试液为（D D）A.A.浓硫酸浓硫酸B.B.甲醛试液甲醛试液C.C.氨试液氨试液D.D.甲醛甲醛硫酸试液硫酸试液E.E.茚三酮试液茚三酮

15、试液 例例2.2.盐酸异丙肾上腺素的检查项盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（目是（E E）A.A.有关物质有关物质B.B.二苯酮二苯酮C.C.盐酸盐酸D.D.醛醛E.E.酮体酮体 第三节第三节 芳氧丙醇胺类药物的分析芳氧丙醇胺类药物的分析 以以-肾上腺素受体阻制剂氧烯肾上腺素受体阻制剂氧烯络尔和卡替络尔为例，作简单介绍。络尔和卡替络尔为例，作简单介绍。一，药物结构与主要理化性质一，药物结构与主要理化性质二，鉴别试验二，鉴别试验（一）化学鉴别反应（一）化学鉴别反应 盐酸卡替络尔盐酸卡替络尔 取本品取本品0.1g0.1g，加水，加水5ml5ml溶解，加硫氰酸络铵溶解，加硫氰酸络铵5 5滴。生成淡红滴。

16、生成淡红色沉淀。色沉淀。氧烯络尔氧烯络尔 取本品取本品0.1g0.1g，加乙醇，加乙醇2ml2ml溶解，滴加高锰酸钾溶液溶解，滴加高锰酸钾溶液1 ml1 ml，振荡，振荡，高锰酸钾色褪，生成棕色沉淀。高锰酸钾色褪，生成棕色沉淀。（二）（二）UVUV盐酸卡替络尔盐酸卡替络尔 （8ug/ml8ug/ml）215215，252nm252nm氧烯络尔氧烯络尔 （40ug/ml40ug/ml）275 nm275 nm 三三 盐酸卡替络尔中有关物质的检查盐酸卡替络尔中有关物质的检查 用薄层高低浓度对比法进行。用薄层高低浓度对比法进行。检查方法检查方法 取本品取本品0.2g0.2g，加甲醇，加甲醇10ml1

17、0ml溶解，作为供试溶液，精密量取溶解，作为供试溶液，精密量取2ml2ml，置置100ml100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，量量瓶中，用甲醇稀释至刻度，量取取1ml1ml，置，置10ml10ml量瓶中，作为对照液。量瓶中，作为对照液。（二者差（二者差500500倍）吸取两液，显斑点。供倍）吸取两液，显斑点。供试品杂质斑点不得更深。限量为试品杂质斑点不得更深。限量为0.2%0.2%。四四 含量测定含量测定（一）盐酸卡替络尔原料药含量测定（一）盐酸卡替络尔原料药含量测定方法方法取本品取本品0.5g0.5g，加冰醋酸，加冰醋酸30ml30ml溶解，加溶解，加热溶解，放冷。加醋酐热溶解，放冷。加醋酐

18、70 ml70 ml，照电，照电位滴定法用高氯酸滴定。位滴定法用高氯酸滴定。1ml1ml高氯酸高氯酸(0.1)(0.1)相当于相当于32.88mg32.88mg。（二）盐酸卡替络尔滴眼液含量测定（二）盐酸卡替络尔滴眼液含量测定方法方法取本品适量，加水定量稀释取本品适量，加水定量稀释16ug/ml16ug/ml含量，含量，UVUV法，法，252nm252nm，取对照液同法，取对照液同法测定。测定。（三）氧烯络尔极其异构体的体内药（三）氧烯络尔极其异构体的体内药物分析物分析HPLCHPLC本类药物有运动员禁用品种。体内药本类药物有运动员禁用品种。体内药物分析应引起重视。物分析应引起重视。参参 考考

19、 内内 容容第三节第三节 氨基醚衍生物类药物的分析氨基醚衍生物类药物的分析 CHO CH2CH2N(CH3)2 HCl盐酸苯海拉明CHO CH2CH2N(CH3)2NNOCH3CH3ONNClH茶苯海明茶苯海明一、结构与性质1.脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性2.UV和和IR3.茶苯海明含卤素茶苯海明含卤素 二、鉴别试验1.与硫酸反应呈色2.制备三硝基苯酚衍生物测熔点2.水解反应3.与AgNO3反应形成沉淀4.UV和IR 三、含量测定（一）非水溶液滴定法 原料（二）银量法 茶苯海明中8-氯茶碱的测定间接银量法测定氯茶碱、Cl8OHNH23（三）酸性染料比色法（三）酸性染料比色法 盐

20、酸苯海拉明片剂及片剂溶出度盐酸苯海拉明片剂及片剂溶出度测定测定（四）阴离子表面活性剂滴定法（双（四）阴离子表面活性剂滴定法（双相滴定法）相滴定法）盐酸苯海拉明注射液盐酸苯海拉明注射液1.原理 滴定反应RX+MNaRM+NaX K1 （可溶于有机溶剂）终点指示MNa+碱性染料有色物 K2 （可溶于有机溶剂）2.测定对象 有机碱性药物 3.测定条件（1）酸性溶液（2）本法应用前提：药物与滴定剂的反应优于滴定剂与指示剂的反应。若滴定剂不能先与药物作用而先与指示剂作用，则滴定无法进行。即使药物与滴定剂先反应，若滴定剂不在反应完成的等当点稍后与指示剂反应，则纵使可以滴定，也会造成误差。K1K2，但也不能

21、相差太大，相差2个数量级以下，即K100。（3）滴定剂 阴离子表面活性剂（4）指示剂 碱性染料 二甲基黄或二甲基黄+亚甲兰（混合指示剂可提高灵敏度）标标标mVc样样标mVc标样标样VVmm（5）本法用对照法定量 因此虽用标准溶液，但标准溶液浓度不用标定。既解决了滴定液的标定问题，又可消除产生的滴定误差。4.测定方法测定方法 精密量取本品适量（约相当于盐酸苯海拉精密量取本品适量（约相当于盐酸苯海拉明明20mg），置具塞锥形瓶中，加水），置具塞锥形瓶中，加水20m1，加，加氯仿氯仿50ml与稀硫酸与稀硫酸5m1。再加二甲基黄一溶。再加二甲基黄一溶剂蓝剂蓝19混合指示液混合指示液1m1，用磺基丁二酸

22、钠二，用磺基丁二酸钠二辛酯试液滴定，至近终点时强力振摇，继续辛酯试液滴定，至近终点时强力振摇，继续滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密称取盐酸苯海拉明对照品约称取盐酸苯海拉明对照品约20mg，照上述方，照上述方法自法自“置具塞锥形瓶置具塞锥形瓶”起，依法测定，根据起，依法测定，根据二者消耗磺基丁二酸钠二辛酯试液的容积二者消耗磺基丁二酸钠二辛酯试液的容积（m1）比值计算，即得。）比值计算，即得。（五）（五）HPLC法法 茶苯海明片茶苯海明片 离子抑制色谱法离子抑制色谱法 内标法定量内标法定量例1.氨基醚衍生物类药物的鉴别反应是（ABCD）A.硫酸呈色反应B.水解反应C.与硝酸银反应D.吸收光谱法E.三氯化铁反应 例2.盐酸苯海拉明的含量测定可用（CDE）A.电泳法B.X射线衍射法C.非水溶液滴定法D.酸性染料比色法E.阴离子表面活性剂滴定法 例3.阴离子表面活性剂滴定法的终点指示原理是（B）A.碱性药物和滴定剂反应，所生成的配位化合物溶于有机溶剂而显色 B.滴定剂和碱性染料反应，所生成的配位化合物溶于有机溶剂而显色 C.碱性药物和酸性染料反应，所生成的配位化合物溶于有机溶剂而显色 D.酸性药物和碱性染料反应，所生成的配位化合物溶于有机溶剂而显色 E.滴定剂和酸性染料反应，所生成的配位化合物溶于有机溶剂而显色