肝癌的生化诊断课件.ppt

1、肝细胞损伤时常用的生化试验 长征医院一、绪论一、绪论 1.1.重要性重要性 2.2.目的目的 (1)(1)了解损害程度了解损害程度 (2)(2)判断预后判断预后 (3)(3)疗效观察疗效观察 (4)(4)体检体检,耐受能力耐受能力3.3.分类分类蛋白质代谢的试验蛋白质代谢的试验 脂类代谢的试验脂类代谢的试验维生素代谢的试验维生素代谢的试验 糖类代谢的试验糖类代谢的试验酶类代谢的试验酶类代谢的试验 免疫功能试验免疫功能试验胆红素代谢的试验胆红素代谢的试验 色素的排泄试验色素的排泄试验药物转化功能试验药物转化功能试验 激素代谢的试验激素代谢的试验胆汁酸代谢的试验胆汁酸代谢的试验二、蛋白质代谢试验二

2、、蛋白质代谢试验(一一)血清总蛋白、白蛋白与球蛋白测定血清总蛋白、白蛋白与球蛋白测定 1.1.原理原理 总蛋白总蛋白-双缩脲比色法双缩脲比色法 白蛋白白蛋白-溴甲酚绿比色法溴甲酚绿比色法 2.2.参考值参考值 3.3.临床意义临床意义白蛋白测定的临床意义白蛋白测定的临床意义 较少见较少见:严重腹泻、呕吐引起的脱水严重腹泻、呕吐引起的脱水,广泛性烧伤广泛性烧伤,急性大出血急性大出血 1.1.蛋白质摄入缺乏蛋白质摄入缺乏:慢性胃肠道疾病慢性胃肠道疾病,营养不良营养不良,妊娠后期妊娠后期,哺乳期哺乳期 2.2.白蛋白合成功能不全白蛋白合成功能不全:肝硬化肝硬化,肝功肝功严重损伤严重损伤,慢性感染慢性

3、感染,恶性贫血恶性贫血 3.3.蛋白质消耗太多蛋白质消耗太多:甲亢甲亢,糖尿病糖尿病,慢慢性消耗性疾病性消耗性疾病,恶性肿瘤恶性肿瘤 4.4.蛋白质丧失增多蛋白质丧失增多:肾病综合征肾病综合征,严重严重烧伤烧伤 1.1.肝肾疾病肝肾疾病:慢肝慢肝,肝硬化肝硬化,肾病综合征肾病综合征 2.2.自身免疫病自身免疫病:风湿热风湿热,系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮 3.3.恶性肿瘤及某些血液病恶性肿瘤及某些血液病:多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤,淋巴细胞性白血病淋巴细胞性白血病 4.4.感染性疾病感染性疾病:疟疾疟疾,丝虫病丝虫病,血吸虫病血吸虫病 1.1.球蛋白减少或缺乏症球蛋白减少或缺乏症 2.2.使用大

4、量网状内皮系统抑制后使用大量网状内皮系统抑制后,如如6-6-巯基巯基嘌呤等化疗后嘌呤等化疗后球蛋白测定的临床意义球蛋白测定的临床意义(二二)血清蛋白电泳血清蛋白电泳 1.1.原理原理 2.2.参考值参考值 3.3.临床意义临床意义(三三)前白蛋白前白蛋白(四四)血氨血氨急性 1 亚急性 慢性或早期肝硬变 中期 Alb 晚期 几种疾病的蛋白电泳变化几种疾病的蛋白电泳变化病名病名 白蛋白白蛋白 1 2 肾病肾病 肝硬化肝硬化 -桥桥 原发性肝癌原发性肝癌 AFP 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤 慢性炎症慢性炎症 无无-球蛋白血症球蛋白血症 双白蛋白血症双白蛋白血症 双峰双峰(五五)甲胎蛋白甲胎蛋白 胚胎

5、期由卵黄囊、胎儿肝合成,胃肠道也能产生少量,肝癌细胞也可重现的癌胚蛋白质。70kD,pI4.75,590aa,单链,含4糖,包括甘露糖、半乳糖、乙酰氨基葡萄糖和岩藻糖,形成寡糖链。-球蛋白区 调节渗透压、抑制细胞免疫反响和体液免疫反响、结合或转运激素以及作为血清蛋白的前体。孕后第六周开始合成,1315周龄含量最高,40周时仅为最高含量的1。检测方法:琼脂双向扩散、琼脂对流免疫电泳、间接反向血球凝集试验、放射火箭电泳自显影和放射免疫分析。对原发性肝癌的诊断意义1早期诊断:升高数十倍至数万倍。500g/L者,均可诊为肝癌。我国自1971年普查,无病症体征的亚临床癌在肝癌病人中占为直径5cm的小肝癌

6、。2 2准确诊断准确诊断:ALT ALT正常正常,排除妊娠与生殖腺胚胎性肿排除妊娠与生殖腺胚胎性肿瘤瘤,AFP,AFP呈持续阳性一个月呈持续阳性一个月,诊断肝癌的准确诊断肝癌的准确性可达性可达100100.AFP200g/L.AFP200g/L持续持续2 2个月者个月者,准确性达。准确性达。3 3对肝癌患者病情和预后判断对肝癌患者病情和预后判断:AFP AFP含量与肿瘤大小成正相关。与恶性含量与肿瘤大小成正相关。与恶性程度相关。程度相关。手术或药物治疗有效时手术或药物治疗有效时,AFP,AFP含量多下含量多下降降,复发或恶化时复发或恶化时,又上升。又上升。4 4局限性局限性:占原发性肝癌占原发

7、性肝癌30304040的胆管细胞癌的胆管细胞癌,多为阴性多为阴性,即使是肝细胞癌也有即使是肝细胞癌也有1010左左右阴性。右阴性。一些良性肝病、新生儿、孕妇及胃癌一些良性肝病、新生儿、孕妇及胃癌等等,出现假阳性的百分率也相应升高。出现假阳性的百分率也相应升高。AFPAFP异质体异质体:根据对刀豆凝集素根据对刀豆凝集素ConAConA和和小扁豆凝集素小扁豆凝集素(LCA)(LCA)结合能力的不结合能力的不同同,AFP,AFP可分为结合型或非结合型可分为结合型或非结合型,特别特别是是LCALCA能识别肝癌能识别肝癌AFPAFP糖链的岩藻糖基。糖链的岩藻糖基。三、胆红素代谢试验三、胆红素代谢试验(一

8、一)根本概念根本概念 1.胆红素来源胆红素来源 (1)衰老红细胞衰老红细胞 (2)幼红细胞幼红细胞 (3)肌红蛋白肌红蛋白 2.间接胆红素间接胆红素 3.直接胆红素直接胆红素 珠蛋白,Fe(代谢池代谢池)衰老红细胞血红蛋白血红素胆绿素胆红素(游离游离/非结合非结合/间接胆红素间接胆红素)(不溶于水不溶于水,不能由肾脏排出不能由肾脏排出)肝脏肝脏 葡萄糖醛酸基转移酶葡萄糖醛酸基转移酶葡萄糖醛酸-胆红素(结合结合/直接胆红素直接胆红素)(溶于水溶于水,可由肾脏排出可由肾脏排出)4.胆红素的正常代谢胆红素的正常代谢(二二)黄疸时胆红素代谢异常黄疸时胆红素代谢异常 1.1.溶血性黄疸溶血性黄疸 2.2

9、.肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸 3.3.阻塞性黄疸阻塞性黄疸(三三)检测方法检测方法血清黄疸指数测定血清黄疸指数测定 目测目测:以以1:100001:10000稀释度的重铬酸钾为稀释度的重铬酸钾为一个单位一个单位 2-6 2-6 单位单位:正常正常 7-157-15单位单位:隐性黄疸隐性黄疸 15 15 单位单位:巩膜染黄巩膜染黄 结果受结果受 溶血、脂血症、药物溶血、脂血症、药物 的影响的影响测定胆红素的价值在于测定胆红素的价值在于:(1)(1)发现隐性黄疸发现隐性黄疸 (2)(2)了解黄疸的开展和转化了解黄疸的开展和转化 (3)(3)鉴别黄疸种类鉴别黄疸种类血清胆红素定量试验血清胆红素定量试验

10、 尿中直接胆红素可被碘液氧尿中直接胆红素可被碘液氧化成绿色的胆绿素化成绿色的胆绿素,而被检出。而被检出。尿中胆红素定性试验尿中胆红素定性试验碘碘 在酸性溶液中在酸性溶液中,尿中尿胆原与对尿中尿胆原与对二甲氨基苯甲醛发生反响二甲氨基苯甲醛发生反响,形成樱红形成樱红色化合物。色化合物。正常人阴性或弱阳性。正常人阴性或弱阳性。尿胆原定性试验尿胆原定性试验四、血清酶学检查四、血清酶学检查1.1.肝细胞内酶生成亢进或低下肝细胞内酶生成亢进或低下2.2.肝细胞膜通透性增高肝细胞膜通透性增高3.3.肝细胞变性坏死肝细胞变性坏死4.4.酶排出的障碍酶排出的障碍5.5.激活剂、抑制剂的影响激活剂、抑制剂的影响(

11、一一)血清酶活性变化机制血清酶活性变化机制1.1.肝细胞实质性损害肝细胞实质性损害:AST:AST、ALTALT、GDHGDH、LDHLDH2.2.胆道疾患胆道疾患:ALP:ALP、GGTGGT、5-NT5-NT3.3.肝脏实质纤维化肝脏实质纤维化:MAO:MAO、-NAH-NAH4.4.肝脏肿瘤肝脏肿瘤:5-NPDase:5-NPDase、ACTACT(二二)诊断肝胆疾病常用酶的分类诊断肝胆疾病常用酶的分类1.1.转氨酶转氨酶 丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶 Alanine aminotransferase,Alanine aminotransferase,ALTALT Glutamic

12、pyruvic transaminase,Glutamic pyruvic transaminase,GPTGPT 天冬氨酸氨基转移酶天冬氨酸氨基转移酶 Aspartate aminotransferase,Aspartate aminotransferase,ASTAST Glutamic oxaloacetic transaminase,Glutamic oxaloacetic transaminase,GOTGOT(三三)酶学检查酶学检查丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶,ALT,ALT 谷丙转氨酶谷丙转氨酶,GPT,GPT丙氨酸丙氨酸 酮戊二酸酮戊二酸 ALT ALT 丙酮酸谷氨酸丙酮酸

13、谷氨酸丙酮酸丙酮酸NADH LDH NADH LDH 乳酸乳酸NADNAD天冬氨酸氨基转移酶天冬氨酸氨基转移酶,AST,AST 谷草转氨酶谷草转氨酶,GOT,GOT天冬氨酸天冬氨酸-酮戊二酸酮戊二酸 AST AST 草酰乙酸草酰乙酸+谷氨酸谷氨酸草酰乙酸草酰乙酸NADH MDH NADH MDH 苹果酸苹果酸NADNADAspartate Transaminase,AST,GOT,EC 2.6.1.1Aspartate Transaminase,AST,GOT,EC 2.6.1.1天冬氨酸天冬氨酸:-:-酮戊二酸氨基转移酶酮戊二酸氨基转移酶 天冬氨酸天冬氨酸 +-+-酮戊二酸酮戊二酸 草酰乙酸

14、草酰乙酸 +谷氨酸谷氨酸 ASTs,ASTmASTs,ASTm天冬氨酸氨基转移酶同工酶天冬氨酸氨基转移酶同工酶天冬氨酸天冬氨酸 +-+-酮戊二酸酮戊二酸 草酰乙酸草酰乙酸 +谷氨酸谷氨酸 草酰乙酸草酰乙酸 +固蓝固蓝BB紫红色紫红色酶带确定酶带确定:ASTs ASTs球蛋白区球蛋白区 ASTmASTm球蛋白区球蛋白区参考值参考值:仅见非深染的仅见非深染的ASTsASTs酶带酶带ASTAST同工酶电泳法测定原理同工酶电泳法测定原理ASTs(ASTs(或或ASTm)ASTm)抗抗ASTs(ASTs(或抗或抗ASTm)ASTm)PEGPEG 参考值参考值:ASTm 4.5:ASTm 4.5 2.6

15、U/L,ASTs 22.9 2.6 U/L,ASTs 22.9 4.1 U/L 4.1 U/L离心沉淀离心沉淀测上清液测上清液ASTASTASTAST同工酶免疫沉淀法测定原理同工酶免疫沉淀法测定原理1.AMI:AMI:总总AST 6AST 68h488h4860h460h45d5d ASTm:ASTm:亚细胞水平损害亚细胞水平损害 晚晚5h 5h 3 37d:ASTm/7d:ASTm/总总AST 25.7AST 25.7 我院我院:ASTm:12h36h120h:ASTm:12h36h120h 死亡死亡:ASTm 84.9:ASTm 84.9 57.8 U/L 57.8 U/L 存活存活:24

16、.7:24.7 16.3 U/L 16.3 U/L2.2.肝病肝病:急、慢性肝炎急、慢性肝炎,活动性肝硬变活动性肝硬变 ASTm,ASTm,评价评价 预后预后3.3.肿瘤肿瘤:局灶性肝恶性变局灶性肝恶性变 ASTs:ASTm=1:1ASTs:ASTm=1:14.4.肌营养不良肌营养不良ASTAST同工酶临床评价同工酶临床评价转氨酶测定的临床意义转氨酶测定的临床意义急性肝炎:早期诊断,预后AST/ALT比值ALT与黄疸别离:重症肝炎ALT与AFP关系:肝炎:AFP,ALT 肝硬化:AFP低水平升高 肝癌:AFP进行性升高器官或组织器官或组织 AST ALTAST ALT心肌心肌 7800 450

17、7800 450肝脏肝脏 7100 28507100 2850骨骼肌骨骼肌 5000 3005000 300肾脏肾脏 4500 12004500 1200胰腺胰腺 1400 1301400 130脾脏脾脏 700 80700 80肺肺 500 45500 45红细胞红细胞 15 715 7血清血清 1 11 1AST,ALT在人体组织中的相对活性在人体组织中的相对活性AST/ALTAST/ALT比值比值AST/ALT AST/ALT 正常人正常人 1.15,1.15,急性病毒性肝炎早期急性病毒性肝炎早期 或轻型肝炎时或轻型肝炎时 0.56(1)0.56(3.03.0转氨酶测定的临床意义转氨酶测

18、定的临床意义急性肝炎:早期诊断,预后AST/ALT比值ALT与黄疸别离:重症肝炎ALT与AFP关系:肝炎:AFP,ALT 肝硬化:AFP低水平升高 肝癌:AFP进行性升高乳酸脱氢酶同工酶乳酸脱氢酶同工酶Lactate Dehydrogenase,LDH,LD,EC 1.1.1.27 Lactate Dehydrogenase,LDH,LD,EC 1.1.1.27 L-L-乳酸乳酸:NAD:NAD氧化复原酶氧化复原酶 pH8pH89.89.8 乳酸乳酸 +NAD+NAD+丙酮酸丙酮酸 +NADH +H+NADH +H+7.87.8 LDH 1 LDH 15 H,M,MW 140,000.5 H,

19、M,MW 140,000.LDH 1,2:LDH 1,2:心肌心肌,肾肾,红细胞红细胞 LDH 3:LDH 3:肺肺,脾脾,胰胰,甲状腺甲状腺,肾上腺肾上腺,淋巴结淋巴结 LDH 4,5:LDH 4,5:骨骼肌骨骼肌,肝肝 LDH x:LDH x:睾丸睾丸,精子精子 LDHLDH同工酶电泳法测定原理同工酶电泳法测定原理 月无无日乳酸 NAD 甲 (紫蓝色)LDH PMS丙酮酸 NADH NBT 琼脂糖电泳法参考值琼脂糖电泳法参考值LDH1 28.4 5.3 LDH2 41.0 5.0LDH3 19.0 4.0 LDH4 6.6 3.5 LDH5 4.6 3.0 1,6-1,6-己二醇能特异地抑

20、制乳酸脱氢酶中的M亚基,在控制1,61,6-己二醇的浓度和抑制时间的条件下,可将LDHLDH2 25 5全部抑制灭活,而直接测定LDHLDH1 1活力。抑制法测定抑制法测定 LDHLDH1 1 原理原理 将待测血清与抗LDHLDH5 5抗体温育,抗体与血清中含有M亚基的LDHLDH2 25 5结合,沉淀免疫复合物,测定上清液中的LDHLDH1 1活力。免疫沉淀法测定免疫沉淀法测定 LDHLDH1 1 原理原理1.AMI:.AMI:总总LDH:12LDH:1218h3d718h3d714d14d LDH LDH1 1:6h24h:6h24h LDH LDH1 1/LDH/LDH2 2=1 24h

21、=1 24h 轻症轻症:总总LDHLDH正常正常,同工酶有变化同工酶有变化 同时有心衰、心源性休克同时有心衰、心源性休克,LDH,LDH5 5 总总LDH:LDH:敏感性敏感性 95.895.8,特异性特异性 89.389.3 LDHLDH1 1:敏感性敏感性 8686,特异性特异性 91.391.3 LDHLDH1 1/LDH/LDH2 2:敏感性敏感性 91.691.6,特异性特异性 92.792.7LDHLDH同工酶临床评价同工酶临床评价 2.2.肝病肝病:急肝急肝:LDH1,2,LDH5:LDH1,2,LDH5 肝硬化肝硬化:LDH2,LDH5:LDH2,LDH5 肝癌肝癌:LDH1,

22、LDH2,:LDH1,LDH2,LDH3,LDH5;LDH3,LDH5;3.3.肿瘤肿瘤:M M 100 100 LDH5 LDH5 93.7 93.7 LDH4 LDH4 66.1 66.1 LDH3LDH34.4.生殖细胞恶性肿瘤和肾胚细胞瘤生殖细胞恶性肿瘤和肾胚细胞瘤:LDH1,1 2 LDH1,1 2LDH同工酶常见谱型分析1.LDH1和LDH2增加:涉及组织损伤:AMI、心肌炎、心肌缺氧、肾堵塞。涉及溶血的疾病:恶性贫血、自身免疫性溶血性贫血、镰形细胞性贫血、地中海贫血、血肿吸收、手术引起的溶血、夜间阵发性血红蛋白尿。2.5种同工酶都增加种同工酶都增加,但但LDH5 相对地增加最大相

23、对地增加最大:肝损伤:肝炎、胆汁淤积。骨骼肌伤:外伤、广泛性外科手术引起骨骼肌伤、坏死和炎症、进行性肌营养不良 缺氧3.LDH2、LDH3、LDH4中间带增加中间带增加:肺、胰、脾、淋巴结和唾液腺坏死和炎症。血小板增多或组织凝血酶原激酶样物质进入血流引起的损伤。4.LDH1,LDH5同时增加同时增加:心肝同时受累Alkaline phosphatase,磷酸单酯磷酸水解酶磷酸单酯+H2O磷酸+酚(醇)膜结合糖蛋白肝,骨,肾,肠,胎盘,胆汁,白细胞碱性磷酸酶碱性磷酸酶ALP基因 三种遗传基因控制 胎盘ALP,肠ALP,肝/骨/肾ALP 糖链结构差异碱性磷酸酶碱性磷酸酶(ALP(ALP或或AKP)

24、AKP)磷酸对硝基苯磷酸对硝基苯H H2 2O O ALP ALP 对硝基酚磷酸对硝基酚磷酸同工酶测定方法同工酶测定方法 物理学方法(电泳、层析)选择性灭活法(抑制剂,热变性)免疫学方法电泳染色原理 -萘磷酸钠+H2O-萘酚+磷酸钠 -萘酚+固蓝B紫色酶定位 肝ALP:2 骨ALP:2-肝骨混合带:2-肠ALP与胎盘ALP:-胆汁ALP:1参考值:肝,骨热稳定性试验热稳定性试验ALP同工酶同工酶 5610min()6510min()骨 0.195 0 肝 1.778 0 肠 胎盘 90.799 8794抑制剂的敏感试验 尿素苯丙氨酸 尿素-ALP/总ALP=0.1-0.2 肝ALP 尿素-AL

25、P/总ALP=0.01-0.09 骨ALP 苯丙-ALP/总ALP0.6 胎盘ALP 苯丙-ALP/总ALP0.7 非胎盘ALP生理性增加生理性增加:骨生长、妊娠、脂肪餐后骨生长、妊娠、脂肪餐后病理性增加病理性增加:1.1.肝损伤肝损伤 2.2.成骨性损伤成骨性损伤 3.3.肿瘤肿瘤 4.4.胆汁淤积胆汁淤积ALP测定的临床意义测定的临床意义有助于黄疸的鉴别有助于黄疸的鉴别 1.80的阻塞性黄疸ALP升高,ALT仅轻度升高 2.肝细胞性黄疸ALT很高,ALP正常或稍高。3.肝内局限性胆道阻塞时,ALP明显升高,ALT无明显增加,胆红素不高。血清血清ALPALP增高机制增高机制膜胆汁从膜别离透入

26、血中肿瘤细胞合成炎症刺激邻近肝细胞产生ALP成骨细胞增生ALP同工酶的临床意义 胆汁型胆汁型ALP:ALP:肝外阻塞性黄疸肝外阻塞性黄疸,转移性肝癌转移性肝癌 阳性率高阳性率高;肝内胆汁淤积肝内胆汁淤积,原发性肝癌原发性肝癌 阳性率低阳性率低.胎盘型胎盘型ALP:ALP:测定胎盘功能的指标测定胎盘功能的指标胆汁型胆汁型ALPALP在肿瘤肝转移中的阳性率在肿瘤肝转移中的阳性率 肿瘤 总例数 肝转移 胆汁型ALP的阳性数 例数()有肝转移 无肝转移 肺癌 77 56(72.7)50(89.3)6(28.6)结肠癌 62 44(70.9)40(90.9)4(22.2)胃癌 49 24(48.9)20

27、(83.3)4(16.0)胰头癌 32 31(96.9)29(93.5)1(100)乳腺癌 24 15(62.5)13(86.7)2(22.2)骨癌 19 4(21.1)4(100.0)0(0.0)前列腺癌 15 7(46.6)4(57.1)2(25.0)研究的非肝癌肿瘤病人278例,肿瘤肝转移有181例,胆汁型ALP对诊断肿瘤肝转移的灵敏度为,特异性为79.1。因此胆汁型ALP对监测肿瘤肝转移具有较高的价值。胎盘胎盘ALP:ALP:妊娠最后三个月时在血清妊娠最后三个月时在血清中增加很快中增加很快,分娩前突然下降分娩前突然下降,产生产生3 34 4天即消失一半天即消失一半,作为作为胎盘功能好坏

28、的指标。胎盘功能好坏的指标。骨骨ALP:ALP:病理性成骨、破骨、生长发育 不能用于鉴别非恶性骨病的恶性肿瘤骨转移,但骨肿瘤的阳性率高。肠肠ALP:ALP:正常胃及食道粘膜无ALP,当肠腺化生时,ALP可以增高,此种ALP证明是肠ALP,对早期发现胃癌有所帮助。类胎盘类胎盘ALP:ALP:Regan ALP:常见于睾丸、卵巢和胰腺癌 Nagao ALP:胰尾部腺癌和转移性胆管腺癌 认为这些类胎盘ALP是胎盘型ALP在癌组织的异位合成。ALPALP糖链糖链 恶性肿瘤所产生的胎盘ALP和肝ALP的糖链不同于正常器官所产生的ALP的糖链。正常器官的糖链改变成为肿瘤特有的糖链,与细胞的恶性转化有关。-

29、Glutamyltransferase,-GT,GGT,EC2.3.2.2.-谷氨酰-多肽:氨基酸-谷氨酰基转移酶 谷胱甘肽+氨基酸-谷氨酰氨基酸+Cys-Gly 膜结合糖蛋白 肾:胰:肝=44:13:4 尿血 -谷氨酰基转移酶GGTGGT基因基因人类基因组中有一GGT基因家族Courtay证实人基因组中含有多个GGT基因组序列-谷氨酰环化转移酶氨基酸5羟脯氨酸2H2OATPADPPi谷氨酸ATPADPPi合成酶-谷氨酰半胱氨酸ATPADP+PiGSH合成酶谷氨酰半胱氨酰甘氨酸-谷氨酰转移酶氨基酸半胱氨酰甘氨酸甘氨酸半胱氨酸H2O肽酶细胞外 膜 细胞内-谷氨酰循环及其对氨基酸的转移作用谷氨酰循

30、环及其对氨基酸的转移作用-谷氨酰-氨基酸 -谷氨酰基转移酶谷氨酰基转移酶(-GT-GT或或GGT)GGT)谷氨酰谷氨酰对硝基苯胺双甘肽对硝基苯胺双甘肽 -GT 谷氨酰谷氨酰基双甘肽对硝基苯胺基双甘肽对硝基苯胺电泳染色原理 -谷氨酰谷氨酰萘胺萘胺+Gly-Gly+Gly-Gly -谷氨酰谷氨酰-Gly-Gly+-Gly-Gly+萘胺萘胺 -萘胺萘胺+固蓝固蓝BB紫红色紫红色酶定位 GGT1:GGT1:白前白前白区白区 GGT2:GGT2:白后白后1 1区区 GGT3:GGT3:1 1后后2 2区区 GGT4:GGT4:2 2后后区区 GGT5:GGT5:后后区区参考值:GGT1,GGT2:+GG

31、T1,GGT2:+当当ALPALP增高时可用于鉴别此增高的增高时可用于鉴别此增高的ALPALP是来源于肝还是骨是来源于肝还是骨,此点在孕妇尤为此点在孕妇尤为重要重要.确定酒精和某些药物对肝脏潜在危确定酒精和某些药物对肝脏潜在危险性。险性。-GT-GT同工酶电泳发现同工酶电泳发现-GT-GT4 4增高与增高与血清胆红素增高密切相关血清胆红素增高密切相关,出现出现-GT-GT1 1者者均有肝功能异常均有肝功能异常。-GT临床评价肝、胆、胰疾患GGT增高原因 传染性肝炎、慢性肝炎及肝硬化呈轻度或中度升高,阻塞性黄疸显著升高,胆汁性肝硬化、胆管炎显著升高,胰头癌/肝癌显著升高。胆汁和胰腺中GGT很高,这些脏器患病时胆汁或胰腺排出受阻,导致反流入血。增高的胆汁酸溶解与细胞膜相结合的可溶性GGT,使之进入血流。肝细胞损伤也使位于微粒体内的GTT释放增加。肿瘤时GGT增高原因 1.个体发育的逆转 2.适应癌细胞代谢需要,有利于解毒和氨基酸转运,满足癌细胞对营养的需要。甲亢、酒精性肝炎、前列腺癌、糖尿病患者血清GGT也可增高垂直板不连续梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳分析GGT同工酶 45例 47例 41例 39例 47例