第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析培训课件.ppt

1、第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析常见的苯乙胺类药物常见的苯乙胺类药物HOHOCOHHCH2NHCH3肾上腺素HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲肾上腺素CCCOOHCOOHOHHHHOHOCHOHCH2NHCH3 HCl盐酸去氧肾上腺素HOCHOHCH2NHCH(CH3)2 HClHO盐酸异丙肾上腺素 二、二、主要化学性质主要化学性质 1.1.弱碱性弱碱性 本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮 显弱碱性。显弱碱性。2.2.酚羟基特性酚羟基特性 本类药物结构中有酚羟基，可与本类药物结构中有酚羟基，可与 FeCl FeCl3 3;发生氧化。发生氧化。3.3

2、.光学活性光学活性 多数药物结构中有手性碳原子，具有旋多数药物结构中有手性碳原子，具有旋 光性。光性。样品制备：本品甲醇溶解即得0011(t1t0)相当于B的H2SO4盐可直接滴定,也可处理后滴定。本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2,H2O2,乙醚，醚层(紫红色)水层(蓝色)消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2 量不足终点不明显，结果偏低。滴定剂的稳定性 非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。硫酸苯丙胺的含量测定：P收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。P收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用

3、电位法指示终点。D CuSO4+NaOH若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为813的弱碱性药物采用本法滴定。本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2,H2O2,盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧 化，生成异丙肾上腺素红。五、与亚硝基铁氰化钠(Rimini试验）1mol/LHCl显绿色,甲氨试液显红紫红 红色高氯酸氢溴酸盐酸硫酸硝酸采用UV法检查：Kb1012时，应用醋酐作为溶剂。一、与三氯化铁反应一、与三氯化铁反应Ar-OHFeCl3络合显色络合

4、显色 碱液碱液颜色变化颜色变化二、甲醛硫酸反应二、甲醛硫酸反应 在此试剂中形成醌式结构在此试剂中形成醌式结构而显色。而显色。药药 物物 三氯化铁三氯化铁 甲醛硫酸甲醛硫酸 肾上腺素肾上腺素 0.1 0.1mol/LHClmol/LHCl显绿色显绿色,甲氨试液显红紫红甲氨试液显红紫红 红色红色 重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 绿色绿色,加加NaNa2 2COCO3 3试液显紫色红色试液显紫色红色 淡红色淡红色 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 紫色紫色 玫瑰红橙红棕红玫瑰红橙红棕红 盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 深绿色深绿色,加加5 5NaNa2 2COCO3 3试液显蓝紫色红色试

5、液显蓝紫色红色 棕色暗紫色棕色暗紫色三、氧化反应三、氧化反应 本类药物具有本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂易被氧化剂I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而显色，氧化而显色，例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被I2,H2O2 氧化后，生成肾上腺素红；氧化后，生成肾上腺素红；盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧氧 化，生成异丙肾上腺素红。化，生成异丙肾上腺素红。0011(t1t0)药 物 三氯化铁 甲醛硫酸乙醚，醚层(紫红色)水层(蓝色)盐酸去氧肾上腺素 配2.消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2 量不足终点不明显，结果偏低

6、。FeCl3;发生氧化。若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧 化，生成异丙肾上腺素红。若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml五、与亚硝基铁氰化钠(Rimini试验）显色：10铁氰化钾10亚硝基铁氰化钠10NaOHP收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。优选第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析0mg/ml =310nm A0.四、紫外特征吸收与红外吸收光谱P收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。四、紫外特征吸收与红外吸

7、收光谱四、紫外特征吸收与红外吸收光谱例如：例如：盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 0.05mg/ml max=280nm A=0.50 这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别五、与亚硝基铁氰化钠五、与亚硝基铁氰化钠(RiminiRimini试验）试验）是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；可用于重酒石是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；可用于重酒石酸间羟胺鉴别。酸间羟胺鉴别。D D 亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠 丙酮丙酮 NaNa2 2COCO3 3红紫色红紫色六、六、双缩脲反应双缩脲反应 是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄酸麻黄

8、碱，盐酸伪麻黄碱鉴别碱，盐酸伪麻黄碱鉴别D D CuSO CuSO4 4+NaOH+NaOH显蓝紫色显蓝紫色乙醚，醚层乙醚，醚层(紫红色紫红色)水层水层(蓝色蓝色)一、一、酮体检查酮体检查 本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢化不完全，易引入酮体杂质。化不完全，易引入酮体杂质。采用采用UVUV法检查：法检查：利用酮体在利用酮体在310310nmnm有吸收，本类药物无吸收。有吸收，本类药物无吸收。例如：肾上腺素本项检查例如：肾上腺素本项检查 配配2.02.0mg/ml =310nm A0.05mg/ml =310nm A0.05 盐酸去氧肾上腺

9、素盐酸去氧肾上腺素 配配2.02.0mg/ml =310nm Amg/ml =310nm A0.020.02 盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 配配2.02.0mg/ml =310nm Amg/ml =310nm A0.150.15 第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查二、二、有关物质的检查有关物质的检查 盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇TLCTLC 盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍PCPC 盐酸氨溴索盐酸氨溴索HPLCHPLC采用采用TLCTLC法中的高低浓度对比法进行检查。法中的高低浓度对比法进行检查。盐酸氨溴索的检查方法盐酸氨溴索的检查方法对照样品制备：本品对照样品

10、制备：本品供试品溶液供试品溶液对照溶液对照溶液(1/100)供试样品制备：本品供试样品制备：本品甲醇溶解甲醇溶解加甲醛溶液加甲醛溶液加热加热吹干溶剂吹干溶剂用水和流动相溶解用水和流动相溶解HPLC分析分析色谱条件：色谱条件：RP-HPLC 0.01mol/lNH4H2PO4-CH3CN(50:50);248 nm分析：对照溶液主成分峰为满量程的分析：对照溶液主成分峰为满量程的2025%，记，记录至主成分峰保留时间的录至主成分峰保留时间的2倍，注入供试品溶液，如倍，注入供试品溶液，如有杂峰，各杂峰的面积之和不得大于对照液主峰面积有杂峰，各杂峰的面积之和不得大于对照液主峰面积的三分之一。的三分之一

11、。例如：肾上腺素本项检查 配2.是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧 化，生成异丙肾上腺素红。本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及0mg/ml =310nm A0.1mol/LHCl显绿色,甲氨试液显红紫红 红色光性。对照样品制备：本品供试品溶液对照溶液(1/100)优选第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析0011(t1t0)五、与亚硝基铁氰化钠(Rimini试验）若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正相当于B的有机酸盐可直接滴定。盐酸氨溴索HPLC盐酸去氧肾上腺素 配2.盐酸去氧肾上腺素、硫酸

12、沙丁胺醇TLC样品制备：本品甲醇溶解即得重酒石酸去甲肾上腺素的测定四、紫外特征吸收与红外吸收光谱三、三、盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查PCPC法法样品制备：本品甲醇溶解即得样品制备：本品甲醇溶解即得展开：展开：7.550 cm，EtOAc-ethanol-water(6:3:1)显色：显色：10铁氰化钾铁氰化钾10亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠10NaOH检测：剪下显色斑点后甲醇萃取用检测：剪下显色斑点后甲醇萃取用UV法测定法测定 一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法(一一)基本原理基本原理当当HAHA酸性较强时，反应不能定量酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低

13、完成，必须除去或降低HAHA的酸性，的酸性，使反应顺利地完成。使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。因此，要根据不同情况采用相应测定条件。(二二)一般方法一般方法供供试试品品+冰冰醋醋酸酸10ml30ml若供试品为氢卤酸盐再若供试品为氢卤酸盐再加加5%5%醋酸汞的冰醋酸液醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml结结果果高氯酸滴定液滴定高氯酸滴定液滴定以空白以空白试验校试验校正正 (三)问题讨论1.适用范围 主要用于Kb108的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终

14、点指示的方法，可使pKb为813的弱碱性药物采用本法滴定。一般来说 Kb为1081010时，宜选冰醋酸作为溶剂；药物的 Kb为10101012时，宜选冰醋酸与醋酐的混合 溶液；Kb1012时，应用醋酐作为溶剂。另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果。2.2.酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：列排序递减：高氯酸氢溴酸盐酸硫酸硝酸高氯酸氢溴酸盐酸硫酸硝酸 消除消除HXHX干扰的方法：加干扰的方法：加Hg(Ac)Hg(Ac)2 2 量不足终点不明显，量不足终点不明显，结果偏

15、低。结果偏低。2 2B BHX +Hg(Ac)HX +Hg(Ac)2 2 2B 2BHAc +HgXHAc +HgX2 2 过量过量(1(13 3倍倍)不影响测定结果不影响测定结果3.3.滴定剂的稳定性滴定剂的稳定性 非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。滴定剂的浓度。若滴定样品与标定若滴定样品与标定HClO4HClO4溶液时的温度不一致，温差溶液时的温度不一致，温差未超过未超过1010时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校

16、正加以校正 N1=N0/1+0.0011(t1t0)N1=N0/1+0.0011(t1t0)4.4.终点指示方法终点指示方法 常用电位法和指示剂法。常用电位法和指示剂法。Ch.PCh.P收载的收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。电位法指示终点。应用实例应用实例 本类药物的原料药多采用此法。本类药物的原料药多采用此法。1.1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定重酒石酸去甲肾上腺素的测定 相当于相当于B B的有机酸盐可直接滴定。的有机酸盐可直接滴定。2.2.盐酸克仑特罗的测定盐酸克仑特罗的测定 相当于相当于B B的的HXHX酸盐

17、不能直接滴定，需加酸盐不能直接滴定，需加Hg(Ac)Hg(Ac)2 2处理后滴定。处理后滴定。3.3.硫酸沙丁醇的测定硫酸沙丁醇的测定 相当于相当于B B的的H H2 2SOSO4 4盐可直接滴定盐可直接滴定,也可处理后滴也可处理后滴定。定。化不完全，易引入酮体杂质。本类药物的原料药多采用此法。若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正0mg/ml =310nm A0.消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2 量不足终点不明显，结果偏低。K3Fe(CN)6氧化而显色，盐酸苯乙双胍PC盐酸苯乙双胍PC基本原理：药物的盐酸盐或硫酸盐易溶于水

18、，而药物本身不溶于水，加适量碱化试剂后，用适当的有机溶剂萃取，提取也蒸干后用中性乙醇溶解，用标准酸液直接滴定，或加入滴定过量的标准酸溶液，用标准碱溶液进行回滴。化不完全，易引入酮体杂质。盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧 化，生成异丙肾上腺素红。三、盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查PC法四、紫外特征吸收与红外吸收光谱盐酸异丙肾上腺素 深绿色,加5Na2CO3试液显蓝紫色红色 棕色暗紫色若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正滴定剂的稳定性 非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。

19、分析：对照溶液主成分峰为满量程的2025%，记录至主成分峰保留时间的2倍，注入供试品溶液，如有杂峰，各杂峰的面积之和不得大于对照液主峰面积的三分之一。0011(t1t0)显色：10铁氰化钾10亚硝基铁氰化钠10NaOH优选第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析盐酸苯乙双胍PC二、二、溴量法溴量法 本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及其注射液用此法。其注射液用此法。基本原理：基本原理：HOOHCH-CH2NHCH3 +Br2HOOHCH-CH2NHCH3 +3HBrBrBrBr Br2 +2KI 2KBr +I2 I2 +2Na2S2O3 2NaI +

20、Na2S4O6基本操作：供试品基本操作：供试品精密称定精密称定加水溶解后精加水溶解后精密加溴滴定液盐酸密加溴滴定液盐酸放置并振摇放置并振摇加碘化钾加碘化钾振摇振摇用用Na2S2O3滴定至近终点滴定至近终点加淀粉指加淀粉指示液示液继续滴定至蓝色消失继续滴定至蓝色消失同时进行空白实验同时进行空白实验三、提取酸碱滴定法三、提取酸碱滴定法 基本原理：药物的盐酸盐或硫酸盐易溶于水，基本原理：药物的盐酸盐或硫酸盐易溶于水，而药物本身不溶于水，加适量碱化试剂后，用适而药物本身不溶于水，加适量碱化试剂后，用适当的有机溶剂萃取，提取也蒸干后用中性乙醇溶当的有机溶剂萃取，提取也蒸干后用中性乙醇溶解，用标准酸液直接

21、滴定，或加入滴定过量的标解，用标准酸液直接滴定，或加入滴定过量的标准酸溶液，用标准碱溶液进行回滴。准酸溶液，用标准碱溶液进行回滴。肾上腺素 0.D 亚硝基铁氰化钠 丙酮 Na2CO3盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇TLCD 亚硝基铁氰化钠 丙酮 Na2CO3盐酸去氧肾上腺素 配2.1mol/LHCl显绿色,甲氨试液显红紫红 红色Kb1012时，应用醋酐作为溶剂。盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧 化，生成异丙肾上腺素红。光性。在此试剂中形成醌式结构而显色。盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧 化，生成异丙肾上腺素红。采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。盐酸去氧肾上腺素 配2.滴定剂的稳

22、定性 非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。化不完全，易引入酮体杂质。显弱碱性。K3Fe(CN)6氧化而显色，适用范围 主要用于Kb108的有机碱盐的含量测定。相当于B的有机酸盐可直接滴定。优选第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析本类药物的原料药多采用此法。消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2 量不足终点不明显，结果偏低。检测：剪下显色斑点后甲醇萃取用UV法测定本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2,H2O2,适用范围 主要用于Kb108的有机碱盐的含量测定。是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；光性。对照样品制备：本品供试品溶液对照溶液(1/100)

23、因此，要根据不同情况采用相应测定条件。采用UV法检查：盐酸去氧肾上腺素 配2.显弱碱性。显弱碱性。2BHX +Hg(Ac)2 2BHAc +HgX20mg/ml =310nm A0.消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2 量不足终点不明显，结果偏低。二、甲醛硫酸反应因此，要根据不同情况采用相应测定条件。若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正盐酸去氧肾上腺素 配2.P收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。高氯酸氢溴酸盐酸硫酸硝酸优选第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析0011(t1t0)乙醚，醚层(紫红色

24、)水层(蓝色)相当于B的H2SO4盐可直接滴定,也可处理后滴定。是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；基本原理：药物的盐酸盐或硫酸盐易溶于水，而药物本身不溶于水，加适量碱化试剂后，用适当的有机溶剂萃取，提取也蒸干后用中性乙醇溶解，用标准酸液直接滴定，或加入滴定过量的标准酸溶液，用标准碱溶液进行回滴。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为813的弱碱性药物采用本法滴定。优选第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析分析：对照溶液主成分峰为满量程的2025%，记录至主成分峰保留时间的2倍，注入供试品溶液，如有杂峰，各杂峰的面积之和不得大于对照液主峰面积的三分之一。四、紫外特

25、征吸收与红外吸收光谱0mg/ml =310nm A0.2BHX +Hg(Ac)2 2BHAc +HgX2(三)问题讨论优选第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析药物的 Kb为10101012时，宜选冰醋酸与醋酐的混合 溶液；药 物 三氯化铁 甲醛硫酸0011(t1t0)化不完全，易引入酮体杂质。三、盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查PC法光性。优选第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析Kb1012时，应用醋酐作为溶剂。对照样品制备：本品供试品溶液对照溶液(1/100)适用范围 主要用于Kb108的有机碱盐的含量测定。色谱条件：RP-HPLC 0.采用UV法检查：D CuSO4+NaOH因此，要根据不同情况采

26、用相应测定条件。酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：0011(t1t0)盐酸苯乙双胍PC化不完全，易引入酮体杂质。盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧 化，生成异丙肾上腺素红。一、与三氯化铁反应是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；滴定剂的稳定性 非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2 量不足终点不明显，结果偏低。对照样品制备：本品供试品溶液对照溶液(1/100)硫酸苯丙胺的含量测定：硫酸苯丙胺的含量测定：BH2SO4+NaOH+NaCl乙醚乙醚提取提取B+H2SO4蒸去乙醚蒸去乙醚NaOHNaOH标准液滴定标准液滴定终点终点