临床微生物检验与临床课件.ppt
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- 临床 微生物 检验 课件
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1、临床微生物检验与临床临床微生物检验与临床临床微生物科 李 浩微生物检验的重要性微生物检验的重要性n在医学高度发展,新的抗菌药物不断涌现的今天,感染性疾病的发病率和病死率仍然居高不下。主要原因之一是当代的感染性疾病,在病原上发生了较大的变化,形成了现代感染性疾病在病原学上的新特点 现代感染性疾病的新特点现代感染性疾病的新特点n以条件致病菌为主:很多低致病、弱毒的细菌,在外环境、人体体表以及与外界相通的腔道中广泛存在的细菌,引起感染甚至造成严重后果的现象日益增多。n病原菌的种类更为广泛:包括需氧菌、厌氧菌、苛氧菌、分枝杆菌和真菌等。n细菌的耐药性不断增强:同一种细菌对抗生素的耐药性可以完全不同,甚
2、至出现同时耐多种抗生素的“多重耐药”细菌,往往使临床医师的“经验性”治疗或所谓的常规治疗根本无效。现代感染性疾病的新特点现代感染性疾病的新特点 提高感染样本送检率提高感染样本送检率 加强细菌耐药监测加强细菌耐药监测 关注细菌性疾病的病原学诊断,已成关注细菌性疾病的病原学诊断,已成为临床工作者、临床微生物与微生态工作者、为临床工作者、临床微生物与微生态工作者、药学家和从事感染控制的工作者共同关注的药学家和从事感染控制的工作者共同关注的热门焦点。热门焦点。病原微生物送检是感染控制的基础成功治疗感染症的因素成功治疗感染症的因素 成功分离病原菌成功分离病原菌 标本收集、运送、保存标本收集、运送、保存
3、标本处理方法标本处理方法 检验医师专业知识检验医师专业知识 医师判读病原菌培养结果医师判读病原菌培养结果 选择适当治疗方法选择适当治疗方法临床医生要合理用好两种数据n1.1.本地区、本单位病原流行病学资料,本地区、本单位病原流行病学资料,指导经验用药。指导经验用药。(微生物室、院感科、(微生物室、院感科、临床科室)临床科室)n2.2.药敏试验报告,纠正经验用药。药敏试验报告,纠正经验用药。重视病原学检查重视病原学检查,尽可能在应用抗菌药尽可能在应用抗菌药物之前留取标本送检。以提高病原学诊物之前留取标本送检。以提高病原学诊断率断率,为选药和调整药物提供依据。为选药和调整药物提供依据。“正确的微生
4、物学检验始自正确的标本采取。临床医师、护师及检验技师都必须通晓其要领。”著名的临床微生物检验专著Manual of Clinical Microbiology 的主编Patrick Murray 标本采集和运送是细菌培养成功的最最重要的关键 但由于标本的采集和运送常由护士或医生或病人自己完成,所以也是最不容易做好的事情,而且不知道问题所在之处,造成的后果是:临床医生最不能接受的问题:阳性率低国内微生物标本的采集目前存在的问题国内微生物标本的采集目前存在的问题 :标本送检率低标本送检率低 从全国来看,抗感染治疗从全国来看,抗感染治疗前,送检相关标本可能只占应送标本的一半前,送检相关标本可能只占应
5、送标本的一半左右,与抗菌药物应用率之高形成鲜明的反左右,与抗菌药物应用率之高形成鲜明的反差。一些医师在经验性治疗受挫后方送标本,差。一些医师在经验性治疗受挫后方送标本,此时已失去阳性培养的机会。此时已失去阳性培养的机会。标本有缺陷标本有缺陷 正确收集各种临床标本,正确收集各种临床标本,关注特检标本采样与送检的方法和条件,是关注特检标本采样与送检的方法和条件,是完成病原学诊断的先决条件。完成病原学诊断的先决条件。微生物让人类步步为营,微生物让人类步步为营,我们应该追求:我们应该追求:“准确的病原学诊断准确的病原学诊断”“针对性病原学治疗针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送,正确的微生物标
6、本采集和运送,是准确的病原学诊断的前提!是准确的病原学诊断的前提!基本原则基本原则1.1.及时采集微生物标本作病原学检查及时采集微生物标本作病原学检查2.2.在抗菌药物使用前采集标本在抗菌药物使用前采集标本3.3.采样时严格执行无菌操作采样时严格执行无菌操作4.4.采样后立即送检采样后立即送检5.5.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂6.6.送检标本应注明来源和检验目的送检标本应注明来源和检验目的常见不合格标本主要有以下问题:常见不合格标本主要有以下问题:n标本采集时间错误标本采集时间错误n容器错误容器错误n标本量不足标本量不足n 标本采集延误标本采集延误
7、n 标本未及时正确运送标本未及时正确运送n 以及暂存条件错误。以及暂存条件错误。n 。最有价值的细菌学检测项目最有价值的细菌学检测项目n 血液培养血液培养n 脑脊液培养脑脊液培养n 胆汁培养胆汁培养n 胸腹水培养胸腹水培养n 关节液关节液n 其他无菌体液或分泌液其他无菌体液或分泌液血培养标本血培养标本采集与运送目前血培养的问题目前血培养的问题:n采血时机不合适采血时机不合适n采血套数不够采血套数不够n采血量不足采血量不足n只做需氧培养,不同时做厌氧培养只做需氧培养,不同时做厌氧培养n采血前或采血时正在使用抗生素治疗采血前或采血时正在使用抗生素治疗相似规模医院的血培养数 国内多数三甲综合医院国内
8、多数三甲综合医院2 210 10 瓶瓶/天天 复旦大学中山医院复旦大学中山医院20205050瓶瓶/天天 香港玛丽医院香港玛丽医院200200瓶瓶/天天 台湾大学医院台湾大学医院300300瓶瓶/天天 我院约我院约10101515瓶瓶/天天1370瓶瓶/2011年年7月月26日日美国,亚特兰大,埃默里大学附属一院,美国,亚特兰大,埃默里大学附属一院,1100床位床位平均平均100 人次人次/天天美国,亚特兰大,埃默里大学附属二院,美国,亚特兰大,埃默里大学附属二院,900床位床位实验室类型实验室类型:美国私立大医院微生物实验室美国私立大医院微生物实验室医院病床数医院病床数:800 beds微生
9、物标本量微生物标本量:600个标本个标本/天天血培养标本量血培养标本量:150 瓶瓶/天天血培养标准采样血培养标准采样:3套瓶套瓶/24小时小时(1个需氧瓶个需氧瓶+1个厌氧瓶个厌氧瓶=1套套)阳性结果阳性结果:10-30株需氧或兼性厌氧菌株需氧或兼性厌氧菌/天天,2株厌氧菌株厌氧菌/月月BacT/ALERT 3D 240 7台台想采就采想采就采答答 案:血培养的指征案:血培养的指征你认为对吗?为了提高病人血培养的阳性率,最好的抽血时间是:nA.发热开始时发热开始时 B.寒战开始时寒战开始时 C.发热最高峰时发热最高峰时 D.寒战结束时寒战结束时 E.预计寒战发热前预计寒战发热前 03060时
10、间(分钟)体温体温血培养采血时机血培养采血时机细菌浓度细菌浓度答答 案:采集血培养样本的最佳时间案:采集血培养样本的最佳时间 基本概念基本概念 采血套数采血套数表皮葡萄球菌的临床意义表皮葡萄球菌的临床意义2 23 3套血培养,有助于污染的判断。套血培养,有助于污染的判断。采集采集1套无法判套无法判断是病原菌还断是病原菌还是污染菌。是污染菌。答答 案案:关于血培养套数与采血部位:关于血培养套数与采血部位 答案:关于标本采集间隔时间答案:关于标本采集间隔时间 菌血症病人血中细菌浓度成年病人:n链球菌心内膜炎 1 to 30 organisms/mln葡萄球菌心内膜炎 1 to 20 organis
11、ms/mln革兰氏阴性菌血症 少于1 to 10 organisms/mln革兰氏阳性菌血症 1 to 300 organisms/ml幼儿病人:n革兰氏阴性菌血症 5 to 1000 organisms/mln75%幼儿菌血症病人血液有100 organisms/ml所以采血量一定要足够!所以采血量一定要足够!采血量采血量(ml)与检出率的关系与检出率的关系 Overall血培养物每增加一毫升,真性菌血症血培养物每增加一毫升,真性菌血症成年人微生物的检出率增加成年人微生物的检出率增加3 但并非越多越好,超过一定数量的采血量会稀释培但并非越多越好,超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤,使肉
12、汤无法有效中和血中的抑制物质养瓶内的肉汤,使肉汤无法有效中和血中的抑制物质(补体、抗体、抗生素)。所以血液与肉汤的最佳比例(补体、抗体、抗生素)。所以血液与肉汤的最佳比例为为1:41:10答答 案:关于采集血液量案:关于采集血液量 各种血液标本的各种血液标本的采集顺序采集顺序n血培养对无菌操作的要求比注射、采集血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。生化、凝血等其它标本要高。n所以要最先采集血培养标本。所以要最先采集血培养标本。n污染率的指标是污染率的指标是 3%3%(100100份标本里只能有不到份标本里只能有不到3 3个标本出现个标本出现污染。)污染。)答案:采各种血液
13、标本的先后顺序答案:采各种血液标本的先后顺序 推荐使用碘町、洗必泰或碘推荐使用碘町、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。伏作为皮肤消毒剂。碘町作用碘町作用1min 碘伏作用碘伏作用1.5-2min 洗必泰作用时间与碘町一样洗必泰作用时间与碘町一样(但不能用于少于(但不能用于少于2个月婴儿个月婴儿皮肤消毒)皮肤消毒)“培养瓶未使用时,需要冷藏或冷培养瓶未使用时,需要冷藏或冷冻。冻。”培养瓶的储存温度 不需冷藏,更不能冷冻。保存在1525的室温即可,温度过低会导致对温度敏感的耐瑟氏菌等死亡。答案:关于未用培养瓶的储存温度 “加入标本后的培养瓶夜班未能及时送到检加入标本后的培养瓶夜班未能及时送到检验科,可以
14、冷藏或放入验科,可以冷藏或放入35的温箱。的温箱。”夜班血培养的夜班血培养的送检送检 培养瓶夜班未能及时送到检验科,培养瓶夜班未能及时送到检验科,存在室温即可,不能冷藏也不能放入存在室温即可,不能冷藏也不能放入35的温箱的温箱。过夜不会对检测造成影响,过夜不会对检测造成影响,但仍需尽快送检。冷藏可能导致对温度但仍需尽快送检。冷藏可能导致对温度敏感的耐瑟氏菌等死亡。温箱会导致细敏感的耐瑟氏菌等死亡。温箱会导致细菌进入生长对数期,从而错过检测的最菌进入生长对数期,从而错过检测的最佳时期。佳时期。答案:关于夜班血培养的送检答案:关于夜班血培养的送检“患者静脉中插有导管,可直接从患者静脉中插有导管,可
15、直接从导管采血。导管采血。”采血部位 不可以不可以,常规血培养不宜从,常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置中采集静脉导管或静脉留置装置中采集,检出污染或定植菌的可能性较,检出污染或定植菌的可能性较大。除非怀疑导管相关性血流感大。除非怀疑导管相关性血流感染,请参照导管相关性血流感染染,请参照导管相关性血流感染的采血方法。的采血方法。答案:关于从静脉留置装置直接采血答案:关于从静脉留置装置直接采血有临床意义的分离株有临床意义的分离株Bourbeau PP et al.Routine incubation of BacT/ALERT FA and FN blood culture bottles
16、for more than 3 days may not be necessary.J Clin Microbiol.2005;43:2506-2509结果表明培养的前三天,有临床意义分离株的结果表明培养的前三天,有临床意义分离株的97%97%被检出,培养被检出,培养前两天的检出率为前两天的检出率为94%94%。97痰培养标本痰培养标本采集与运送病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题使下呼吸道感染病原诊断成为难题n细菌(包括放线菌与奴卡菌,厌氧菌与细菌(包括放线菌与奴卡菌,厌氧菌与分枝杆菌)分枝杆菌)n真菌(包括肺孢子菌)真菌(包括肺孢子菌)n病毒病毒n支原体、衣原体与立克次体支原
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