药物分析-课件-胺-六.ppt

1、第七章第七章 芳香胺类药物的分析芳香胺类药物的分析胺类药物药典收载多胺类药物药典收载多芳香胺芳香胺类、脂肪胺类、季胺盐类、磺酰胺类、类、脂肪胺类、季胺盐类、磺酰胺类、芳烃胺类（芳烃胺类（苯乙胺苯乙胺）、）、芳氧丙醇胺芳氧丙醇胺第一节第一节 芳胺类芳胺类药物的分析药物的分析第二节第二节 苯乙胺苯乙胺类药物的分析类药物的分析第三节第三节 芳氧丙醇胺芳氧丙醇胺类药物的分析类药物的分析芳胺芳胺芳胺芳胺 决定决定 决定决定 结构结构性质性质含量测定含量测定杂质检查杂质检查鉴别鉴别第一节第一节 芳胺类药物的分析芳胺类药物的分析对氨基苯甲酸酯对氨基苯甲酸酯的衍生物的衍生物 酰胺类酰胺类(两类两类)n对氨基苯

2、甲酸酯类药物的基本对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构结构与主要与主要性质性质n酰胺类药物的基本酰胺类药物的基本结构结构与主要与主要性质性质n鉴别鉴别试验试验n特殊杂质特殊杂质检查检查n含量含量测定测定芳胺芳胺芳胺芳胺一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要性质构与主要性质n（一）（一）基本结构基本结构与典型药物与典型药物（局部麻醉药）（局部麻醉药）1、基本结构基本结构母体母体COR2OR1NH2、对氨基苯甲酸酯类典型药物、对氨基苯甲酸酯类典型药物n盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因Procaine hydrochloride局部麻醉药局部麻醉药 HCln苯佐卡因苯佐卡因ben

3、zocaine局部麻醉药局部麻醉药n盐酸丁卡因盐酸丁卡因 HCl Tetracaine hydrochloride局部麻醉药局部麻醉药H2NCOOC2H5COOCH2CH2N(C2H5)2CH3(CH2)3NH芳胺芳胺COOCH2CH2N(C2H5)2H2N芳胺芳胺对氨基苯甲酸酯类典型药物对氨基苯甲酸酯类典型药物对氨基苯甲酸酯类的酯键对氨基苯甲酸酯类的酯键 酰胺酰胺盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺（抗心律失常药）（抗心律失常药）Procainamide hydrochloride化学性质接近，放在一起讲化学性质接近，放在一起讲 对氨基对氨基苯甲酸苯甲酸（二）主要性质（二）主要性质n芳伯氨基特性芳伯

4、氨基特性n水解性质水解性质n弱碱性弱碱性n其它特性其它特性1.芳伯氨基特性芳伯氨基特性n重氮化重氮化偶合偶合反应反应n芳醛缩合成芳醛缩合成Schiff碱的反应碱的反应 Procaine hydrochloride 易氧化变色易氧化变色 Benzocaine 可区别可区别 Tetracaine hydrochloride 无此特性无此特性CH3CH2CH2CH2NH-对氨基对氨基苯甲酸苯甲酸对氨基对氨基苯甲酸苯甲酸2.水解特性水解特性 光线、热、碱性条件光线、热、碱性条件n酯键、酰胺键酯键、酰胺键 水解水解Procaine hydrochloride 水解水解 对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸Benzo

5、caineTetracaine hydrochloride 对丁氨基苯甲酸对丁氨基苯甲酸 对氨基对氨基苯甲酸苯甲酸3、弱碱性、弱碱性nProcaine hydrochloride 侧链侧链 叔胺叔胺N 弱碱性弱碱性nTetracaine hydrochloride 生物碱沉淀剂生物碱沉淀剂 非水滴定非水滴定 沉淀反应沉淀反应nBenzocaine 无无（侧链无（侧链无N）对氨基对氨基苯甲酸苯甲酸4.其它特性其它特性n芳伯氨基；芳伯氨基；或芳伯氨基脂烃或芳伯氨基脂烃胺胺侧链侧链 药物药物 游离碱游离碱：碱性油状液体或低熔点固体碱性油状液体或低熔点固体 难溶于水，可溶于有机溶剂难溶于水，可溶于有机

6、溶剂 盐酸盐盐酸盐：白色结晶性粉末白色结晶性粉末,一定熔点一定熔点 易溶于水和乙醇易溶于水和乙醇,难溶于有机溶剂难溶于有机溶剂酰胺酰胺二、酰胺类药物的基本结构与主要二、酰胺类药物的基本结构与主要性质性质n（一）（一）基本结构与典型药物基本结构与典型药物苯胺酰基苯胺酰基衍生物衍生物母体结构芳酰氨基母体结构芳酰氨基COR2NHR1R4R3酰胺酰胺HONHCOCH3酰胺类典型药物酰胺类典型药物 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚（paracetamol）扑热息痛）扑热息痛 解热镇痛解热镇痛n醋胺苯砜醋胺苯砜（acedapsone）抗麻风抗麻风SOOCH3COHNNHCOCH3酰胺酰胺酰胺类典型药物酰胺类典型药

7、物盐酸利多卡因盐酸利多卡因（lidocaine hydrochloride）局部麻醉局部麻醉 HClH2O盐酸布比卡因盐酸布比卡因（bupivacaine hydrochloride）局部麻醉局部麻醉NHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3酰胺酰胺（二）主要化学性质（二）主要化学性质n1.水解后呈芳伯氨基特性水解后呈芳伯氨基特性：重氮化偶合反应：重氮化偶合反应酸性酸性n2.水解产物易酯化水解产物易酯化：醋酸：醋酸酯化酯化乙酸乙酯味乙酸乙酯味对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 水解水解乙醇乙醇H H2 2SOSO4 4醋氨苯砜醋氨苯砜乙酸乙酯的酯香味乙酸乙酯的酯香味NHCOR2NH2HONHCOCH3C

8、H3COOH酰胺酰胺n3.酚羟基的特性：酚羟基的特性：FeCl3 FeCl3对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚与醋氨苯砜、盐酸利多卡因、盐酸布与醋氨苯砜、盐酸利多卡因、盐酸布比卡因区别比卡因区别。HONHCOCH3蓝紫色蓝紫色酰胺酰胺n4.弱碱性弱碱性:叔胺氮离子叔胺氮离子盐酸利多卡因盐酸利多卡因、盐酸布比卡因、盐酸布比卡因 酯烃侧链酯烃侧链叔叔N碱性碱性与生物碱沉淀剂与生物碱沉淀剂成盐成盐沉淀沉淀对乙酰氨基酚、醋氨苯砜没有叔对乙酰氨基酚、醋氨苯砜没有叔N，区别，区别5.与重金属离子发生沉淀反应与重金属离子发生沉淀反应：酰胺基上的氮：酰胺基上的氮CuCu2+2+CoCo2+2+有色配位化合物沉淀有色配位

9、化合物沉淀芳胺芳胺三、鉴别试验三、鉴别试验n重氮化重氮化偶合反应偶合反应n与三氯化铁反应与三氯化铁反应n与重金属离子反应与重金属离子反应n水解产物反应水解产物反应n制备衍生物测熔点制备衍生物测熔点n紫外特征吸收光谱紫外特征吸收光谱n红外吸收光谱红外吸收光谱芳胺芳胺（一）重氮化（一）重氮化偶合反应偶合反应芳伯氨基、潜在芳伯氨基芳伯氨基、潜在芳伯氨基n盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺 +亚硝酸钠亚硝酸钠 盐酸盐酸 重氮化反应重氮化反应n苯佐卡因苯佐卡因 重氮盐重氮盐+碱性碱性 萘酚萘酚偶氮染料偶氮染料n对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚盐酸或盐酸或 水解水解硫酸硫酸 +亚硝酸钠亚硝酸钠

10、 重氮化反应重氮化反应 n 醋氨苯砜醋氨苯砜 n盐酸丁卡因盐酸丁卡因（芳香（芳香仲胺仲胺）+亚硝酸钠亚硝酸钠 酸性酸性 亚硝基化反应亚硝基化反应乳白色沉淀乳白色沉淀偶合反应偶合反应芳胺芳胺盐酸丁卡因的亚硝基化反应盐酸丁卡因的亚硝基化反应 +HNO2 +H2O 乳白色沉淀乳白色沉淀与芳伯氨基类的药物区别与芳伯氨基类的药物区别 （重氮化偶合）（重氮化偶合）COOCH2CH2N(C2H5)2C4H9HNCOOCH2CH2N(C2H5)2NOC4H9N芳胺芳胺1、盐酸普鲁卡因和苯佐卡因的鉴别方法、盐酸普鲁卡因和苯佐卡因的鉴别方法 +NaNO2+2HCl +NaCl+2H2O 酸性 +NaOH +NaC

11、l+H2O 碱性 重氮盐 萘酚萘酚 偶氮染料偶氮染料橙黄橙黄猩红色猩红色NH2COOCH2CH2N(C2H5)2COOCH2CH2N(C2H5)2N2Cl+COOCH2CH2N(C2H5)2N2Cl+OHCOOCH2CH2N(C2H5)2OHN=N芳胺芳胺2、对乙酰氨基酚的鉴别方法、对乙酰氨基酚的鉴别方法 +HCl+H2O HCl+CH3COOH HCl+HNO2 +2H2O +NaOH +H20+NaCl 红色红色 HONHCOCH3HONH2HONH2HON2Cl+-HON2Cl+-OHOHN=NOH芳胺芳胺（二）与三氯化铁反应（二）与三氯化铁反应 3 +FeCl3 Fe+3HCl 3对乙

12、酰氨基酚 酚羟基酚羟基 蓝紫色蓝紫色NHCOCH3OHNHCOCH3O_与其他区别与其他区别芳胺芳胺（三）与重金属离子反应（三）与重金属离子反应1、盐酸利多卡因的鉴别方法、盐酸利多卡因的鉴别方法 （盐酸利多卡因盐酸利多卡因）芳酰胺芳酰胺结构结构 硫酸铜硫酸铜 蓝紫色蓝紫色配位化合物配位化合物 氯化钴氯化钴 氯仿氯仿 亮绿色细小钴盐沉淀亮绿色细小钴盐沉淀 黄色黄色NHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3苯佐卡因、盐酸普苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡鲁卡因、盐酸丁卡因因芳胺芳胺鉴别鉴别与汞离子反应与汞离子反应 （盐酸利多卡因）（盐酸利多卡因）硝酸汞硝酸汞 黄色黄色对氨基苯甲酸酯类药物对氨基苯甲

13、酸酯类药物 红色红色或或橙黄色橙黄色（盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸丁卡因）（盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸丁卡因）芳胺芳胺鉴别鉴别2 2、盐酸普鲁卡因胺的鉴别方法盐酸普鲁卡因胺的鉴别方法 芳酰胺结构芳酰胺结构 至沸至沸 浓浓H2O2(氧化氧化)盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺羟肟羟肟 酸酸 FeCl3羟肟酸铁（羟肟酸铁（紫红色紫红色）变为变为 暗棕色暗棕色 棕黑色棕黑色芳胺芳胺鉴别鉴别（四）水解产物反应（四）水解产物反应1 1、盐酸普鲁卡因的鉴别方法、盐酸普鲁卡因的鉴别方法 红色石蕊试纸红色石蕊试纸兰兰盐酸盐盐酸盐0.1g0.1g（二乙胺基乙醇）（二乙胺基乙醇）NaOHNaOHHOCHHOCH2 2

14、CHCH2 2N(CN(C2 2H H5 5)2 2普鲁卡因普鲁卡因白色白色游离碱游离碱 油状物油状物对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸钠 对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸 NaOHHCl白色白色COOCH2CH2N(C2H5)2H2N HCl过量盐酸过量盐酸沉淀溶解沉淀溶解盐酸对氨盐酸对氨基苯甲酸基苯甲酸芳胺芳胺鉴别鉴别2 2、苯佐卡因的鉴别方法、苯佐卡因的鉴别方法C C2 2H H5 5OHOHC C2 2H H5 5OHOH4I4I2 26NaOH CHI6NaOH CHI3 35NaI5NaIHCOONaHCOONa5H5H2 2O O 黄色黄色碘仿气味碘仿气味 NaOH芳胺芳胺鉴别鉴别 白色结晶白色

15、结晶测定熔点测定熔点芳胺芳胺鉴别鉴别白色白色 测定熔点测定熔点芳胺芳胺鉴别鉴别（六）紫外特征吸收光谱（六）紫外特征吸收光谱n苯环苯环 紫外吸收光谱紫外吸收光谱特征特征n maxmax，E E1cm1cm1%1%n溶剂？浓度？溶剂？浓度？Ch.P(2005)Ch.P(2005)中盐酸布比卡因和醋氨苯中盐酸布比卡因和醋氨苯砜、盐酸普鲁卡因胺片的鉴别采用了砜、盐酸普鲁卡因胺片的鉴别采用了UVUV。药物药物溶剂溶剂浓度浓度(ug/ml)(ug/ml)maxmax(nm)(nm)E E1cm1cm1%1%备注备注对乙对乙酰氨酰氨基酚基酚HCl(0.1moHCl(0.1mol/L)-l/L)-甲醇甲醇(1

16、:99)(1:99)0.4%NaOH0.4%NaOH5 58 8249249257257约约880880715715BP(1998),USP(29)BP(1998),USP(29)与与对照品紫外吸收相同对照品紫外吸收相同苯佐苯佐卡因卡因氯仿氯仿278USP(24)与对照品紫与对照品紫外吸收相同；两者吸外吸收相同；两者吸收不超过收不超过3.0盐酸盐酸丁卡丁卡因因pH6磷酸盐磷酸盐缓冲液缓冲液10310同上；两者之差不超同上；两者之差不超过过2.0盐酸盐酸普鲁普鲁卡因卡因NaOH（0.02mol/L)水水205275280BP(1998),于于230 350nm波长处扫描波长处扫描芳胺芳胺鉴别鉴别

17、（七）红外吸收光谱（七）红外吸收光谱 适于化学结构复杂、化学结构相互差别较小适于化学结构复杂、化学结构相互差别较小的药物的的药物的鉴别鉴别与与区别区别 书上列举了盐酸普鲁卡因与盐酸普鲁卡因书上列举了盐酸普鲁卡因与盐酸普鲁卡因胺胺红红外吸收光谱的区别。外吸收光谱的区别。COOCH2CH2N(C2H5)2H2NHCl Ch.P(2005)中，所讲的药物均中，所讲的药物均有有IR的鉴别。的鉴别。四、特殊杂质检查四、特殊杂质检查（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查1.乙醇溶液的澄清度与颜色乙醇溶液的澄清度与颜色 （原料中的（原料中的Fe粉粉 乙醇浑浊）乙醇浑浊）（中间体

18、（中间体对氨基酚对氨基酚的的有色氧化产物有色氧化产物 乙醇中显橙红色乙醇中显橙红色or棕色）棕色）2.有关物质有关物质（生产工艺复杂，线路长，中间体、副产物及分解产物）（生产工艺复杂，线路长，中间体、副产物及分解产物）（对氯乙酰苯胺对氯乙酰苯胺）TLC法法 （对照品）（对照品）限量限量3.对氨基酚对氨基酚(毒性大、使药物变色毒性大、使药物变色)碱性亚硝基铁氰化钠碱性亚硝基铁氰化钠 蓝色蓝色配位配位化合物化合物芳胺芳胺鉴别鉴别芳胺芳胺杂质杂质(二二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的 检查检查(TLCTLC)灭菌温度、时间灭菌温度、时间 溶液溶液pHpH值、贮藏

19、时间值、贮藏时间 光线光线 金属离子金属离子 水解水解 对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸、2 2 二乙氨基乙醇二乙氨基乙醇 贮藏时间延长贮藏时间延长 高温加热高温加热 脱羧脱羧 -co-co2 2 苯胺苯胺 OO （氧化（氧化注射液变黄）注射液变黄）H2NCOOHH2NOO对照品对照品比较法比较法酰胺酰胺五、含量测定五、含量测定n亚硝酸钠法亚硝酸钠法 芳伯氨基芳伯氨基n非水溶液滴定法非水溶液滴定法 叔胺氮弱碱性叔胺氮弱碱性n分光光度法分光光度法 苯环苯环nHPLC待测组分与杂质同时测定待测组分与杂质同时测定n体内药物分析体内药物分析芳胺芳胺含量含量（一）亚硝酸钠滴定法（一）亚硝酸钠滴定法 芳伯氨基芳伯

20、氨基 水解后芳伯氨基水解后芳伯氨基 苯佐卡因苯佐卡因 醋氨苯砜醋氨苯砜 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 及注射液及注射液 及片剂及片剂盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺及其片剂与注射液及其片剂与注射液Ch.P(2005)Ch.P(2005)酸性条件酸性条件芳胺芳胺含量含量亚亚1、基本、基本原理原理ArNHCOR+H2O ArNH2 +RCOOH ArNH2+NaNO2+2HCl ArN2+Cl-+NaCl+2H2O H水解后芳伯氨基水解后芳伯氨基重氮盐重氮盐芳伯氨基芳伯氨基定量定量反应反应水解后芳伯氨基水解后芳伯氨基含量含量亚硝酸亚硝酸2.测定的主要条件测定的主要条件n（1）加入适量溴化钾加快反应速度加入

21、适量溴化钾加快反应速度n（2）加过量盐酸加速反应加过量盐酸加速反应n（3）滴定的温度滴定的温度n（4）滴定管尖端插入液面下滴定滴定管尖端插入液面下滴定含量含量亚硝酸亚硝酸(1)加入适量溴化钾加快反应速度加入适量溴化钾加快反应速度重氮化反应历程重氮化反应历程：NaNO2+HCl HNO2+NaCl HNO2 +HCl NOCl+H2OArN H2 慢 Ar N H N O 快 Ar N=N OH 快 ArN2+CL 碱性越弱，反应速度快碱性越弱，反应速度快（为什么？）（为什么？）-反应快慢的反应快慢的内因内因碱性弱，与盐酸成盐少，游离碱的浓度高，反应速度快碱性弱，与盐酸成盐少，游离碱的浓度高，反

22、应速度快NO+Cl_含量含量亚硝酸亚硝酸适量溴化钾加快反应速度适量溴化钾加快反应速度KBr HClHNO2+HBr NOBr+H2O （1）HNO2+HCl NOCl+H2O （2）平衡常数平衡常数 K1 300 K2 （溴化钾可以加快反（溴化钾可以加快反应速度的应速度的外因外因）K2K1含量含量亚硝酸亚硝酸(2)加过量盐酸加速反应加过量盐酸加速反应（外因）（外因）n（1 1）重氮化反应速度加快）重氮化反应速度加快n（2 2）重氮盐在酸性溶液中稳定）重氮盐在酸性溶液中稳定n（3 3）防止生成偶氮氨基化合物）防止生成偶氮氨基化合物 Ar-NAr-N2 2+ClCl +H+H2 2N-Ar N-A

23、r Ar-N=N-NH-Ar+Ar-N=N-NH-Ar+HClHCl若酸度过大若酸度过大 阻碍芳伯氨基的游离阻碍芳伯氨基的游离 反应速度反应速度 HNOHNO2 2 分解分解 芳胺类药物与盐酸的芳胺类药物与盐酸的molmol比：比：1 1 2.5 2.5 6 6含量含量亚硝酸亚硝酸（3）滴定的温度）滴定的温度室温（室温（10 30 ）n温度温度 （10 ）重氮化反应速度重氮化反应速度（2.52.5倍倍）n温度温度 亚硝酸、亚硝酸、重氮盐分解重氮盐分解(2倍倍)分解分解 Ar N2+Cl-+H2O Ar OH+N2+HCl 测定一般在低温下进行测定一般在低温下进行.太慢太慢 室温室温含量含量亚硝

24、酸亚硝酸(4)滴定管尖端插入液面下滴定滴定管尖端插入液面下滴定重氮化反应重氮化反应分子反应、慢分子反应、慢 避免避免 亚硝酸挥发和分解亚硝酸挥发和分解 滴定管尖端插入液面下约滴定管尖端插入液面下约2/32/3处处 一次将大部分亚硝酸滴定液在搅拌下迅速加入一次将大部分亚硝酸滴定液在搅拌下迅速加入 将滴定管尖端提出液面将滴定管尖端提出液面，少量水淋洗尖端，再缓缓滴定，少量水淋洗尖端，再缓缓滴定 近终点，在最后一滴加入后搅拌近终点，在最后一滴加入后搅拌1 1 5 5分钟，确定终点是否真正到达分钟，确定终点是否真正到达含量含量亚硝酸亚硝酸3.指示终点的方法指示终点的方法n永停滴定法永停滴定法(中国中国

25、 (终点时过量亚硝酸在电极上发生氧化还原反应终点时过量亚硝酸在电极上发生氧化还原反应)n电位法电位法 (美国美国)n外指示剂法外指示剂法(中国中国)-碘化钾碘化钾-淀粉糊剂或试纸淀粉糊剂或试纸 缺点缺点:操作烦琐操作烦琐,终点不易掌握终点不易掌握 n内指示剂法内指示剂法 缺点缺点:滴定过程中指示剂可能被亚硝酸氧化破坏滴定过程中指示剂可能被亚硝酸氧化破坏,有的重氮盐有色有的重氮盐有色,观察终观察终 点颜色变化比较困难点颜色变化比较困难 未能普遍推广应用未能普遍推广应用20052005 版版的方法为永停滴定法的方法为永停滴定法芳胺含量芳胺含量亚硝酸钠亚硝酸钠指示终点指示终点永停滴定法永停滴定法供试

26、品供试品 搅拌溶解搅拌溶解 双珀电双珀电极极 室温，液面下滴定室温，液面下滴定永停滴定永停滴定：可逆电对滴定不可逆电对：可逆电对滴定不可逆电对 （亚硝酸钠）（亚硝酸钠）（供试品）（供试品）电流从无电流从无 有，滴定终点有，滴定终点KBr 2g亚硝酸钠液滴定亚硝酸钠液滴定过量过量HCl芳胺芳胺含量含量(二二)非水滴定法非水滴定法n盐酸丁卡因盐酸丁卡因 盐酸利多卡因盐酸利多卡因 HCl HCl 叔胺氮叔胺氮 弱碱性弱碱性 盐酸布比卡因盐酸布比卡因COOCH2CH2N(C2H5)2CH3(CH2)3NHNHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3芳胺芳胺含量含量非水滴定碱量法非水滴定碱量法：溶剂？滴定

27、剂？指示剂？为什么加：溶剂？滴定剂？指示剂？为什么加Hg(Ac)2?终点颜色终点颜色?冰醋酸，高氯酸，结晶紫，氢卤酸的干扰冰醋酸，高氯酸，结晶紫，氢卤酸的干扰绿色绿色绿色绿色兰色兰色终点颜色终点颜色消除氢卤酸的消除氢卤酸的干扰干扰Hg(Ac)2萘酚苯甲萘酚苯甲醇醇结晶紫结晶紫结晶紫结晶紫指示剂指示剂高氯酸高氯酸高氯酸高氯酸高氯酸高氯酸滴定剂滴定剂冰醋酸冰醋酸冰醋酸冰醋酸冰醋酸冰醋酸醋酸酐醋酸酐溶剂溶剂备注备注盐酸布比盐酸布比卡因卡因盐酸利多盐酸利多卡因卡因盐酸丁卡因盐酸丁卡因芳胺芳胺含量含量(三三)紫外分光光度法紫外分光光度法n原理：原理：A=CL n对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚:溶剂溶剂 最大吸

28、收波长最大吸收波长 测定方法测定方法 0.4%NaOH溶液溶液 257nm 中国药典中国药典:吸收系数法吸收系数法 甲醇甲醇-水混合溶剂水混合溶剂 244nm USP:对照品比较法对照品比较法 应用应用:原料、片剂、注射液、栓剂、胶囊剂原料、片剂、注射液、栓剂、胶囊剂E1cm1%E1cm1%酰胺酰胺含量含量吸收系数法吸收系数法n需已知需已知 ,最好用最好用对照品比较法对照品比较法n需选用需选用不同型号不同型号不少于五台不少于五台紫外分光光度计进行测试紫外分光光度计进行测试 按药典规定方法进行按药典规定方法进行校正校正 （波长、吸收度、杂散光波长、吸收度、杂散光、吸收池、吸收池配对性、狭缝配对性

29、、狭缝对对A影响）影响）另：对测定中所用的另：对测定中所用的天平、容量瓶、移液管天平、容量瓶、移液管等也需等也需校正校正。检查吸收度与浓度是否呈线性关系？检查吸收度与浓度是否呈线性关系？精密称取精密称取药物的药物的对照品对照品配制的测试溶液，要求至少用配制的测试溶液，要求至少用高、低高、低两种浓度，应两种浓度，应使其吸收度分别在使其吸收度分别在0.60.8和和0.30.4之间，每种浓度之间，每种浓度2份，也可多配几种浓份，也可多配几种浓度。度。五台仪器五台仪器 取取平均值，平均值，RSD不得过不得过1.5%E1cm1%E1cm1%芳胺芳胺含量含量（四）（四）HPLCHPLC特点：同时测定药物及

30、杂质，特点：同时测定药物及杂质，同时测定同时测定（五）体内药物分析（五）体内药物分析对乙酰氨基酚解热镇痛药对乙酰氨基酚解热镇痛药 中毒中毒 早期发现早期发现 死亡率死亡率5050 对照品标准曲线法对照品标准曲线法 回收率、日内回收率、日内RSDRSD，日间，日间RSDRSD酰胺酰胺苯乙胺苯乙胺第二节第二节 苯乙胺类药物的分析苯乙胺类药物的分析n结构和性质结构和性质n鉴别试验鉴别试验n特殊杂质检查特殊杂质检查n含量测定含量测定酰胺酰胺苯乙胺苯乙胺一、苯乙胺类药物的基本结构与主要性质一、苯乙胺类药物的基本结构与主要性质n（一）基本结构与典型药物：（一）基本结构与典型药物：P174页表页表7-1 苯

31、乙胺类典型药物苯乙胺类典型药物 苯乙胺的基本结构苯乙胺的基本结构 HX R R1 1 ：含含苯环苯环 的取代基的取代基 R R2 2 ：-H-H，-CH-CH3 3 ，-C(CH-C(CH3 3)3 3,（双胍）（双胍）R R3 3：-H-H，-CH-CH3 3 HXHX：HClHCl，H H2 2SOSO4 4 ，（重酒石酸）（重酒石酸）CHCHR1R3NHR2OHCH(OH)COOHCH(OH)COOHCNHCNH2NHNH酰胺酰胺苯乙胺苯乙胺表表7 71 1 苯乙胺类苯乙胺类典型药物典型药物CHCHR1R3NHR2OHHXHH重酒石酸去甲肾重酒石酸去甲肾上腺素上腺素Noradrenali

32、ne bitartrateHClHCH3血管收缩剂血管收缩剂盐酸去氧肾上腺盐酸去氧肾上腺素素Phenylephrine hydrochlorideCH3H血管收缩剂血管收缩剂重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺Metaraminol bitartrateHCH3肾上腺素肾上腺素adrenalineHXR3R2R1药物名称药物名称HOHOHOHOHOHOCH(OH)COOHCH(OH)COOHCH(OH)COOHCH(OH)COOH肾上腺素受体肾上腺素受体激动药激动药酰胺酰胺苯乙胺苯乙胺CHCHR1R3NHR2OHHX表表7 71 1 苯乙胺类苯乙胺类典型药物典型药物HClCH3H血管加压血管加压盐酸甲

33、氧明盐酸甲氧明methoxamine hydrochlorideH2SO4H硫酸特布他林硫酸特布他林terbutaline sulfateHClHH治疗脑神经治疗脑神经盐酸多巴胺盐酸多巴胺dopamine hydrochlorideHClH-CH(CH3)2盐酸异丙肾上腺盐酸异丙肾上腺素素isoprenalinehydrochlorideHXR3R2R1药物名称药物名称HOHOOCH3CH3OHOHOHOHO-C(CH3)3酰胺酰胺苯乙胺苯乙胺CHCHR1R3NHR2OHHX表表7 71 1 苯乙胺类苯乙胺类典型药物典型药物HClHC(CH3)3盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗clenbuterol

34、hydrochlorideH2SO4CH3H硫酸苯丙胺硫酸苯丙胺amfetamine sulfateHClHCH(CH3)2盐酸氯丙那林盐酸氯丙那林clorprenaline hydrochlorideHClH降血糖药降血糖药盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍phenforminhydrochlorideHXR3R2R1药物名称药物名称ClH2NClClCNHCNH2NH NH酰胺酰胺苯乙胺苯乙胺CHCHR1R3NHR2OHHX表表7 73 3 苯乙胺类苯乙胺类典型药物典型药物HClCH3CH3盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱ephedrine hydrochlorideH2SO4肾上腺素受体肾上腺素受体激动药激动

35、药HCH(CH3)2硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇salbutamole sulfateHXR3R2R1药物名称药物名称HOCH2OH酰胺酰胺苯乙胺苯乙胺（二）主要化学性质（二）主要化学性质n1.弱碱性弱碱性:本类药物分子结构的共性本类药物分子结构的共性 烃氨基侧链烃氨基侧链(氮氮仲胺氮仲胺氮)游离碱难溶于水、易溶于有机溶剂，盐可溶于水游离碱难溶于水、易溶于有机溶剂，盐可溶于水n2.酚羟基酚羟基特性：本类药物多含有特性：本类药物多含有苯酚苯酚或或邻苯二酚邻苯二酚的结构的结构 重金属配位呈色、空气中或光热易氧化，色变深（碱性条件更易）重金属配位呈色、空气中或光热易氧化，色变深（碱性条件更易）n3.光学

36、活性光学活性具具旋光性旋光性：多数药物结构中含有：多数药物结构中含有手性碳原子手性碳原子，具旋光性。，具旋光性。n4.其它其它:苯环上的其它取代基苯环上的其它取代基(如如:盐酸克仑特罗的盐酸克仑特罗的芳伯氨基芳伯氨基);紫外吸收光谱紫外吸收光谱;红外吸收光谱红外吸收光谱苯乙胺苯乙胺鉴别鉴别二、鉴别试验二、鉴别试验n（一）与三氯化铁反应（一）与三氯化铁反应 n（二）与甲醛（二）与甲醛-硫酸反应硫酸反应 酚羟基酚羟基性质性质n（三）氧化反应（三）氧化反应n（四）紫外特征吸收与红外特征吸收光谱（四）紫外特征吸收与红外特征吸收光谱（苯环苯环）n（五）与亚硝基铁氰化钠的反应（五）与亚硝基铁氰化钠的反应

37、脂肪伯氨基脂肪伯氨基性质性质n（六）双缩脲反应（六）双缩脲反应 苯环侧链具有苯环侧链具有氨基醇氨基醇结构结构苯乙胺苯乙胺鉴别鉴别分子结构中有酚羟基的药物，如肾上腺素分子结构中有酚羟基的药物，如肾上腺素（一）与三氯化铁反应（一）与三氯化铁反应 有酚羟基的药物有酚羟基的药物FeFe3+3+有色络合物有色络合物加入碱性溶液加入碱性溶液 被高铁离子氧化被高铁离子氧化紫色或紫红色紫色或紫红色 具体药物具体药物显色显色详见详见P176表表7-2（二）与甲醛（二）与甲醛-硫酸反应硫酸反应 硫酸硫酸与甲醛形成具有醌式结与甲醛形成具有醌式结构的构的有色有色化合物化合物表表72 苯乙胺类药物与三氯化铁和甲醛苯乙胺

38、类药物与三氯化铁和甲醛-硫酸反应显色硫酸反应显色酰胺酰胺苯乙胺苯乙胺墨绿色墨绿色，滴加，滴加1氨试液，显氨试液，显紫红色紫红色盐酸多巴胺盐酸多巴胺棕色棕色暗紫色暗紫色深绿色深绿色，滴加新制，滴加新制5碳酸氢碳酸氢钠液，显钠液，显蓝紫色蓝紫色红色红色盐酸异丙肾上盐酸异丙肾上腺素腺素玫瑰红玫瑰红橙红橙红深棕红深棕红紫色紫色盐酸去氧肾上盐酸去氧肾上腺素腺素淡红色淡红色翠绿色翠绿色，加碳酸氢钠试液显，加碳酸氢钠试液显蓝蓝色色红色红色重酒石酸去甲重酒石酸去甲肾上腺素肾上腺素红色红色0.1mol/L盐酸缓冲溶液中显盐酸缓冲溶液中显翠翠绿色绿色，加氨试液显，加氨试液显紫色紫色紫红紫红色色肾上腺素肾上腺素甲醛

39、硫酸甲醛硫酸三氯化铁三氯化铁药物药物酰胺酰胺苯乙胺苯乙胺n（三）氧化反应（三）氧化反应 具有酚羟基结构的本类药物，可具有酚羟基结构的本类药物，可以被氧化剂（碘、过氧化氢、铁氰以被氧化剂（碘、过氧化氢、铁氰化钾等）氧化呈现不同颜色化钾等）氧化呈现不同颜色 鉴别鉴别药物。药物。有些则在一定条件下不显色有些则在一定条件下不显色鉴别。鉴别。苯乙胺苯乙胺鉴别鉴别n（四）紫外特征吸收与红外特征吸收光谱（四）紫外特征吸收与红外特征吸收光谱 不同药物在不同溶剂中、不同浓度下有特定的不同药物在不同溶剂中、不同浓度下有特定的 max和和A 表表73 用紫外特征吸收光谱鉴别的苯乙胺类药物（用紫外特征吸收光谱鉴别的苯

40、乙胺类药物（IR）251,257,2630.5水水盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱2740.08水水硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇243,2960.030.1mol/L盐酸盐酸盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗0.602340.01水水盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍2760.10.1mol/L盐酸盐酸硫酸特布他林硫酸特布他林2800.030.5%硫酸硫酸盐酸多巴胺盐酸多巴胺0.502800.05水水盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素2720.10水水重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺药典药典IR吸收度吸收度（A）max(nm)浓度浓度(mg/ml)溶剂溶剂药物药物药典药典UV苯乙胺苯乙胺鉴别鉴别n（五）与亚硝基铁氰化钠的反应（五）

41、与亚硝基铁氰化钠的反应 脂肪伯氨基脂肪伯氨基性质性质 重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺丙酮丙酮亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠NaHCONaHCO3 3 红紫色红紫色（六）双缩脲反应（六）双缩脲反应盐酸麻黄碱分子结构中，芳环侧链中具有氨基醇结构，显双缩盐酸麻黄碱分子结构中，芳环侧链中具有氨基醇结构，显双缩脲反应。脲反应。CHNH2苯乙胺苯乙胺三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查n（一）酮体检查（一）酮体检查药物制备药物制备 酮体酮体 氢化还原氢化还原 药物药物 不完全不完全 酮体杂质酮体杂质 表表74 紫外分光光度法检查酮体的条件及要求紫外分光光度法检查酮体的条件及要求0.060.063473471.51

42、.5水水酮体酮体盐酸甲氧明盐酸甲氧明0.150.153103102.02.0水水酮体酮体盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素0.050.053103102.02.0水水去甲肾上腺去甲肾上腺酮酮重酒石酸去甲肾上重酒石酸去甲肾上腺素腺素0.200.203103102.02.0水水酮体酮体盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素0.050.053103102.02.0HClHCl(92000)(92000)肾上腺酮肾上腺酮肾上腺素肾上腺素A A 测定波长测定波长(nm)(nm)样品浓度样品浓度(mg/ml)(mg/ml)溶剂溶剂检查的杂质检查的杂质药物药物检查检查苯乙胺苯乙胺（二）有关物质检查（二）有关物质检查

43、1 1、盐酸氨溴索、盐酸氨溴索检查方法：检查方法：HPLCHPLC2 2、盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查、盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查纸色谱法纸色谱法 参照显色位置参照显色位置 剪下剪下 洗脱，萃取洗脱，萃取 UV UV 0.480.483 3、硫酸特布他林的检查方法、硫酸特布他林的检查方法TLCTLC232nm苯乙胺苯乙胺含量含量四、含量测定四、含量测定 原料药原料药 制剂制剂 非水滴定法非水滴定法 溴量法溴量法 高效液相色谱法高效液相色谱法 1414种典型药物中种典型药物中 提取容量法；比色法；提取容量法；比色法；11种种 原料药采用此法原料药采用此法 紫外分光光度法紫外分光光度法 阴离子表

44、面活性剂滴定法阴离子表面活性剂滴定法 苯环上一个酚羟基苯环上一个酚羟基 详见讲义详见讲义苯乙胺苯乙胺含量含量（一）非水溶液滴定法（一）非水溶液滴定法表表75 非水溶液滴定法测定本类药物的主要条件非水溶液滴定法测定本类药物的主要条件电位滴定法电位滴定法5300.1盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍电位滴定法电位滴定法高氯酸高氯酸5200.25盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗蓝绿色蓝绿色结晶紫结晶紫高氯酸高氯酸加醋酐加醋酐15100.4硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇蓝绿色蓝绿色萘酚苯甲醇萘酚苯甲醇5100.2盐酸甲氧明盐酸甲氧明蓝绿色蓝绿色结晶紫结晶紫3200.15盐酸氯丙那林盐酸氯丙那林蓝色蓝色结晶紫结晶紫饱和氯化饱和

45、氯化汞汞50200.2盐酸芬氟拉明盐酸芬氟拉明蓝色蓝色结晶紫结晶紫5300.15盐酸异丙肾上盐酸异丙肾上腺素腺素蓝绿色蓝绿色结晶紫结晶紫5250.15盐酸多巴胺盐酸多巴胺蓝绿色蓝绿色结晶紫结晶紫高氯酸高氯酸100.2重酒石酸去甲重酒石酸去甲肾上腺素肾上腺素蓝绿色蓝绿色结晶紫结晶紫100.15肾上腺素肾上腺素终点终点颜色颜色指示剂指示剂滴定剂滴定剂加加Hg(Ac)2液量液量(ml)加冰加冰HAc量量(ml)取样量取样量(g)药物药物苯乙胺苯乙胺含量含量（二）溴量法（二）溴量法重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素苯酚结构苯酚结构 BrBr2 2I I2 2用用NaNa2 2

46、S S2 2O O3 3 邻、对位溴代反应邻、对位溴代反应盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素：BrBr2 21 1:3:3过量的过量的BrBr2 2生成生成I I2 2 用用NaNa2 2S S2 2O O3 3 1 1:2 2剩余滴定法剩余滴定法过量的过量的Br2 +KI苯乙胺苯乙胺含量含量（三）提取酸碱滴定法（三）提取酸碱滴定法药物的药物的盐酸盐盐酸盐 碱碱药物的药物的游离碱游离碱硫酸盐硫酸盐 酸酸水溶性水溶性 不溶于水不溶于水 易溶于有机溶剂易溶于有机溶剂 蒸干溶剂，标准酸直接滴定蒸干溶剂，标准酸直接滴定 加入过量的标准酸溶液加入过量的标准酸溶液蒸干溶蒸干溶剂剂标准碱滴定标准碱滴定苯乙胺苯

47、乙胺含量含量（四）紫外分光光度法与比色法（四）紫外分光光度法与比色法酚羟基酚羟基亚铁离子亚铁离子Fe2+络合络合有色物质有色物质 分光光度法分光光度法对照品比较法对照品比较法灵敏、简便灵敏、简便常作制剂含量测定常作制剂含量测定 芳伯氨基芳伯氨基重氮化偶合反应重氮化偶合反应有色物质有色物质苯乙胺苯乙胺含量含量（五）高效液相色谱法（五）高效液相色谱法高分离效率、高灵敏度、高选择性高分离效率、高灵敏度、高选择性n应用应用：苯乙胺类药物苯乙胺类药物制剂制剂的的常规分析常规分析；临床药浓监控临床药浓监控（激素类药物更要注（激素类药物更要注 意）；意）；体内药物动力学体内药物动力学研究研究 1.1.对仪器

48、的一般要求对仪器的一般要求 2.2.系统适用性试验系统适用性试验 3.3.测定法测定法苯乙胺苯乙胺含量含量1.对仪器的一般要求对仪器的一般要求n高效液相色谱仪高效液相色谱仪n色谱柱填料色谱柱填料（固定相种类固定相种类）、流动相组成流动相组成、检测器类型检测器类型 不得任意改变不得任意改变n色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度测器的灵敏度 可适当改变可适当改变n一般色谱图约一般色谱图约20分钟内记录完毕分钟内记录完毕苯乙胺苯乙胺含量含量2

49、.系统适用性试验系统适用性试验n检查色谱系统是否符合要求检查色谱系统是否符合要求n色谱柱的色谱柱的理论塔板数理论塔板数、分离度分离度、拖尾因子拖尾因子n（1）色谱柱的理论塔板数）色谱柱的理论塔板数n n=5.54(tR/Wh/2)2n (2)分离度分离度 R 1.5 2(tR2 tR1)R =W1+W2n (3)拖尾因子拖尾因子(对称因子对称因子)T=W0.05h/2d T 0.951.05n (4)重复性重复性:RSD 不大于不大于2%苯乙胺苯乙胺含量含量3.测定法测定法n内标法加校正因子测定供试品的含量内标法加校正因子测定供试品的含量n外标法外标法（六）体内药物分析（六）体内药物分析苯乙胺

50、苯乙胺含量含量第三节第三节 芳氧丙醇胺类药物芳氧丙醇胺类药物氧烯洛尔氧烯洛尔盐酸卡替洛尔盐酸卡替洛尔讲药典，原理少。自学讲药典，原理少。自学1 1、药物中杂质的来源有哪些？试举例说药物中杂质的来源有哪些？试举例说明。明。2 2、简述氯化物检查法的原理和方法，若简述氯化物检查法的原理和方法，若为有机氯杂质，可采用哪些方法进行处为有机氯杂质，可采用哪些方法进行处理破坏？理破坏？3 3、中国药典的重金属检查法共有哪些方中国药典的重金属检查法共有哪些方法？各适于哪些情况？法？各适于哪些情况？4 4、检查司可巴比妥钠的重金属，取供试检查司可巴比妥钠的重金属，取供试品品1.0g1.0g，依法检查，规定含重