芳香胺类药物的分析培训课程课件.ppt

1、第章芳香胺类药物的分析优选第章芳香胺类药物的分析第一节第一节 芳芳 胺类药物的分析胺类药物的分析芳胺类药物分为两类芳胺类药物分为两类芳伯氨基未被取代芳伯氨基未被取代芳伯氨基被酰化芳伯氨基被酰化一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物（一）基本结构与典型药物COOR2NR1HCOOC2H5H2N苯佐卡因苯佐卡因H2NCOOCH2CH2N C2H52.HCl盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因COOCH2CH2N(C2H5)2CH3(CH2)3NHHCl盐酸丁卡因盐酸丁卡因CONHCH2CH2N(C2H5)2H2NHCl盐酸普鲁卡

2、因胺盐酸普鲁卡因胺1.1.芳伯氨基特性：重氮化偶合反应；芳醛缩合成芳伯氨基特性：重氮化偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易碱；易 氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。（二（二）主要理化性质主要理化性质水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸 丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均 为对氨基苯甲酸。为对氨基苯甲酸。弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具 有弱碱性。有弱碱性。4.其它特性：因结构中有其它特性：因结构

3、中有 芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其 游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于 水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物（一）基本结构与典型药物NH C R2OR1R3R4HONHCOCH3对乙酰氨基酚（扑热息痛）对乙酰氨基酚（扑热息痛）SOONHCOCH3CH3CONH醋氨苯砜醋氨苯砜NHCONC4H9CH3CH3HCl盐酸布比卡因盐酸布比卡因NHCOCH2N(C2H5)2CH

4、3CH3HCl盐酸利多卡因盐酸利多卡因 1.1.水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸 水解后显芳伯氨基的特性反应。水解后显芳伯氨基的特性反应。注意空间位阻的影响。注意空间位阻的影响。2.2.水解产物易酯化：对乙酰基酚和醋氨苯砜，酸水解生成水解产物易酯化：对乙酰基酚和醋氨苯砜，酸水解生成 醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋 酸乙酯香味。酸乙酯香味。（二）主要化学性质（二）主要化学性质（一）基本结构与典型药物间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜HBr +KClex400nm（激发波长）、em485nm（发射波长）

5、处测定荧光强度，标准曲线法定量。利用酮体在310nm有吸收，本类药物无吸收。(一)化学鉴别反应HNO2 +NaCl（一）基本结构与典型药物Ar-N2+Cl-+H2N-Ar Ar-N=N-NH-Ar +HCl用电位法指示终点,HCl不干扰，无需加醋酸汞处理。解，甲醇中略溶，乙醇中极微溶解，乙醚中几乎不溶；亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化对乙酰氨基酚+FeCl3测定。盐酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2HNO2 永停在某一位置）3.3.酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基；醋氨苯砜酸酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基；醋氨苯砜酸 水解有酚羟基，可与水解有酚羟基，可与FeClFeCl3 3发生显色反

6、应，发生显色反应，可相互区别。可相互区别。4.4.弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显 碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可 相互区别。相互区别。5.5.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨 基上氮可与基上氮可与CuCu2+2+,Co,Co2+2+生成生成 有色配位化合物沉淀。有色配位化合物沉淀。三、鉴别试验三、鉴别试验n（一）重氮化（一）重氮化-偶合反应偶合反应 分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可

7、发生此反应。氨基的药物，均可发生此反应。Ar-NH2HClNaNO2重氮盐重氮盐OH-萘酚萘酚橙黄橙黄猩红色猩红色 直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普盐酸普 鲁卡因胺鲁卡因胺间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜 利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。生此反应。丁卡因虽无芳伯氨基，但可与丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNONaNO2 2反反应生成应生成N N亚硝基化合物的乳白色沉淀。亚硝基化合物的乳白色沉淀。NH2COOCH2CH2N(C2H5)2OHNHCOCH3H2OAr-NH2Na

8、NO2+HClAr-N2+Cl-OHOH-OHAr-N=N猩红或红色NHC4H9COOCH2CH2(C2H5)2+HNO2C4H9N-NOCOOCH2CH2(C2H5)2+H2O 乳白色苯甲酸 E.例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化例如：对乙酰基酚在0.Ar-OH+N2 +HCl间氨基酚 C.HNO2 永停在某一位置）此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。ex400nm（激发波长）、em485nm（发射波长）处测定荧光强度，标准曲线法定量。Ar-N2+Cl-+H2N-Ar Ar-N=N-NH-Ar +HCl一、药物结构与主要理化学性质2NaO2+2KI +4HCl 2N

9、O +I2 +2KCl +2NaCl+2H2O4%NaOH10ml+H2O 100ml 257nm测定A。温度高反应速度快；酸中极微极微溶解氨基的药物，均可发生此反应。基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因盐酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2本类药物的原料药多采用此法。（二）与三氯化铁反应（二）与三氯化铁反应对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚+FeClFeCl3 3蓝紫色化合物蓝紫色化合物NHCOCH3O-NHCOCH3OH3+FeCl33Fe +3HCl 1.与铜和钴离子反应：与铜和钴离子反应：利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物；利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物；与氯化钴生成亮绿色沉淀

10、。与氯化钴生成亮绿色沉淀。（三）与金属离子反应三）与金属离子反应CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)22+Cu2+CH3CH3NCOCH2N(C2H5)2CH3CH3(C2H5)2NCH2CONCu蓝紫色+Co2+CH3CH3NCOCH2N(C2H5)2CH3CH3(C2H5)2NCH2CONCo亮绿色2.2.羟肟酸铁盐反应羟肟酸铁盐反应 基于普鲁卡因胺分子中的基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。芳酰胺结构。CONHCH2CH2N(C2H5)2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)23H2O2FeCl3紫红，暗棕色，棕黑色NH2CONHCH2CH

11、2N(C2H5)2NH2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2NH2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)23FeH2O2FeCl3紫红，暗棕色，棕黑色3.3.与汞离子反应与汞离子反应盐酸利多卡因盐酸利多卡因+H H2 2NONO3 3+Hg(NO+Hg(NO3 3)2 2黄色黄色对氨基苯甲酸酯对氨基苯甲酸酯 H H2 2NONO3 3+Hg(NO+Hg(NO3 3)2 2红色或橙黄色红色或橙黄色1.1.盐酸普鲁卡因的鉴别盐酸普鲁卡因的鉴别 (四四)水解产物反应水解产物反应盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因+NaOHNaOH普鲁卡因普鲁卡因油状物油状物对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸钠+二乙氨基乙醇二乙

12、氨基乙醇（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）对氨基苯甲酸钠对氨基苯甲酸钠+HClHCl对氨基苯甲酸（白色）对氨基苯甲酸（白色）NH2COOCH2CH2N(C2H5)2.HClNH2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2NH2COONaNaOHNaOH+HOCH2CH2N(C2H5)2NH2COONaNH2COOHNH2COOHHClHClHCl.2.2.苯佐卡因的鉴别苯佐卡因的鉴别 苯佐卡因苯佐卡因+NaOHNaOH乙醇乙醇乙醇乙醇+I I2 2 +NaOHNaOHCHICHI3 3（碘仿臭气，黄色碘仿臭气，黄色沉淀）沉淀）重氮盐在酸性介质中稳定；在规定的浓度测定m

13、ax采用RPIP-HPLC-EChD 法；直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普4mol/L)-乙腈(70:30)的磷酸盐酸异丙肾上腺素 0.Ar-NH2 +NaNO2 +2HCl利用酮体在310nm有吸收，本类药物无吸收。乙醚，醚层(紫红色)水层(蓝色)ex410nm、em520nm处测定荧光强度，对照法定量。盐酸普鲁卡因+NaOH1片稀HCl 24ml+H2O 1000ml 精密量 取5mlCX=AX/AR CR对氨基苯甲酸酯 H2NO3+Hg(NO3)2 KHBr 比KHCl大300倍1nol/L)-甲醇于max =249nm;E1%1cm=880氧化变色等。碱，盐酸伪麻黄碱鉴别：可以

14、苯甲酸为内标同时测定两本法重点将在第八章讨论。弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显(五五)制备衍生物测熔点制备衍生物测熔点1.三硝基苯酚衍生物的制备：利多卡因和布比卡因三硝基苯酚衍生物的制备：利多卡因和布比卡因NHCOCH2N(C2H5)2CH3H3CNO2NO2O2NOH.熔点为228232CH3NHCOCH3NC4H9NO2NO2O2NOH.熔点为194 2.硫氰酸盐衍生物的制备：盐酸丁卡因硫氰酸盐衍生物的制备：盐酸丁卡因 COOCH2CH2N(C2H5)2.HClNHC4H9COOCH2CH2N(C2H5)2 HSCN.NH4SCNNHC4H9熔点为131(六六)紫外特征吸收光

15、谱法紫外特征吸收光谱法 1.在在max 处测定供试液的百分吸收系数。处测定供试液的百分吸收系数。例如：对乙酰基酚在例如：对乙酰基酚在0.4%NaOH中于中于max=240nm;E1%1cm=715 在在HCl(0.1nol/L)-甲醇于甲醇于max =249nm;E1%1cm=8802.在规定的浓度测定在规定的浓度测定max 例如：醋氨苯砜例如：醋氨苯砜5g/ml;max =256nm;284nm 再例如：盐酸普鲁卡因胺再例如：盐酸普鲁卡因胺5g/ml;max=280nm(七七)红外吸收光谱法红外吸收光谱法（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查 1.1.乙醇溶液的

16、澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可 能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生 有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。四、特殊杂质检查四、特殊杂质检查检查方法：配制检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色；本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色；如显混浊，与如显混浊，与1号浊度标号浊度标 准液比较，不得更浓；准液比较，不得更浓；如显色，与棕红色如显色，与棕红色2号或橙红色号或橙红色2号号 标准液比较，标准液比较，不得更

17、深。不得更深。2.有关物质检查：有关物质检查：Ch.P是以对氯苯乙酰胺为对照品，是以对氯苯乙酰胺为对照品，采用采用TLC 法法 中的杂质对照品法。中的杂质对照品法。3.对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与 亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化 合物，采用比色法。合物，采用比色法。(二二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查的检查为什么要检查？为什么要检查？H2NH2NCOOH-CO2O=OO黄色怎样检查？怎样检查？采用采用TLCTLC法中的法中的杂质对照品法进行检查。杂质对照品法进行检查。（一

18、）亚硝酸钠滴定法（一）亚硝酸钠滴定法 Ar-NHAr-NH2 2;Ar-NHCOR;Ar-NO;Ar-NHCOR;Ar-NO2 2均可采用此法均可采用此法 Ch.PCh.P中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。解后用本法。五、含量测定五、含量测定NHCOR+H2ONH2+RCOOHH+NO2+6HNH2+2H2O1.原理原理：Ar-NHCOR +H2OAr-NH2 +RCOOHH+Ar-NH2 +NaNO2 +2HClAr-N2+Cl-+NaCl +2H

19、2On测定主要条件：测定主要条件：(1)加加KBr增加反应速度增加反应速度重氮化的反应历程为：重氮化的反应历程为：NaNO2 +HClHNO2 +NaClHNO2 +HClNOCl +H2OKHClNN+Cl-快N N OH快NNOH慢NO+Cl-NH2KBr +HClHBr +KClHNO2 +HClNOBr +H2OKKBr KHBr 比比KHCl大大300倍倍生成生成NOBr量大得多量大得多加快反应速度加快反应速度 (2)加过量加过量HCl加速反应：加速反应：重氮化速度加快；重氮化速度加快；重氮盐在酸性介质中稳定；重氮盐在酸性介质中稳定；防止生成氨基偶氮化合物。防止生成氨基偶氮化合物。A

20、r-N2+Cl-+H2N-Ar Ar-N=N-NH-Ar +HCl 一般摩尔比为一般摩尔比为Ar-NH2:HCl=1:2.56 。(3)室温条件下滴定室温条件下滴定:温度高反应速度快；每升高温度高反应速度快；每升高10加快加快2.5倍倍太高太高,可使可使Ar-N2+Cl-+H2OAr-OH+N2 +HCl(4)滴定管尖端插入液面下滴定滴定管尖端插入液面下滴定 3.指示终点的方法指示终点的方法 (1)用停滴定法用停滴定法 溶液溶液 检流计检流计 终点前：终点前：无过量无过量 无电流无电流 HNO2 终点时：有过量终点时：有过量 有电流（使指针偏离零有电流（使指针偏离零 HNO2 永停在某一位置）

21、永停在某一位置）(2)外指示剂法外指示剂法 用用KI-淀粉指示剂淀粉指示剂 指示终点的原理：指示终点的原理：2NaO2+2KI +4HCl 2NO +I2 +2KCl +2NaCl+2H2OGVVR1R2+V(二）非水溶液滴定法二）非水溶液滴定法 基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因 侧链叔胺氮在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中碱侧链叔胺氮在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中碱 性弱，加醋酐可增加其碱性。因醋酐合乙酰氧离子比性弱，加醋酐可增加其碱性。因醋酐合乙酰氧离子比 醋酸和质子的酸性强，可增加碱性。醋酸和质子的酸性强，可增加碱性。2(CH3CO

22、)2O(CH3CO)3O+CH3COO-相当于相当于 BHCl +Hg(Ac)2BHAc +HgCl2BHAc +HClO4BHClO4 +HAc 1.对乙酰基酚原料的含量测定对乙酰基酚原料的含量测定 在在0.4%NaOH介质中；介质中；257nm D%E1%1cm样样 E1%1cm标标100；E1%1cm715 2.对乙酰基酚片溶出度测定对乙酰基酚片溶出度测定 （测定条件同上）（测定条件同上）1片稀片稀HCl 24ml+H2O 1000ml 精密量精密量 取取5ml +0.4%NaOH10ml+H2O 100ml 257nm测定测定A。W110005100100C（g/100ml)W(g)=

23、200 C;C=A/715 溶出度溶出度W标示量标示量10080为合格为合格（三）分光光度法（三）分光光度法中性条件下的重氮化反应中性条件下的重氮化反应（四）比色法（四）比色法盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因+1,2-+1,2-蒽醌蒽醌-4-4-磺酸钠磺酸钠pH4-9棕红色化合物，棕红色化合物，max482nm处测定处测定A A流动相为甲醇1HAc(40:60);UV检测器250nm.有色配位化合物沉淀。水中微溶。Ar-NH2 +RCOOH一、药物结构与主要理化学性质盐酸去氧肾上腺素 配2.盐酸异丙肾上腺素 深绿色,加5NaCO3试液显蓝紫色红色 棕色暗紫色弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，

24、显P是以对氯苯乙酰胺为对照品，CX=AX/AR CR2NaO2+2KI +4HCl 2NO +I2 +2KCl +2NaCl+2H2OK3Fe(CN)6氧化而显色，(2)外指示剂法再例如：盐酸普鲁卡因胺5g/ml;max=280nm(一)酮体检查乙醚，醚层(紫红色)水层(蓝色)对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与解，甲醇中略溶，乙醇中极微溶解，乙醚中几乎不溶；流动相为NaClO4(0.Ar-OH+N2 +HCl（五）盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定（五）盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定ex400nm（激发波长）、激发波长）、em485nm（发射波长）处测发射波长）处测定荧光强度，标准曲线法定量。

25、定荧光强度，标准曲线法定量。盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺+荧胺荧胺pH7.5荧光物荧光物 此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中 常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两 者的含量，该法简单准确。者的含量，该法简单准确。色谱条件：色谱柱为色谱条件：色谱柱为BondapakC18 300mm4mm 流动相为甲醇流动相为甲醇1HAc(40:60);UV检测器检测器250nm.（六）（六）HPLC法法第二节第二节 苯乙胺类药物的分析苯乙胺类药物的分析一、苯乙胺类药物的基本

26、结构与主要化学性质一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物（一）基本结构与典型药物R1CH CH NH R2OH R3*常见的苯乙胺类药物常见的苯乙胺类药物HOHOCOHHCH2NHCH3肾上腺素HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲肾上腺素CCCOOHCOOHOHHHHOHOCHOHCH2NHCH3 HCl盐酸去氧肾上腺素HOCHOHCH2NHCH(CH3)2 HClHO盐酸异丙肾上腺素 （二）（二）主要化学性质主要化学性质 1.1.弱碱性弱碱性 本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮 显弱碱性。显弱碱性。2.2.酚羟基特性酚羟基特

27、性 本类药物结构中有酚羟基，可与本类药物结构中有酚羟基，可与 FeCl FeCl3 3;发生氧化。发生氧化。3.3.光学活性光学活性 多数药物结构中有手性碳原子，具有旋多数药物结构中有手性碳原子，具有旋 光性。光性。二、鉴别试验二、鉴别试验 (一一)与三氯化铁反应与三氯化铁反应Ar-OHFeCl3络合显色络合显色 碱液碱液紫红色紫红色。(二）甲醛硫酸反应二）甲醛硫酸反应 在此试剂中形成醌式结构而显色。在此试剂中形成醌式结构而显色。药药 物物 三氯化铁三氯化铁 甲醛硫酸甲醛硫酸 肾上腺素肾上腺素 0.1 0.1mol/LHClmol/LHCl显绿色显绿色,甲氨试液显红紫红甲氨试液显红紫红 红色红

28、色 重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 绿色绿色,加加NaCONaCO3 3试液显紫色红色试液显紫色红色 淡红色淡红色 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 紫色紫色 玫瑰红橙红棕红玫瑰红橙红棕红 盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 深绿色深绿色,加加5 5NaCONaCO3 3试液显蓝紫色红色试液显蓝紫色红色 棕色暗紫色棕色暗紫色(三）氧化反应三）氧化反应 本类药物具有本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂易被氧化剂I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而显色，氧化而显色，例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被I2,H2O2 氧化后，生成肾上腺素红；氧化后，生成

29、肾上腺素红；盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧化，氧化，生成异丙肾上腺素红。生成异丙肾上腺素红。(四）紫外特征吸收与红外吸收光谱四）紫外特征吸收与红外吸收光谱例如：例如：盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 0.05mg/ml max=280nm A=0.50 这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别(五）与亚硝基铁氰化钠五）与亚硝基铁氰化钠(RiminiRimini试验）试验）是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；可用于重酒石是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；可用于重酒石酸间羟胺鉴别。酸间羟胺鉴别。D D 亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠 丙酮

30、丙酮 NaNa2 2COCO3 3红紫色红紫色与氯化钴生成亮绿色沉淀。弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显D CuSO4+NaOH水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸Ar-NH2 +RCOOH1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是一、药物结构与主要理化学性质盐酸普鲁卡因+NaOH采用UV法检查：1nol/L)-甲醇于max =249nm;E1%1cm=880碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可中性条件下的重氮化反应CX=AX/AR CR利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。（一）基本结构与典型药物有弱碱性。盐酸普鲁卡因胺+荧胺（一）基本结构与典型药物HNO2 2

31、H2NSO3NH4Ar-OH+N2 +HCl第三节 芳氧丙醇类药物的分析(六六)双缩脲反应双缩脲反应 是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄碱，盐酸伪麻黄碱鉴别：碱，盐酸伪麻黄碱鉴别：D D CuSO CuSO4 4+NaOH+NaOH显蓝紫色显蓝紫色乙醚，醚层乙醚，醚层(紫红色紫红色)水层水层(蓝色蓝色)(一一)酮体检查酮体检查 本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢化不完全，易引入酮体杂质。化不完全，易引入酮体杂质。采用采用UVUV法检查：法检查：利用酮体在利用酮体在310310nmnm有吸收，

32、本类药物无吸收。有吸收，本类药物无吸收。例如：肾上腺素本项检查例如：肾上腺素本项检查 配配2.02.0mg/ml =310nm Amg/ml =310nm A0.050.05 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 配配2.02.0mg/ml =310nm Amg/ml =310nm A0.020.02 盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 配配2.02.0mg/ml =310nm Amg/ml =310nm A0.150.15 三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查(二二)有关物质的检查有关物质的检查 采用采用TLCTLC法中的高低浓度对比法进行检查。法中的高低浓度对比法进行检查。(三三)盐酸苯乙双胍中有关

33、双胍的检查盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 采用采用PCPC法中的杂质对照法进行检查。法中的杂质对照法进行检查。(一一)非水溶液滴定法非水溶液滴定法 本类药物的原料药多采用此法。本法重点将在第八章讨论。本类药物的原料药多采用此法。本法重点将在第八章讨论。1.1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定重酒石酸去甲肾上腺素的测定 相当于相当于B B的有机酸盐可直接滴定。的有机酸盐可直接滴定。2.2.盐酸克仑特罗的测定盐酸克仑特罗的测定 相当于相当于B B的的HXHX酸盐不能直接滴定，需加酸盐不能直接滴定，需加Hg(Ac)Hg(Ac)2 2处理后滴定。处理后滴定。3.3.硫酸沙丁醇的测定硫酸沙丁醇的测定 相当于相当

34、于B B的的H H2 2SOSO4 4盐可直接滴定盐可直接滴定,也可处理后滴定。也可处理后滴定。四、含量测定四、含量测定(二二)溴量法溴量法 本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及其注射液用此法。其注射液用此法。基本原理：基本原理：HOOHCH-CH2NHCH3 +Br2HOOHCH-CH2NHCH3 +3HBrBrBrBr Br2 +2KI 2KBr +I2 I2 +2Na2S2O3 2NaI +Na2S4O6(三三)比色法比色法 利用药物分子结构中的利用药物分子结构中的Ar-OHAr-OH与与FeFe3 3络合显色，进行比色络合显色，进行比色测

35、定；测定；也可利用药物分子结构中的也可利用药物分子结构中的Ar-NHAr-NH2 2重氮化偶合显色，进行重氮化偶合显色，进行比色。比色。ClN2+Cl -CH(OH)CH2NHC(CH3)3ClClCH(OH)CH2NHC(CH3)3ClNHCH2CH2NH2+N=NNHCH2CH2NH2N-(1-萘基）乙二胺500nm比色测定例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定 上述偶合剂可与上述偶合剂可与HNOHNO2 2显色，干扰比色测定，可先加氨基显色，干扰比色测定，可先加氨基磺酸铵分解过量的磺酸铵分解过量的HNOHNO2 2。HNOHNO2 2 2H 2H2 2NSONSO3

36、 3NHNH4 42N2N2 2 +(NH +(NH4 4)2 2SOSO4 4+H+H2 2SOSO4 4+H+H2 2O O (四四)提取酸碱滴定法提取酸碱滴定法硫酸苯丙胺的含量测定：硫酸苯丙胺的含量测定：BH2SO4+NaOH+NaCl乙醚乙醚提取提取B+H2SO4蒸去乙醚蒸去乙醚NaOHNaOH标准液滴定标准液滴定终点终点(五五)荧光分光光度法荧光分光光度法肾上腺素测定肾上腺素测定：ex410nm、em520nm处测定荧光强度，处测定荧光强度，对照法定量。对照法定量。肾上腺素肾上腺素+I I2 2 肾上腺红肾上腺红一定条件下一定条件下N-N-甲基甲基-3,5,6-3,5,6-三羟基吲哚

37、三羟基吲哚(六六)HPLC法法 例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定 采用采用RPIP-HPLC-UV法；用外标一点法进行定量测法；用外标一点法进行定量测 定。定。例二、血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定例二、血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定 采用采用RPIP-HPLC-EChD 法；用标准曲线法进行定量法；用标准曲线法进行定量 测定。测定。(七七)衍生化衍生化GC法法 （GC-FID 以盐酸美西律作内标物以盐酸美西律作内标物)应用示例：盐酸芬氟拉明片的含量测定应用示例：盐酸芬氟拉明片的含量测定 盐酸芬氟拉明三氟乙酰肝盐酸芬氟拉明三氟乙酰肝

38、 衍生物衍生物对乙酰基酚片溶出度测定 （测定条件同上）(三)盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查（一）非水溶液定法本法重点将在第八章讨论。有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。相当于B的HX酸盐不能直接滴定，需加Hg(Ac)2处理后滴定。色谱条件：预柱为十八烷基硅胶柱；碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可盐酸普鲁卡因胺+荧胺可用于重酒石酸间羟胺鉴别。Ar-N2+Cl-+NaCl +2H2OAr-NH2 +RCOOH终点前：无过量 无电流（一）基本结构与典型药物盐酸卡替洛尔化学名为5-3-1,1-二甲基乙基)氨基-2-羟丙氧基基上氮可与Cu2+,Co2+生成苯佐卡因+NaOH(4)滴定管尖端插入液面下

39、滴定不得更深。第三节第三节 芳氧丙醇类药物的分析芳氧丙醇类药物的分析一、药物结构与主要理化学性质一、药物结构与主要理化学性质OONHCH3CH3CH3CH2 氧烯洛尔(Oxprenolol)NHOONCH3CH3H3CH.HClOH 盐酸卡替洛尔(Carteolol hydrochloride)氧烯洛尔化学名为氧烯洛尔化学名为 1-邻烯丙氧基苯氧基邻烯丙氧基苯氧基-3-异丙氨基异丙氨基-2-丙醇丙醇.本本 品为白色结晶粉末品为白色结晶粉末,乙醇、丙酮中易溶；异密、氯仿中略溶；乙醇、丙酮中易溶；异密、氯仿中略溶；水中微溶。水中微溶。盐酸卡替洛尔化学名为盐酸卡替洛尔化学名为5-3-1,1-二甲基乙

40、基二甲基乙基)氨基氨基-2-羟丙氧基羟丙氧基 -3,4-二氢二氢-2(1H)-喹诺酮盐酸盐。本喹诺酮盐酸盐。本 品为白色结晶粉末品为白色结晶粉末,水中溶水中溶 解，甲醇中略溶，乙醇中极微溶解，乙醚中几乎不溶；在冰醋解，甲醇中略溶，乙醇中极微溶解，乙醚中几乎不溶；在冰醋 酸中极微极微溶解酸中极微极微溶解(一一)化学鉴别反应化学鉴别反应 1.1.沉淀反应沉淀反应 利用其碱性与生物碱沉淀剂生成沉淀利用其碱性与生物碱沉淀剂生成沉淀 盐酸卡替洛尔硫氰酸铬铵试液盐酸卡替洛尔硫氰酸铬铵试液 淡红色淡红色 2.2.氧化反应氧化反应 利用侧链的不饱和双键可被高锰酸钾氧化利用侧链的不饱和双键可被高锰酸钾氧化 氧烯

41、洛尔氧烯洛尔 KMnOKMnO4 4 MnO MnO2 2(棕色沉淀棕色沉淀)(二二)紫外分光谱鉴别法紫外分光谱鉴别法 盐酸卡替洛尔：盐酸卡替洛尔：8 8g/ml,max=215nm;252nmg/ml,max=215nm;252nm 氧烯洛尔：氧烯洛尔：40 40g/ml,max=275nmg/ml,max=275nm二、鉴别试验二、鉴别试验三、盐酸卡替洛尔中有关物质检查三、盐酸卡替洛尔中有关物质检查本品采用本品采用TLCTLC法中的高低浓度对照法法中的高低浓度对照法四、含量测定四、含量测定 （一）非水溶液定法（一）非水溶液定法 盐酸卡替洛尔，氧烯洛尔原料可采用此法盐酸卡替洛尔，氧烯洛尔原料

42、可采用此法 盐酸卡替洛尔盐酸卡替洛尔BHCl+HClOBHCl+HClO4 4 BHClO BHClO4 4+HCl+HCl 用电位法指示终点用电位法指示终点,HClHCl不干扰，无需加醋酸汞处理。不干扰，无需加醋酸汞处理。（二）紫外分光光度法（二）紫外分光光度法 本法主要用于制剂分析。例如盐酸卡替洛尔注射液采用本法。本法主要用于制剂分析。例如盐酸卡替洛尔注射液采用本法。采用对照品比较法：采用对照品比较法：C CX X=A=AX X/A/AR R C CR R 标示量标示量 C CX X D/VD/V取取mlml规格规格ml/ml/标示量标示量100100 （三（三）HPLCHPLC法法 应用

43、示例：人血浆中样烯络尔及其异构体的测定应用示例：人血浆中样烯络尔及其异构体的测定 色谱条件：预柱为十八烷基硅胶柱；色谱条件：预柱为十八烷基硅胶柱；分析柱为手性分析柱为手性ODODR R柱柱(C C1818固定相上涂渍固定相上涂渍3,5-3,5-二二 甲本氨基甲酸酯纤维素，作为手性剂甲本氨基甲酸酯纤维素，作为手性剂););流动相为流动相为NaClO4(0.4mol/L)-NaClO4(0.4mol/L)-乙腈乙腈(70:30)(70:30)的磷酸的磷酸 缓冲液；检测器：缓冲液；检测器：237237nmnm 样品预处理：血浆样品用醋酸纤维素膜透析，预柱纯化和富样品预处理：血浆样品用醋酸纤维素膜透析

44、，预柱纯化和富 集，然后通过集，然后通过RPRP手性手性HPLCHPLC法分析。法分析。回收率：可达回收率：可达8080以上；线性范围：以上；线性范围：0.050.05g/mlg/ml2.50g/ml2.50g/ml 日内和日间精密度的日内和日间精密度的RSD14%.RSD14%.练习与思考练习与思考 A A型题型题 1 1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是A.A.水杨醛水杨醛 B.B.间氨基酚间氨基酚 C.C.水杨酸水杨酸 D.D.对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸 E.E.氨基酚氨基酚2 2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是A.A.水杨

45、醛水杨醛 B.B.间氨基酚间氨基酚 C.C.对氨基酚对氨基酚 D.D.苯甲酸苯甲酸 E.E.苯酚苯酚3 3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是A.A.水杨醛水杨醛 B.B.间氨基酚间氨基酚 C.C.对氨基酚对氨基酚 D.D.酮体酮体 E.E.苯甲酸苯甲酸 B B型题型题 A A。硫酸铜反应硫酸铜反应 B.B.氧化反应氧化反应 C.C.还原反应还原反应 D.D.水解后重氮化水解后重氮化-偶合反应偶合反应 E.E.重氮化重氮化-偶合反应偶合反应 1.1.盐酸利多卡因盐酸利多卡因 2.2.肾上腺素肾上腺素 3.3.盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 4 4对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚ABED