苯丙胺类药物的分析课件.ppt

1、第七章 芳胺类芳胺类1苯乙胺类苯乙胺类2苯丙胺类苯丙胺类3一、对氨基苯甲酸酯类一、对氨基苯甲酸酯类H2NCOOC2H5苯佐卡因苯佐卡因(benzocaine)H2NCOOC2H4N(C2H5)2HCl盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因(procaine hydrochloride)H2NCOOC2H4N(C2H5)2HClCl盐酸氯普鲁卡因盐酸氯普鲁卡因(chloroprocaine hydrochloride)H3C(H2C)3HNCOOC2H4N(C2H5)2HCl盐酸丁卡因盐酸丁卡因(tetracaine hydrochloride).R1HNCOOR2化学性质化学性质()2.2.水解水解：受光线

2、、热、碱的影响；盐酸丁卡因：受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因BABABABA，其余药物其余药物PABAPABA3.3.弱碱性弱碱性：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水溶剂：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水溶剂滴定滴定4.4.溶解性溶解性：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。OCH2CH2N(C2H5)2NHCH2CH2N(C2H5)2()1.1.芳伯氨基芳伯氨基：重氮化偶合反应；与芳醛缩合

3、成：重氮化偶合反应；与芳醛缩合成SchiffSchiff碱；易氧化变色等碱；易氧化变色等二、酰胺类二、酰胺类R4R3NHR1CR2OHONHCOCH3CH3COHNSNHCOCH3OOCH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2NHCOCH3CH3NC4H9.HClHCl对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚(paracetemol)醋氨苯砜醋氨苯砜(acedapsone)盐酸利多卡因盐酸利多卡因(lidocaine hydrochloride)盐酸布比卡因盐酸布比卡因(bupivacaine hydrochloride)R3R4R1NHCOR2HONHCOCH3SN HC O C H3OOH3CO CH N

4、paracetamol acedapsone1.1.水解水解芳伯胺基芳伯胺基2.水解产物水解产物(醋酸醋酸)+乙醇乙醇/硫酸硫酸醋酸乙酯醋酸乙酯3.对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚三氯化铁反应三氯化铁反应4.弱碱性：叔胺氮原子生物沉淀剂弱碱性：叔胺氮原子生物沉淀剂沉淀沉淀5.酰胺氮原子与金属离子络合显色酰胺氮原子与金属离子络合显色化学性质化学性质 ()(一一)重氮化重氮化-偶合反应偶合反应 分子中存在芳伯胺基或存在潜在芳伯胺基的药物，均可分子中存在芳伯胺基或存在潜在芳伯胺基的药物，均可与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性-萘萘酚偶合生成有色的偶氮

5、染料。酚偶合生成有色的偶氮染料。NH2R+NaNO2H+N2+Cl-R+Na+H2ON2+Cl-R+OHOHNNRNaOH+NaCl+H2O三、三、鉴别试验鉴别试验1.1.芳伯胺基芳伯胺基COOC2H5H2N苯佐卡因苯佐卡因H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2HCl盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因H2NCONHCH2CH2N(C2H5)2HCl盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺橙黄到猩红色沉淀橙黄到猩红色沉淀2.2.潜在芳伯胺基潜在芳伯胺基盐酸或硫酸水解盐酸或硫酸水解红色沉淀红色沉淀NHCOCH3HO对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚H3COCHNSOONHCOCH3醋氯苯砜醋氯苯砜区别盐酸丁卡因区别盐酸丁卡因C

6、OOCH2CH2N(CH3)2C4H9HNHNO2+COOCH2CH2N(CH3)2C4H9NNO+H2O白色沉淀白色沉淀(二二)三氯化铁反应三氯化铁反应3+FeCl3NHCOCH3OHNHCOCH3O3Fe+3HCl（蓝紫色蓝紫色）(三三)金属离子反应金属离子反应1 1、与铜和钴离子反应与铜和钴离子反应 （具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡（具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因）因）硫酸铜硫酸铜/碳酸钠试液碳酸钠试液蓝紫色配合物蓝紫色配合物氯仿层显黄色氯仿层显黄色 氯化钴氯化钴/酸性溶液酸性溶液亮绿色细小钴盐沉淀亮绿色细小钴盐沉淀2 2、羟肟酸铁盐反应羟肟酸铁盐反应 具有芳酰胺结构的，如盐酸普鲁卡因

7、胺具有芳酰胺结构的，如盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁盐酸普鲁卡因胺卡因胺浓过氧化氢浓过氧化氢/加热至沸加热至沸羟肟酸三氯化铁三氯化铁羟肟酸铁羟肟酸铁（紫红色）（紫红色）3 3、与汞离子反应与汞离子反应 a.a.芳酰胺类，如盐酸利多卡因芳酰胺类，如盐酸利多卡因 盐酸利盐酸利多卡因多卡因煮沸煮沸硝酸汞硝酸汞/硝酸硝酸黄色黄色b.b.对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因红色或橙黄色红色或橙黄色(四四)水解产物反应水解产物反应1 1、盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因10NaOH溶液溶液白色白色(普鲁卡因普鲁卡因)油状物油状物(普鲁卡因普鲁卡因)蒸气（二乙氨基乙醇）蒸气（二乙氨基乙醇）(使润湿的红色

8、石蕊试纸变蓝使润湿的红色石蕊试纸变蓝)油状物油状物消失消失放冷放冷盐酸酸化盐酸酸化白色白色（对氨基苯甲酸）（对氨基苯甲酸）（能溶于过量的盐酸）（能溶于过量的盐酸）2 2、苯佐卡因苯佐卡因H2NCOOC2H5+NaOHH2NCOONa+C2H5OHC2H5OH+I2+NaOHCHI3+HCOONa+H2O+NaI4655(五五)制备衍生物测定熔点制备衍生物测定熔点1 1、盐酸利多卡因盐酸利多卡因 盐酸布比卡因盐酸布比卡因三硝基苯酚三硝基苯酚三硝基苯酚利多卡因三硝基苯酚利多卡因（mp.228232）三硝基苯酚布比卡因三硝基苯酚布比卡因（mp.194）2 2、盐酸丁卡因盐酸丁卡因25硫氰酸铵溶液硫氰

9、酸铵溶液5醋酸钠溶液醋酸钠溶液丁卡因硫氰酸盐丁卡因硫氰酸盐（mp.131）(六六)UVUV(七七)、IRIRNH2COOCH2CH2N(C2H5)2HCl盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺NH2CONHCH2CH2N(C2H5)2HCl 波数波数cm-1 波数波数cm-1 酯羰基酯羰基C=O 1692 酯基酯基C-O 1271,1170,1115 二乙胺盐二乙胺盐N-H 2585 2645（略向高波数）（略向高波数）1550（N-H 酰胺酰胺带）带）1280（N-H酰胺酰胺带带）二乙胺盐，二乙胺盐，高波数移动高波数移动酯基酯基四、四、特殊杂质的检查特殊杂质的检查(一一)对乙

10、酰氨基酚对乙酰氨基酚NO2ClNaOH 水解NO2OHFe,HClNH2OHC2H5OH,乙酰化1 1、酸度、酸度（1 1）来源：生产过程引进酸性杂质）来源：生产过程引进酸性杂质 贮存过程水解产物醋酸贮存过程水解产物醋酸（2 2）适宜）适宜pHpH为为5.55.5-6.5(-6.5(本品本品1 1的水溶液）的水溶液）偏酸或偏碱易发生水解，从而影响质量。偏酸或偏碱易发生水解，从而影响质量。对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚2.2.乙醇溶液的澄清度与颜色：乙醇溶液的澄清度与颜色：中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色。（比浊，比色）棕色。（比浊，比色

11、）3.3.有关物质：有关物质：中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯乙中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、酰苯胺、O-O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等）苯醌和醌亚胺等）药典规定：以对氯乙酰苯胺为对照品，药典规定：以对氯乙酰苯胺为对照品，TLCTLC限度检查。限度检查。判断：置紫外灯判断：置紫外灯(254nm)(254nm)下检视，供试品如显杂质斑点，下检视，供试品如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更大，更深。与对照溶液的主斑点比较，不得更大，更深。4.4.对氨基酚对氨基酚乙酰化不完全或贮藏不当引起

12、水解毒性较大并有色泽乙酰化不完全或贮藏不当引起水解毒性较大并有色泽Na2Fe(NO)(CN)5+H2ONa2Fe(CN)5H2O+NONa2Fe(CN)5H2OH2NOH+H2N2(NC)5FeNa2OH+H2O 检查方法：检查方法：取本品取本品1.0g1.0g，加甲醇溶液（，加甲醇溶液（1212）20ml20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml1ml，摇匀，放置，摇匀，放置30min30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g1.0g加对氨基酚加对氨基酚50g50g用同一方法制成的对照液比较，不得更深用同一方法制成的对照

13、液比较，不得更深（0.005%0.005%）。）。(二二)盐酸普鲁卡因注射液盐酸普鲁卡因注射液H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2HClH2NCOOHH2N-CO2OOO水解限度：水解产物对氨基苯甲酸，不得超过限度：水解产物对氨基苯甲酸，不得超过1.2%1.2%。检查方法：检查方法：TLCTLC法，对氨基苯甲酸对照品对照，对二甲氨法，对氨基苯甲酸对照品对照，对二甲氨基苯甲醛溶液显色。基苯甲醛溶液显色。(三三)盐酸氯普鲁卡因注射液盐酸氯普鲁卡因注射液(四四)盐酸罗哌卡因注射液盐酸罗哌卡因注射液罗哌卡因罗哌卡因 (ropivacaine)NHNO*罗哌卡因为氨基酰胺类局罗哌卡因为氨基酰胺类局麻

14、药，广泛应用于外科麻醉、麻药，广泛应用于外科麻醉、急性止痛等急性止痛等。其有效构型为其有效构型为S S型，型，R R型为无效构型，因此型为无效构型，因此必须对罗哌卡因对映体纯度必须对罗哌卡因对映体纯度进行检查和控制。进行检查和控制。五、含量测定五、含量测定容量分析方法容量分析方法分光光度法分光光度法 色谱法色谱法亚硝酸钠滴定法亚硝酸钠滴定法(sodium nitrite method)非水溶液滴定法非水溶液滴定法non-aqueous titrimetry)(一一)亚硝酸钠滴定法亚硝酸钠滴定法(sodium nitrite method)Ar-NHCOR+H2OH+Ar-NH2+RCOOHAr

15、-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2ONaNO2 +HCl HNO2+NaClHNO2 +HCl NOCl +H2O ClNArOHNNArNONHArNHAr2NO2HBrHBr生成生成NONO+的速度的速度 HBrHBr生成生成NONO+的速度的速度注意事项注意事项1 1）滴定温度：室温）滴定温度：室温10103030。若温度过高，使。若温度过高，使HNO2HNO2逸失，逸失，并且重氮盐分解。并且重氮盐分解。Ar-NNClAr-NNCl-+H+H2 2O Ar-OH+NO Ar-OH+N2 2+HCl+HCl2 2）酸度：加入盐酸有利于重氮化反应速度加快）酸度

16、：加入盐酸有利于重氮化反应速度加快 重氮盐在酸性液中稳定防止偶氮氨基化合物的生成。重氮盐在酸性液中稳定防止偶氮氨基化合物的生成。3 3）滴定速度：重氮化反应为分子反应，应缓缓加入）滴定速度：重氮化反应为分子反应，应缓缓加入NaNONaNO2 2,不断搅拌。不断搅拌。4 4）滴定管尖端插入液面下）滴定管尖端插入液面下2/32/3处：防止处：防止HNOHNO2 2挥发分解。挥发分解。5 5）加入）加入KBrKBr：加快反应：加快反应6 6）指示终点方法：永停滴定法、外指示剂法）指示终点方法：永停滴定法、外指示剂法(碘化钾碘化钾-淀粉淀粉)(二二)非水滴定法非水滴定法(non-aqueous tit

17、rimetry)弱碱性弱碱性注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰指示剂：结晶紫指示剂：结晶紫指示剂：萘酚苯甲醇指示剂：萘酚苯甲醇盐酸丁卡因盐酸丁卡因盐酸利多卡因盐酸利多卡因侧链烃胺的叔胺氮侧链烃胺的叔胺氮侧链哌啶环的叔胺氮侧链哌啶环的叔胺氮盐酸布比卡因盐酸布比卡因盐酸丁卡因加醋酐以突出终点盐酸丁卡因加醋酐以突出终点CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2HCl+Hg(Ac)2CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2HAc+HgCl222CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2HAc+HAcCH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2HCl

18、O4+HClO4(三三)UVUV 对乙酰氨基酚在对乙酰氨基酚在257nm257nm波长处有最大吸收，中国药典波长处有最大吸收，中国药典20052005版采用百分吸收系数（版采用百分吸收系数（）法，测定对乙酰氨基酚的含）法，测定对乙酰氨基酚的含量。量。例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂胶囊、颗粒剂%11cmE【含量测定含量测定】取本品约取本品约40mg40mg，精密称定，置，精密称定，置250ml250ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%0.4%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液50ml50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取溶解后，加水

19、至刻度，摇匀，精密量取5ml5ml，至至100ml100ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%0.4%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液10ml10ml，加水至刻度，摇匀，加水至刻度，摇匀，照紫外可见分光广度法（药典照紫外可见分光广度法（药典Chp2005Chp2005版附录版附录AA），在），在257nm257nm的的波长处测定吸光度，按波长处测定吸光度，按C C8 8H H9 9NONO2 2的吸收系数（的吸收系数（）为）为715715计算，计算，即得。即得。%11cmE(四四)HPLCHPLC对乙酰氨基酚泡腾片的含量测定对乙酰氨基酚泡腾片的含量测定(五五)体内药物分析体内药物分析HPCE研究人血浆中的普

20、鲁卡因、利多卡因、研究人血浆中的普鲁卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因丁卡因和布比卡因一、基本结构与性质一、基本结构与性质R1HCOHHCR3NHR2 R1 R2 R3 H OH OC lH2NC lH OH O H2CC H(C H3)2C(C H3)3C H3C H3C H3HHHH C lH C lH2S O4肾上腺素肾上腺素(adrenaline)盐酸克伦特罗盐酸克伦特罗(clenbuterol ydrochloride)硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇(salbutamol sulfate)盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱(ephedrine hydrochloride)R1HCOHHCR3NHR2弱碱性

21、：弱碱性：l 烃胺基侧链，仲胺氮弱碱性。烃胺基侧链，仲胺氮弱碱性。l 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水其盐可溶于水酚羟基特性：酚羟基特性：邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色；邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色；在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；在碱性溶液中更易变色。在碱性溶液中更易变色。*光学活性：光学活性：手性碳原子，具有旋光性手性碳原子，具有旋光性苯环取代基特性苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗芳伯氨基；：如盐酸克伦特罗芳伯氨基；紫外、红紫外、红外吸收特性外吸收特性(一一)与三氯化铁反应、与甲醛硫

22、酸反应与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应药物药物三氯化铁三氯化铁甲醛硫酸甲醛硫酸肾上腺素肾上腺素Adrenaline0.1mol/L0.1mol/L盐酸液中显翠绿盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫色，加氨试液显紫色，紫红色红色红色红色重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素Noradrenaline bitartrate翠绿色，加碳酸氢钠试液翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色显蓝色，红色淡红色淡红色盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素Phenylephrine hydrochloride紫色紫色玫瑰红，橙红，深玫瑰红，橙红，深棕红棕红盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素Isoprenaline hydr

23、ochloride深绿色，滴加新制深绿色，滴加新制5%5%碳酸碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色氢钠液，显蓝紫色，红色棕色，暗紫色棕色，暗紫色盐酸多巴胺盐酸多巴胺Dopamine hydrochloride墨绿色，滴加墨绿色，滴加1%1%氨溶液，氨溶液，显紫红色显紫红色(二二)氧化反应氧化反应 酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色。呈现不同颜色。肾上腺肾上腺素素碘或过氧化碘或过氧化氢氢中性或酸性中性或酸性肾上腺素肾上腺素红红放置放置棕红色多聚体棕红色多聚体盐酸异丙肾上腺盐酸异丙肾上腺素素偏酸性条件偏酸性条件碘碘异丙肾上腺素异丙肾上腺素红红硫代硫酸硫代

24、硫酸钠钠淡红色溶淡红色溶液液重酒石酸重酒石酸去甲肾上腺去甲肾上腺素素酒石酸氢钾饱和酒石酸氢钾饱和液液pH 3.56碘试碘试液液放置放置5min5min硫代硫酸硫代硫酸钠钠溶液为无色或仅溶液为无色或仅显微红色或淡紫显微红色或淡紫色色肾上腺素肾上腺素或盐酸异丙肾上腺素或盐酸异丙肾上腺素明显的红棕色明显的红棕色或紫色或紫色（三）（三）UV和和IR药物药物溶剂溶剂浓度浓度(mg/ml)nm(nm)吸收度吸收度(A)重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺水水0.10272盐酸异丙肾上腺盐酸异丙肾上腺素素水水0.052800.50盐酸多巴胺盐酸多巴胺0.5%硫酸硫酸0.03280盐酸芬氟拉明盐酸芬氟拉明0.1mol

25、/L盐酸盐酸0.25263,270盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍水水0.012340.60盐酸克伦特罗盐酸克伦特罗0.1mol/L盐酸盐酸0.03243,296硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇水水0.08274盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱水水0.50251,257,263（四（四）亚硝基铁氰化钠反应）亚硝基铁氰化钠反应（脂肪族伯胺的专属反应）（脂肪族伯胺的专属反应）HOHCOHHCCH3NH2重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺水水溶解溶解亚硝基铁氰化钠试亚硝基铁氰化钠试液液丙酮丙酮(无甲醛无甲醛)数滴，碳酸氢钠少量数滴，碳酸氢钠少量（五）双缩脲反应（五）双缩脲反应 盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，芳环侧链具有氨基醇结构，盐

26、酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。可显双缩脲特征反应。例：例：ChpChp鉴别盐酸麻黄碱鉴别盐酸麻黄碱 取本品取本品10mg，1ml水溶解后，加硫酸铜试液水溶解后，加硫酸铜试液2滴与滴与20%氢氧化钠液氢氧化钠液1ml，即显蓝紫色，加乙醚，即显蓝紫色，加乙醚1ml振摇、放置，振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。（一）酮体检查生产工艺：生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。杂质。降解产物降解产物HOHONHOHO-H2OOONHOH-H2O-ON+OHOONOHOONO

27、Hn肾上腺素红多聚体 药物药物杂质杂质 溶剂溶剂C(mg/C(mg/ml)ml)(nm)(nm)A A肾上腺素肾上腺素 肾上腺肾上腺酮酮HCl(9HCl(92000)2000)2.02.0 3103100.050.05盐酸去氧肾上腺盐酸去氧肾上腺素素 酮体酮体 水水 2.0 2.0 310 3100.200.20重酒石酸去甲肾重酒石酸去甲肾上腺素上腺素去甲肾去甲肾上腺酮上腺酮 水水 2.0 2.0 310 3100.050.05盐酸异丙肾上腺盐酸异丙肾上腺素素 酮体酮体 水水 2.0 2.0 310 3100.150.15盐酸甲氧明盐酸甲氧明 酮胺酮胺 水水 1.51.5 3473470.06

28、0.06紫外分光光度法检查酮体的条件及要求紫外分光光度法检查酮体的条件及要求（二）有关物质（二）有关物质盐酸安溴索盐酸安溴索HPLC盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍纸色谱法纸色谱法盐酸特布他林盐酸特布他林TLC原料：非水溶液滴定法、溴量法原料：非水溶液滴定法、溴量法制剂：比色法、提取容量法、紫外分光光度法、制剂：比色法、提取容量法、紫外分光光度法、高效液相色谱法高效液相色谱法（一）非水溶液滴定法（一）非水溶液滴定法(弱碱性弱碱性)l 冰醋酸为溶剂冰醋酸为溶剂l 醋酸汞消除氢卤酸的干扰醋酸汞消除氢卤酸的干扰l 结晶紫为指示剂（盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲，结晶紫为指示剂（盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲，也

29、可电位法指示终点）也可电位法指示终点）l 若碱性较弱则加醋酐使突跃明显若碱性较弱则加醋酐使突跃明显l 加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐品后应放冷后再加醋酐例：重酒石酸去甲肾上腺素直接滴定例：重酒石酸去甲肾上腺素直接滴定 盐酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰；由于碱性较弱，盐酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰；由于碱性较弱，电位法指示终点电位法指示终点 硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂（二）溴量法（二）溴量法HOHCOHCH2NHCH3+3Br2HOHCOH

30、CH2NHCH3BrBrBr+3HBrBr2+2KI2KBr+I2I2+2Na2SO32NaI+Na2S4O61 1、游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失、游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失2 2、不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般、不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过量以过量2 2为宜。为宜。3 3、平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。、平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。（三）提取酸碱滴定法（三）提取酸碱滴定法(溶解性差异溶解性差异)方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂提取，

31、将提取液蒸干，残渣中物游离，用适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提取液加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定）。准碱滴定液回滴定）。硫酸苯丙胺硫酸苯丙胺加水溶解加水溶解加氢氧化钠试液加氢氧化钠试液8ml 8ml 加氯化钠使饱和加氯化钠使饱和乙醚多次提取乙醚多次提取合并乙醚液合并乙醚液精密加硫酸滴定液（精密加硫酸滴定液（0.05mol/L0.05mol/L）25ml25ml振摇振摇低温蒸去乙醚低温蒸去乙醚放冷至室温放冷至

32、室温加甲基红指示液加甲基红指示液2 2滴滴用氢氧化钠用氢氧化钠（0.1mol/L0.1mol/L）滴定。每）滴定。每1ml1ml硫酸滴定液（硫酸滴定液（0.05mol/L0.05mol/L）相当于）相当于18.42mg18.42mg的的C C1818H H2626N N2 2HH2 2SOSO4 4。（四）（四）UV和比色法和比色法ClClN2+Cl-CH(OH)CH2NH(CH3)3+NHCH2CH2NH2ClClNCH(OH)CH2NH(CH3)3NNHCH2CH2NH2（五）（五）HPLCHPLC（六）（六）体内药物分析体内药物分析(GC-MS)(GC-MS)一、基本结构与性质一、基本结

33、构与性质NHR2R1NHCOOCC2H5CH3NCOOHO OHOOH马来酸依那普利马来酸依那普利(enalapril maleate)NHNCOOHOC2H5COOCHCl盐酸贝那普利盐酸贝那普利(benazepril hydrochloridebenazepril hydrochloride)NHCOOHH2NONCOOH赖诺普利赖诺普利(lisinopril)主要性质：主要性质：酸碱性酸碱性 脯氨酸衍生物脯氨酸衍生物 光学活性光学活性 水解特性水解特性NHCOOHH2NONCOOH赖诺普利(lisinopril)（一）理化鉴别（一）理化鉴别（二）旋光法（二）旋光法（三）光谱、色谱法（三）光谱、色谱法（一）马来酸依那普利（一）马来酸依那普利NHNHOOCHHHMeCOOHONCH3CH2OOCHHMeNOOH依那普利拉依那普利双酮（二）西拉普利（二）西拉普利（三）溶剂残留（三）溶剂残留（一）酸碱滴定法（一）酸碱滴定法非水溶液中滴定非水溶液中滴定马来酸依那普利马来酸依那普利(Ch.P)(Ch.P)水溶液滴定水溶液滴定马来酸依那普利、赖诺普利马来酸依那普利、赖诺普利(BP)(BP)醇醇-水混合溶液水混合溶液雷米普利、西拉普利雷米普利、西拉普利（二）（二）HPLCHPLCeg:eg:依那普利及其活性代谢物的药动学研究依那普利及其活性代谢物的药动学研究