脑脊液及浆膜腔积液检查-长沙医学院课件.ppt
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- 脑脊液 浆膜 积液 检查 长沙 医学院 课件
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1、第七章 长沙医学院临检教研室长沙医学院临检教研室 陈丽华陈丽华目的要求1、掌握:、掌握:(1)CSF一般性状检查;蛋白定性试验原理、方一般性状检查;蛋白定性试验原理、方法、参考值、和临床意义。法、参考值、和临床意义。(2)显微镜检查的方法、参考值、和临床意义。)显微镜检查的方法、参考值、和临床意义。(3)常见脑膜疾患的脑脊液改变。)常见脑膜疾患的脑脊液改变。2、熟悉:、熟悉:酶学检查;脑脊液蛋白、糖的方法学酶学检查;脑脊液蛋白、糖的方法学评价。评价。3、了解:、了解:CSF形成及功能,形成及功能,CSF成分,成分,CSF采采集、酶及其他、免疫球蛋白检查、病原学检查集、酶及其他、免疫球蛋白检查、
2、病原学检查目的要求重点重点:常规检验方法(细胞计数、分类计常规检验方法(细胞计数、分类计数、蛋白测定)及意义数、蛋白测定)及意义难点难点:镜检形态镜检形态第一节 概述一、一、CSF的生成:的生成:脑脊液脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF(cerebrospinal fluid,CSF)是存在于脑室是存在于脑室及蛛网膜下腔内的一种无色透明液体。主要由脑及蛛网膜下腔内的一种无色透明液体。主要由脑室的脉络丛通过主动分泌和超滤的联合过程形成室的脉络丛通过主动分泌和超滤的联合过程形成的,形成的的,形成的CSFCSF经第三、第四脑室进入小脑延髓经第三、第四脑室进入小脑延髓池,再分布于蛛
3、网膜下腔内。池,再分布于蛛网膜下腔内。1.量:量:成人为成人为120180ml 新生儿新生儿101060ml60ml。2.CSF循环:循环:产生于脑室脉络丛。产生于脑室脉络丛。3.血血-脑屏障:脑屏障:脑脊液是由血液通过脉络丛后形成的,但并非直接脑脊液是由血液通过脉络丛后形成的,但并非直接流通,而是通过血流通,而是通过血-脑屏障选择性的过滤。脑屏障选择性的过滤。二、CSF的功能1缓冲缓冲保护功能保护功能2调节颅内压调节颅内压3代谢作用代谢作用4.维持神经系统正常维持神经系统正常pH.5.参与神经内分泌调节。参与神经内分泌调节。三、适应症和标本三、适应症和标本CSF采集采集(一)(一)CSF压力
4、的正常值压力的正常值腰椎穿刺腰椎穿刺 侧卧位:侧卧位:成人:成人:80180mmH2O 儿童:儿童:40100mmH2O(二)腰椎穿刺适应证(二)腰椎穿刺适应证不明原因剧烈头痛、昏迷、瘫痪或抽不明原因剧烈头痛、昏迷、瘫痪或抽搐。搐。有脑膜刺激症状。有脑膜刺激症状。疑颅内出血,脑膜白血病,神经梅毒。疑颅内出血,脑膜白血病,神经梅毒。中枢神经系统疾病需系统观察或椎管中枢神经系统疾病需系统观察或椎管内给药。内给药。(三)禁忌证(三)禁忌证疑有颅内高压者疑有颅内高压者处于休克,衰竭或濒危状态者处于休克,衰竭或濒危状态者腰椎腰椎TB、穿刺部位有化脓性感染灶、穿刺部位有化脓性感染灶颅后窝有占位性病变或伴有
5、脑干症颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状者状者(四)标本采集(四)标本采集无菌采集无菌采集 压力测定压力测定 收集三管收集三管T1 细菌培养细菌培养T2 化学或免疫学检查化学或免疫学检查T3 一般性状检查一般性状检查必要时再留一管进行细胞学检查。必要时再留一管进行细胞学检查。收集于无菌试管(或小瓶)中,各收集于无菌试管(或小瓶)中,各12ml,立即立即送检。送检。脑脊液压力检测脑脊液压力检测(五)脑脊液检查目的脑脊液检查目的中枢神经感染性疾病的诊断与鉴别诊断。中枢神经感染性疾病的诊断与鉴别诊断。脑血管疾病的诊断与鉴别诊断。脑血管疾病的诊断与鉴别诊断。协助脑部肿瘤的诊断。协助脑部肿瘤的诊断。中枢神
6、经系统疾病的治疗与疗效观察。中枢神经系统疾病的治疗与疗效观察。第二节 脑脊液一般性状检查一般性状检查 1.颜色颜色 2.混浊度即透明度混浊度即透明度 3.薄膜形成和凝块薄膜形成和凝块 4.比密比密 5.pH1.颜色:无色透明或淡黄色颜色颜色 原因原因 临床意义临床意义无色无色 正常,病脑,结脑,正常,病脑,结脑,红色红色 出血出血 穿刺损伤、蛛网膜下腔或脑室出血穿刺损伤、蛛网膜下腔或脑室出血黄色黄色 黄疸症黄疸症 陈旧性出血、黄疸、梗阻;黄色素陈旧性出血、黄疸、梗阻;黄色素乳白色乳白色 WBC 化脓性脑膜炎化脓性脑膜炎淡绿色淡绿色 脓性分泌物脓性分泌物 铜绿假单胞菌等引起的脑膜炎铜绿假单胞菌等
7、引起的脑膜炎黑褐色黑褐色 色素增多色素增多 脑膜黑色素瘤,高胆红素血症脑膜黑色素瘤,高胆红素血症外观外观 前后三管红色逐渐变淡前后三管红色逐渐变淡 三管红色均匀一致三管红色均匀一致2.混浊度即透明度混浊度即透明度观察方法:观察方法:在腰穿后在腰穿后1小时取小时取CSF 35ml,置无,置无色透明玻璃试管内,在自然光线下进行观察。色透明玻璃试管内,在自然光线下进行观察。报告报告:清晰透明清晰透明 微混微混 混浊混浊参考值:参考值:清晰透明清晰透明意义:意义:白细胞、蛋白质、细菌、霉菌等增多,混白细胞、蛋白质、细菌、霉菌等增多,混 浊度增加。浊度增加。3.薄膜形成和凝块正常:正常:24静置静置12
8、24小时不形成膜状物、凝块或小时不形成膜状物、凝块或沉淀物。沉淀物。异常异常报告方式:报告方式:无凝块、有凝块、有薄膜、胶胨状无凝块、有凝块、有薄膜、胶胨状神经梅毒:小絮状凝块而不形成薄膜。神经梅毒:小絮状凝块而不形成薄膜。4.比密正常:正常:1.0061.008增高:增高:各种颅内炎症各种颅内炎症降低:降低:脑脊液分泌增多脑脊液分泌增多第三节 脑脊液常用化学检查蛋白质检查葡萄糖定量测定氯化物定量测定谷氨酰胺定量测定脑脊液蛋白定性方法脑脊液蛋白定性方法主要为清蛋白主要为清蛋白,占血浆占血浆1%。Pandy testRoss-Jone test None-Apett test 方方 法法 比比
9、较较优优 点点 缺缺 点点 方方 法法灵敏度高,标本灵敏度高,标本少,结果易观察,少,结果易观察,操作简便操作简便标本可现弱阳性标本可现弱阳性检测球蛋白,操作检测球蛋白,操作简便简便灵敏度较弱灵敏度较弱分别检测球蛋白分别检测球蛋白和清蛋白和清蛋白操作较繁琐操作较繁琐一、蛋白质测定一、蛋白质测定1)标本因穿刺出血,有血清蛋白混入,可引标本因穿刺出血,有血清蛋白混入,可引起假阳性。起假阳性。2)室温低于)室温低于10,苯酚饱和度低,可引起假阴苯酚饱和度低,可引起假阴性性3)潘氏试验加标本后应立即在黑色背景下观)潘氏试验加标本后应立即在黑色背景下观察结果。察结果。蛋白定性检查:质量控制蛋白定性检查:
10、质量控制定量法定量法方法方法优点优点缺点缺点比浊法比浊法简便,快速,无简便,快速,无需特殊仪器需特殊仪器标本量大,对两标本量大,对两种蛋白沉淀能力种蛋白沉淀能力不同不同染料结合法染料结合法考马斯亮蓝考马斯亮蓝快速,灵敏度高,快速,灵敏度高,标本量少标本量少对实验条件的对实验条件的pH值要求较高值要求较高 参考范围参考范围(1)定性定性:()()()(2)定量定量:成人腰池:成人腰池:0.20.40mg/L 小脑延髓池:小脑延髓池:0.100.25mg/L 脑室:脑室:0.050.15mg/L临床意义临床意义血脑屏障通透性血脑屏障通透性蛋白蛋白或或CSFCSF循环障碍循环障碍,见于见于:(1)C
11、NS (1)CNS感染性疾病感染性疾病 (2)(2)神经根病变神经根病变 (3)(3)椎管内梗阻:蛋白椎管内梗阻:蛋白-细胞分离现象细胞分离现象 (4)(4)其他:其他:CNSCNS肿瘤,肿瘤,早产儿早产儿 二、葡萄糖二、葡萄糖(1)参考值:)参考值:腰椎穿刺腰椎穿刺 2.54.4mmol/L小脑髓池小脑髓池 2.84.5mmol/L脑室脑室 3.04.4mmol/LCSF糖糖/血浆糖血浆糖=3/5 1)定性(半定量):定性(半定量):基本同尿糖班氏法基本同尿糖班氏法 2)定量:定量:葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法CSF中葡萄糖含量取决于以下几种因素:中葡萄糖含量取决于以
12、下几种因素:1.血液葡萄糖的浓度血液葡萄糖的浓度2.血脑屏障的通透性血脑屏障的通透性3.CSF中葡萄糖的酵解程度中葡萄糖的酵解程度4.携带运转系统的功能携带运转系统的功能2.测定3.临床意义临床意义 1)增加:血糖升高,见于)增加:血糖升高,见于糖尿病、早产儿、糖尿病、早产儿、新生儿、脑水肿、脑溢血。新生儿、脑水肿、脑溢血。2)降低:)降低:神经系统感染性疾病:神经系统感染性疾病:颅内肿瘤:颅内肿瘤:髓母细胞瘤、髓母细胞瘤、各种原因引起的低血糖。各种原因引起的低血糖。蛛网膜下腔出血蛛网膜下腔出血脑寄生虫病:脑囊虫病脑寄生虫病:脑囊虫病三、氯化物三、氯化物 1.参考值:参考值:CSF中氯化物主要
13、是中氯化物主要是NaCl,含量含量为血氯为血氯1.2倍倍左右左右正常正常 成人成人:120130mmol/L 儿童儿童:111123mmol/L 2.Donnan平衡平衡CSF内蛋白质含量较低,为了维持内蛋白质含量较低,为了维持CSF和血和血浆渗透压之间平衡,故浆渗透压之间平衡,故CSF氯化物含量高于血氯化物含量高于血浆浆1.21.3倍,即为倍,即为Donnan平衡。平衡。3 3)氯化物检测)氯化物检测原理:随着血氯、血脑脊液屏障的通透性、原理:随着血氯、血脑脊液屏障的通透性、csfcsf中蛋白含量变化中蛋白含量变化而改变。而改变。Donnan balance:3.临床意义临床意义 1)减低)
14、减低 脑部细菌或真菌感染。脑部细菌或真菌感染。见于结脑最见于结脑最明显,病毒性脑炎无显著变化。明显,病毒性脑炎无显著变化。低血氯症。低血氯症。呕吐、肾上腺皮质功能减退和肾病变。呕吐、肾上腺皮质功能减退和肾病变。2)增高增高 见于高氯血症、呼吸性碱中毒、尿毒见于高氯血症、呼吸性碱中毒、尿毒症。症。四、免疫球蛋白四、免疫球蛋白1.1.参考范围参考范围:IgG:1040mg/L;IgG:1040mg/L;IgA:06mg/L;IgA:06mg/L;IgM:00.22mg/L;IgM:00.22mg/L;IgEIgE:极少量。极少量。2.2.临床意义临床意义:IgGIgG:细菌性脑膜炎、多发性硬化细菌
15、性脑膜炎、多发性硬化 IgAIgA:化脑、结核性脑膜炎及神经性梅毒等:化脑、结核性脑膜炎及神经性梅毒等 IgMIgM:化脓性脑膜炎、病脑、肿瘤等化脓性脑膜炎、病脑、肿瘤等 IgE:脑寄生虫病:脑寄生虫病五五.MBP.MBP1.参考范围:参考范围:4g/L2.临床意义:临床意义:是神经组织独有的蛋白质,脑组织实是神经组织独有的蛋白质,脑组织实质损伤的特异性标记。质损伤的特异性标记。增高增高:见于多发性硬化症、神经性梅毒、脑血管病见于多发性硬化症、神经性梅毒、脑血管病和外伤患者。和外伤患者。可作为多发性硬化症的辅助诊断。可作为多发性硬化症的辅助诊断。六、酶学检查六、酶学检查正常时正常时,血清酶不能
16、通过血脑屏障血清酶不能通过血脑屏障1.ADA:TBM显著高于其他脑(膜)炎显著高于其他脑(膜)炎2.LD:脑组织损伤、细菌感染脑组织损伤、细菌感染3.CK:脑实质破坏脑实质破坏4.AST:脑组织坏死、出血、脑萎缩等脑组织坏死、出血、脑萎缩等5.溶菌酶溶菌酶:细菌感染细菌感染6.ALT:中枢神经系统转移癌:中枢神经系统转移癌第四节 脑脊液显微镜检查细胞计数细胞计数白细胞分类计数白细胞分类计数 一、细胞计数一、细胞计数 1.细胞总数计数细胞总数计数 细胞总数包括白细胞和红细胞。细胞总数包括白细胞和红细胞。方法:方法:(1)直接充池计数直接充池计数 脑脊液清亮或微浑时,脑脊液清亮或微浑时,直接充池,
17、直接充池,低倍镜下计数两个计数池内的四角低倍镜下计数两个计数池内的四角和中央大格内的细胞数(和中央大格内的细胞数(1l脑脊液)。脑脊液)。计数公式:计数公式:脑脊液细胞总数脑脊液细胞总数/L=10大格内细胞数大格内细胞数106/L(2)稀释计数法)稀释计数法适于细胞含量多的浑浊脑脊液。用生理盐水稀适于细胞含量多的浑浊脑脊液。用生理盐水稀释不同的倍数后,充池,低倍镜下计数四角及释不同的倍数后,充池,低倍镜下计数四角及正中五个大方格内细胞数。正中五个大方格内细胞数。计数公式:计数公式:细胞总数细胞总数/L=(五大格细胞数(五大格细胞数/5)10稀释倍稀释倍 数数106/L =五大格内细胞数五大格内
18、细胞数2稀释倍数稀释倍数106/L 2.白细胞计数(1)直接计数法)直接计数法 适于无色清晰透明或微浑脑适于无色清晰透明或微浑脑脊液。脊液。在小试管内加冰乙酸在小试管内加冰乙酸12滴,转动试管,使管滴,转动试管,使管壁粘附少许冰乙酸后,然后将其倾去,再滴加混壁粘附少许冰乙酸后,然后将其倾去,再滴加混匀的脑脊液匀的脑脊液4滴,摇匀,静放数分钟,滴,摇匀,静放数分钟,利用管壁利用管壁粘附的冰乙酸将红细胞溶解。粘附的冰乙酸将红细胞溶解。充池计数及结果计算按充池计数及结果计算按CSF细胞总数计数的步细胞总数计数的步骤及公式。骤及公式。(2)稀释计数法)稀释计数法:同血液白细胞计数。:同血液白细胞计数。
19、二、白细胞分类计数1.直接分类法直接分类法 白细胞计数后,转高倍镜,共计白细胞计数后,转高倍镜,共计数数100个白细胞,分别计数单个核细胞(包括淋个白细胞,分别计数单个核细胞(包括淋巴、单核及内皮细胞)和多个核细胞(粒细胞)巴、单核及内皮细胞)和多个核细胞(粒细胞)的数量。的数量。报告方式:报告方式:以单核细胞和多核细胞百分比报告。以单核细胞和多核细胞百分比报告。如细胞不足如细胞不足100个可直接报告数值或换算成百个可直接报告数值或换算成百分比。分比。若细胞不足若细胞不足30个改用染色后分类计数。个改用染色后分类计数。2.涂片染色分类计数方法:方法:CSF以以1000rpm离心离心5min 弃
20、上清液弃上清液取沉淀推成薄片取沉淀推成薄片 置室温下干燥置室温下干燥 瑞氏瑞氏染色后按血片白细胞分类计数方法油镜下进行染色后按血片白细胞分类计数方法油镜下进行分类计数。分类计数。3.3.参考范围参考范围(1 1)总数)总数:无红细胞。无红细胞。WBCWBC:成人(:成人(0 08)10 106 6/L/L 儿童(儿童(0 01515)10 106 6/L/L 新生儿(新生儿(0 03030)10 106 6/L/L(2 2)分类计数)分类计数 主要为淋巴细胞和单核细胞,主要为淋巴细胞和单核细胞,单个核细胞:约单个核细胞:约70%70%,多个核细胞:约多个核细胞:约30%30%。4.质量控制1)
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