核医学放射自显影术ARG课件.ppt

1、 核医学放射自显影术ARG1 18671867年年 Nieple de st victer Nieple de st victer发展铀盐能使发展铀盐能使胶片感光，但引出错误的结论胶片感光，但引出错误的结论 1896 1896年年 H.Becqueral H.Becqueral证实上述是辐射引起。证实上述是辐射引起。1898 1898年年 Bq.Bq.和居里夫妇和居里夫妇 发现发现210210popo，226226RaRa 1924 1924年年 Lacassagae Lacassagae 首次研究铀在生物体内首次研究铀在生物体内分布分布 19391945 19391945 各种记录粒子径迹的

2、专用乳胶各种记录粒子径迹的专用乳胶 1946 1946年年 Belanger Belanger和和leblandlebland更好的液体乳更好的液体乳胶，胶，ARGARG分辨力大为提高。分辨力大为提高。1950 1950年年 Pelc Pelc揭膜乳胶揭膜乳胶 1956 1956年年 超微结构及电镜超微结构及电镜ARGARG核医学放射自显影术ARG2定位准确定位准确 敏感度高敏感度高 可定量测量，还可做形态定量分析可定量测量，还可做形态定量分析 不需复杂设备，应用广泛。不需复杂设备，应用广泛。引入示踪剂引入示踪剂制备标本制备标本制备制备ARGARG曝曝光光照像处理照像处理标本染色标本染色分析分

3、析核医学放射自显影术ARG3组成：银盐组成：银盐+明胶：明胶：分类：分类：原子核乳胶：核乳胶，干板，揭膜原子核乳胶：核乳胶，干板，揭膜 氚片氚片 X片片 电影正片及幻灯片电影正片及幻灯片核医学放射自显影术ARG41、乳胶及制品、乳胶及制品a、液体核乳胶：粘稠、液体核乳胶：粘稠、10以下呈胶冻状，以下呈胶冻状，40温溶，极限温溶，极限50，出厂本底，出厂本底3个银粒个银粒 /1000m应用：核应用：核4所有带电粒子所有带电粒子 核核2a粒子粒子 HW34电镜电镜ARGb、干板：宏观及光镜、干板：宏观及光镜ARGc、揭膜乳胶：光镜定量、揭膜乳胶：光镜定量ARG核医学放射自显影术ARG5d、国外产品

4、：、国外产品：美美 EastmanKodak NTE 英英 Kodak 英英 Ilford L-4 比利时比利时 Gevaert Nuc-307 银粒银粒 0.07-0.4 Exp-6M 按敏感度分为：按敏感度分为：0型：型：a粒子粒子 2型：型：3H,125I 5型：用于低电离作用的型：用于低电离作用的粒子径迹粒子径迹ARG核医学放射自显影术ARG62、电影正片、电影正片 or 幻灯片：幻灯片：粒径粒径1m，单面涂乳胶，厚，单面涂乳胶，厚15m，外加保护层，除外加保护层，除3H以外的各种核素宏观以外的各种核素宏观ARG3、X 光片：粒径光片：粒径2.5m，敏感性强，但分，敏感性强，但分辨力低

5、，宏观辨力低，宏观ARG，低能核素不适应。，低能核素不适应。4、氚片：进口、氚片：进口 LKB产品，国产也有了，产品，国产也有了，粒径粒径1m，暗室安全光相当耐受，宏观，暗室安全光相当耐受，宏观3H ARG5、彩色乳胶片干板：彩显、彩色乳胶片干板：彩显ARG核医学放射自显影术ARG7三、三、ARGARG原理原理 原理：造成核乳胶的点阵发原理：造成核乳胶的点阵发生缺陷（形状不一、颗粒不完生缺陷（形状不一、颗粒不完整、缺一个或一对离子等）也整、缺一个或一对离子等）也叫叫“敏化中心敏化中心”。当射线作用乳胶时，电离的电子向当射线作用乳胶时，电离的电子向“敏化敏化中心中心”移动，移动，.较多时或形成静

6、电膜，较多时或形成静电膜，吸引吸引Ag+Ag+移动。虽量少移动。虽量少1/1001/100亿，但有巨大催亿，但有巨大催化作用，能使溴化银结晶还原成金属银粒。化作用，能使溴化银结晶还原成金属银粒。当显影时两者被显出的速度不同，很容易区当显影时两者被显出的速度不同，很容易区分。分。核医学放射自显影术ARG81、潜影形成：、潜影形成：2、潜影消退：、潜影消退：3、显影及显影剂：、显影及显影剂：最常用的显影剂：最常用的显影剂：D-196和和D-19 1）米吐尔）米吐尔（硫酸甲基对氨基苯酸）（硫酸甲基对氨基苯酸）主份，强还原主份，强还原剂剂2）亚硫酸钠：保护剂，能中和还原剂的氧）亚硫酸钠：保护剂，能中和

7、还原剂的氧化物，延长显影效力，还可溶解部分银粒，化物，延长显影效力，还可溶解部分银粒，减少其相互结合而导致粒变粗减少其相互结合而导致粒变粗 3）海德尔（以苯二酚）：强还原剂，但与米）海德尔（以苯二酚）：强还原剂，但与米吐尔不同。但与米吐尔不同。它还原力低，吐尔不同。但与米吐尔不同。它还原力低，影像出现缓慢，可使影像密度增加影像出现缓慢，可使影像密度增加 核医学放射自显影术ARG94）碳酸钠：促进剂，增加显影）碳酸钠：促进剂，增加显影5）溴化钾：抑制剂，抑制未感光的银盐，）溴化钾：抑制剂，抑制未感光的银盐，防止溴折出而增加灰雾，从而增加显象防止溴折出而增加灰雾，从而增加显象的反差，使力象更清晰的

8、反差，使力象更清晰影响显影的因素：影响显影的因素：（1）显影时间）显影时间（2）显影温度）显影温度（3）显影液的搅动）显影液的搅动（4）显影液的效力）显影液的效力核医学放射自显影术ARG104、定影：、定影：海波海波（硫代硫酸钠）（硫代硫酸钠）溶去未形成潜影的银晶体溶去未形成潜影的银晶体亚硫酸钠：保护剂，能与酸形成亚硫酸氢根亚硫酸钠：保护剂，能与酸形成亚硫酸氢根离子，从而抑制海波被酸分解。离子，从而抑制海波被酸分解。醋酸：停显剂：终止显影液继续使用。醋酸：停显剂：终止显影液继续使用。钾矾：坚膜剂，防止乳胶在定影和水洗过程钾矾：坚膜剂，防止乳胶在定影和水洗过程中因膨胀而造成脱落，防止操作中的擦伤

9、中因膨胀而造成脱落，防止操作中的擦伤or划痕。划痕。5、水洗及干燥：水洗及干燥：洗去杂质等，防止析出硫磺，洗去杂质等，防止析出硫磺，它与空气中水份氧化为硫酸，影象变黄。它与空气中水份氧化为硫酸，影象变黄。干燥：人工电吹风，干燥：人工电吹风，or自然干燥，防空气灰自然干燥，防空气灰法沾染法沾染。核医学放射自显影术ARG11四、射线与乳胶的相互作用四、射线与乳胶的相互作用1、粒子：质量大，高粒子：质量大，高LET，穿透力弱，但电离，穿透力弱，但电离密度大，直线传播，粒子径迹粗短而致密，不密度大，直线传播，粒子径迹粗短而致密，不需灵敏度高的乳胶需灵敏度高的乳胶2、粒子：质量轻，射程较粒子：质量轻，射

10、程较粒子长些，穿行路粒子长些，穿行路径易改变，不一定是直线传播，径迹为不规则径易改变，不一定是直线传播，径迹为不规则曲线，射程仅为乳胶表面的几个颗粒层。曲线，射程仅为乳胶表面的几个颗粒层。3、射线：是一种电磁辐射，本身不带电，不会射线：是一种电磁辐射，本身不带电，不会引起电离，但它能与核引起电离，但它能与核or核外电子碰撞损失能核外电子碰撞损失能量而产生次级带电粒子；它穿透力强，在靶物量而产生次级带电粒子；它穿透力强，在靶物质中损失的能量少，故很难留下清晰的径迹，质中损失的能量少，故很难留下清晰的径迹，但对低能但对低能线可形成小点状径迹。它产生的次级线可形成小点状径迹。它产生的次级带电离子常使

11、乳胶本底增加。带电离子常使乳胶本底增加。核医学放射自显影术ARG12 4、EC、IT：在电子俘获和内转换的衰变中产：在电子俘获和内转换的衰变中产生的生的、X线不被乳胶记录，但俄歇电子和内转换线不被乳胶记录，但俄歇电子和内转换电子与电子与粒子的性质相同，可使乳胶感光。粒子的性质相同，可使乳胶感光。纯纯衰变的核素：衰变的核素：3H、14C、45Ca、35S、32P r：131I EC：125I IT：99mTc 径迹径迹ARG：乳胶厚度超过射线粒子的射程，记：乳胶厚度超过射线粒子的射程，记录到的是粒子的全部径迹，物理学研究范畴。录到的是粒子的全部径迹，物理学研究范畴。银粒密度银粒密度ARG：薄的乳

12、胶层，只要求留下径迹：薄的乳胶层，只要求留下径迹超始部分的银粒。超始部分的银粒。ARG常用核素，能量及射程常用核素，能量及射程P270表表146（参考书（参考书 夏宗勤主编实验核医学与核药学）夏宗勤主编实验核医学与核药学）核医学放射自显影术ARG13五、五、ARG的分辨力、效率、本底及示踪的分辨力、效率、本底及示踪1、分辨力：定义，区别示踪物在组织中准确位、分辨力：定义，区别示踪物在组织中准确位置的能力。置的能力。区分两个邻近结构（放射源）区分两个邻近结构（放射源）表示方法：半距离表示方法：半距离HD 半半径半半径 HR 它是反映影象散射情况的常用指标。它是反映影象散射情况的常用指标。应注意：

13、应注意：HD、HR指反映颗粒的散射情况，并指反映颗粒的散射情况，并不说明不说明ARG所能分辨的最小距离或源的大小。所能分辨的最小距离或源的大小。HD、HR越小，分辨力越高越小，分辨力越高3H 光镜光镜ARG HD在在0.30.4m 电镜电镜ARG HD在在80180nm核医学放射自显影术ARG14影响分辨力的因素：影响分辨力的因素：a、银粒的大小、银粒的大小b、乳胶厚度、乳胶厚度c、标本与乳胶间距、标本与乳胶间距d、射线能量、射线能量e、曝光时间、曝光时间f、显影时间、显影时间g、标本厚度、标本厚度h、本底、本底 核医学放射自显影术ARG152、效率：、效率：定义：曝光定义：曝光t内，示踪剂每

14、内，示踪剂每100次衰变所造次衰变所造成的显影银颗粒数目成的显影银颗粒数目。表示方法：百分比表示方法：百分比/100m2 影响效率的因素影响效率的因素a、LET f、曝光时间曝光时间b、标本厚度、标本厚度 g、源乳距源乳距c、乳胶厚度、乳胶厚度 h、显影条件、显影条件d、银粒大小银粒大小 i、曝光时间太长时、曝光时间太长时e、乳胶敏感度、乳胶敏感度核医学放射自显影术ARG163、本底：没有放射性时的银颗粒、本底：没有放射性时的银颗粒本底增高的因素：本底增高的因素：a、红灯过亮、红灯过亮b、外环境辐射、外环境辐射c、显影时间过长、显影时间过长d、乳胶受到压力或张力的作用、乳胶受到压力或张力的作用

15、e、标本中有还原物、标本中有还原物f、乳胶保存过久、乳胶保存过久核医学放射自显影术ARG17 一般原则：辐射强时，曝光时间可缩短，而一般原则：辐射强时，曝光时间可缩短，而射线弱时，曝光时间相应延长。射线弱时，曝光时间相应延长。影响因素：影响因素：a、核素的性质、核素的性质b、核素引入的途径、核素引入的途径c、示踪剂剂型、示踪剂剂型d、核素在体内的分布和蓄积状况、核素在体内的分布和蓄积状况e、标本制备时间长时，核素易丢失、标本制备时间长时，核素易丢失f、感光材料的灵敏度感光材料的灵敏度目前最常用的是：实验确定曝光法。目前最常用的是：实验确定曝光法。核医学放射自显影术ARG18六、六、ARG的各种

16、方法的各种方法1、宏观、宏观ARG：接触法：适于磨片，动物整体切片植物片接触法：适于磨片，动物整体切片植物片2、光镜、光镜ARG：用于非扩散性示踪剂（石蜡切片）用于非扩散性示踪剂（石蜡切片）浸膜法：从乳胶中提出来浸膜法：从乳胶中提出来 裱贴法：在温水中捞起标本和干板裱贴法：在温水中捞起标本和干板 揭膜乳胶法：在温水中捞起标本和揭膜揭膜乳胶法：在温水中捞起标本和揭膜 用于扩散性示踪剂（冰冻切片）：用于扩散性示踪剂（冰冻切片）：融表法：冷沾取切片融表法：冷沾取切片 绞链接触法：复杂绞链接触法：复杂核医学放射自显影术ARG193、电镜、电镜ARG：亚细胞水平，分辨力极亚细胞水平，分辨力极高，要求标本

17、和乳胶层极薄，高，要求标本和乳胶层极薄，Ilford L4或或HW4乳胶常用，颗粒乳胶常用，颗粒140nm，示，示踪剂用量是光镜的踪剂用量是光镜的10倍。倍。浸膜法：浸膜法：金属环法：金属环法：4、细胞涂片、细胞涂片ARG：a、血涂片、血涂片ARG b、骨髓涂片、骨髓涂片ARG核医学放射自显影术ARG20 图像中银粒沉着处，反映标本中核素的存在图像中银粒沉着处，反映标本中核素的存在部位，也表示标记物定位。部位，也表示标记物定位。一、宏观一、宏观ARG：可直接看：可直接看or放大镜，黑度表示放放大镜，黑度表示放素所在部位，越黑说明放射性越强，含某物标记素所在部位，越黑说明放射性越强，含某物标记物

18、越多，如要精确定位，必须与原标本重合在一物越多，如要精确定位，必须与原标本重合在一起观察。起观察。二、微观二、微观ARG：a、银粒与组织结构的关系用微调来确定。、银粒与组织结构的关系用微调来确定。b、银粒与其它颗粒的区别，用改变焦点来观察、银粒与其它颗粒的区别，用改变焦点来观察它们的大小，颜色和外形。它们的大小，颜色和外形。c、区别标本内与标本外乳胶中的银粒区别标本内与标本外乳胶中的银粒d、定量以银粒计数表示。、定量以银粒计数表示。核医学放射自显影术ARG21 定量分析法：预先制作一套已知活度梯度定量分析法：预先制作一套已知活度梯度的放射源标准系列片，与待测标本在同一张乳的放射源标准系列片，与

19、待测标本在同一张乳胶上曝，显，定。胶上曝，显，定。图像用黑度计图像用黑度计or光密度计读数，以标准梯光密度计读数，以标准梯度活度为纵坐标，光密度值为横坐标，绘一条度活度为纵坐标，光密度值为横坐标，绘一条标准曲线，即可定量。标准曲线，即可定量。还有如下定量法：还有如下定量法：视测颗粒计数：颗粒数视测颗粒计数：颗粒数/cm 显微光度计测定：显微光度计测定：电视扫描装置电视扫描装置（三）亚微观（三）亚微观ARG：电镜电镜ARG，它图象中银粒呈扭曲的丝团，它图象中银粒呈扭曲的丝团状，故易辨认。状，故易辨认。核医学放射自显影术ARG22适于显影不太清楚适于显影不太清楚or放射性较弱的组织放射性较弱的组织

20、AGR。特点：在乳胶中加入了闪烁剂。特点：在乳胶中加入了闪烁剂。九、双标记九、双标记ARG当需要研究机体同时摄入的多种放素掺入细当需要研究机体同时摄入的多种放素掺入细胞的区别时，必须用双标记。胞的区别时，必须用双标记。依据：选用两种不同的辐射类型依据：选用两种不同的辐射类型不同能量不同能量不同半衰期不同半衰期不同分布定位不同分布定位核医学放射自显影术ARG23选用选用、辐射体，辐射体，粒子密度大，呈直线形粒子密度大，呈直线形径迹，径迹，密度小，单个银颗粒。密度小，单个银颗粒。能量不同：两次涂乳胶法得到能量不同：两次涂乳胶法得到ARG影像加以影像加以区别。区别。3H、14C 第一次乳胶，反映第一

21、次乳胶，反映3H、14C之和之和第二次乳胶，先涂一层火棉胶，只反映高能第二次乳胶，先涂一层火棉胶，只反映高能量量14C不同的不同的T1/2：131I，3H，两者衰变速率相差，两者衰变速率相差极大，可先涂火棉胶做中间层，阻断极大，可先涂火棉胶做中间层，阻断3H射出，射出，此时是此时是131I造成显影。放置造成显影。放置60天左右，去掉上天左右，去掉上边两层边两层or在标本背面涂乳胶每曝一次光。在标本背面涂乳胶每曝一次光。核医学放射自显影术ARG24普通照像普通照像核乳胶核乳胶 溴化银：明胶溴化银：明胶47：53 80：2015：85 15：85颗粒颗粒0.53*10-6M 0.10.4*10-6密度密度6*109/cm3 1013颗粒结晶颗粒结晶/cm3核医学放射自显影术ARG25