样品的采集与处理-课件.ppt
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1、第二章 样品的采集与处理 一项分析工作一般包括下列步骤:(1)试样的采集和制备;(2)定性检验;(3)试样的分解;(4)干扰的消除;(5)测定;(6)分析结果的计算和评价。第一节 样品的采集和保存 在定量分析中往往用样本平均值来估计总体平均值。这就要求进行测定时所使用的分析试样具有高度代表性,即样本平均值能代表总体平均值,否则,分析结果再“准确”也毫无意义。总体:分析对象的全体 样品:从总体抽出的一小部分样品 采样:从总体中抽出样品的操作过程。一、样品的采集原则 原则:代表性、典型性和适时性。1、代表性:代表总体,各个方向分别采集,2、典型性:针对典型样品,有目的。例如:参假食品的检测。是事件
2、应对中必采的样品。胃内容物是确定摄入中毒的最好检体,尿是分析非挥发性毒物的较好检体;血液是最重要的毒物检测样品,3、适时性:有时间概念,例如:发生食品中毒应及时赴现场采集。对化学事故(或中毒事件)可供采集的样品有现场样品(环境、食品、化学品及其它用品等)及患者的生物材料(血、尿、胃内容物、组织)。采样时机可以选在事发现场救助时、医院抢救和治疗时、甚至在病人恢复时,某些中毒甚至可在事件发生后数十天仍有可能采集到有价值的样品。现场遗留的食物、化学品、盛装的容器是首先应采集的样品 采样时应避免样品污染和被测组分的损失 选择合适的采样器具和采样方法 详细完整记录采样环境 至少采集两份样品,用于分析和保
3、存二、样品的保存 1、密封保存法 2、冷藏保存法 3、化学保存法 存放容器的选择 存放容器的清洗 存放时间三、各类样品采集方法简介 (一)、空气样品:气体样品为均匀样品。可采用直接法和浓缩法。1、直接采样 2、浓缩采样:(1)、溶液吸收法。(2)、固体吸附剂阻留法。(3)、滤纸膜阻留法(4)冷阱收集低温浓缩 采样装置:收集器,流量计,采样动力 (二)水样(三)食品 随机抽样、系统抽样、指定代表性样品(四)生物材料 生物介质(biological matrix)包括全血、血浆、血清、尿、毛发、唾液和各种组织。其中最常用的生物样品是血液和尿液。1.血样的采集 供测定的血样应能代表整个血药浓度。若能
4、从动脉或心脏取血最为理想,但只能用于动物,不能用于人。动物采血可根据不同种类及实验需要,采取适当的方法。如大、小鼠可由尾动脉、静脉、心脏、眼眶取血或断头取血等,家兔可由耳缘静脉、颈静脉等多处取血,犬可由前、后肢静脉等处取血。对于受试者通常采用静脉取血(成人从肘正中静脉取血,小儿从颈外静脉取血)。静脉取血一般将注射器针头插入静脉血管抽取。抽取的血液转移至试管或其它容器时应缓缓压出,以防血细胞破裂。全血在加肝素或柠檬酸、草酸盐等抗凝剂后,离心分取血浆,其体积约为全血的一半。血清则是由血液中纤维蛋白原等影响下,引起血块凝结而析出,离心取用,而血块凝结时往往易造成药物吸附的损失。全血直接作为样品时,也
5、应加入抗凝剂混匀,防止凝血。对大多数药物来说,血浆浓度与红细胞中的浓度呈正比,所以测定全血不能比测定血浆提供更多的信息。而全血的净化较血浆与血清复杂,尤其是溶血后,血色素等可能会给HPLC测定带来影响。但是,一些药物可与红细胞结合,或药物在血浆和红细胞的分布比率因人而异,在这些情况下,宜采用全血。血样抽取量受到一定的限制。人体药代动力学研究需要在多个时间点(一般为1220点)取样,每次由前臂静脉取血35m1。随着高灵敏度测定方法的建立,取样量可继续降低,从而更易为受试者接受。实验动物取血量应注意是否超过了动物的生理承受能力。制备血浆样品时,将采取的血样置含有抗凝剂的试管中,缓缓转动试管使其充分
6、混合、离心,所得上清液即为血浆。常用的抗凝剂有肝素,它是体内正常的生理成分,因而不会改变血样的化学组成或引起药物的变化,一般不会干扰测定。通常lml血液采用20个单位的肝素即可抗凝。可将配制好的肝素溶液均匀地涂布在试管壁上,于6070烘干备用。其它抗凝剂有柠檬酸、草酸盐、EDTA等,但它们可能引起被测组分发生变化或干扰某些药物的测定。制备血清样品时,将采取的血样在室温下至少放置3060min,待血液凝固后,以30004000r/min离心10min,分取上层澄清的血清。2.尿样的采集 尿药测定主要用于药物剂量回收、药物代谢及生物利用度研究,也可用于乙酰化代谢和氧化代谢快、慢型测定等。因为尿药浓
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