最新-药物的鉴别实验-课件.ppt

1、依据药典进行的药物分析主要有三大项：依据药典进行的药物分析主要有三大项：鉴别、检查和含量测定鉴别、检查和含量测定药典所收载的药物项下的鉴别试验方法，药典所收载的药物项下的鉴别试验方法，仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证实是否为其所标示的药物。以证实是否为其所标示的药物。这些试验方法不能赖以鉴别未知物这些试验方法不能赖以鉴别未知物（一）性状：（一）性状：反映了药物特有的物理性质，一般包反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、嗅、味、溶解度以及物理常数括外观、嗅、味、溶解度以及物理常数(mp.bp.(mp.bp.等等)。（二）一般鉴别试验（二）一般鉴别试验

2、（general identification general identification testtest）：证实其是某一类药物，而不能证实是哪一）：证实其是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。仅供确认单一的化学药物，如为数种化学种药物。仅供确认单一的化学药物，如为数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定外，药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定外，应不适用。应不适用。无机药物无机药物 阴离子和阳离子的特殊反应阴离子和阳离子的特殊反应 有机药物有机药物 典型的官能团反应典型的官能团反应 （三）专属鉴别试验（三）专属鉴别试验（specific identification sp

3、ecific identification testtest）：根据每一种药物化学结构的差异及其所引起）：根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同的物理化学特性的不同,选用某些特有的灵敏定性反选用某些特有的灵敏定性反应应，来鉴别药物真伪的来鉴别药物真伪的。证实其是某一种药物证实其是某一种药物 。例如，经一般鉴别反应的钠盐试验，证实某一药物例如，经一般鉴别反应的钠盐试验，证实某一药物为钠盐，但不能辨认是氯化钠、苯甲酸钠或者是其为钠盐，但不能辨认是氯化钠、苯甲酸钠或者是其它某一种钠盐药物。要想最后证实被鉴别的物质到它某一种钠盐药物。要想最后证实被鉴别的物质到底是哪一种药物，必须在

4、一般鉴别试验的基础上，底是哪一种药物，必须在一般鉴别试验的基础上，再进行专属鉴别试验，方可确认。再进行专属鉴别试验，方可确认。（一）反应灵敏度和空白试验（一）反应灵敏度和空白试验1.1.反应灵敏度反应灵敏度（sensitivity）*最低检出量（最低检出量（minimum detectable quantity）（又称检出限量）：（又称检出限量）：以以m m表示，就是应用某一表示，就是应用某一反应，在一定的条件下，能够观测出的供试品反应，在一定的条件下，能够观测出的供试品的最小量，其单位通常用微克（的最小量，其单位通常用微克（g g）表示。）表示。*最低检出浓度（最低检出浓度（minimum

5、detectable concentration）：以）：以1:G或或1:V表示，是应用表示，是应用于某一反应，在一定条件下，能够观测出供于某一反应，在一定条件下，能够观测出供试品的最低浓度试品的最低浓度。两者间满足以下关系：两者间满足以下关系：m=(vm=(v10106 6)/V)/V2.空白试验（空白试验（blank test）:就是在与供试就是在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂同样加入进行的试验。试品外，其它试剂同样加入进行的试验。（二）提高灵敏度的方法（二）提高灵敏度的方法1.加入与水不相溶的有机溶剂加入与水不相溶的有机溶剂

6、 2.改进观测方法改进观测方法 1.1.干法干法 焰色试验焰色试验 加热分解加热分解 取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，使火焰显出特殊的颜色。无色火焰中燃烧，使火焰显出特殊的颜色。在适当的温度条件下，加热使供试品分在适当的温度条件下，加热使供试品分解，生成有特殊气味的气体解，生成有特殊气味的气体。（二）化学鉴别法（二）化学鉴别法2.2.湿法湿法 呈色或褪色反应呈色或褪色反应 沉淀生成反应沉淀生成反应 荧光反应荧光反应 气体生成反应气体生成反应 三氯化铁呈色反应三氯化铁呈色反应-酚羟基或水解后产生酚羟基酚羟基或水解后产生酚羟基异羟肟酸铁反应异

7、羟肟酸铁反应-多为芳酸及其酯类、酰胺类多为芳酸及其酯类、酰胺类 茚三酮呈色反应茚三酮呈色反应-脂肪氨基脂肪氨基 重氮化重氮化-偶合显色反应偶合显色反应-芳伯氨基或能产生芳伯芳伯氨基或能产生芳伯氨基氨基氧化还原显色反应及其它颜色反应氧化还原显色反应及其它颜色反应 常见的呈色反应常见的呈色反应与重金属离子的沉淀反应与重金属离子的沉淀反应-如巴比妥类药物如巴比妥类药物与铜盐、钴盐、银盐生成沉淀的反应；与铜盐、钴盐、银盐生成沉淀的反应；与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应-多为生多为生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐；物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐；其它沉淀反应。

8、其它沉淀反应。常见的呈色反应有：常见的呈色反应有：药物本身可在可见光下发射荧光；药物本身可在可见光下发射荧光；药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见光下发药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见光下发射荧光；射荧光；药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其它反应后，发射荧光。经其它反应后，发射荧光。常见的荧光发射形式有以下类型常见的荧光发射形式有以下类型大多数的大多数的胺（铵）类胺（铵）类药物、药物、酰脲类酰脲类药物以及某些药物以及某些酰胺酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气类药物

9、，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体生硫化氢气体 含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生乙酸乙酯的香味。产生乙酸乙酯的香味。常有气体生成的药物常有气体生成的药物（三）（三）光谱鉴别法光谱鉴别法1 1紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 核对核对max和和min；规定一定浓度的供试液在规定一定浓度的供试液在max处的吸收度；处的吸收度；规定吸收波长和吸收系数法；规

10、定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸收度比值法；规定吸收波长和吸收度比值法；经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。2.2.红外光谱红外光谱 鉴别法鉴别法标准图谱对照法：标准图谱对照法：中国药典（中国药典（2019年版年版)BP(2019年版年版)对照品法：对照品法：USP(29)。（一种专属性很强、（一种专属性很强、应用较广）应用较广）（四）色谱鉴别法（四）色谱鉴别法 1.1.薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法 采用对照品（或标准品）比较采用对照品（或标准品）比较法，要求二者的法，要求二者的R Rf f值一致值一致 ；2.2.高效液相色谱鉴别法高

11、效液相色谱鉴别法 要求供试品和对照品色要求供试品和对照品色谱峰的保留时间应一致含量测定方法为内标法谱峰的保留时间应一致含量测定方法为内标法 ；3.3.气相色谱鉴别法气相色谱鉴别法 4.4.纸色谱鉴别法纸色谱鉴别法 逐渐被薄层色谱法所取代逐渐被薄层色谱法所取代 5.5.高效毛细管电泳高效毛细管电泳（五）生物学方法（五）生物学方法 对于某些有特殊生物效应的药物，可根据药物的特对于某些有特殊生物效应的药物，可根据药物的特殊生理活性将药物通过各种途径给予微生物、动物或殊生理活性将药物通过各种途径给予微生物、动物或动物的离体器官，观察药理作用以鉴别药物，多用抗动物的离体器官，观察药理作用以鉴别药物，多用

12、抗生素及生化药物的鉴别。生素及生化药物的鉴别。1.1.仪器方法的数量大大增加，尤其是仪器方法的数量大大增加，尤其是IRIR和和HPLCHPLC；2.2.制剂广泛采用制剂广泛采用IRIR法鉴别；法鉴别；（六）药物鉴别方法的新动向（六）药物鉴别方法的新动向二、鉴别试验与原理二、鉴别试验与原理（一）、有机氟化物（一）、有机氟化物取供试品约取供试品约7mg7mg，照氧瓶燃烧法（附录，照氧瓶燃烧法（附录VIIVIIC C）进行）进行有机破坏有机破坏,用水用水20ml20ml与与0.01mol/L0.01mol/L氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液6.5ml6.5ml为为吸收液，待燃烧完全后，充分振摇；取吸收液吸收

13、液，待燃烧完全后，充分振摇；取吸收液2ml2ml，加，加茜素氟蓝试液茜素氟蓝试液0.5ml0.5ml，再加，再加12%12%醋酸钠的稀醋酸溶液醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml0.2ml，用水稀释至，用水稀释至4 ml4 ml，加，加硝酸亚铈硝酸亚铈试液试液0.5ml0.5ml，即，即显显蓝紫色蓝紫色；同时做空白对照试验。；同时做空白对照试验。反应式见反应式见p16（二）、有机酸盐（二）、有机酸盐1 1、水杨酸盐、水杨酸盐 加三氯化铁试液加三氯化铁试液1 1滴，即滴，即显紫色显紫色;加稀盐酸，即析出白色水杨酸沉淀；分离，沉淀在醋加稀盐酸，即析出白色水杨酸沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液中溶解。酸铵试液中

14、溶解。2 2、醋酸盐、醋酸盐 加硫酸和乙醇后，加热，即分解发生加硫酸和乙醇后，加热，即分解发生醋酸乙酯醋酸乙酯的香气；的香气；取供试品的中性溶液，加三氯化铁试液取供试品的中性溶液，加三氯化铁试液1 1滴，溶液呈深滴，溶液呈深红色红色,加稀无机酸，加稀无机酸，红色即退去红色即退去。3.3.苯甲酸盐苯甲酸盐 取供试品的中性溶液，加三氯化铁试液，即生成取供试品的中性溶液，加三氯化铁试液，即生成赭赭色沉淀色沉淀；加稀盐酸，变为白色沉淀；加稀盐酸，变为白色沉淀；取供试品，置干燥试管中，加硫酸后，加热，不炭取供试品，置干燥试管中，加硫酸后，加热，不炭化，但析出化，但析出苯甲酸苯甲酸，在试管内壁凝结成白色升

15、华物。，在试管内壁凝结成白色升华物。4.4.枸橼酸盐枸橼酸盐 加稀硫酸数滴加稀硫酸数滴,加热至沸，加高锰酸钾试液数滴振加热至沸，加高锰酸钾试液数滴振摇，摇，紫色即消失紫色即消失；溶液分成两份，；溶液分成两份，1 1份中加硫酸汞试份中加硫酸汞试液液1 1滴滴,另另1 1份中逐滴加入溴试液，均生成份中逐滴加入溴试液，均生成白色白色沉淀；沉淀；取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在管的内壁成管的内壁成银镜银镜。取供试品溶液，加醋酸成酸性后，加硫酸亚铁试取供试品溶液，加

16、醋酸成酸性后，加硫酸亚铁试液液1 1滴和过氧化氢试液滴和过氧化氢试液1 1滴，待溶液滴，待溶液退色退色后，用氢氧后，用氢氧化钠试液碱化，溶液即化钠试液碱化，溶液即显紫色显紫色。5.5.酒石酸盐酒石酸盐（四）托烷生物碱类（四）托烷生物碱类 取供试品约取供试品约10mg10mg，加发烟硝酸，加发烟硝酸5 5滴，置水浴上蒸干，滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇得黄色的残渣，放冷，加乙醇2 23 3滴湿润，加固体滴湿润，加固体氢氧化钾一小颗，即显氢氧化钾一小颗，即显深紫色深紫色。（三）芳香第一胺类（三）芳香第一胺类 取供试品约取供试品约50mg50mg，加稀盐酸，加稀盐酸1ml,1ml,必要

17、时缓缓煮沸使必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加溶解，放冷，加0.1mol/L0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性碱性萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙橙黄到猩红色沉淀。黄到猩红色沉淀。（五）常见无机离子的鉴别（五）常见无机离子的鉴别1.1.钠盐钠盐焰色反应焰色反应 火焰显黄色火焰显黄色 取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色沉淀。液，即生成黄色沉淀。2.2.钾盐钾盐焰色反应：焰色反应显紫色，但有少量钠盐混焰色反应：焰色反应显紫色，但有少量钠盐混存时，须隔蓝色玻璃透视存时，须隔蓝色玻璃透视；取

18、供试品，加热炽灼，除去可能含有的铵盐，取供试品，加热炽灼，除去可能含有的铵盐，放冷后，加水溶解，再加放冷后，加水溶解，再加0.1%0.1%四苯硼钠溶液与醋四苯硼钠溶液与醋酸，即生成白色沉淀。酸，即生成白色沉淀。3.3.钙盐钙盐燃烧火焰显砖红色燃烧火焰显砖红色 取供试品溶液（取供试品溶液（120120），加甲基红指示液），加甲基红指示液2 2滴，滴，用氨试液中和，再滴加盐酸至呈酸性，加草酸铵试用氨试液中和，再滴加盐酸至呈酸性，加草酸铵试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀不溶于醋酸，但液，即生成白色沉淀；分离，沉淀不溶于醋酸，但可溶于盐酸。可溶于盐酸。焰色反应焰色反应焰色反应：钡的火焰光谱在可见光区有

19、焰色反应：钡的火焰光谱在可见光区有533.56533.56、513513、488 nm488 nm几条主要谱线，其中以几条主要谱线，其中以533.56 nm533.56 nm波长的谱波长的谱线最强线最强,故钡盐的燃烧火焰显黄绿色，用绿色玻璃透故钡盐的燃烧火焰显黄绿色，用绿色玻璃透视火焰显蓝色。视火焰显蓝色。取供试品溶液，加稀硫酸，即生成白色沉淀；分离取供试品溶液，加稀硫酸，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。4.4.钡盐钡盐 白色白色 Ba2+SO42-BaSO4 5.5.铵盐铵盐取供试品，加过量氢氧化钠试液后，加热，即分取供试品，加过量氢氧化钠试液

20、后，加热，即分解，发生氨臭；遇湿润的红色石蕊试纸，能使之变解，发生氨臭；遇湿润的红色石蕊试纸，能使之变蓝，并能使蓝，并能使硝酸亚汞硝酸亚汞试液湿润的滤纸显试液湿润的滤纸显黑色黑色。黑色 取供试品溶液，加碱性碘化汞钾试液取供试品溶液，加碱性碘化汞钾试液1 1滴，即生成红滴，即生成红棕色沉淀棕色沉淀。红棕色（六）无机酸根（六）无机酸根1.1.氯化物氯化物 1)1)取供试液品溶液，加硝酸使成酸取供试液品溶液，加硝酸使成酸性后性后,加硝酸银试液加硝酸银试液,即生成白色凝乳状沉淀；分即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸，沉淀复生离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸，沉淀复生成。如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，成。如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，须先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，须先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液进行试验。取滤液进行试验。2)2)取供试品少量，置试管中，加等量二氧化锰，取供试品少量，置试管中，加等量二氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即发生氯气，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即发生氯气，能使湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。能使湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。