病毒感染的检查方法与防治原则培训课件.ppt
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- 关 键 词:
- 病毒感染 检查 方法 防治 原则 培训 课件
- 资源描述:
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1、病毒感染的检查方法病毒感染的检查方法与防治原则与防治原则重点及难点重点及难点标本的采集和送检标本的采集和送检病毒分离培养方法病毒分离培养方法病毒感染的血清学诊断方法病毒感染的血清学诊断方法人工主动免疫和被动免疫及其常用制剂人工主动免疫和被动免疫及其常用制剂2病毒感染的检查方法与防治原则第一节第一节 病毒感染的检查方法病毒感染的检查方法l标本的采集与送检标本的采集与送检l病毒的分离与鉴定病毒的分离与鉴定l病毒感染的诊断病毒感染的诊断3病毒感染的检查方法与防治原则一、标本的采集与送检一、标本的采集与送检采集急性期标本采集急性期标本使用抗生素使用抗生素冷藏保存,快速送检冷藏保存,快速送检采集双份血清
2、采集双份血清4病毒感染的检查方法与防治原则二、病毒的分离与鉴定二、病毒的分离与鉴定(一)病毒的分离培养(一)病毒的分离培养u动物接种动物接种u鸡胚培养鸡胚培养u细胞培养细胞培养5病毒感染的检查方法与防治原则动物接种动物接种6病毒感染的检查方法与防治原则p应用:无敏感细胞培养的病毒应用:无敏感细胞培养的病毒p优点:结果易观察,可建立动物模型优点:结果易观察,可建立动物模型p缺点:要有饲养条件,费用高,有潜伏病毒,缺点:要有饲养条件,费用高,有潜伏病毒,对许多人类病毒不敏感对许多人类病毒不敏感动物接种动物接种7病毒感染的检查方法与防治原则鸡胚培养鸡胚培养p优点:对多种病毒敏感,条件易控制,操作优点
3、:对多种病毒敏感,条件易控制,操作 简单,成本较低简单,成本较低p缺点:无病毒增殖指标;有些病毒可致鸡胚缺点:无病毒增殖指标;有些病毒可致鸡胚死亡死亡8病毒感染的检查方法与防治原则鸡鸡胚胚接接种种部部位位示示意意图图9病毒感染的检查方法与防治原则 单层细胞单层细胞 悬浮细胞悬浮细胞根据细胞生根据细胞生长情况长情况 原代细胞原代细胞 二倍体细胞二倍体细胞 传代细胞系传代细胞系根据细胞来源、根据细胞来源、染色体特征及染色体特征及传代次数传代次数细胞培养细胞培养10病毒感染的检查方法与防治原则1.原代细胞原代细胞 primary cells对多种病毒敏感对多种病毒敏感来源困难来源困难,获取成本高获取
4、成本高可携带潜伏病毒可携带潜伏病毒 11病毒感染的检查方法与防治原则2.二倍体细胞二倍体细胞 diploid cells对多种病毒敏感对多种病毒敏感不带病毒,无致癌潜能不带病毒,无致癌潜能用于病毒疫苗生产用于病毒疫苗生产 12病毒感染的检查方法与防治原则 3.传代细胞传代细胞 continuous cell对多种病毒敏感对多种病毒敏感繁殖能力高,传代时间长繁殖能力高,传代时间长不能用于病毒疫苗生产不能用于病毒疫苗生产13病毒感染的检查方法与防治原则病毒在培养细胞中的增殖指征病毒在培养细胞中的增殖指征:p细胞病变细胞病变p红细胞吸附红细胞吸附p病毒干扰作用病毒干扰作用p细胞代谢的改变细胞代谢的改
5、变14病毒感染的检查方法与防治原则细胞病变效应细胞病变效应 cytopathic effect,CPE 正常细胞正常细胞细胞病变早期细胞病变早期细胞病变晚期细胞病变晚期15病毒感染的检查方法与防治原则 红细胞吸附红细胞吸附 hemadsorption 带有血凝素的病毒感染细胞后,能与脊带有血凝素的病毒感染细胞后,能与脊椎动物红细胞结合椎动物红细胞结合鸡红细胞吸附于流感病毒感染的细胞鸡红细胞吸附于流感病毒感染的细胞16病毒感染的检查方法与防治原则 风疹病毒风疹病毒 人胚肾细胞人胚肾细胞CPE()埃可病毒埃可病毒 人胚肾细胞人胚肾细胞CPE()人胚肾细胞人胚肾细胞埃可病毒埃可病毒CPE(-)CPE
6、(+)待检标本待检标本风疹病毒风疹病毒(-)风疹病毒风疹病毒(+)病毒干扰作用病毒干扰作用 viral interference 某些病毒不引起某些病毒不引起CPE,但可干扰感染同一但可干扰感染同一细胞另一病毒增殖,抑制该病毒的细胞另一病毒增殖,抑制该病毒的CPE。17病毒感染的检查方法与防治原则(二)病毒的鉴定(二)病毒的鉴定 形态学鉴定形态学鉴定 血清学鉴定血清学鉴定 分子生物学鉴定分子生物学鉴定18病毒感染的检查方法与防治原则1.形态学鉴定形态学鉴定 光学显微镜光学显微镜 巨细胞病毒包涵体巨细胞病毒包涵体透射电镜透射电镜 SARS病毒病毒19病毒感染的检查方法与防治原则Ab 方方法法包包
7、括括Ag 2.血清学鉴定血清学鉴定用已知特异性抗体对病毒进行种用已知特异性抗体对病毒进行种、型型和亚型的鉴定和亚型的鉴定ELISA中和试验中和试验血凝抑制试验血凝抑制试验补体结合试验补体结合试验20病毒感染的检查方法与防治原则 方方法法包包括括3.分子生物学方法鉴定分子生物学方法鉴定 对病毒的蛋白抗原、核算进行检测对病毒的蛋白抗原、核算进行检测蛋白印迹技术蛋白印迹技术核酸扩增核酸扩增核酸杂交核酸杂交基因芯片基因芯片基因测序基因测序21病毒感染的检查方法与防治原则新病毒的鉴定新病毒的鉴定 l核酸类型的测定核酸类型的测定l理化性状的检测理化性状的检测l基因测序和生物对比基因测序和生物对比22病毒感
8、染的检查方法与防治原则(三)病毒数量与感染性测定(三)病毒数量与感染性测定u50%组织细胞感染量组织细胞感染量u红细胞凝集实验红细胞凝集实验u空斑形成试验空斑形成试验23病毒感染的检查方法与防治原则 1.50组织细胞感染量组织细胞感染量 50 tissue culture infectious dose,TCID50原理:测定原理:测定50%细胞出现细胞出现CPE的最小病的最小病毒量毒量以以CPE作指标,判断病毒感染性和毒力作指标,判断病毒感染性和毒力测定活病毒数量测定活病毒数量24病毒感染的检查方法与防治原则 +-2.红细胞凝集实验红细胞凝集实验 red cell agglutination
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