吩噻嗪类药物的分析课件.ppt

1、一、基本结构1.硫氮杂蒽母核SNRR10123456789R R：具有具有2 23 3碳链的二甲或二乙胺基，或含氮杂环如碳链的二甲或二乙胺基，或含氮杂环如哌嗪和哌啶的衍生物哌嗪和哌啶的衍生物RR：-H-H，-Cl-Cl，-CF-CF3 3，-COCH-COCH3 3吩噻嗪类药物吩噻嗪类药物为苯并噻嗪的为苯并噻嗪的衍生物，分子衍生物，分子结构中均含有结构中均含有硫氮杂蒽母核，硫氮杂蒽母核，基本结构如下：基本结构如下：第一节第一节 基本结构与主要性质基本结构与主要性质2020/11/31SNCl(CH2)3NCH3CH3HCl氯丙嗪SNCH2CHNCH3CH3CH3HCl异丙嗪2020/11/32

2、NSClCH2NNOH奋乃静奋乃静盐酸氟奋乃静2020/11/33盐酸三氟拉嗪NSCF3CH2NNCH3盐酸硫利达嗪NSSCH3NCH32020/11/341.1.弱碱性弱碱性:NSRR具有弱碱性，极弱具有弱碱性，极弱脂肪烃氨基、呱嗪及呱啶等衍生物所脂肪烃氨基、呱嗪及呱啶等衍生物所含氮原子碱性较强，可用于鉴别和含含氮原子碱性较强，可用于鉴别和含量测定量测定二、主要性质：二、主要性质：2020/11/35硫氮杂蒽环上硫原子为硫氮杂蒽环上硫原子为2 2价，易氧化呈色。母核易被氧化成等价，易氧化呈色。母核易被氧化成等不同的产物，随取代基的不同，呈现不同的颜色。不同的产物，随取代基的不同，呈现不同的颜

3、色。2.2.氧化呈色氧化呈色：NSRR易被硫酸、硝酸、过氧化氢、三氯易被硫酸、硝酸、过氧化氢、三氯化铁氧化，可用于鉴别和含量测定，化铁氧化，可用于鉴别和含量测定，过程与产物比较复杂过程与产物比较复杂NSRRONSRROO2020/11/363.3.与金属离子配合呈色：与金属离子配合呈色：硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色。其氧化产物砜和亚砜无此反电子，易与金属离子络合呈色。其氧化产物砜和亚砜无此反应。应。2020/11/37 4.4.紫外和红外吸收：紫外和红外吸收：含含S S、N N的三环共轭的大的三环共轭的大 体系。体系。S S、N N与苯环形

4、成与苯环形成p-p-共轭。共轭。紫外吸收紫外吸收主要由主要由母核三环的母核三环的系统系统所产生，一般具所产生，一般具三个峰值三个峰值。204204209209nmnm（205nm205nm附近）、附近）、250250265265nmnm（254nm254nm附近）和附近）和300300325325nmnm（300nm300nm附近）。附近）。最强峰多在最强峰多在 250 250265265nmnm。2 2位上取代基（位上取代基（RR）不同，会引起吸收峰发生位移。结不同，会引起吸收峰发生位移。结构中构中2 2价硫，易氧化，产物砜及亚砜有四个吸收峰。价硫，易氧化，产物砜及亚砜有四个吸收峰。2020

5、/11/382020/11/395.5.红外吸收光谱特性红外吸收光谱特性:由于取代基由于取代基R R和和RR的不同，具有不的不同，具有不同的红外光谱，已被药典用于不同品种鉴别。同的红外光谱，已被药典用于不同品种鉴别。2020/11/310第二节第二节 鉴别试验鉴别试验一、化学法一、化学法（一）与生物碱沉淀试剂反应（一）与生物碱沉淀试剂反应 吩噻嗪类药物吩噻嗪类药物10位的含氮取代基有碱性，可与生物碱沉淀位的含氮取代基有碱性，可与生物碱沉淀试剂反应试剂反应2020/11/311（二）氧化显色反应：（二）氧化显色反应：)(红色樱红呈色母核氧化剂 氧化剂氧化显色：氧化剂氧化显色：H H2 2SOSO

6、4 4、溴水、溴水、FeClFeCl3 3、H H2 2O O2 2 吩噻嗪环为一良好电子给予体吩噻嗪环为一良好电子给予体。相继失去电子形。相继失去电子形成几个不同的氧化阶，而形成自由基型产物（成几个不同的氧化阶，而形成自由基型产物（自由自由基、半醌自由基基、半醌自由基）和非离子型氧化产物（）和非离子型氧化产物（亚砜、砜、亚砜、砜、3-3-羟基吩噻嗪、吩噻酮等）羟基吩噻嗪、吩噻酮等）故可被多种氧化剂氧化而故可被多种氧化剂氧化而呈色。呈色。2020/11/312v 显色反应显色反应 药物名称药物名称 硫硫 酸酸 硝硝 酸酸 过氧化氢过氧化氢 盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪 显红色显红色,渐变淡黄色渐变淡黄

7、色 盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪 显樱桃红色显樱桃红色,放置放置 生成红色沉淀生成红色沉淀,加热即溶解加热即溶解,后颜色渐变深后颜色渐变深 溶液由红色转变为橙黄色溶液由红色转变为橙黄色 奋乃静奋乃静 显深红色显深红色;放置后放置后 红色渐褪去红色渐褪去 盐酸氟奋乃静盐酸氟奋乃静 显淡红色显淡红色,温热温热 后变成红褐色后变成红褐色 盐酸三氟拉嗪盐酸三氟拉嗪 生成微带红色的白色沉淀生成微带红色的白色沉淀;放放 置后置后,红色变深红色变深,加热后变黄色加热后变黄色 盐酸硫利达嗪盐酸硫利达嗪 显蓝色显蓝色 2020/11/313例：盐酸氯丙嗪例：盐酸氯丙嗪 ChPChP（20102010）鉴别鉴别 （1 1

8、）取本品）取本品 10mg10mg，加水，加水 1ml1ml溶解后，加硝酸溶解后，加硝酸5 5滴，滴，即显红色，渐变成行色。即显红色，渐变成行色。例：盐酸氯丙嗪（糖衣）片例：盐酸氯丙嗪（糖衣）片 ChPChP（20102010）鉴别鉴别 （1 1）取本品，除去糖衣，研细，称取细粉适量，）取本品，除去糖衣，研细，称取细粉适量，加水加水1ml,1ml,振摇使盐酸氯丙嗪溶解，滤过；滤液照盐酸氯丙振摇使盐酸氯丙嗪溶解，滤过；滤液照盐酸氯丙嗪项下的鉴别试验，显相同反应。嗪项下的鉴别试验，显相同反应。2020/11/314（三）（三）与钯离子络合显色与钯离子络合显色利用分子结构中未被氧化的硫与金属钯离子络

9、合形成利用分子结构中未被氧化的硫与金属钯离子络合形成有色络合物，如与有色络合物，如与癸氟奋乃静癸氟奋乃静形成红色络合物。形成红色络合物。该反应被该反应被ChP（2010）用于吩噻嗪类药物及其制剂的）用于吩噻嗪类药物及其制剂的鉴别。不受氧化产物亚砜和砜的干扰鉴别。不受氧化产物亚砜和砜的干扰2020/11/315（四）含卤素取代基的反应（四）含卤素取代基的反应1.焰色反应焰色反应2.显色反应显色反应 吩噻嗪类药物吩噻嗪类药物2位的含氟取代基，可经有位的含氟取代基，可经有机破坏后，分解后的氟化物，在酸性条件下，与茜草锆试机破坏后，分解后的氟化物，在酸性条件下，与茜草锆试液反应呈色。液反应呈色。202

10、0/11/316（五）氯化物的鉴别反应（五）氯化物的鉴别反应1.硝酸银的沉淀反应硝酸银的沉淀反应2.氧化还原反应氧化还原反应2020/11/3171 1、特征的紫外吸收：、特征的紫外吸收：二、光谱法二、光谱法 2020/11/318盐酸氯丙嗪及其制剂的有关物质检查盐酸氯丙嗪及其制剂的有关物质检查COOHNH2COOHN2ClCOOHCl重氮化NaNO2,HClCu2Cl2ClH2NCOOHNHClCOOHClCu,缩合脱羧Fe第三节有关物质的检查第三节有关物质的检查2020/11/319NSClNSClNHCl环合S,I23-氯二苯胺()HH2-氯-10H-吩噻嗪()2020/11/320NS

11、ClH分离异构体C6H5Cl,Cl缩合ClCH2CH2N(CH3)2,NaOHNH3CCH3CH2NSCl成盐HCl,C2H5OHNH3CCH3CH2NSClHCl2020/11/321NH3CHCH2NSCl3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N-甲基-1-丙胺()NH3CCH2NSClNCH3CH3N-3-(2-10H-吩 噻 嗪-10-基)丙 基-N,N,N-三 甲 基-1,3-丙 二 胺()其他烷基化吩噻嗪类化合物2020/11/322NH3CCH3CH2NSClO3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺S-氧化物()贮藏不当产生的氧化物NH3CCH3C

12、H2NSCl3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺N-氧化物()O2020/11/323NoImage主成分自身对照法离子对试剂，增加氯丙嗪的保留同时检查多个有关物质2020/11/324第四节第四节 含量测定含量测定酸碱滴定法酸碱滴定法 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 乙醇乙醇-水溶液中的氢氧化钠滴定法水溶液中的氢氧化钠滴定法紫外分光光度法紫外分光光度法高效液相色谱法高效液相色谱法2020/11/325 吩噻嗪类原料药物含量测定大多利用其侧链脂肪胺碱吩噻嗪类原料药物含量测定大多利用其侧链脂肪胺碱性，国内外药典多采用非水滴定法测定本类药物及其盐酸性，国内外药典多采用非

13、水滴定法测定本类药物及其盐酸盐原料药的含量。盐原料药的含量。非水溶液滴定法非水溶液滴定法一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法2020/11/326【ChPChP盐酸氯丙嗪含量测定盐酸氯丙嗪含量测定】取本品约取本品约0.2g0.2g精密称精密称定加定加冰醋酸冰醋酸10ml10ml与醋酐与醋酐30ml30ml溶解后，照溶解后，照电位滴定法电位滴定法，用高氯酸用高氯酸 (0.1mol/L)(0.1mol/L)滴定液滴定液滴定，并将滴定结果用滴定，并将滴定结果用空白空白试验试验校正。校正。每每1ml1ml高氯酸滴定液高氯酸滴定液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相当于相当于35.53mg35.53mg盐

14、酸氯盐酸氯丙嗪。丙嗪。氯丙嗪的碱性较弱，氯丙嗪的碱性较弱，醋酐解离生成醋酐解离生成醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸性强，更利于增加氯丙嗪的碱性酸性强，更利于增加氯丙嗪的碱性2020/11/327注意：注意：滴定剂的稳定性滴定剂的稳定性 非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，故高氯酸滴定液的浓具有挥发性，膨胀系数较大，故高氯酸滴定液的浓度受温度的影响。若滴定样品与标定度受温度的影响。若滴定样品与标定HClOHClO4 4溶液时的溶液时的温度不一致，温差超过温度不一致，温差超过1010时时,应重新标定；温差未应重新标

15、定；温差未超过超过1010时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正：以校正：N测=N标/1+0.0011（t测-t标）2020/11/328乙醇乙醇-水溶液中的氢氧化钠滴定法水溶液中的氢氧化钠滴定法 吩噻嗪类药物的盐酸盐的水溶液吩噻嗪类药物的盐酸盐的水溶液显酸性显酸性，在乙醇，在乙醇-水溶液中，可采用氢氧化钠滴定液测定其含量。水溶液中，可采用氢氧化钠滴定液测定其含量。ChP盐酸异丙嗪含量测定采用此法盐酸异丙嗪含量测定采用此法2020/11/329操作：操作：取取1010片，除去糖衣后，精称，研细片，除去糖衣后，精称，研细称取粉称取粉末适量末适量加水、盐

16、酸溶解加水、盐酸溶解过滤，取滤液于过滤，取滤液于249249nmnm处处测定。测定。已知：盐酸异丙嗪已知：盐酸异丙嗪E=910E=910，即可计算，即可计算优点：优点：不需标准品不需标准品缺点：缺点：仪器精密度要求高仪器精密度要求高测定中注意问题测定中注意问题：避光、防止氧化。避光、防止氧化。1.1.直接分光光度法：直接分光光度法：v盐酸异丙嗪片的测定盐酸异丙嗪片的测定二、紫外分光光度法二、紫外分光光度法2020/11/330 盐酸异丙嗪：片剂盐酸异丙嗪：片剂测定波长为测定波长为249249nmnm（为为910910）；）；注射液注射液为了消除抗氧剂维生为了消除抗氧剂维生素素C C（max m

17、ax 243nm243nm）对测定的干扰，测定波长改对测定的干扰，测定波长改为为299299nmnm（为为108108）。）。1%1cmE1%1cmE 同理，同理，盐酸氯丙嗪片剂盐酸氯丙嗪片剂测定波长为测定波长为254254nmnm（为为915915）；）；注射液注射液测定波长改为测定波长改为306306nmnm（为为115115）。）。1%1cmE1%1cmEv盐酸异丙嗪注射剂的测定盐酸异丙嗪注射剂的测定波长的选择波长的选择2020/11/3311 1、盐酸氯丙嗪注射液的含量测定，选择在、盐酸氯丙嗪注射液的含量测定，选择在299nm299nm波长处测定，其原因是波长处测定，其原因是 （C C

18、）A A、299nm299nm处是它的最大吸收波长处是它的最大吸收波长 B B、为了排除其氧化产物的影响、为了排除其氧化产物的影响C C、为了排除抗氧剂的干扰、为了排除抗氧剂的干扰 D D、在、在299nm299nm处，它的吸收值最稳定处，它的吸收值最稳定E E、在、在299nm299nm处测定误差最小处测定误差最小2020/11/3322.2.提取后分光光度法提取后分光光度法 盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪注射液计算。为以，测定盐酸氯丙嗪乙醚层氯丙嗪盐酸氯丙嗪盐酸萃取乙醚提取氨水碱化 915 E 1254 1%1cmmaxAnm2020/11/3333.3.提取后双波长分光光度法：提取后双波长分

19、光光度法：用于校正样品中氧化产物对测定影响用于校正样品中氧化产物对测定影响（1 1）原理）原理 在待测组分（在待测组分（a a）的最大吸收波长（测定波长，的最大吸收波长（测定波长，1 1）处测定待测组分和干扰组分（）处测定待测组分和干扰组分（b b）吸收度的总吸收度的总和；另选一适当波长（参比波长，和；另选一适当波长（参比波长，2 2）测定吸收度，）测定吸收度，并使干扰组分在测定波长和参比波长处的吸收度相并使干扰组分在测定波长和参比波长处的吸收度相等，即等，即 ，而待测组分在这两个波长处吸收，而待测组分在这两个波长处吸收度的差值足够大。度的差值足够大。bbAA212020/11/334abba

20、aababababaCAAAlCAAAAAAAAA )()()(212121221121（2 2）定量依据）定量依据 样品在二波长下吸收度差值（样品在二波长下吸收度差值（A A）：）：即，吸收度差值（即，吸收度差值（A A）仅与待测组分的浓度有关，仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。2020/11/335双波长分光光度法双波长分光光度法波长选择：波长选择：测定波长测定波长 测，参比波长测，参比波长 参参A A标标 测 参A A样样A样=A测-A参 A标=A测-A参C样=C标A样A标2020/11/336 干扰组分在两个波长处吸

21、收度相等干扰组分在两个波长处吸收度相等 待测组分在两个波长处吸收度相差足够大待测组分在两个波长处吸收度相差足够大 （3 3）必要条件）必要条件（4 4）应用）应用 氯丙嗪的最大吸收波长为氯丙嗪的最大吸收波长为254254nm,nm,其氧化产物在此其氧化产物在此波长也有吸收波长也有吸收,同时在同时在277277nmnm处氧化产物也有吸收处氧化产物也有吸收,且且其吸收度与在其吸收度与在254254nmnm处吸收度相等处吸收度相等,而氯丙嗪在此波长处而氯丙嗪在此波长处无吸收。无吸收。A=AA=A254254-A-A2772772020/11/337萃取：萃取：除去抗氧剂的干扰除去抗氧剂的干扰氧化产物

22、盐酸盐盐酸氯丙嗪乙醚层氧化产物氯丙嗪盐酸氯丙嗪注射液盐酸萃取乙醚提取浓氨碱化例：盐酸氯丙嗪注射液的含量测定（例：盐酸氯丙嗪注射液的含量测定（USP32-NF27)USP32-NF27)2020/11/338 双波长分光光度法测定：双波长分光光度法测定：排除氧化产物的干扰排除氧化产物的干扰 测定波长测定波长 254 254nmnm 参比波长参比波长 277 277nm nm 对照法定量对照法定量(A254-A277)样(A254-A277)标C标 12.5/V 2020/11/339 抗氧剂维生素抗氧剂维生素C C的二阶导数光谱近似为接近基线的的二阶导数光谱近似为接近基线的一条直线，不干扰盐酸氯

23、丙嗪的测定。一条直线，不干扰盐酸氯丙嗪的测定。4.4.二阶导数分光光度法二阶导数分光光度法盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪注射液 因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数光谱量取峰因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数光谱量取峰266266nmnm谷谷254254nmnm距离，标准曲线法定量。距离，标准曲线法定量。2020/11/340 原理：吩噻嗪类药物可与一些金属离子（如原理：吩噻嗪类药物可与一些金属离子（如PdPd2+2+）在适当在适当pHpH值值的溶液中形成有色的络合物，借以进行比色测定。的溶液中形成有色的络合物，借以进行比色测定。5.5.钯离子比色法钯离子比色法Pd2+SS2Cl-NSRRPdCl2pH2202

24、0/11/341优点：优点：钯离子比色法可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪钯离子比色法可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪类药物的测定类药物的测定 反应在反应在 pH2pH20.1 0.1 的缓冲液中进行的缓冲液中进行，对照法定量处测定在红色络合物吩噻嗪类药物A nm500 Pdmaxmax0.1pH222020/11/342（1 1）钯离子试剂：）钯离子试剂：PdCl PdCl2 2和十二烷基硫酸酯钯盐。和十二烷基硫酸酯钯盐。用用PdClPdCl2 2时，形成的有色络合物水中溶解度小时，形成的有色络合物水中溶解度小,样品量样品量大时大时,产生沉淀。产生沉淀。十二烷基硫酸酯钯盐十二烷基硫酸酯钯盐,其络合

25、物溶解度大其络合物溶解度大,吸收强度增吸收强度增大（约大（约2 2倍）。倍）。讨论：讨论：2020/11/343三、高效液相色谱法：三、高效液相色谱法：（一）反相高效液相色谱法（一）反相高效液相色谱法固定相：十八烷基键合硅胶固定相：十八烷基键合硅胶流动相：水流动相：水-甲醇，水甲醇，水-乙腈中加入含氮碱性试剂（扫尾剂）乙腈中加入含氮碱性试剂（扫尾剂）如如二乙胺、三乙胺二乙胺、三乙胺等。等。2020/11/344抑制或掩蔽固定相抑制或掩蔽固定相表面的游离硅醇基表面的游离硅醇基的活性的活性2020/11/345离子型化合物或能解离的化合物用常规离子型化合物或能解离的化合物用常规HPLCHPLC分离

26、时，分离时，常会出现色谱峰拖尾和保留值不稳定等问题，用常会出现色谱峰拖尾和保留值不稳定等问题，用离子对离子对色谱色谱则能解决以上问题。则能解决以上问题。（二）离子对色谱法（二）离子对色谱法离子对色谱离子对色谱是将离子对提取与色谱技术相结合，适用是将离子对提取与色谱技术相结合，适用于于pKapKa在在2-82-8的弱酸和弱碱性化合物的分离。的弱酸和弱碱性化合物的分离。通常使用反相通常使用反相ion-pair ion-pair 色谱，因离子对试剂在极色谱，因离子对试剂在极性流动相中易于溶解，并易于调整控制反离子的浓度性流动相中易于溶解，并易于调整控制反离子的浓度和流动相的和流动相的pHpH值。值。

27、2020/11/3461.1.原理：原理：在流动相中加入与成解离状态的待测组分在流动相中加入与成解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，使之与待测组分离子离子电荷相反的离子对试剂，使之与待测组分离子形成离子对，增加待测组分在非极性固定相中的分形成离子对，增加待测组分在非极性固定相中的分配，从而改善其色谱保留与分离行为。配，从而改善其色谱保留与分离行为。2020/11/347对于酸类样品（对于酸类样品（RCOOHRCOOH），），用四丁基铵盐（用四丁基铵盐（TBATBA+X X-）RCOOHRCOOHRCOORCOO-+H+H+TBATBA+X X-TBATBA+X+X-RCOORCOO-+

28、TBA+TBA+RCOORCOO-TBATBA+-2020/11/348离子对试剂离子对试剂因其烷基的疏水性，为因其烷基的疏水性，为C18C18或或C8C8固定相所吸固定相所吸附，生成动态覆盖的离子交换剂，通过离子交换，附，生成动态覆盖的离子交换剂，通过离子交换，保留样品离子保留样品离子对于碱性样品对于碱性样品B B，用烷基磺酸盐（用烷基磺酸盐（R-SOR-SO3 3NaNa）做离子对做离子对试剂。试剂。B+HB+HBH+R-SOR-SO3 3NaNaR-SOR-SO3 3-+NaNa+BH+R-SO+R-SO3 3-BH+R-SOR-SO3 3-2020/11/349（1 1）离子对试剂的性

29、质和浓度：）离子对试剂的性质和浓度：在一定范围内，离子在一定范围内，离子对试剂浓度增加，保留增加，通常所用浓度为对试剂浓度增加，保留增加，通常所用浓度为0.000.003mol/ml3mol/ml0.01mol/ml0.01mol/ml。（2 2）流动相流动相PHPH：是是IPCIPC分离的重要条件，酸性样品分离的重要条件，酸性样品PHPH应应大于大于PkaPka两个单位，使其解离成两个单位，使其解离成RCOORCOO-，碱性样碱性样品，品，PHPH应应小于小于PkaPka两个单位，使其解离成两个单位，使其解离成BHBH+。（3 3）流动相的组成：）流动相的组成：（4 4）离子强度：）离子强度

30、：2.2.影响离子对形成的条件影响离子对形成的条件2020/11/350样品中含有样品中含有-COOH,-SOCOOH,-SO3 3H H基团时基团时,选用的离子对试选用的离子对试剂应是剂应是带正电荷的有机铵盐，带正电荷的有机铵盐，以此增加样品阴离子以此增加样品阴离子在反相色谱中的保留值，选用的流动相一般都为甲在反相色谱中的保留值，选用的流动相一般都为甲醇醇/水；水；除了加入离子对试剂外，还要加入磷酸盐或其他除了加入离子对试剂外，还要加入磷酸盐或其他缓冲液，以控制流动相的酸度，从而使这些酸性或缓冲液，以控制流动相的酸度，从而使这些酸性或碱性官能团能完全解离，最大程度形成离子对；碱性官能团能完全

31、解离，最大程度形成离子对；3.3.离子对试剂和其他添加剂的一般选用规则离子对试剂和其他添加剂的一般选用规则2020/11/351样品中含有样品中含有-NHNH2 2，-NH-NH-基团或其他阳离子时，选用基团或其他阳离子时，选用的离子对试剂应是的离子对试剂应是烷基磺酸盐烷基磺酸盐（如戊烷磺酸钠、庚（如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠）其他盐类；烷磺酸钠）其他盐类；样品中同时含有样品中同时含有-NHNH2 2，-COOH-COOH，-SO-SO3 3H H等不同性质等不同性质的基团时，则规则或都适用。的基团时，则规则或都适用。2020/11/352pH3.5BH+C7H15SO2O-BH+C7H15SO2

32、O-4.测定吩噻嗪类药物时，主要采用烷基磺酸盐阴离子对试测定吩噻嗪类药物时，主要采用烷基磺酸盐阴离子对试剂（如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠）或其他盐类。剂（如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠）或其他盐类。影响条件：影响条件：流动相一般呈酸性，以利于生物碱的离解；流动相一般呈酸性，以利于生物碱的离解；离子对试剂离子对试剂的非极性部分越大，形成的离子对分配系数越大，保的非极性部分越大，形成的离子对分配系数越大，保留时间越长留时间越长（十二烷基磺酸钠庚烷磺酸钠戊烷磺（十二烷基磺酸钠庚烷磺酸钠戊烷磺酸钠）。酸钠）。2020/11/353例：盐酸异丙嗪注射液的含量测定法例：盐酸异丙嗪注射液的含量测定法色谱条件色谱条件

33、色谱柱色谱柱:苯基柱苯基柱（30cmm30cmm4.6mm4.6mm）；）；流动相为流动相为:0.0.2mol/L2mol/L戊烷磺酸钠戊烷磺酸钠溶液溶液-乙腈乙腈-冰醋酸冰醋酸 （100:100:1100:100:1）；）；检测波长检测波长:为为254254nmnm；流速流速:约约1.51.5ml/minml/min。2020/11/354对照品溶液制备：对照品溶液制备：取异丙嗪取异丙嗪对照品对照品适量，精密称定，用流适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成每动相溶解并稀释制成每1 ml1 ml中约含中约含0.1mg0.1mg的药物。的药物。供试品溶液制备：供试品溶液制备：精密量取本品适量，用

34、流动相稀释至精密量取本品适量，用流动相稀释至刻度，摇匀；精密量取上述溶液刻度，摇匀；精密量取上述溶液10.0 ml10.0 ml，置，置100ml100ml量瓶量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，既得。中，用流动相稀释至刻度，摇匀，既得。系统适用性试验系统适用性试验 ：测定方法：测定方法：取对照品溶液和供试品溶液分别进样，记录色取对照品溶液和供试品溶液分别进样，记录色谱图。谱图。2020/11/355结果计算：结果计算：每ml中异丙嗪的量（mg）=500（C/V）（rU/rS）r rU U和和r rS S分别为供试品溶液和对照品溶液中主峰响分别为供试品溶液和对照品溶液中主峰响应值。应值。2020/11/356 本实验流动相含有缓冲盐和离子对试剂，易损本实验流动相含有缓冲盐和离子对试剂，易损坏色谱柱和高压泵，故实验结束，即用甲醇水坏色谱柱和高压泵，故实验结束，即用甲醇水磷酸（磷酸（77:23:0.677:23:0.6）混合液清洗色谱柱）混合液清洗色谱柱3030minmin，再再用甲醇水（用甲醇水（50:5050:50）混合液继续清洗）混合液继续清洗3030minmin。注意：注意：2020/11/357