第二章原核微生物课件.ppt
- 【下载声明】
1. 本站全部试题类文档,若标题没写含答案,则无答案;标题注明含答案的文档,主观题也可能无答案。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
2. 本站全部PPT文档均不含视频和音频,PPT中出现的音频或视频标识(或文字)仅表示流程,实际无音频或视频文件。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
3. 本页资料《第二章原核微生物课件.ppt》由用户(晟晟文业)主动上传,其收益全归该用户。163文库仅提供信息存储空间,仅对该用户上传内容的表现方式做保护处理,对上传内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知163文库(点击联系客服),我们立即给予删除!
4. 请根据预览情况,自愿下载本文。本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
5. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007及以上版本和PDF阅读器,压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 第二 章原核 微生物 课件
- 资源描述:
-
1、 微生物的纯培养和显微微生物的纯培养和显微技术技术(原核微生物原核微生物)第一节第一节微生物纯培养微生物纯培养本节提要:本节提要:微生物纯培养的接种方法微生物纯培养的接种方法 灭菌与无菌操作灭菌与无菌操作 微生物的保藏技术微生物的保藏技术 纯培养(纯培养(pureculture):):单个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代。单个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代。对于微生物,由于其主要进行无性繁殖,故纯培养即为克隆。对于微生物,由于其主要进行无性繁殖,故纯培养即为克隆。建立纯培养,证实其纯度无可置疑,并保持不受污染是微生建立纯培养,证实其纯度无可置疑,并保持不受污染是微生物学家最重要的任务之一。(即控
2、制无杂菌)物学家最重要的任务之一。(即控制无杂菌)一、获得纯培养的方法:一、获得纯培养的方法:平板分离法平板分离法 液体分离法液体分离法 单细胞挑取分离法单细胞挑取分离法 选择性培养基分离法选择性培养基分离法(一)(一).平板分离法:平板分离法:1、划线分离法:快速、方便。、划线分离法:快速、方便。分段划线(适用于浓度较大的样品)分段划线(适用于浓度较大的样品)连续划线(适用于浓度较小的样品)连续划线(适用于浓度较小的样品)扇形划线扇形划线方格划线方格划线 2、稀释倾注分离法:、稀释倾注分离法:可定性、定量。可定性、定量。方法:先取稀释液注入平皿,再注入方法:先取稀释液注入平皿,再注入45左右
3、的培养基,将稀释液冲开培养左右的培养基,将稀释液冲开培养基表面、中间均会出现菌落。基表面、中间均会出现菌落。3、涂布平板法、涂布平板法(培养基表面出现菌落)(培养基表面出现菌落)简单易行,但易造成机械损伤。简单易行,但易造成机械损伤。(二)液体分离法(二)液体分离法适用于细胞较大的微生物。用液体培养基对菌液做适用于细胞较大的微生物。用液体培养基对菌液做10倍系列稀释,使试管中只存在一个细胞,由此繁殖得到倍系列稀释,使试管中只存在一个细胞,由此繁殖得到的后代必是纯培养。的后代必是纯培养。(三)单细胞(单孢子)分离法(三)单细胞(单孢子)分离法较大的微生物可用毛细管挑取单个个体;个较大的微生物可用
4、毛细管挑取单个个体;个体较小的微生物,需用显微操作仪,在显微体较小的微生物,需用显微操作仪,在显微镜下进行。镜下进行。(四)(四).选择培养分离选择培养分离(通常做成固体的培养(通常做成固体的培养基)基)利用选择培养基进行直接分离。利用选择培养基进行直接分离。富集培养。即利用不同微生物间的生命活动富集培养。即利用不同微生物间的生命活动特点的不同,制定特定的环境条件,使适应特点的不同,制定特定的环境条件,使适应该条件的微生物旺盛生长,其数量大大增加,该条件的微生物旺盛生长,其数量大大增加,便于分离到特定的微生物便于分离到特定的微生物 固体培养各种微生物形成的菌落特征固体培养各种微生物形成的菌落特
5、征 固体培养各种微生物形成的菌落特征固体培养各种微生物形成的菌落特征 二、纯培养的接种方法二、纯培养的接种方法根据菌的生长速度的快慢来选择根据菌的生长速度的快慢来选择斜面接种、斜面接种、液体接种液体接种。(一)斜面接种:(一)斜面接种:为保存菌种和获得大量菌种为保存菌种和获得大量菌种(1)密涂布法)密涂布法(适用于各种适用于各种M,可获得大量菌,可获得大量菌体)体)(2)蛇形划线法)蛇形划线法(适用于易扩散的适用于易扩散的M)(3)中央划线法(适用于生长快的)中央划线法(适用于生长快的M)(4)点种法(适用于真菌短时间保存菌种)点种法(适用于真菌短时间保存菌种)(二)穿刺接种法:(二)穿刺接种
6、法:用于接种试管深层琼脂培养基,以观用于接种试管深层琼脂培养基,以观察细菌运动及鉴定细菌用。察细菌运动及鉴定细菌用。(三)液体接种法 用接种针在液面边缘-产生混浊-搅匀、振荡 三、无菌技术三、无菌技术 无菌操作:防止微生物进入物体的技术。无菌操作:防止微生物进入物体的技术。无菌:指没有活的微生物(包括芽孢)。无菌:指没有活的微生物(包括芽孢)。死亡:指不可逆地丧失了生长繁殖的能力。死亡:指不可逆地丧失了生长繁殖的能力。除菌:应用机械的方法(过滤、离心分离、除菌:应用机械的方法(过滤、离心分离、静电吸附)除去液体或气体中的微生物。静电吸附)除去液体或气体中的微生物。灭菌操作:灭菌操作:杀灭所有微
7、生物杀灭所有微生物常用常用湿热灭菌:高压蒸汽灭菌湿热灭菌:高压蒸汽灭菌干热灭菌:空气加热灭菌干热灭菌:空气加热灭菌高温灼烧:用火直接接触烧灭高温灼烧:用火直接接触烧灭 四、菌种保藏四、菌种保藏 传代培养保藏传代培养保藏 冷冻保藏冷冻保藏 干燥保藏干燥保藏 第二节第二节显微镜和显微技术显微镜和显微技术一、显微镜的种类及原理(一、显微镜的种类及原理(p21-25)种类种类 普通光学显微镜普通光学显微镜暗视野显微镜暗视野显微镜相差显微镜相差显微镜荧光显微镜荧光显微镜透射电子显微镜透射电子显微镜(transmissionelectronmicroscopeTEM)扫描电子显微镜扫描电子显微镜(SEM)
8、扫描隧道显微镜扫描隧道显微镜(STM)原子力显微镜原子力显微镜(AFM)2.原理原理显微镜的作用主要是放大作用。一般利用目镜和物镜显微镜的作用主要是放大作用。一般利用目镜和物镜两组透镜两组透镜来放大成像,组成由机械装置和来放大成像,组成由机械装置和光学系统两光学系统两大部分。大部分。除了放大外,决定显微观察效果的还有两个重要的因除了放大外,决定显微观察效果的还有两个重要的因素,即分辨率和反差。素,即分辨率和反差。分辨率:指辨别两点之间最小距离的能力。即最小可分分辨率:指辨别两点之间最小距离的能力。即最小可分辨能力。辨能力。0.5分辨率分辨率=-nsin显微镜的分辨率的比较图,书显微镜的分辨率的
9、比较图,书23页图页图2-10反差:样品区别于背景的程度反差:样品区别于背景的程度 与显微镜的自身特点有关;与显微镜的自身特点有关;显微观察时对显微镜的正确使用;显微观察时对显微镜的正确使用;良好的标本制作和观察技术,良好的标本制作和观察技术,二、显微技术二、显微技术 1.良好标本的制备良好标本的制备 光学显微镜的制样光学显微镜的制样活体观察活体观察压滴法、悬滴法、菌丝埋片法压滴法、悬滴法、菌丝埋片法染色观察染色观察活菌染色、活菌染色、死菌染色死菌染色正染色和负染色正染色和负染色 电子显微镜的制样电子显微镜的制样透射电镜样品的制备透射电镜样品的制备电子的穿透能力有限,需采用覆盖有支持膜的电子的
10、穿透能力有限,需采用覆盖有支持膜的载网来承载被观察的样品。载网来承载被观察的样品。常用负染技术常用负染技术投影技术投影技术超薄切片技术超薄切片技术 扫描电镜样品的制备扫描电镜样品的制备主要要求干燥主要要求干燥,并且表,并且表面能够导电,常用自然干燥、真空干燥、冷冻面能够导电,常用自然干燥、真空干燥、冷冻干燥等。干燥等。干燥、喷镀金属导电层后观察。干燥、喷镀金属导电层后观察。2、分析技术、分析技术 对显微镜的正确使用对显微镜的正确使用了解显微镜的构造了解显微镜的构造和性能。和性能。观察技术观察技术不仅观察物体的形态、结构,不仅观察物体的形态、结构,可进行的摄影技术,而且与计算科学技可进行的摄影技
11、术,而且与计算科学技术结合的图像分析、模拟仿真技术。术结合的图像分析、模拟仿真技术。对物体的组成成分定性和定量。对物体的组成成分定性和定量。第二节第二节原核微生物原核微生物1.原核微生物的特点原核微生物的特点1)没有发育完全的核,)没有发育完全的核,DNA高度折叠高度折叠为核区,拟核;为核区,拟核;2)没有细胞器,细胞膜内陷形成不规)没有细胞器,细胞膜内陷形成不规则泡沫结构体系;则泡沫结构体系;3)不进行有丝分裂。)不进行有丝分裂。2.本章授课重点本章授课重点细菌、放线菌、蓝细菌细菌、放线菌、蓝细菌第一节第一节细菌(细菌(bacteria)一、细胞的形态构造及其功能一、细胞的形态构造及其功能(
12、一)形态和染色(一)形态和染色球状球状杆状杆状螺旋状螺旋状基本形态基本形态一、细胞的形态和大小一、细胞的形态和大小(一)细菌形态(一)细菌形态1、球状、球状细胞个体呈球形或椭圆形,不同种的球菌在细胞分细胞个体呈球形或椭圆形,不同种的球菌在细胞分裂时会形成不同的空间排列方式,常被作为分类依据。裂时会形成不同的空间排列方式,常被作为分类依据。分有:单球菌、双球菌(肺炎球菌)、四联球菌、分有:单球菌、双球菌(肺炎球菌)、四联球菌、八叠球菌(甲烷球菌)、链球菌、葡萄球菌。八叠球菌(甲烷球菌)、链球菌、葡萄球菌。一、细胞的形态构造及其功能一、细胞的形态构造及其功能(一)细菌的形态(一)细菌的形态2、杆状
13、、杆状细胞呈杆状或圆柱形,一般其粗细(直径)比较细胞呈杆状或圆柱形,一般其粗细(直径)比较稳定,而长度则常因培养时间、培养条件不同而有较稳定,而长度则常因培养时间、培养条件不同而有较大变化。大变化。分有:单杆菌、双杆菌和链杆菌。分有:单杆菌、双杆菌和链杆菌。炭疽病的病原菌炭疽病的病原菌-炭疽杆菌炭疽杆菌一、细胞的形态和大小一、细胞的形态和大小(一)细菌形态(一)细菌形态3、螺旋菌、螺旋菌螺旋菌呈螺旋卷曲状,螺纹不满一圈的称为弧菌。螺旋菌呈螺旋卷曲状,螺纹不满一圈的称为弧菌。一、细胞的形态构造及其功能一、细胞的形态构造及其功能(一)形态和染色(一)形态和染色3、螺旋状、螺旋状弧菌弧菌螺旋菌螺旋菌
14、螺旋体菌螺旋体菌弧菌:弧菌:菌体只有一个弯曲,其程度不足一圈,菌体只有一个弯曲,其程度不足一圈,形似形似“C”字或逗号,鞭毛偏端生。字或逗号,鞭毛偏端生。蛭蛭弧弧菌菌霍乱弧菌霍乱弧菌螺旋菌:螺旋菌:菌体回转如螺旋,螺菌体回转如螺旋,螺旋数目和螺距大小因旋数目和螺距大小因种而异。鞭毛二端生种而异。鞭毛二端生细胞壁坚韧,菌体较细胞壁坚韧,菌体较硬。硬。二、细菌的大小与重量二、细菌的大小与重量细菌的大小测量单位是细菌的大小测量单位是um大小的测量方法大小的测量方法显微镜测微尺显微镜测微尺显微照相后根据放大倍数进行测算显微照相后根据放大倍数进行测算细菌的大小以微米(细菌的大小以微米(m)计。计。多数球
15、菌的大小(直径)为多数球菌的大小(直径)为0.52.0m;杆菌(长杆菌(长宽)为(宽)为(15)(0.51.0)m;螺旋菌(宽度螺旋菌(宽度弯曲长度)为(弯曲长度)为(0.251.7)(260)m;另外,细菌的大小与个体的发育情况有另外,细菌的大小与个体的发育情况有关,刚分裂的新细菌小,随发育逐渐变关,刚分裂的新细菌小,随发育逐渐变大,老化后又变小。大,老化后又变小。二、细胞的结构二、细胞的结构一一般般结结构:构:细细菌菌都都有有的的构构造造特殊结构:部分细菌具有的或特殊结构:部分细菌具有的或一般细菌在特殊环境下才有的一般细菌在特殊环境下才有的1 1、细菌细胞的、细菌细胞的一般构造一般构造 细
16、胞壁(细胞壁(cellwall)是位于细胞体表最外层,内侧是位于细胞体表最外层,内侧紧贴细胞膜的一层较为坚韧且略具弹性的细胞结构。紧贴细胞膜的一层较为坚韧且略具弹性的细胞结构。约占干重的约占干重的1025%。1)细胞壁(细胞壁(cellcellwall)wall)不同细菌的细胞壁化学组成和结构不同,通过革不同细菌的细胞壁化学组成和结构不同,通过革兰氏染色法可将所有的细菌分为革兰氏阳性菌(兰氏染色法可将所有的细菌分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(和革兰氏阴性菌(G)。)。细菌是单细胞结构。细菌是单细胞结构。(1)(1)革兰氏阳性菌(革兰氏阳性菌(G+)的细胞壁成分的细胞壁成分G+菌细胞壁化
17、学组成以肽聚糖菌细胞壁化学组成以肽聚糖(peptidoglycan)为为主。这是原核微生物所特有的成份,占细胞壁物质总主。这是原核微生物所特有的成份,占细胞壁物质总量的量的4090%。另外还含有磷壁酸及少量的蛋白质和脂肪。另外还含有磷壁酸及少量的蛋白质和脂肪。G+菌菌细胞壁较厚,约为细胞壁较厚,约为2080nm,结构简单。结构简单。(2)(2)革兰氏阴性菌(革兰氏阴性菌(G)的的细胞壁成分细胞壁成分主要成份为:脂多糖主要成份为:脂多糖、磷脂、脂蛋白、肽聚糖,磷脂、脂蛋白、肽聚糖,G有有肽聚糖,仅占细胞壁干重的肽聚糖,仅占细胞壁干重的5-10%。G细胞壁很薄,厚度约为细胞壁很薄,厚度约为10nm
18、,但它的组成和结构但它的组成和结构比比G+更复杂。分为外壁和内壁。其中,外壁又可分为更复杂。分为外壁和内壁。其中,外壁又可分为三层:最外层为脂多糖,中间层为磷脂层,内层为脂三层:最外层为脂多糖,中间层为磷脂层,内层为脂蛋白。蛋白。肽聚糖肽聚糖:肽聚糖是由肽聚糖是由N乙酰胞壁酸(乙酰胞壁酸(NAM)和)和N乙酰葡萄乙酰葡萄糖胺(糖胺(NAG)双糖以及少数氨基酸短肽链组成的亚单)双糖以及少数氨基酸短肽链组成的亚单位聚合而成的大分子复合体呈长链骨架状。位聚合而成的大分子复合体呈长链骨架状。肽聚糖单体肽聚糖单体p40由由NAG和和NAM双糖、四个氨基酸分子按双糖、四个氨基酸分子按L型与型与D型型交替连
19、接的肽尾或侧链、肽桥或肽间桥构成。交替连接的肽尾或侧链、肽桥或肽间桥构成。3)肽聚糖的特点)肽聚糖的特点:1)为原核生物所特有为原核生物所特有(古细菌例外古细菌例外);2)D-Glu,D-Ala,M-DAP在自然界蛋白质中不存在在自然界蛋白质中不存在(M-DAP是一种在原核微生物细胞壁上才有的内消旋是一种在原核微生物细胞壁上才有的内消旋二氨基庚二酸);二氨基庚二酸);3)个别菌中个别菌中DAP可为可为Lys代替;代替;4)一般由五个氨基酸组成肽桥连接肽尾,个别菌中两一般由五个氨基酸组成肽桥连接肽尾,个别菌中两肽尾可直接由肽键连接,肽聚糖的多样性就是变化在肽尾可直接由肽键连接,肽聚糖的多样性就是
20、变化在肽桥上。肽桥上。肽聚糖肽聚糖 肽聚糖网格状结构肽聚糖网格状结构:磷壁酸又名垣酸,是大多数磷壁酸又名垣酸,是大多数G+菌所特有菌所特有的成分,约占细胞壁成分的的成分,约占细胞壁成分的10%。(3)G+细菌与细菌与G-细菌细胞壁的比较细菌细胞壁的比较细菌 壁厚nm肽聚糖 磷壁酸 脂多糖 蛋白质脂肪G+20804090+-约2014G-1010-+约601122总结:总结:1.G+菌具有大量的肽聚糖,独含磷壁酸,不含脂多糖;菌具有大量的肽聚糖,独含磷壁酸,不含脂多糖;2.G-菌菌含有少量的肽聚糖,独含脂多糖,蛋白质含量较含有少量的肽聚糖,独含脂多糖,蛋白质含量较多,不含磷壁酸。多,不含磷壁酸。
21、细胞壁的生理功能细胞壁的生理功能1.保护原生质体免受渗透压引起的破裂作用;保护原生质体免受渗透压引起的破裂作用;2.维持细菌的形态。维持细菌的形态。溶菌酶处理不同形态的菌体细胞壁后,菌体均呈球状。溶菌酶处理不同形态的菌体细胞壁后,菌体均呈球状。3.细胞壁为多孔结构的分子筛,可以阻挡某些分子的细胞壁为多孔结构的分子筛,可以阻挡某些分子的进入。进入。4.细胞壁为鞭毛提供支点,使鞭毛运动。细胞壁为鞭毛提供支点,使鞭毛运动。2 2)、)、细胞膜细胞膜(1)细胞概念:)细胞概念:细胞质膜(细胞质膜(cytoplasmicmembrane),),又称质膜又称质膜(plasmamembrane)、)、细胞膜
22、(细胞膜(cellmembrane)或内或内膜(膜(innermembrane),),是紧贴在细胞壁内侧、包围着是紧贴在细胞壁内侧、包围着细胞质的一层柔软、脆弱、富有弹性的半透性薄膜,厚约细胞质的一层柔软、脆弱、富有弹性的半透性薄膜,厚约78nm。约占细菌体重的约占细菌体重的10左右。左右。(2)细胞膜的化学组成与结构模型:)细胞膜的化学组成与结构模型:细胞膜的化学组成主要为蛋白质、脂类和多糖。细胞膜的化学组成主要为蛋白质、脂类和多糖。蛋白质(占蛋白质(占50%70%)脂类为磷脂(占脂类为磷脂(占20%30%)多糖约占多糖约占2。(2)细胞膜的化学组成与结构模型:)细胞膜的化学组成与结构模型:
23、亲水的极性端亲水的极性端疏水的非极性端疏水的非极性端(3)细胞膜的生理功能:)细胞膜的生理功能:是维持细胞内正常渗透压的屏障;选择性地控制细胞是维持细胞内正常渗透压的屏障;选择性地控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送;内、外的营养物质和代谢产物的运送;含有合成细胞壁和形成横膈膜组分的酶,合成细胞壁含有合成细胞壁和形成横膈膜组分的酶,合成细胞壁重要基地;重要基地;膜内陷形成中间体,含有叶绿素,参与光合作用。膜内陷形成中间体,含有叶绿素,参与光合作用。还有吗?还有吗?(3)细胞膜的生理功能:)细胞膜的生理功能:膜上含有氧化磷酸化、膜上含有氧化磷酸化、NADH(烟酰胺腺嘌呤二核烟酰胺腺嘌呤二核苷
24、酸苷酸)脱氢酶等能量代谢的酶系,在细胞质膜上进行脱氢酶等能量代谢的酶系,在细胞质膜上进行物质代谢和能量代谢,是细胞的产能场所;物质代谢和能量代谢,是细胞的产能场所;细胞质膜上有鞭毛基粒,是鞭毛基体的着生部细胞质膜上有鞭毛基粒,是鞭毛基体的着生部位和鞭毛旋转的供能部位;位和鞭毛旋转的供能部位;细胞质的主要成分为核糖体、内含颗粒、多种酶类和中细胞质的主要成分为核糖体、内含颗粒、多种酶类和中间代谢物、质粒、各种营养物和大分子的单体等。间代谢物、质粒、各种营养物和大分子的单体等。3 3)细胞质和内含物细胞质和内含物(1)概念:)概念:细胞质(细胞质(cytoplasm)是细胞质膜包围的除核区外是细胞质
25、膜包围的除核区外的一切半透明、胶状、颗粒状物质的总称。含水量约的一切半透明、胶状、颗粒状物质的总称。含水量约80%。核糖体是细胞质中的一种核糖核蛋白的颗粒状物质,核糖体是细胞质中的一种核糖核蛋白的颗粒状物质,由核糖核酸由核糖核酸RNARNA(60%)和蛋白质和蛋白质(40%)组成,常以游离组成,常以游离状态或多聚核糖状态分布于细胞质中。它是蛋白质的状态或多聚核糖状态分布于细胞质中。它是蛋白质的合成场所。合成场所。(2)(2)核糖体核糖体(ribosome)(ribosome)(3)贮藏物)贮藏物(reservematerials):即:即内含颗内含颗粒粒贮藏物是一类由不同化学成分累积而成的不溶
展开阅读全文