人教版选修1分解纤维素的微生物的分离课件.ppt

1、专题专题2:2:微生物的培养与应用微生物的培养与应用学习目标：学习目标：1.1.简述纤维素酶的种类及作用简述纤维素酶的种类及作用2.2.掌握从土壤中分离纤维素分解菌的操作技术掌握从土壤中分离纤维素分解菌的操作技术纤维素，一种由纤维素，一种由葡萄糖葡萄糖首尾相连而首尾相连而成的高分子成的高分子多糖类多糖类化合物化合物一、基础知识一、基础知识1.某些微生物能分解纤维素，是因为它们某些微生物能分解纤维素，是因为它们能够产生能够产生纤维素酶纤维素酶。2.纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即少包括三种组分，即C1C1酶酶、CxCx酶酶和和葡葡萄糖苷酶萄糖

2、苷酶。纤维素纤维素酶酶酶酶纤维二糖纤维二糖葡萄糖苷葡萄糖苷酶酶 葡萄糖葡萄糖纤维素酶水解滤纸实纤维素酶水解滤纸实验验取二支取二支20mL20mL的试管的试管各加入一张滤纸条各加入一张滤纸条分别加分别加11mL11mL、10mL 10mL 0.1mol/L0.1mol/L的的PHPH为为4.84.8的醋酸醋酸钠缓的醋酸醋酸钠缓冲液冲液乙试管加入乙试管加入1mL1mL纤维纤维素酶素酶将试管放在将试管放在140r/min140r/min的摇床上的摇床上振荡振荡1h1h3.3.纤维素分解菌的筛选纤维素分解菌的筛选1 1）方法：）方法：刚果红染色法刚果红染色法2 2）原理：）原理：纤维素纤维素刚果红刚果

3、红红色复合物红色复合物纤维素纤维素纤维素酶纤维素酶红色复合物消失红色复合物消失出现出现以纤维素分解菌为中心以纤维素分解菌为中心的透明圈的透明圈分解分解请根据实验流程图和提供的三个资料，思考有关问题，然后进行实验设计，并写出详细的实验方案。在小组内进行交流。(1)土壤取样的环境是怎样的？作出这种选择的理由是 什么？(2)选择培养基培养基对微生物是如何进行选择的？(3)选择培养用液体培养基还是固体培养基？为什么？(4)刚果红染色法有几种方法？怎样操作？两种方法各 有哪些优缺点？选择选择纤维素丰富纤维素丰富的环境，因为在的环境，因为在富含富含纤维素的环境中纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对纤维素分

4、解菌的含量相对提高。提高。土壤取样土壤取样选择选择培养培养1.1.用什么样的培养基进行选择培养？用什么样的培养基进行选择培养？以纤维素为唯一碳源的培养基，以纤维素为唯一碳源的培养基，只有纤维素分只有纤维素分解菌能够生长繁殖，其他微生物生长受到抑制。解菌能够生长繁殖，其他微生物生长受到抑制。2.2.用液体培养基还是用液体培养基还是固体培养基？为什么？固体培养基？为什么？液体培养基，因为可以获得更多菌体，液体培养基，因为可以获得更多菌体，而且进行稀释涂布操作更简单。而且进行稀释涂布操作更简单。梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上素分解菌的培养基上1、制备培养基

5、、制备培养基:参照旁栏参照旁栏中的比例中的比例2、涂布平板：将稀释度、涂布平板：将稀释度为为104106的菌悬液各的菌悬液各取取0.1ml涂布在培养基上涂布在培养基上30倒置培养倒置培养挑选产生透挑选产生透明圈的菌落明圈的菌落 参照课本参照课本刚果红染色法刚果红染色法，挑选产生透，挑选产生透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落刚果红刚果红染色法染色法方法一：方法一：先培养微生物，再加入刚果红进先培养微生物，再加入刚果红进 行行颜色反应颜色反应方法二：方法二：在倒平板时就加入刚果红在倒平板时就加入刚果红思考：这两种方法各有哪些优点与不足？思考：这两种方法各有哪些优点与不足？优点优点缺点缺点方法一方法一 显示出的颜色反应显示出的颜色反应基本上是纤维素分基本上是纤维素分解菌的作用解菌的作用操作繁琐，加入刚操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落果红溶液会使菌落之间发生混杂之间发生混杂方法二方法二 操作简便，不存在操作简便，不存在菌落混杂问题菌落混杂问题能产生能产生淀粉酶淀粉酶的微的微生物和具有生物和具有降解色降解色素素能力的微生物也能力的微生物也能出现透明圈能出现透明圈