肾穿活检组织标本课件.ppt

1、肾穿活检组织标本肾穿活检组织标本制作与染色制作与染色余姚市人民医院余姚市人民医院一取材一取材 肾活检标本经皮质穿刺取检，分皮质和髓质，在解剖显微镜下，肾皮质组织色较淡，肾小球为如针尖大小的红色小点，不规则分布。穿刺所得的组织，一般包括以下几种成分：皮质组织；皮髓交界组织；皮质-髓质-皮质组织。固定固定液：常规:中性福尔马林。电镜:3%戌二醛。固定时间：最好不低于8小时。脱水、包埋、切片 随常规脱水机脱水，尽量用小包埋模块包埋，以利于连续切片。切片厚度um，烤片温度60。1小时。HE染色：观察组织学和细胞学形态，通过它能显示整个疾病的全貌，明确病变的性质和分布的特点 染色结果 肾小球轮廓清晰，细

2、胞核、质蓝红对比鲜明，各种细胞成分着色鲜艳。特殊染色 六氨银染色 肾小球肾炎的病变主要表现在肾小球，尤其是肾小球基膜的改变。常规HE染色不能清晰地显示基膜，主要通过PAMS染色才能将基膜清晰地显示出来。染色原理：肾小球基膜富含粘多糖，必须经过氧化才能暴露醛基，醛基把六胺银还原为黑色的金属银。试剂配制（1）1%高碘酸水溶液（2）5%铬酸水溶液（3）2%草酸水溶液（4）3%六次甲基四胺水溶液（5）5%硝酸银水溶液（6）5%硼砂水溶液（7）0.1%氯化金水溶液（8）3%硫代硫酸钠水溶液 方法（1）1%高碘酸氧化10min，蒸馏水洗。（2）5%铬酸氧化20min，蒸馏水洗。（3）2%草酸泡洗 1min

3、，蒸馏水洗三次。（4）新鲜配制六胺银溶液（六胺银染液：3%六次甲基四胺 水 20ml，5%硝酸银 1ml，四硼酸钠 2.4ml）用50ml规格的染色玻璃缸750W微波炉的中低档预热。（5）将切片置入六胺银溶液中于60度水浴箱中孵育1525min（6）蒸馏水漂洗3次。（7）0.1%氯化金调色12min，蒸馏水洗。（8）3%硫代硫酸钠处理12min，蒸馏水洗。（9）复染苏木素，伊红（10）常规脱水，中性树胶封固Masson三色染色三色染色 Masson三色染色主要是用来观察肾小球嗜复红蛋白沉积物（免疫复合物）及肾脏内胶原纤维增生等。我科采用改良后方法，通过组织切片的补充固定，试剂浓度的改良组合、调整染色时间。对肾穿活检切片进行了新旧两种方法的试验比较，取得了较为满意的效果 高碘酸-无色品红 在肾小球疾病中，常导致肾小球基底膜的改变，HE染色无法清晰显示基底膜，PAS对显示基底膜的诊断有一定意义