掌握光学显微镜的使用方法课件.ppt

1、 实验一实验一 细胞形态、细胞形态、细胞器的显微结构的观察细胞器的显微结构的观察一、实验目的一、实验目的1.1.了解普通光学显微镜的工作了解普通光学显微镜的工作原理，掌握光学显微镜的使原理，掌握光学显微镜的使用方法。用方法。2.2.熟悉光学显微镜下细胞的基熟悉光学显微镜下细胞的基本形态与结构。本形态与结构。二、实验原理n经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。n显微镜物象是否清楚不仅决定于放大倍数，还与显微镜的分辨力（resolution）有关，分辨力是指显微镜（或人的眼睛距目标25cm处）能分辨物体最小间隔的能力，分辨力的大小决定于光的波长和镜口率以及介质的折射率，用公式表示为：nR=0.

2、61/NA NAsin/2 式中：n=介质折射率；=镜口角（标本对物镜镜口的张角），N.A.=镜口率（numeric aperture）。镜口角总是要小于180，所以sina/2的最大值必然小于1。n制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.651.78，所用介质的折射率越接近玻璃的越好。对于干燥物镜来说，介质为空气，镜口率一般为0.050.95；油镜头用香柏油为介质，镜口率可接近1.5。n普通光线的波长为400700nm，因此显微镜分辨力数值不会小于0.2m，人眼的分辨力是0.2mm，所以一般显微镜设计的最大放大倍数通常为1000X。三、实验用品三、实验用品n各种组织切片各种组织切片n可直接进行解剖

3、及观察并具有正像立体感的体视显微镜体视显微镜；n能观察活细胞的相差显微镜相差显微镜、暗场显微镜暗场显微镜；n对于双折射物质进行结构研究的偏光显微偏光显微镜镜；n组织培养中长工作距离的倒置显微镜倒置显微镜；n图像具有浮雕感的微分干涉显微镜微分干涉显微镜；n具有高分辨率可进行显微断层扫描的激光激光共聚焦显微镜共聚焦显微镜。四、方法与步骤四、方法与步骤（一）光学显微镜的构造（一）光学显微镜的构造1.1.机械系统机械系统 用于固定材料和观察方便。用于固定材料和观察方便。2.2.光学系统光学系统 由物镜和目镜组成，是显微镜的主体，由物镜和目镜组成，是显微镜的主体，为了消除球差和色差，目镜和物镜都由复为了

4、消除球差和色差，目镜和物镜都由复杂的透镜组构成；杂的透镜组构成；3.3.照明系统照明系统 包括光源和聚光器包括光源和聚光器（二）显微镜的使用n1.聚光器的调节n2.光阑的调节n3.工作距离n4.油镜的使用（三）观察标本（四）电镜照片 细胞（Cell）植物细胞植物细胞(plant cell)动物细胞动物细胞(animal cell)细胞核（nucleus）外膜外膜内膜内膜膜间隙膜间隙基质基质高尔基体（Golgi complex）电镜电镜 模型模型内质网内质网(endoplasmic reticulum,ER)电镜照片电镜照片粗面内质网 电镜电镜 模型模型核糖体（ribosome）溶酶体溶酶体(l

5、ysosome)溶酶体时酸性细胞器溶酶体时酸性细胞器,含 有 一 系 列含 有 一 系 列 消 化消 化 降 解 酶降 解 酶(degradative enzymes);分为分为初级溶酶体初级溶酶体和和次级溶次级溶酶体酶体。过氧化物酶体过氧化物酶体(peroxisome or microbody)是一种简单的膜包是一种简单的膜包围的小泡围的小泡,具多种功能具多种功能,含含有有50多种酶降解大分子多种酶降解大分子,最终产生最终产生H2O2。在植物种参与光呼在植物种参与光呼吸反应和种子萌发。吸反应和种子萌发。细胞骨架微管微管微丝微丝中等纤维中等纤维 中心粒（centriole）叶绿体叶绿体(chloroplast)液泡五、实验报告n简述显微镜的主要结构和操作要领。n绘图比较所观察到的不同的细胞形态与结构。