中药制剂理化鉴别的方法-课件.ppt
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1、1中药制剂理化鉴别的方法2精品资料4 你怎么称呼老师?如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你是否会认为老师的教学方法需要改进?你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式?教师的教鞭“不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我笨,没有学问无颜见爹娘”“太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早”5第一节第一节 必备知识必备知识一、理化鉴别的意义 中药制剂的理化鉴别是利用其药味中药制剂的理化鉴别是利用其药味(原料药原料药)中的中的某种或某类指标性成分的理化性质,通过化学分析方某种或某类指标性成分的理化性质,通过化学分析方法和仪器分析方法,检测有关成分在制剂中是否存在,法和仪器分析方法,检测有关成分在制剂中是否
2、存在,进而对所含药味与处方的一致性做出判断,达到鉴定进而对所含药味与处方的一致性做出判断,达到鉴定药品真伪之目的。药品真伪之目的。药品真实性的检定是药品质量控制的重要内容,药品真实性的检定是药品质量控制的重要内容,是评价药品质量的重要依据。如果药品缺乏真实性,是评价药品质量的重要依据。如果药品缺乏真实性,则可判定为不合格药品,并以假药论处。则可判定为不合格药品,并以假药论处。6 理化鉴别是以制剂药味中的指标性成分(主要为有效成分或特征性成分)为检测对象,故可以更加客观深刻地评价药品的真实性。对于液体制剂或其它不含原料药粉的制剂,理化鉴别则显得为重要。7 目前中国药典收载的理化鉴别方法有:一般化
3、学鉴别法、微量升华法、荧光鉴别法、分光光度法、薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法等。其中色谱法尤其是薄层色谱法得到广泛的应用,这主要是由于色谱法具有分离分析双重功能,从而大大提高了鉴别工作的灵敏度和专属性,并成为今后中药制剂鉴别的发展方向。8鉴别方法鉴别方法 应用品种应用品种说说 明明薄层色谱薄层色谱114高效液相色谱高效液相色谱4 气相色谱气相色谱3主要鉴别挥发性成分主要鉴别挥发性成分分光光度法分光光度法0一般化学反应法一般化学反应法2荧光鉴别法荧光鉴别法0微量升华法微量升华法0显微鉴别法显微鉴别法29适用于含药粉的剂型适用于含药粉的剂型9 一般化学反应法是利用检测试剂与制剂中的指标性成
4、分发生化学反应,根据所产生的颜色、沉淀或气体等现象,来判断某些成分或某些药味的有无。由此可见,所谓一般化学反应法即通常所说的显色反应和沉淀反应。10 1.一般化学反应法具有操作简便,适用性较强等特点。2.其否定功能往往强于肯定功能,专属性较差。3.易发生假阳性或假阴性反应11假阳性或假阴性反应克服方法如下:对样品进行预处理,除去干扰性成分,富集被检成分。选用专属性较强的检测试剂。必要时做阳性或阴性对照试验加以验证,保证其专属性和灵敏度。12 主要用于制剂中生物碱、黄酮类、蒽醌类、皂苷、香豆素、萜类以及各种矿物类成分的鉴别 (一)生物碱 1.碘化铋钾反应 产生红棕色沉淀 2.碘化汞钾反应 产生类
5、白色沉淀 3.硅钨酸反应 产生白色沉淀 4.苦味酸反应 产生黄色结晶性沉淀 需在酸性条件下进行。注意事先排除其它成分的干扰。少数生物碱不与上述通用沉淀试剂反应,而具有专属性较强的其它反应。而具有专属性较强的其它反应。13 最多使用的检识反应为盐酸镁粉反应,呈紫红色。大山楂丸(山楂)、抗骨增生丸(淫羊藿)、参茸保胎丸(黄芩)等。此外,黄芩提取物采用二氯氧锆-盐酸显色反应进行检识。主要应用碱液反应(Borntrager反应),阳性反应呈红色,加酸红色褪去呈黄色。例如大黄流浸膏。14 常用的定性鉴别反应有:泡沫反应 样品水溶液振摇后,产生持久性泡沫。醋酐浓硫酸反应 甾体皂苷呈现污绿色,三萜皂苷呈现红
6、、红紫色。浓硫酸反应 呈现红、红紫色。三氯化锑或五氯化锑反应 氯仿液呈紫兰色。氯仿浓硫酸反应 氯仿层出现红色或兰色,并具绿色荧光。例:地奥心血康胶囊(黄山药和穿山龙薯蓣的提取物)、养心定悸膏(甘草、红参、麦冬)。15常用的检识反应有:氯亚氨基-2,6-二氯醌-四硼酸钠反应(Gibbs反应),呈现蓝色。异羟肟酸铁反应 呈红色。应用品种有:养阴清肺膏(牡丹皮)、前列舒丸(牡丹皮)等。16(六)挥发性成分 主要使用香草醛浓硫酸反应检识此类成分,正反应呈红、红紫色。应用品种主要有:万应锭(冰片)、牛黄解毒片(冰片)、养心定悸膏(桂枝、生姜)等。17朱砂、石膏、雄黄等为中成药中常见的矿药。1.朱砂(主含
7、HgS)主要采用铜片反应。HgS+2HCl+CuCuCl2 2+Hg(白)+H2 2S 天王补心丹等中成药中朱砂的鉴定。2.石膏、牡蛎、海螵蛸等 此类药物均富含钙盐,主要采用草酸铵反应。CaSO4 4+(NH4 4)2 2C2 2O4 4CaC2 2O4 4(白)+(NH4 4)2 2SO4 4 CaC2 2O4 4溶于盐酸,难溶于醋酸。CaC2 2O4 4+2HClCaCl2 2+H2 2C2 2O4 4 止咳桔红口服液(石膏)、安胃片(海螵蛸)、龙牡壮骨颗粒(牡蛎、龙骨、乳酸钙、葡萄糖酸钙等)18 3.雄黄(主含As2S2)(1)氯化钡沉淀法(检出硫)AsAs2 2S S2 2+KClO+
8、KClO3 3+4HNO+4HNO3 3 2K2K3 3AsOAsO3 3+H+H2 2SOSO4 4+Cl+Cl2 2+4NO+4NO H H2 2SOSO4 4+BaCl+BaCl2 2 BaSOBaSO4 4(白)(白)牙痛一粒丸 (2)硫化氢反应(检出砷)2As2As2 2S S2 2+7O+7O2 2 2As 2As2 2O O3 3+4SO+4SO2 2 As As2 2O O3 3+3H+3H2 2O 2HO 2H3 3AsOAsO3 3 2H 2H3 3AsOAsO3 3+3H+3H2 2S AsS As2 2S S3 3(黄)+6H+6H2 2O O AsAs2 2S S3
9、3在盐酸中析出黄色沉淀,并溶于碳酸铵中 4As4As2 2S S3 3+12(NH+12(NH4 4)2 2COCO3 3 4(NH4(NH4 4)3 3AsOAsO3 3+4(NH+4(NH4 4)3AsS)3AsS3 3+12CO+12CO2 2 小儿惊风散等。o19 常含有较多的蛋白质或氨基酸、故鉴别此类药物,常使用茚三酮反应,正反应呈红紫色。例如:龟龄集(鹿茸、海马、等)、参茸保胎丸(阿胶、鹿茸)等。20(1)供试液的制备(见前述)(2)操作方式 大多为试管反应,或在检测试纸上、或在蒸发皿(坩埚)中进行反应 21五、结果判断 将反应现象或结果与药品标准对照,若一致则符合规定。若不一致则
10、判定为不符合规定。22 试管反应一般使用210cm试管,取供试液12ml。加入检测试液时,试管应稍倾斜,试液应沿试管内壁逐滴加入,滴管下口不得触及内壁。加入反应试液后一般需振摇试管,使之与供试液混匀。振摇时应缓缓摇摆振摇,不得上下振摇,手指不允许堵塞试管口,若需层反应,则不得振摇试管。一般需在白色背景下观察反应所产生的颜色或沉淀,若沉淀为白色或类白色则需在黑色背景下观察。如果反应需加热,一般在水浴中加热。用试管夹夹持试管,内容物不得超过容积的2/3,试管应倾斜45度,试管口不得闭塞,并不得朝向人。加热有机溶液绝对不允许使用明火热源。如果反应需无水条件,必须保持试管、蒸发皿等容器的干燥,例如醋酐
11、浓硫酸反应。231.千柏鼻炎片2.小儿清热止咳口服液3.茴香橘核丸4.地奥心血康胶囊5.养阴清肺膏6.安胃片7.天王补心丹8.牙痛一粒丸9.中风回春片24 本法是利用某些成分的升华性,在一定温度下将其从制剂中升华分离出来,并以升华物所具有的某些理化性质作为制剂鉴别的依据。25 升华法具有简便、实用等特点,由于升华性仅为少数中药化学成分所具有且升华物纯度较高,故该法专属性亦较好。26 大多采用微量升华法,少数使用坩埚法或蒸发皿法,在此,仅介绍微量升华。27六味地黄丸中冰片升华物六味地黄丸中冰片升华物显微镜下观六味地黄丸中冰片升华物香草醛浓硫酸显色28 升华时应缓缓加热,温度过高,易使药粉焦化,在
12、载玻片上产生焦油状物,影响对升华物的观察或检识。温度的控制可通过调整酒精灯火焰与石棉板的间距来实现。样品粉末用量一般约0.5g,过少不易产生足够量的升华物。可在载玻片上滴加少量水降温,促使升华物凝集析出。无金属片,可用载玻片代替。29 (一)万应锭的鉴别(二)小儿惊风散的鉴别(反应机理)(三)明目地黄丸的鉴别30 荧光鉴别法是利用制剂中某些成分,如黄酮类、蒽醌类、香豆素类等在可见光或紫外光照射下能产生一定颜色荧光的性质,对中药制剂进行鉴别。有的成分本身不具荧光性,但加酸、碱处理后,或经其它化学方法处理后也可产生荧光供鉴别用。31 本法操作简便、灵敏,具有一定的专属性。例如大黄和土大黄,前者显棕
13、色至棕红色荧光,而后者显亮蓝色荧光,很容易区分。32 取中成药的提取液点加于滤纸上或加入蒸发皿中,置紫外光灯(365nm)下约10cm处观察所产生的荧光。必要时可在供试品上加酸、碱或其它试剂,再观察荧光及其变化。33 荧光强度较弱,故一般需在暗室中观察荧光。供试液一般用毛细管吸取,少量多次点加在滤纸上,使斑点集中且具有一定浓度。紫外光对人的眼睛和皮肤有损伤,操作者应避免与紫外光较长时间接触。34(一)元胡止痛片(二)五味麝香丸(三)热炎宁颗粒35 基于相同物质在同一的色谱条件下,表现出相同的色谱行为这一基本规律,在同一块薄层板上点加供试品和对照物,在相同条件下展开,显色检出色谱斑点后,将所得供
14、试品与对照物的色谱图进行对比分析,从而对药品进行定性鉴别。36 (一)简便、快速、易普及、具有分离和分析双重功能,且采用共薄层对照分析法共薄层对照分析法,故专属性亦较强。(二)系统适用性试验。(05版药典新增)1.检测灵敏度 2.分离度 3.重复性371.1.检测灵敏度检测灵敏度 主要用于限量检查.采用供试品溶液和对照品溶液与稀释若干倍(10倍)的对照品溶液在规定的色谱条件下,于同一块薄层板上点样、展开、检视,后者应显示清晰的斑点。382.2.分离度分离度 用于鉴别时,对照品溶液与供试品溶液中相应的主斑点,应显示两个清晰分离的斑点。用于限量检查和含量测定时,要求定量峰与相邻峰之间有较好的分离度
15、,除另有规定外,分离度应大于1.0。39 分离度(R)的计算公式为:R=2(d2-d1)/W1+W2 式中 d1为相邻两峰中后一峰与原点的距离;d2为相邻两峰中前一峰与原点的距离;W1 及W2为相邻两峰各自的峰宽;ABW1W2d1d2403.3.重复性重复性 主要用于含量测定.即同一供试品溶液在同一块薄层板上平行点样的待测成分的峰面积测量值的相对相对标准偏差标准偏差(RSD)(RSD)应不大于不大于3.0%3.0%;需显色后测量的相对标准偏差应不大于5.0%。41(三)对照物的设置 对照物分为对照品对照品(主要为有效成分和特征性成分的单体)、对照药材对照药材和对照提取物对照提取物三种。对照物的
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