[指南]下颌前突与正凡人群中nell1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究课件.ppt

1、下颌前突与正常人群中下颌前突与正常人群中Nell-1基因基因单核苷酸多态性位点单核苷酸多态性位点rs61150458的的研究研究专 业：口腔正畸学导 师：王小琴 教授研 究 生：赵 华前言材料与方法结果讨论结论前言 MP有家族聚集倾向MP可能为常染色体显性遗传病 局部因素有一个影响MP的主基因且符合孟德尔遗传 多因素影响 Gheriani Marazita 许多学者Ricardo Silviene 2003年 2007年19世纪 2007年，余兴华等人对MP患者和正常下颌患者进行了生长激素受体基因单核苷酸多态性分析。另外还有许多学者在研究与下颌骨发育有关的基因，比如ShhNell-1Ptc等。

2、结果发现了一个位于第10外显子的1673位SNP位点碱基突变类型为腺嘌呤(A)胞嘧啶(C)。国内研究现状Nell-1基因目前对 Nell-1 基因的研究主要集中在骨组织工程学方面，基因改变研究未见报道。本实验对105例（实验组60例，对照组45例）受试者的Nell-1基因SNP位点rs61150458进行了初步研究。SNP位点基因GC蛋白质Glu Asp 天冬氨酸谷氨酸研究目的材料与方法仪器及材料PCR扩增仪 紫外凝胶分析系统 凝胶电泳仪 Hinf 限制性内切酶 引物 厂家深圳泰立仪器仪表有限公司 UVP Hoefer Scientific Instruments Fermentas life

3、 sciences 生工生物工程有限公司 实验试剂与仪器研究对象研究对象 满足以下条件的进行头颅侧位片测量：l 均为汉族人，且没有异族通婚史 l 双侧颌面对称，无面部畸形 l 无不良习惯及替牙障碍 l 均为成年人，无外伤史，无手术史 纳入标准纳入标准对照组(正常)：SNA、SNB、ANB、上颌长、上颌位置、MP-FH 在正常范 围之内，2ANB4实验组(MP)：SNA、上颌长、上颌位置、MP-FH在正常范围之内，ANB0。实验组60人对照组45人采静脉血5ml提取全部DNA设计相应目的基因的引物PCR扩增目的基因Hinf 酶切统计学分析实验步骤DNA提取目的基因引物的设计目的基因引物的设计50

4、LPCR反应体系 试剂名称10BufferMgCl2(25mM)dNTP(10mM)上游引物(10M)下游引物(10M)Taq酶模板DNA三蒸水剂量5L4L1L1L1L0.4L10L28LPCR反应参数 预热预热变性变性退火退火延伸延伸循环次数循环次数温度（温度（）94949494565672723636次次时间时间2min2min20s20s30s30s30s30s 1 SspI aat|att13 1 tctttccctaatatttg 61 MboII n|nnnnnnntcttc84 61 NdeII|gatc83 61 MboI|gatc83 HinfI g|antc101 61 1

5、21 MboII n|nnnnnnntcttc167121 181 cgctgc 酶的确定 Hinf 5 G A N T C 3 3 C T N A G 5 统计学分析 结 果电泳结果目的基因扩增产物200bpMarker目的基因实验组酶切后凝胶电泳图 100bp200bpGG型酶切后片段长度：83bp、134bp；CC型酶切后片段长度：217bp GC型酶切后片段长度：83bp、134bp、217bp对照组酶切后凝胶电泳图 100bp200bpGG型酶切后片段长度：83bp、134bp；CC型酶切后片段长度：217bp GC型酶切后片段长度：83bp、134bp、217bp等位基因频率分析等

6、位基因频率分析 组别实验组对照组等位基因基因GCGC频数41192817频率0.670.330.620.38X20.426P0.514 注：P0.05，即实验组与对照组之间等位基因频率差异无显著性。基因型分析基因型分析 组别实验组对照组基因型GGGCCCGGGCCC频数321810231012频率0.520.300.180.510.220.27X21.835P0.400 注：P0.05，即实验组与对照组之间的基因型分布差异无显著性。讨 论Nell-1基因的特点MP的致病原因与Nell-1基因无关。由于样本量有限，其代表性有限。MP的致病原因与Nell-1的该SNP位点的变异无关。结果分析由于实

7、验组与对照组的病例有限，对Nell-1基因与MP患者的内在联系需增加样本量做进一步的研究，对其它位点及二者之间的内在联系仍需深入探讨。Nell-1基因的rs61150458多态性位点在中国汉族MP人群与正常人群之间的等位基因频率及基因型分布差异无显著性，尚不能认为MP的致病原因与该位点的变异有关。12主要参考文献主要参考文献 1 Alexander AE,McNamara JA Jr,Franchi L,.Semilongitudinal cephalometric study of craniofacial growth in untreated Class III malocclusion

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