XBP1调控胶质瘤细胞氧化应激的课件.ppt
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- XBP1 调控 胶质 细胞 氧化 应激 课件
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1、XBP1调控胶质瘤细胞氧化应激的实验研究刘耀华 赵世光 陈晓丰 梁元 郑秉杰哈尔滨医科大学附属第一医院 神经外科ROSCancer Cell 14,December 9,2008CatalaseSODExogenous ROS:The last straw breaks the camels back.The Achilles Heel of cancer cells(Cancer Cell.2008;14(6):427-9 IF 24.962)肿瘤,包括胶质瘤可以产生高水平活性氧;肿瘤细胞的Akt过度激活,决定了其对活性氧敏感;大量活性氧可以杀伤肿瘤,很多化疗药物为活性氧诱导剂;调控胶质瘤细
2、胞氧化应激水平可能对其治疗具有积极意义。活性氧(ROS)与胶质瘤研究背景HypoxiaROSNutrients DeprivationOxidative StressER StressProtective molecules?研究背景:内质网应激、氧化应激、XBP1XBP1XBP1CCAATantioxidant genes(Catalase,SOD1,etc)transcriptsERSECCAATNF-YXBP1NF-YNF-Ytranscriptstarget genestranscriptstranscriptsXBP1?transcriptstranscripts实验设计 胶质瘤细胞
3、系U251MG进行RNA干扰,抑制XBP1基因表达后比较细胞对外源性活性氧H2O2的敏感性;流式细胞技术检测ROS蓄积和线粒体膜电位;检测比较细胞内抗氧化分子表达水平;将细胞进行XBP1基因过表达,观察能否起到相反的效果;应用启动子突变分析探讨XBP1促抗氧化分子转录活性的机制。实验结果一对H2O2的敏感性比较00.10.250.51020406080100RandomSiXBP1H2O2 concentration(mM)survival fraction(%of total)*H2O2处理后trypan blue检测细胞生存情况 *P0.05,*P0.01实验结果一RandomSiXBP1
4、13.0100101102103104FL1-HH2O2-0.5100101102103104FL1-H60.3100101102103104FL1-H-C100101102103104FL1-H5.47.1100101102103104FL1-H-C100101102103104FL1-H29.4100101102103104FL1-HH2O2-0.5100101102103104FL1-H29.4流式细胞技术检测线粒体膜电位(MMP)对H2O2的敏感性比较实验结果二抑制XBP1特异性增强细胞对氧化应激的敏感性对活性氧诱导剂PTL的敏感性比较(*P0.05,*P0.01)0510204002
5、0406080100RandomSiXBP1 PTL concentration(uM)survival fraction(%of total)*实验结果二抑制XBP1特异性增强细胞对氧化应激的敏感性对其它2种化疗药物诱导的细胞死亡没有明显区别C01020304050randomSiXBP1cell death(%of total)VP16FK228实验结果二XBP1缺失特异性增强细胞对氧化应激的敏感性9.0100101102103104FL1-H100101102103104FL1-HRandom-C.001SiXBP1-C100101102103104FL1-H10010110210310
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