S100在宫颈癌中的表达课件.ppt
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- S100 宫颈癌 中的 表达 课件
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1、S100在宫颈癌中的表在宫颈癌中的表达及与宫颈癌浸润转达及与宫颈癌浸润转移的关系移的关系 目录 一、立论依据一、立论依据二、研究方案二、研究方案三、研究基础三、研究基础四、研究进度四、研究进度五、参考文献五、参考文献六、经费预算六、经费预算一、立论依据一、立论依据n宫颈癌宫颈癌是指发生在子宫阴道部及宫颈管的恶性肿瘤,是常见的妇科恶性肿瘤,是当今严重威胁妇女健康的主要疾病之一。n宫颈癌发生率在世界范围内呈上升趋势。肿瘤分子生物学的研究表明,宫颈癌的发生、发展与癌基因的激活及抑癌基因的失活有关。目前,随着对S100的进一步研究发现它与肿瘤的发生、转移关系密切。立项背景立项背景nS100 蛋白家族是
2、一个有21 个成员的钙结合蛋白家族,S100 蛋白通过对钙离子的调节及与靶蛋白的相互作用,在体内发挥多种生物学功能。研究发现,S100 家族与肿瘤的发生发展关系密切。n研究S100蛋白家族常用的观测指标为:S100A4,S100A8,S100A11。立项背景nS100A4 是一个与细胞分化及肿瘤的发生、转移、预后密切相关的蛋白。nS100A4、S100A8 多聚集于肿瘤的边缘,故推测它们可能与肿瘤的侵袭性有关。n近年提出S100A11 可作为一个肿瘤抑制蛋白,研究发现它在永生化成纤维细胞中的表达低于在正常成纤维细胞的表达。研究现况n研究发现,S100 家族中有15 个成员基因定位均位于稳定性差
3、的1 号染色体长臂2 区1 带(1q21)1,2 ,该区易发生各种染色体重排;且有多个S100 成员在多种肿瘤中表达异常,并与肿瘤的浸润、转移有关。n目前已发现S100A4 在乳腺癌、结直肠肿瘤、胃肿瘤、食管鳞癌、骨肉瘤等肿瘤中高表达。研究现况nS100A8 在结直肠肿瘤中高表达。n在正常成纤维细胞中注入S100A11抗体,出现DNA合成增加,S100A11 可能具有肿瘤抑制作用。n国内外对S100蛋白家族的研究越来越多,涉及的专业也越来越多,但就S100在宫颈癌中表达的研究尚未见报道。二、研究方案二、研究方案研究方案研究方案研究目标研究目标研究对象研究对象实验方案实验方案实验方法实验方法关键
4、问题关键问题创新之处创新之处可行性分析可行性分析研究目标n在本研究中应用免疫组织化学法方法检测S100A4,S100A8,S100A11在宫颈癌组织和正常子宫颈组织的表达水平的差异,寻找S100亚型S100A4、S100A8、S100A11在宫颈癌中表达的规律,探索其与宫颈癌的临床分期、组织学分级的关系,为评价宫颈癌的恶性程度、预后提供一个观测指标。研究对象n本课题的研究对象是2010年6月至2010年12月在病理科存档的未经放化疗仅仅手术患者的宫颈组织。n检测上述不同宫颈组织中、不同肿瘤直径、不同浸润深度、不同淋巴结转移情况的宫颈癌组织中S100A4,S100A8,S100A11的表达。实验
5、方案收集标本收集标本购买试剂购买试剂处理标本处理标本S100检测检测数据统计数据统计采用SPSS统计软件包采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)染色组织标本分别用10%甲醛固定,石蜡包埋,切片厚4m收集手术切除、未经放化疗并且经术后病理确诊的患者宫颈标本试剂购自福州迈新生物技术科技公司实实验验组组对对照照组组方式方式2:根据浸润深度分组:浸润:根据浸润深度分组:浸润12肌层、浸润肌层、浸润12肌层肌层方式方式1:根据肿瘤直径分组:肿瘤直径:根据肿瘤直径分组:肿瘤直径4cm、肿瘤直径、肿瘤直径4cm方式方式3:根据是否伴随周围淋巴结转移分组:无:根据是否伴随周围淋巴结转移分组:无
6、/有盆腔淋巴结转移组有盆腔淋巴结转移组因子宫肌瘤而非宫颈病变行子宫全切术的术后宫颈标本因子宫肌瘤而非宫颈病变行子宫全切术的术后宫颈标本对照组n选择同期因子宫肌瘤而非宫颈病变行子宫全切术的术后宫颈标本,患者年龄3065岁之间,平均47.5岁左右。采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶法(sP法)。n选择因宫颈病变未经放化疗仅仅手术患者,经术后病理确诊的宫颈标本,同样选择患者年龄3065岁之间,平均47.5岁左右。免疫组化方法同对照组。n根据肿瘤直径分组:肿瘤直径4cm、肿瘤直径4cm各数例;n根据浸润深度分组:浸润12肌层、浸润12肌层各数例;n根据是否伴随周围淋巴结转移分组:无盆腔淋巴
7、结转移、有盆腔淋巴结转移组各数例。实验组n用免疫组织化学的方法检测各种宫颈组织标本中S100的表达,分析其表达与宫颈癌肿瘤直径、浸润深度、有无淋巴结转的关系,以及分析S100在宫颈癌组织表达的相关性,以推测S100表达异常是否可作为评估宫颈癌浸润深度和淋巴转移状态、判断宫颈癌预后的有用指标。从而得出结论:在上述不同组织中,随着宫颈病变程度的加深,S100阳性表达率逐渐升高,探究临床上通过测S100的表达,来估计病情的严重程度,进一步判断宫颈癌的预后情况。实验方法统计学方法n 数据统计采用SPSS13.0统计软件包,宫颈 病变各组间率的比较采用X2检验、Spearman等级相关分析评价其相关性。
8、n P0.05为差异有统计学意义。关键问题n1.标本收集尽量全面,不同肿瘤直径、不同浸润深度、不同淋巴结转移情况的标本都收集到。n2.保证免疫组化反应过程的顺利。创新性n目前国内外对S100在宫颈癌发生、发展过程中的表达及相关性研究较少。寻找灵敏度和特异度均较好的诊断性分子标志物用于宫颈癌的早期诊断具有一定的创新性。课题可行性分析n可提供大量组织学标本。n导师为国内知名肿瘤专家,在妇科肿瘤的研究方面有很深造诣。n本教研室有经验丰富的导师群。n1.与本课题有关的,前期研究工作积累和已取得的研究工作成绩n2.已具备的实验条件(包括利用国家重点实验室和部门开放实验室的计划与落实情况)(1)临床病例搜
9、集容易,前期治疗处理易于实现。(2)鼠抗人S100A4,S100A8,S100A11单克隆抗体(即用 型)及即用型快捷Maxvision检测试剂盒购自福州迈 新生物技术科技公司。(3)手术术式统一,术者操作娴熟,手术室条件符合标准。(4)Leica-CM1850 型恒冷箱切片机(德国,莱卡公司)(5)超低温冰箱(日本,三洋株式会社)三、研究基础三、研究基础四、研究进度四、研究进度n2010年01月-2010年03月 查资料,完成课题 设计n2010年04月-2010年09月 收集标本,完成 综述n2010年09月-2010年11月 实验、收集数据n2010年12月-2011年02月 完成论文五
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