No4第四章实验动物微生物控制课件.ppt
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- No4 第四 实验 动物 微生物 控制 课件
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1、第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing二、实验动物微生物和寄生虫控制的等级二、实验动物微生物和寄生虫控制的等级普通动物普通动物 (conventional animal CV)清洁级动物清洁级动物 (clean animal CL)无特定病原体动物无特定病原体动物 (specific pathogen free animal,SPF)无菌动物和悉生动物无菌动物和悉生动物 (germ free animal GF)(gnotobiotic animal GN)第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing(一
2、)(一)普通动物普通动物(Conventional animal CV)(Conventional animal CV)指动物不携带主要的人兽共患病、自身的烈性传染指动物不携带主要的人兽共患病、自身的烈性传染病的病原体及体外寄生虫的实验动物。病的病原体及体外寄生虫的实验动物。饲养在普通环境下饲养在普通环境下;建立消毒防疫制度、动物房操作规程等建立消毒防疫制度、动物房操作规程等动物饲养和实验设施要符合最基本的要求动物饲养和实验设施要符合最基本的要求动物仅供作教学、或预备实验时使用。动物仅供作教学、或预备实验时使用。第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bi
3、ng2023-1-31(二)清洁级动物(二)清洁级动物(clean animal CL(clean animal CL 除普通动物应排除的病原体外,不携带对动物危害大除普通动物应排除的病原体外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。和对科学研究干扰大的病原。如:清洁级小鼠如:清洁级小鼠 排除排除8 8种细菌、种细菌、5 5种病毒、种病毒、7 7种寄生虫种寄生虫;清洁级大鼠清洁级大鼠 不应携带不应携带8 8种细菌、种细菌、2 2种病毒、种病毒、7 7种寄生虫种寄生虫第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31清洁级动物应注意如下几
4、点:清洁级动物应注意如下几点:引种引种应来源更高等级的动物应来源更高等级的动物;饲养、繁殖或使用在温、湿度可控的饲养、繁殖或使用在温、湿度可控的屏障环境;屏障环境;物品物品如笼具、垫料、器具、饲料和饮水如笼具、垫料、器具、饲料和饮水等,应等,应灭菌处理灭菌处理;要建立要建立严格严格管理制度和操作规范。管理制度和操作规范。清洁级动物已是我国目前主要使用的质量控制等级的动物,清洁级动物已是我国目前主要使用的质量控制等级的动物,已被广泛地应用于生命科学研究、新药研制和安全评价等领域已被广泛地应用于生命科学研究、新药研制和安全评价等领域的动物实验之中。的动物实验之中。第四章第四章 实验动物微生物及寄生
5、虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31(三)无特定病原体动物(三)无特定病原体动物 (Specific Pathogen Free Animal,SPF)(Specific Pathogen Free Animal,SPF)指在清洁级动物的基础上,动物不携带主要潜在感染指在清洁级动物的基础上,动物不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。或条件致病和对科学实验干扰大的病原。清洁级动物和无特定病原体动物差异:清洁级动物和无特定病原体动物差异:SPFSPF动物需要控制的微生物和寄生虫的种类更多动物需要控制的微生物和寄生虫的种类更多第四章第四章 实验动物微
6、生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31u来源:无菌剖腹产动物来源:无菌剖腹产动物u保种、饲育及使用:在保种、饲育及使用:在屏障环境屏障环境 中中u设施:设施:屏障环境屏障环境并经常性的监测并经常性的监测u从事的人员:应当接受实验动物学的专门培训。从事的人员:应当接受实验动物学的专门培训。u应用:应用:SPFSPF动物广泛地于肿瘤免疫学、病理学、药物动物广泛地于肿瘤免疫学、病理学、药物学、毒理学、生物制品研制及生物医学等方面,尤其学、毒理学、生物制品研制及生物医学等方面,尤其在放射、烧伤等医学研究领域具有特殊的应用价值。在放射、烧伤等医学研究领域具有特殊
7、的应用价值。SPFSPF动物已是国际公认的标准的实验动物动物已是国际公认的标准的实验动物.第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31(四)无菌动物和悉生动物(四)无菌动物和悉生动物无菌动物无菌动物:(germ free animal GF)(germ free animal GF)动物不携带任何以现有手段可检出的微生物和寄动物不携带任何以现有手段可检出的微生物和寄生虫,来源由普通动物经无菌剖腹产手术,幼仔置于生虫,来源由普通动物经无菌剖腹产手术,幼仔置于无菌隔离器中,由人工哺乳或代乳饲育而成。无菌隔离器中,由人工哺乳或代乳饲育而成。
8、悉生动物悉生动物:(gnotobiotic animal GN)(gnotobiotic animal GN)在无菌动物中人为地植入已知的一种或数种微生在无菌动物中人为地植入已知的一种或数种微生物的动物被称为悉生动物。物的动物被称为悉生动物。第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31种种类类培育者及育成时间培育者及育成时间小鼠小鼠Pleasants,1959大鼠大鼠Reyniers等,等,1946:Gustafsson,1948;Pleasants,1959豚鼠豚鼠Miyakawa等等,1958;Tanami,1959;Pnilli
9、ps等等,1959;Horton和和Hickey,1961;Newton和和Dewitt,1961兔兔Wostmann和和Pleasants,1959;Luckey,1963狗狗Glimsedt,1946猫猫Bleby,1969山羊、山羊、绵羊绵羊Smith,1961,1966猪猪Whitenair,等等,1960马驹马驹Drummond等等,1973猴猴Reyniers,1942鸡鸡Reyniers,1943鹌鹑鹌鹑Woodard等等,1965;Miles,1966已育成的无菌动物已育成的无菌动物 第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023
10、-1-31健康动物处死健康动物处死浸在浸在3737灭菌液中送进无菌隔离器灭菌液中送进无菌隔离器剖腹手术切除子宫剖腹手术切除子宫将子宫浸消毒液即送到另一只隔离器中将子宫浸消毒液即送到另一只隔离器中切开子宫取胎切开子宫取胎用灭菌纱布揩拭仔体并电刀断脐用灭菌纱布揩拭仔体并电刀断脐放入隔离器内人工喂乳或保姆代养放入隔离器内人工喂乳或保姆代养1 1、无菌动物技术、无菌动物技术第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-312 2、无菌动物的特征、无菌动物的特征形态学改变形态学改变消化系统消化系统 肠道肌层薄,张力低,盲肠肥大,肠粘膜肠道肌层薄,张力
11、低,盲肠肥大,肠粘膜绒毛增多,肝脏重量下降绒毛增多,肝脏重量下降循环系统循环系统 心脏相对缩小心脏相对缩小血液系统血液系统 白细胞增多白细胞增多网状内皮系统网状内皮系统 脾脏缩小,无三级滤泡,功能降低脾脏缩小,无三级滤泡,功能降低泌尿系统泌尿系统 肾脏较小肾脏较小第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31功能和代谢的改变功能和代谢的改变免疫功能免疫功能 网状内皮系统、淋巴组织发育不良,缺网状内皮系统、淋巴组织发育不良,缺乏丙种球蛋白,吞噬细胞能力弱。乏丙种球蛋白,吞噬细胞能力弱。生长率生长率 无菌鸟类比普通鸟类生长率高;无菌鸟类比普
12、通鸟类生长率高;无菌大、小鼠和普通动物相同;无菌大、小鼠和普通动物相同;无菌豚鼠、兔生长率比普通动物慢。无菌豚鼠、兔生长率比普通动物慢。生殖生殖 在生殖方面的影响在生殖方面的影响?。第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31代谢代谢 代谢周期比普通动物长;血中含氮量少,代谢周期比普通动物长;血中含氮量少,肠道对水的吸收率低肠道对水的吸收率低营养营养 无菌对豚鼠、兔的营养吸收有影响,无菌无菌对豚鼠、兔的营养吸收有影响,无菌动物肠道上皮细胞更新率低,肠壁物质交换较慢动物肠道上皮细胞更新率低,肠壁物质交换较慢,通过胆汁排泄代谢产物的速度减
13、慢通过胆汁排泄代谢产物的速度减慢寿命寿命 无菌动物比普通动物寿命长无菌动物比普通动物寿命长第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-313 3、无菌动物在生物医学研究中的应用、无菌动物在生物医学研究中的应用 微生物学研究中的应用微生物学研究中的应用 研究某些疾病的病原研究某些疾病的病原:提供组织培养的无菌组织;:提供组织培养的无菌组织;研究病原体的致病作用与机体的关系。研究病原体的致病作用与机体的关系。如:将溶组织阿米巴接种到无菌豚鼠的盲肠内如:将溶组织阿米巴接种到无菌豚鼠的盲肠内不能引起感染。在普通豚鼠中却能引起致死性感染不能引起感染
14、。在普通豚鼠中却能引起致死性感染 探讨单一病原体的致病作用探讨单一病原体的致病作用 如猫瘟病毒正常猫易感染,无菌则不易受感如猫瘟病毒正常猫易感染,无菌则不易受感 第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31u微生物学研究中的应用微生物学研究中的应用 研究微生物间的拮抗作用研究微生物间的拮抗作用 如:霍乱弧菌单菌感染无菌幼豚鼠可使其死亡;但同如:霍乱弧菌单菌感染无菌幼豚鼠可使其死亡;但同时感染产气荚膜杆菌时,动物不发生死亡。时感染产气荚膜杆菌时,动物不发生死亡。福氏痢疾杆菌单菌经口感染无菌幼豚鼠时死亡;福氏痢疾杆菌单菌经口感染无菌幼豚鼠
15、时死亡;但先经口接种活的大肠杆菌,无菌豚鼠不致死亡,但先经口接种活的大肠杆菌,无菌豚鼠不致死亡,肠道里只能检出大肠杆菌,而没有痢疾杆菌。肠道里只能检出大肠杆菌,而没有痢疾杆菌。病毒病研究病毒病研究第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31免疫学研究中的应用免疫学研究中的应用 (免疫学研究是发展无菌动物的原因之一)免疫学研究是发展无菌动物的原因之一)免疫功能与机体感受性的关系免疫功能与机体感受性的关系 特异性抗细菌抗体;特异性抗细菌抗体;肺泡巨噬细胞的活力;肺泡巨噬细胞的活力;唾液中的溶菌酶和白细胞;唾液中的溶菌酶和白细胞;对内毒素的
16、全身反应等都明显降低对内毒素的全身反应等都明显降低第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31研究丙种球蛋白和特异性抗体:研究丙种球蛋白和特异性抗体:无菌动物血清中无菌动物血清中 一球蛋白含量低。一球蛋白含量低。用无抗原性饲料喂无菌动物,小鼠血清中完用无抗原性饲料喂无菌动物,小鼠血清中完全缺乏丙种球蛋白。全缺乏丙种球蛋白。无菌小猪中用无抗原性的饲料时,血清里完无菌小猪中用无抗原性的饲料时,血清里完全没有丙种球蛋白和特异性抗体存在。全没有丙种球蛋白和特异性抗体存在。第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zha
17、ng Bing2023-1-31放射医学研究放射医学研究 放射致无菌动物粘膜损伤较普通动物轻放射致无菌动物粘膜损伤较普通动物轻微。微。?在营养代谢研究中的应用在营养代谢研究中的应用 探讨细菌和维生素的关系探讨细菌和维生素的关系 许多营养成分依靠肠许多营养成分依靠肠道细菌降解。肠道细菌可合成道细菌降解。肠道细菌可合成VBVB、VK VK,应用无应用无菌动物可研究那些菌可合成菌动物可研究那些菌可合成VBVB、VK VK 探讨细菌与胆汁酸代谢的关系探讨细菌与胆汁酸代谢的关系 微生物可使胆汁微生物可使胆汁酸发生化学变化,减少其再吸收。酸发生化学变化,减少其再吸收。第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控
18、制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31在肿瘤研究中的应用在肿瘤研究中的应用免疫抑制剂的研究:免疫抑制剂的研究:因普通动物用免疫抑制剂可降低其抵抗力,致其继因普通动物用免疫抑制剂可降低其抵抗力,致其继发感染而死亡;要用无菌动物进行。发感染而死亡;要用无菌动物进行。用于致癌作用和微生物关系的研究:用于致癌作用和微生物关系的研究:如:大肠杆菌产物乙基硫氨酸为致癌物;如:大肠杆菌产物乙基硫氨酸为致癌物;无菌大鼠口服苏铁素无致癌性,普通大鼠口服苏铁素可无菌大鼠口服苏铁素无致癌性,普通大鼠口服苏铁素可诱发结肠和其他部位的癌变诱发结肠和其他部位的癌变 尿道癌在普通实验动物中少见,
19、但在无菌动物中却较常尿道癌在普通实验动物中少见,但在无菌动物中却较常见(如无菌大鼠)见(如无菌大鼠)。可能的原因:微生物可产生或改变化学物质的致癌性微生物可产生或改变化学物质的致癌性第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31要求要求第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1
20、-31 三、不同等级实验动物的微生物要求三、不同等级实验动物的微生物要求第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31第四章第四章 实验动物微生物及寄生虫控制实验动物微生物及寄生虫控制Zhang Bing2023-1-31第四章第
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