第二章药物的鉴别试验药物分析学习考试资料精选课件.ppt

1、第二章药物的鉴别试验药物分析学习考试资料优选第二章药物的鉴别试验药物分析学习考试资料二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目（一）性状（一）性状反映了药物特有的物理性质，包括反映了药物特有的物理性质，包括药品的外观、溶解度以及物理常数等。药品的外观、溶解度以及物理常数等。是药品质量重要指标之一是药品质量重要指标之一.第二章第二章二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目1.1.外观外观是指药品的外表感观和色泽，包括是指药品的外表感观和色泽，包括药品的聚集状态、晶型、色泽及臭、味药品的聚集状态、晶型、色泽及臭、味等性质。等性质。2.2.溶解度溶解度 是药品的一种物理性质。是药品的一种物理性质。在一定程度上

2、反映了药物的纯度。在一定程度上反映了药物的纯度。第二章第二章二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目极易溶解溶质极易溶解溶质1g1g（mlml）能在）能在溶剂不到溶剂不到1ml1ml溶解；溶解；几乎不溶或不溶溶质几乎不溶或不溶溶质1g1g（mlml）在溶剂在溶剂10000ml10000ml中不能完全溶解。中不能完全溶解。第二章第二章二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目3.3.物理常数物理常数是评价药品质量的主是评价药品质量的主要指标之一。要指标之一。a a、熔点、熔点:固体有机药物的重要物理常固体有机药物的重要物理常数。数。b b、比旋度、比旋度 偏振光透过偏振光透过1dm1dm、1g1gmlml

3、 的溶液，在一定波长和温度下测得的旋光的溶液，在一定波长和温度下测得的旋光度称为比旋度。度称为比旋度。第二章第二章二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目 是反映手性药物特性及其纯是反映手性药物特性及其纯度的主要指标。度的主要指标。第二章第二章由由=c cl l 求出求出 D20 D20二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目C.C.吸收系数吸收系数 在一定的波长、溶剂和在一定的波长、溶剂和温度下，吸光物质在单位浓度、温度下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度的吸收度为吸收系单位液层厚度的吸收度为吸收系数。数。表示方式：摩尔吸收系数表示方式：摩尔吸收系数 百分吸收系数百分吸收系数第二章第二章二、二、鉴别

4、试验的项目鉴别试验的项目 第二章第二章百分吸收系数百分吸收系数 在一定条件下，溶液浓在一定条件下，溶液浓度为度为1 1（W/V),W/V),厚度为厚度为1cm1cm时的时的吸收度。吸收度。%cmE1%cmE1A=l c二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目 百分吸收系数是吸光物质的重要百分吸收系数是吸光物质的重要物理常数，不仅用于考查原料药的质物理常数，不仅用于考查原料药的质量，同时可作为药物含量测定的依据。量，同时可作为药物含量测定的依据。第二章第二章不适用于多组分药物或存在多晶现象难以控制转晶条件的药物。中的紫外吸收在272nm处为峰,216nm处 与碘化铋钾的沉淀反应BP采用标准图谱对照法

5、利用衍射线间的距离及其相对强度可以进行晶体物质的定性或定量分析（2）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有机酸或碱干燥，将红外图谱与相应的有机酸碱对照图谱比较。证实某一种药物的依据011nm的电磁波。Xray diffraction第二章药物的鉴别试验药物分析学习考试资料（2）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有机酸或碱干燥，将红外图谱与相应的有机酸碱对照图谱比较。Xray diffraction根据每一种药物结构的差异及其引起的理化性质不同,选用某些灵敏的定性反应,来鉴别药物真伪.a、熔点:固体有机药物的重要物理常数。对于固体药品要注

6、意晶型的影响；（1）直接用有机溶剂提取主成分，去除辅料干扰后，将红外图谱与对照图谱比较。二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目头孢曲松钠头孢曲松钠 第二章第二章【性状性状】本品为白色或类白色结本品为白色或类白色结晶性粉末；无臭。晶性粉末；无臭。本品在水中易溶，在甲醇中微溶，本品在水中易溶，在甲醇中微溶，在氯仿或乙醚中几乎不溶。在氯仿或乙醚中几乎不溶。比旋度比旋度 取本品，精密称定，加水取本品，精密称定，加水溶解并制成每溶解并制成每1ml1ml中含中含10mg10mg的溶的溶液，依法测定液，依法测定(附录附录 E)E)，比旋，比旋度为度为153153至至170170。二、二、鉴别试验的项目鉴别试验

7、的项目头孢曲松钠头孢曲松钠 第二章第二章吸收系数吸收系数 取本品，精密称定，加取本品，精密称定，加水溶解并制成每水溶解并制成每1ml1ml中约含中约含10g10g的溶液，照分光光度的溶液，照分光光度 法法(附录附录 A)A)，在，在241nm241nm的波长处测定吸收的波长处测定吸收度，吸收系数度，吸收系数()()为为495545495545。%cmE1二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目（二）一般鉴别试验（二）一般鉴别试验 是依据某一类药物的结构和理化是依据某一类药物的结构和理化性质的特征性质的特征,通过化学反应来鉴别通过化学反应来鉴别药物真伪药物真伪.v 根据阴、阳离子根据阴、阳离子（钠盐

8、、钙盐、（钠盐、钙盐、硫酸盐、氯化物等）硫酸盐、氯化物等）的特殊反应。的特殊反应。v 采用典型的官能团反应采用典型的官能团反应 （芳香第一胺、丙二酰脲）芳香第一胺、丙二酰脲）。第二章第二章二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目（三）专属鉴别试验（三）专属鉴别试验 证实某一种药物的依据证实某一种药物的依据 根据每一种药物结构的差异及根据每一种药物结构的差异及其引起的理化性质不同其引起的理化性质不同,选用某些选用某些灵敏的定性反应灵敏的定性反应,来鉴别药物真伪来鉴别药物真伪.第二章第二章二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目第二章第二章HNNHOOC2H5OC2H5HNNHOOC2H5O苯巴比妥HNN

9、OOONaCH2CHCH2C3H7司可巴比妥钠巴比妥二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目乙胺嘧啶 供试品在0.a、熔点:固体有机药物的重要物理常数。些酰胺类药物,可经强碱处理后加热产生氨气.不适用于多组分药物或存在多晶现象难以控制转晶条件的药物。（三）色谱法（HPLC GC TLC)中的紫外吸收在272nm处为峰,216nm处制剂的鉴别注意辅料的干扰，可提取分离后压片。些酰胺类药物,可经强碱处理后加热产生氨气.近红外光谱法（nearinfrared spectrophotomestry)【性状】本品为白色或类白色结晶性粉末；a、熔点:固体有机药物的重要物理常数。Typical Powder P

10、atterns Obtained for Four Solid Phases of Ampicillin中国药典采用标准图谱对照法证实某一种药物的依据第二章药物的鉴别试验药物分析学习考试资料大多数胺（铵）类药物、酰尿类以及某通过测定被测物质在近红外谱区7502500nm（128004000cm1）的特征光谱，利用适当的化学计量学方法提取相关信息后，对被测物质进行定性、定量的一种分析技术。常见制剂采用IR鉴别的方法 在适当的溶剂中药物本身在可见光下发射荧光一般鉴别试验一般鉴别试验区别不同类别的药物区别不同类别的药物.第二章第二章专属鉴别试验专属鉴别试验则是在一般鉴别试验的基础上则是在一般鉴别试验

11、的基础上,区别同类药物的各个单体区别同类药物的各个单体.二、二、鉴别试验的项目鉴别试验的项目 第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法鉴别方法要鉴别方法要求求 专属性强专属性强 耐用性好耐用性好 灵敏度高灵敏度高 简便快速简便快速 化学法化学法 色谱法色谱法 生物学法生物学法第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法 光谱法光谱法1.1.呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 三氯化铁呈色反应三氯化铁呈色反应第二章第二章HOOCH3N对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法（一）化学鉴别法（一）化学鉴别法 重氮化重氮化-偶合呈色反应偶合呈色反应第二章第二章HOOCH3N

12、对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法 2.2.沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 与金属离子的沉淀反应与金属离子的沉淀反应 与碘化铋钾的沉淀反应与碘化铋钾的沉淀反应 其它沉淀反应其它沉淀反应第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法3.3.气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法大多数胺（铵）类药物、酰尿类以及某大多数胺（铵）类药物、酰尿类以及某 些酰胺类药物些酰胺类药物,可经强碱处理后加热产生氨气可经强碱处理后加热产生氨气.化学结构含硫药物化学结构含硫药物,可经强酸处理后加热可经强酸处理后加热 产生硫化氢气体产生硫化氢气体.第二章第二章HNNNHNSH2N7H2O

13、硫鸟嘌呤硫鸟嘌呤 巴比妥类药物巴比妥类药物三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法4.4.荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 在适当的溶剂中药物本身在可见在适当的溶剂中药物本身在可见光下发射荧光光下发射荧光硫酸奎宁在硫酸溶液中显蓝色的荧光硫酸奎宁在硫酸溶液中显蓝色的荧光 药物与试剂反应后发射荧光药物与试剂反应后发射荧光维生素维生素B1B1的硫色素反应的硫色素反应第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法膜法：液体样品夹于KBr片间反映了药物特有的物理性质，包括药品的外观、溶解度以及物理常数等。不适用于多组分药物或存在多晶现象难以控制转晶条件的药物。制剂的鉴别注意辅料的干扰，可提取分离后压片。硫酸奎

14、宁在硫酸溶液中显蓝色的荧光是依据某一类药物的结构和理化性质的特征,通过化学反应来鉴别药物真伪.规定362nm与381nm处吸收度比值不大于0.采用典型的官能团反应测定最大吸收波长,或同时测定最小吸收波长.X-ray照射晶体化合物可发生衍射。对于固体药品要注意晶型的影响；（2）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有机酸或碱干燥，将红外图谱与相应的有机酸碱对照图谱比较。a、熔点:固体有机药物的重要物理常数。6、381nm与405nm波长比值不大于0.Typical Powder Patterns Obtained for Four Solid Phases of Amp

15、icillin硫酸奎宁在硫酸溶液中显蓝色的荧光高效液相色谱法(HPLC)本品在水中易溶，在甲醇中微溶，在氯仿或乙醚中几乎不溶。011nm的电磁波。（2）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有机酸或碱干燥，将红外图谱与相应的有机酸碱对照图谱比较。应用广泛，适用于复杂环境下药物有效成分鉴别,具有分离、分析同时进行的特点.（二（二)光谱鉴别法光谱鉴别法1.1.紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法测定最大吸收波长测定最大吸收波长,或同时测或同时测定最小吸收波长定最小吸收波长.第二章第二章乙胺嘧啶乙胺嘧啶 供试品在供试品在0.1mol/L0.1mol/L盐酸介质盐酸介质中的紫外吸收在

16、中的紫外吸收在272nm272nm处为峰处为峰,216nm,216nm处处有最小吸收有最小吸收.三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法 规定吸收波长和吸收度比值法规定吸收波长和吸收度比值法 两性霉素两性霉素B B在在362nm、381nm、405nm波长处有最大吸收波长处有最大吸收.规定规定362nm与与381nm处吸收度比值不大处吸收度比值不大于于0.6、381nm与与405nm波长比值波长比值不大于不大于0.9.第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法第二章第二章 规定一定浓度供试品在最大吸规定一定浓度供试品在最大吸收收 波长处的吸收度波长处的吸收度.三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的

17、方法法莫替丁，制成每法莫替丁，制成每1ml1ml含含15g15g的溶的溶液，在液，在265nm265nm2nm2nm的波长处有最大的波长处有最大吸收，其吸收度为吸收，其吸收度为0.45-0.480.45-0.48。2 2 红外光谱法鉴别法红外光谱法鉴别法第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法 适用范围：适用范围：主要用于组分单一、结构明确主要用于组分单一、结构明确的原料药，特别适合于用其它方法的原料药，特别适合于用其它方法不易区分的同类药物不易区分的同类药物。不适用于多组分药物或存在不适用于多组分药物或存在多晶现象难以控制转晶条件的药物。多晶现象难以控制转晶条件的药物。2 2 红外光

18、谱法红外光谱法（2 2）测定方法）测定方法 中国药典采用标准图谱对照法中国药典采用标准图谱对照法 原料药的鉴别：除另有规定外，原料药的鉴别：除另有规定外，按照按照药品红外光谱集药品红外光谱集各卷所各卷所收载各光谱图所规定的制备方法收载各光谱图所规定的制备方法制备。制备。第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法 2 2 红外光谱法红外光谱法（2 2）测定方法）测定方法a.a.USP USP 采用对照品法；采用对照品法；BPBP采用标采用标准图谱对照法准图谱对照法第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法 2 2 红外光谱法红外光谱法（3 3）样品制备方法样品制备方法 压片法：与压片

19、法：与KBrKBr或或KClKCl细粉混合细粉混合 糊法：糊状液体夹于糊法：糊状液体夹于KBrKBr片间片间 膜法：液体样品夹于膜法：液体样品夹于KBrKBr片间片间a.a.溶液法：将液体样品置于液体池溶液法：将液体样品置于液体池第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法 2 2 红外光谱法红外光谱法（4 4）应用光谱图对照时应注意的问）应用光谱图对照时应注意的问题题 使用前用聚苯乙烯薄膜进行校正；使用前用聚苯乙烯薄膜进行校正；测定前注意用红外灯干燥测定前注意用红外灯干燥KBrKBr及样品；及样品；对于固体药品要注意晶型的影响；对于固体药品要注意晶型的影响；对于盐酸盐的样品可采用对于盐酸

20、盐的样品可采用KClKCl基质；基质；a.a.制剂的鉴别注意辅料的干扰，可提取制剂的鉴别注意辅料的干扰，可提取分离后压片。分离后压片。第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法 常见制剂采用常见制剂采用IR鉴别的方法鉴别的方法n（1）直接用有机溶剂提取主成分，去除）直接用有机溶剂提取主成分，去除辅料干扰后，将红外图谱与对照图谱比辅料干扰后，将红外图谱与对照图谱比较。较。n（2）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有机酸或碱干燥，将红外图谱与相应的有机酸或碱干燥，将红外图谱与相应的有机酸碱对照图

21、谱比较。机酸碱对照图谱比较。n如氨茶碱片剂，磷酸氯喹片如氨茶碱片剂，磷酸氯喹片三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法3.3.近红外光谱法（近红外光谱法（nearnearinfrared spectrophotomestry)infrared spectrophotomestry)通过测定被测物质在近红外谱区通过测定被测物质在近红外谱区7507502500nm2500nm（12800128004000cm4000cm1 1）的）的特征光谱，利用适当的化学计量学方特征光谱，利用适当的化学计量学方法提取相关信息后，对被测物质进行法提取相关信息后，对被测物质进行定性、定量的一种分析技术。定性、定量的一种

22、分析技术。Ch.PCh.P已收载已收载NIRSNIRS的指导原则的指导原则4.4.原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 利用由待测元素灯发出的特征谱线通过供利用由待测元素灯发出的特征谱线通过供试品经原子化产生的原子蒸汽时，根据供试液试品经原子化产生的原子蒸汽时，根据供试液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减在特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度可进行定性、定量分析。弱程度可进行定性、定量分析。5.5.核磁共振法核磁共振法 通过测定供试品指定基团上的质子峰的化通过测定供试品指定基团上的质子峰的化学位移学位移和偶合常数进行药物鉴别。和偶合常数进行药物鉴别。6.X6.X射线粉末衍射法射线

23、粉末衍射法 Xray diffraction X-rayX-ray波长为波长为0.010.011nm1nm的电磁波。的电磁波。X-rayX-ray照射晶体化合物可发生衍射。照射晶体化合物可发生衍射。具有单晶或多晶的化合物，均有其特定具有单晶或多晶的化合物，均有其特定的的X Xrayray衍射图谱。衍射图谱。利用衍射线间的距离及其相对强度可以利用衍射线间的距离及其相对强度可以进行晶体物质的定性或定量分析进行晶体物质的定性或定量分析Typical Powder Patterns Obtained for Four Solid Phases of Ampicillin第二章第二章三、三、鉴别试验的方

24、法鉴别试验的方法7.7.质谱法鉴别法质谱法鉴别法 通过离子化技术，使物质形成分子通过离子化技术，使物质形成分子离子，再继续有规律的裂解而形成不离子，再继续有规律的裂解而形成不同质量的碎片离子，可推断化合物的同质量的碎片离子，可推断化合物的分子式，及相应的结构信息。分子式，及相应的结构信息。Ch.PCh.P收载了收载了MSMS法法 应用广泛，适用于复杂环应用广泛，适用于复杂环境下药物有效成分鉴别境下药物有效成分鉴别,具有分具有分离、分析同时进行的特点离、分析同时进行的特点.一般在检查或含量测定项一般在检查或含量测定项下，采用色谱法，鉴别也采用下，采用色谱法，鉴别也采用此法。此法。第二章第二章（三

25、）色谱法（三）色谱法（HPLC GC TLC)HPLC GC TLC)三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法第二章第二章三、三、鉴别试验的方法鉴别试验的方法 薄层色谱法薄层色谱法 供试品与同浓度的对照品比较供试品与同浓度的对照品比较 供试品溶液与对照品溶液等体积混合比较供试品溶液与对照品溶液等体积混合比较 与供试品化学结构相似的药物对照品比较与供试品化学结构相似的药物对照品比较 供试品与其化学结构相似的药物等体积混供试品与其化学结构相似的药物等体积混合比较合比较ab系统适用性实验系统适用性实验 比移值（比移值（R Rf f）分离效能：在对照品与结构相似药分离效能：在对照品与结构相似药物的对照品制

26、成混合对照溶液的色物的对照品制成混合对照溶液的色谱中，应显示两个清晰的斑点。谱中，应显示两个清晰的斑点。如：如：醋酸泼尼松醋酸泼尼松 醋酸可的松醋酸可的松（2）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有机酸或碱干燥，将红外图谱与相应的有机酸碱对照图谱比较。Typical Powder Patterns Obtained for Four Solid Phases of Ampicillin硫酸奎宁在硫酸溶液中显蓝色的荧光供试品与同浓度的对照品比较常见制剂采用IR鉴别的方法产生硫化氢气体.（2）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有机酸或碱干燥

27、，将红外图谱与相应的有机酸碱对照图谱比较。规定吸收波长和吸收度比值法百分吸收系数是指药品的外表感观和色泽，包括药品的聚集状态、晶型、色泽及臭、味等性质。与金属离子的沉淀反应（2）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有机酸或碱干燥，将红外图谱与相应的有机酸碱对照图谱比较。在一定的波长、溶剂和温度下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度的吸收度为吸收系数。Typical Powder Patterns Obtained for Four Solid Phases of Ampicillin区别同类药物的各个单体.反映了药物特有的物理性质，包括药品的外观、溶解度以及物理常数等

28、。中的紫外吸收在272nm处为峰,216nm处 药物与试剂反应后发射荧光近红外光谱法（nearinfrared spectrophotomestry)Typical Powder Patterns Obtained for Four Solid Phases of Ampicillin 在适当的溶剂中药物本身在可见光下发射荧光化学法 重氮化-偶合呈色反应溶液法：将液体样品置于液体池（三）色谱法（HPLC GC TLC)中的紫外吸收在272nm处为峰,216nm处通过离子化技术，使物质形成分子离子，再继续有规律的裂解而形成不同质量的碎片离子，可推断化合物的分子式，及相应的结构信息。应用广泛，适用

29、于复杂环境下药物有效成分鉴别,具有分离、分析同时进行的特点.简便快速 规定一定浓度供试品在最大吸收区别同类药物的各个单体.重氮化-偶合呈色反应通过离子化技术，使物质形成分子离子，再继续有规律的裂解而形成不同质量的碎片离子，可推断化合物的分子式，及相应的结构信息。规定362nm与381nm处吸收度比值不大于0.如：醋酸泼尼松 醋酸可的松测定前注意用红外灯干燥KBr及样品；供试品与同浓度的对照品比较a、熔点:固体有机药物的重要物理常数。比旋度 取本品，精密称定，加水溶解并制成每1ml中含10mg的溶液，依法测定(附录 E)，比旋度为153至170。硫酸奎宁在硫酸溶液中显蓝色的荧光根据每一种药物结构

30、的差异及其引起的理化性质不同,选用某些灵敏的定性反应,来鉴别药物真伪.反映了药物特有的物理性质，包括药品的外观、溶解度以及物理常数等。与碘化铋钾的沉淀反应高效液相色谱法(HPLC)在一定程度上反映了药物的纯度。则是在一般鉴别试验的基础上,本品在水中易溶，在甲醇中微溶，在氯仿或乙醚中几乎不溶。P已收载NIRS的指导原则乙胺嘧啶 供试品在0.第二章药物的鉴别试验药物分析学习考试资料区别不同类别的药物.偏振光透过1dm、1gml大多数胺（铵）类药物、酰尿类以及某产生硫化氢气体.第二章药物的鉴别试验药物分析学习考试资料膜法：液体样品夹于KBr片间对于固体药品要注意晶型的影响；（2）对于有机酸的碱盐或有机碱的酸盐，直接取沉淀干燥，采用有机溶剂提取有机酸或碱干燥，将红外图谱与相应的有机酸碱对照图谱比较。区别不同类别的药物.压片法：与KBr或KCl细粉混合2.高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)供试品和对照品色谱峰保留时供试品和对照品色谱峰保留时间（间（t tR R）一致）一致.3.气相色谱法气相色谱法 (GC)(GC)同同HPLCHPLC要求要求