高速冷冻离心机的原理及应用讲解课件.ppt
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1、高速冷冻离心机高速冷冻离心机技术操作训练技术操作训练v掌握离心分离的原理掌握离心分离的原理v熟悉离心机主机的基本构件及操作程序熟悉离心机主机的基本构件及操作程序v了解离心机的安全使用和日常保养了解离心机的安全使用和日常保养【实验目的】【实验目的】离心分离原理离心分离原理【实验原理】【实验原理】当悬浮液绕轴旋转时,悬浮中的微粒就同时受到背向转轴方向的离心力和正向转轴方向的介质浮力的双向作用,微粒的运动轨迹取决于所受合力的方向。根据物理学原理推导可知:F合=F离-F介=Vr4p2N2r/3600-Vs4p2N2r/3600=V4p2N2r/3600(r-s)式中V表示微粒的体积,N表示每分钟的转数
2、,r表示微粒至转轴的距离,p与s分别表示微粒与其介质的密度。当r=s时,F合=0,微粒受力平衡,故将维持距转轴恒定的距离转动,也就不可能被分离开;当rs时,F合s时,F合0,微粒主要受离心力作用而向远离转轴方向移动,直至沉淀到容器底部。因此,因此,rsrs是微粒从悬浮液中进行离心分离的基本条件。使用普通是微粒从悬浮液中进行离心分离的基本条件。使用普通离心机的根本目的就在于使这样的微粒从悬浮液中分离出来。离心机的根本目的就在于使这样的微粒从悬浮液中分离出来。离心力及其作用离心力及其作用 从理论上讲,凡是能通过离心分离的微粒在悬浮液静置时,受重力与浮从理论上讲,凡是能通过离心分离的微粒在悬浮液静置
3、时,受重力与浮力的共同作用也能自动沉降而得以分离,只是分离所需时间较长,效果较差,力的共同作用也能自动沉降而得以分离,只是分离所需时间较长,效果较差,沉降本领较弱。一般常用相对离心力(沉降本领较弱。一般常用相对离心力(RCFRCF)的大小来表示离心分离的本领强)的大小来表示离心分离的本领强弱。相对离心力是指微粒在离心分离时所受的合力(弱。相对离心力是指微粒在离心分离时所受的合力(F F合合)与在静置分离时所)与在静置分离时所受合力(受合力(FF合合)的比值。)的比值。FF合合=Vr=Vrg-Vsg-Vsg=Vgg=Vg(r-sr-s)故故RCF=FRCF=F合合/F/F合合=4p=4p2 2N
4、 N2 2r/3600gr/3600g 由于由于4p4p2 2N N2 2r/3600r/3600就是微粒处的角加速度,所以相对离心力又是微粒在离就是微粒处的角加速度,所以相对离心力又是微粒在离心时的角加速度与在静置时的重力加速度之比。很明显,只要调节心时的角加速度与在静置时的重力加速度之比。很明显,只要调节N N或或/和和r r就就可影响可影响RCFRCF的值,从而改变其离心分离本领。实验中的值,从而改变其离心分离本领。实验中RCFRCF的值常用多少倍于重的值常用多少倍于重力加速度表示,如力加速度表示,如10001000g g。离心力与作用时间的积累效应离心力与作用时间的积累效应 微粒在悬浮
5、液中被分离的速度快慢除与转动的转数大小有关外,还与离心时间长短有关,即离心力作用于微粒上具有时间积累效应。衡量时间积累效应高低的物理量常用冲量矩的大小来表示,冲量矩(Lt)的值等于离心力的力矩(L)与离心时间(t)的乘积,依物理学原理可推导出:Lt=(2pRn/60)2t,即冲量矩的大小与转速(N)的平方和时间的乘积成正比。由此可见,在同一离心转头的条件下(N,r一定),转动时间越长,冲量矩越大,分离效果越好。对同一悬浮液,因转动的时间不同而有不同的冲量矩,若调节影响冲量矩的两个可变因子即转速(N)和时间(t),可以在较低转、速较长时间得到较高转速、较短时间同样的冲量矩,从而得到相同的分离效果
6、。但是,若转速相差太大,则会受扩散作用影响而使较低转速离心的分离效果下降。实验过程中,欲使沉淀与母液分开,常使用过滤和离心两种方法。实验过程中,欲使沉淀与母液分开,常使用过滤和离心两种方法。但在下述情况下,使用离心方法效果较好。但在下述情况下,使用离心方法效果较好。v 沉淀有粘性或母液粘稠。沉淀有粘性或母液粘稠。v 沉淀颗粒小,容易透过滤纸。沉淀颗粒小,容易透过滤纸。v 沉淀量过多而疏松。沉淀量过多而疏松。v 沉淀量很少,需要定量测定。或母液量很少,分离时应减少损失。沉淀量很少,需要定量测定。或母液量很少,分离时应减少损失。v 沉淀和母液必须迅速分开。沉淀和母液必须迅速分开。v 一般胶体溶液。
7、一般胶体溶液。离心技术概述离心技术概述 离心技术就其原理来说属于一种物理的技术手段,目前在农业、医药、食品卫生、生物制品、生物工程、细胞生物学、分子生物学和生物化学等诸多领域里得到了广泛的应用,使离心机,尤其是超速离心机已成为现代生物化学实验室中不可缺少的必备设备。为了满足生产、科研和教学的不同需要,不同类型、不同规格和不同用途的离心机应运而生,且随着整个科学技术的发展不断地得到改进、提高和更新。离心机的种类离心机的种类工业用途工业用途 低速(低速(N 30,000 rpm)实验用途实验用途分析用途:分析超速离心机分析用途:分析超速离心机制备用途制备用途普通离心机普通离心机水平式离心机水平式离
8、心机斜角式离心机斜角式离心机冰冻离心机冰冻离心机大容量冷冻离心机大容量冷冻离心机高速冷冻离心机高速冷冻离心机超高速冷冻离心机超高速冷冻离心机不同类型的离心机不仅具有不同的构造,而且具有不同的应用范围。普通离心机的最大转速在10000 rpm以下,最大相对离心力小于10000g,容量从几十毫升至几升,分离形式是固液沉降分离,转子有角式和外摆式,其转速不能严格控制,通常不带冷冻系统,于室温下操作。这种离心机多用交流整流电动机驱动,电机碳刷易磨损,转速由电压调压器调节,起动电流大,速度升降不均匀,一般转头是置于一个硬质钢轴上,因此离心前精确平衡离心管及其内容物极为重要,否则易造成的离心机损坏。在现代
9、实验室中,普通离心机通常在下列情况下用于物质的分离和提取:(1)沉淀有粘滞;(2)沉淀颗粒小,容易透过滤纸;(3)沉淀量过多而疏松;(4)沉淀量过少,而需要定量分析;(5)母液粘稠;(6)母液量很少,分离时需减少损失;(7)沉淀和母液需迅速分离;(8)一般胶体溶液。高速离心机能够对样品溶液中的悬浮物质进行高纯度的分离、浓缩、精制和提取,多用于血液、细胞、蛋白质、酶、病毒、激素等的分离制备和收集。高速冷冻离心机一般最大转速为1000030000rpm,最大相对离心力为90000g左右,最大容量可达3升,分离形式也是固液沉降分离,转头配有各种角式转头、荡平式转头、区带转头、垂直转头和大容量连续流动
10、式转头、一般都有制冷系统,以消除高速旋转时转头与空气之间摩擦而产生的热量,离心室的温度可以调节和维持在040,转速、温度和时间都可以严格准确地控制,并有指针或数字显示,通常用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉淀物等的分离与纯化工作,但不能有效地沉降病毒、小细胞器(如核蛋白体)或单个分子。超速离心机目前主要用于:超速离心机目前主要用于:(1 1)测定生物大分子和高分子聚合物的沉降系数()测定生物大分子和高分子聚合物的沉降系数(S S)、扩散系数)、扩散系数(D D)和分子量()和分子量(M M););(2 2)研究生物大分子的大小和形状;)研究生物大分子的大小和形状;(3 3
11、)研究生物大分子的缔合、离解和降解;)研究生物大分子的缔合、离解和降解;(4 4)追随分离高分子的提纯过程,鉴定其均一程度,测定其组成)追随分离高分子的提纯过程,鉴定其均一程度,测定其组成和浓度;和浓度;(5 5)分离提纯血清脂蛋白;)分离提纯血清脂蛋白;(6 6)发现异常血清蛋白质成分等。)发现异常血清蛋白质成分等。离心机的构造与转速的关系构造低速离心机 高速冷冻离心机 超速离心机壳体部分(转头室、转头)壳体部分(转头室、转头)控制部分(电机及传动装控制部分(电机及传动装置、速度控制、安全保护置、速度控制、安全保护装置)装置)冷冻部分(制冷机)冷冻部分(制冷机)真空部分(真空泵、扩散真空部分
12、(真空泵、扩散泵)泵)辅助装置(增速辅助、密辅助装置(增速辅助、密度成型器)度成型器):有;:有;:无。:无。Sigma 3K-30 高速冷冻离心机高速冷冻离心机Sigma 1-15K 高速冷冻离心机高速冷冻离心机简要说明简要说明A A所有相关参数,如转速、离心力、时间和温度均可以设定所有相关参数,如转速、离心力、时间和温度均可以设定B B转速、离心力参数可以放大观察转速、离心力参数可以放大观察C C适用转头的参数可以检索显示适用转头的参数可以检索显示D D离心设定程序可以调用修改离心设定程序可以调用修改技术指标技术指标 Sigma 3K-30 高速冷冻离心机高速冷冻离心机详细说明:详细说明:
13、1 1、台式高速冷冻离心机,最大离心力可达、台式高速冷冻离心机,最大离心力可达60000 g60000 g以上以上2 2、离心转速范围、离心转速范围100 rpm 100 rpm 30000 rpm30000 rpm,设定步长,设定步长1 rpm1 rpm3 3、所有可能的运行参数均可以任意设定、所有可能的运行参数均可以任意设定4 4、离心转头自动识别,可以防止转子过速运转、离心转头自动识别,可以防止转子过速运转5 5、多种规格角转头可选,适配离心管范围从微量管到、多种规格角转头可选,适配离心管范围从微量管到85 mL(1085 mL(10mL)6 6、可选配一种水平转头、可选配一种水平转头7
14、 7、配置高效致冷系统,温度范围、配置高效致冷系统,温度范围-20-20 40408 8、无需离心机运转即可完成转头预冷、无需离心机运转即可完成转头预冷9 9、无碳刷免维护变频电机,使用寿命长、无碳刷免维护变频电机,使用寿命长1010、高品质的电机系统、高品质的电机系统1111、自动离心机盖闭锁功能、自动离心机盖闭锁功能1212、产品符合、产品符合IEC 1010IEC 1010等国际安全标准等国际安全标准Sigma 3K-30 高速冷冻离心机高速冷冻离心机技技 术术 指指 标标 Sigma 1-15K-高速冷冻离心机高速冷冻离心机台式高速冷冻离心机,用于微量管的离心沉降处理24孔水平转头,用
15、于1.5mL至2.2mL微量离心管的离心30孔或24孔角转头,包括离心盖40孔角转头,用于0.25mL至0.4mL微量离心管的离心最高转速时最低温度:4 免维护无碳刷变频电机驱动,并具有“正常”和“柔和”制动功能液晶显示运行温度、离心速度和离心力及时间预设运行时间最长可达30分钟或持续运转以秒为单位显示“短时运转”钢制机身,保证安全性和稳定性,低噪音 顶盖关闭锁定装置,安全可靠,符合国际安全标准(IEC 1010)Sigma-1-15K-高速冷冻离心机高速冷冻离心机详细说明:详细说明:一、离心机的准备一、离心机的准备 在离心操作前必需首先准备好离心机。备机包括:1.机型的选择:即根据具体的实验
16、要求选择水平式离心机或斜角式离心机。2.离心套筒的准备:检查离心套筒内是否有橡皮缓冲胶垫,胶垫上若附着碎玻璃等杂物应清除。3.离心机检查:检查离心机安放是否平稳,转轴是否牢固,润滑是否良好,离心腔内有无异物,缸盖能否锁紧等。二、电源的准备二、电源的准备 电源应选择与离心机使用说明书相吻合的电源,电原插座必须有地线以保证离心安全。若实验室没有合适的电源,则应重新安装电源线,电源插座应靠近离心机以方便操作。三、平衡附件的准备三、平衡附件的准备 平衡附件包括:1.天平:普通离心机用11000的台秤进行离心平衡,台平上固定两个等重的烧杯,以备平衡之用。2.离心管和配平管:离心管用于装离心液,配平管用于
17、装配乎液(注意:配平管的长度一般不宜超过离心管的长度,以避免水平离心时被转轴打碎)。3.烧杯与皮头吸管:烧瓶用来盛配平液,皮头吸管用来吸配平液进行配平。四、离心液的准备四、离心液的准备 离心液应根据具体的实验要求进行准备。五、试机五、试机 在以上准备完成以后,应先让离心机进行空载运转,密切观察空载运转情况是否正常,在无异常时方可进行离心。【实验准备】【实验准备】1取离心管装上离心液放于一对重量相近的离心套筒的橡胶孔中,离心液面距离心管口至少应留2cm的距离,以免离心时离心液溅出。2调平称量天平,将置于离心机对称位置上的离心套筒、离心管及内盛物配平,相差不超过0.05克,将平衡好的离心套筒放于离
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