血凝的基本知识课件.ppt
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- 血凝 基本知识 课件
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1、2020/3/611血凝的基本知识血凝的基本知识倍赛血凝事业部2020/3/612血凝的基本知识血凝的基本知识?血液凝固(凝血):?形态:血液由液体状态凝胶状态。?本质:纤维蛋白原纤维蛋白。?基本学说凝血瀑布学说。2020/3/613凝血瀑布学说凝血瀑布学说血液凝固是一系列凝血因子酶反应过程;每个凝血因子都被其前一因子所激活;最后激活凝血酶原生成凝血酶凝血酶使纤维蛋白原转变成纤维蛋白,生成纤维蛋白凝块。2020/3/614血凝试剂的基本原理及临床应用血凝试剂的基本原理及临床应用?凝血功能的一些检测手段?常规筛选检测(检测凝血功能是否正常)?PT凝血酶原时间测定。?APTT活化部分凝血活酶时间测
2、定。?TT凝血酶时间测定。特殊物质检测(检测引起凝血功能异常的原因)?纤维蛋白原测定?纤维蛋白降解产物?D二聚体?凝血因子检测?发色底物测定(如蛋白C,蛋白S,等)2020/3/615血凝常规四项检测血凝常规四项检测?PT-凝血酶原时间测定?APTT-活化部分凝血活酶时间测定?TT-凝血酶时间测定?FBG-纤维蛋白原测定2020/3/616PT测定测定?PT试剂中主要含组织因子(TF)和ca离子,试剂中加入血浆后,TF和ca离子与血浆中因子,形成TFca离子复合物,启动外源性凝血途径;?最后使凝血酶原形成凝血酶,凝血酶可使血浆中的纤维蛋白原转变成纤维蛋白。?纤维蛋白的交联,聚合成凝胶状态;?血
3、浆从流动状态变成凝固状态这个过程短时间内完成,可用仪器检测。这段时间即为凝血酶原时间 PT,一般以秒表示。2020/3/617PT检测临床应用(2)监控口服抗凝药病人的凝血功能?口服抗凝药治疗时间比较长,治疗过程需要监控;?剂量增加或减少,会引起出血或凝血;?口服抗凝药治疗病人的治疗剂量,治疗时间由PT检测决定,一般要控制在INR2.0-3.0之间。2020/3/618INR 国际标准化比值国际标准化比值INR(?正常人血浆PT平均值每一实验室取20个以上正常人血浆测得的PT秒数平均值。不能用质控血浆或参值作为正常人比血浆PT血浆PT平均值不准确?ISI国际敏感指数2020/3/619PT的I
4、SI 值ISI 国际敏感指数?ISI值是生产厂商生产的PT试剂与国际标准PT试剂测值相比的值,凡出厂的PT试剂必须标明其正确的ISI值。若ISI1则表示该试剂敏感度与国际标准试剂值一致若ISI值越大,则表明该试剂越不敏感。2020/3/6110各种ISI 值的PT试剂ISI值试剂敏感度建议使用试剂ISI值1.0-1.2敏感如长岛液体PT试剂太平洋PT试剂Dade Behring PT试剂ISI值1.2-1.4比较敏感如库尔特PT试剂StagoPT试剂ISI值1.6以上不敏感不建议使用2020/3/6111不同ISI 值的PT试剂的INR 计算举例同一种标本,同一仪器,用不同ISI 值试剂测定,
5、INR 值应相同。?ISI值:1.02在库尔特仪器上正常人平均值=11.8秒长岛液体PT 异常病人标本测得PT值试剂39秒病人?ISI值:1.36在库尔特仪器上正常人ACL 平均PT值12秒库尔特原装异常病人标本测得PT值PT 29.8秒试剂病人2020/3/6112PST 试剂ISI 值正确标识的重要性?国内有些试剂生产厂商,生产的PT试剂试剂ISI值只有1.8左右,甚至2.0以上,但他们提供给客户的ISI值却是1.22。?举例:国内某公司生产的血凝试剂,正常人PT平均测值为12秒,测得口服抗凝药病人血浆PT22秒,标示的ISI值为1.22,而实际ISI却为1.8。?计算:INR(标本值)I
6、NR(标本值)PT结果不准确,会导致异常的病人有可能被认为正常;误导口服抗凝药病人用药,严重的会引起出血。实际INR3.0应减少用药,但按标识的ISI值计算结果永远3.0.2020/3/61132020/3/6114部分厂商提供不真实ISI 值的原因原因:技术水平达不到生产ISI1.6 建议不予使用对枸橼酸浓度不敏感(3.2%或3.8%)对凝血因子的敏感2020/3/6117选择PT试剂的要点(2)试剂的成分来源:?重组组织因子(基因工程方法)最好?如长岛液体PT试剂、Dade Behring PT 试剂(Inovin)?人胚胎组织:如Dade Behring PT试剂?新鲜兔脑粉:如库尔特P
7、T试剂、StagoPT试剂?陈旧兔脑粉:大多数国产的PT冻干试剂(ISI1.6)开瓶后的稳定性:?长岛液体PT试剂:开瓶后,37,稳定30天以上。?其他PT试剂:开瓶后,37,稳定8小时。2020/3/6118PT检测的结果评估美国CLIA-88 提出PT指标的允许误差?有国际标准,以INR表示;?不同厂家根据自己的试剂给出一个正常范围,一般正常范围为:10.5-14.5秒;?同一个标本用不同试剂,在同一仪器上检测,INR值应相同。PT总允许误(Tea)靶值15%精密度(CV)批内变异2同一天批间变异3天间变异42020/3/6119APTT 检测临床应用(2)监控静脉滴注肝素抗凝治疗的病人的
8、凝血功能?临床上对静脉滴注肝素抗凝治疗的病人必须进行APTT检测以便监控。?APTT的值应控制在1.5-2.5 x基础秒数?基础秒数-肝素治疗前的APTT秒数;?不同的APTT试剂,对肝素敏感性不同,建议使用对肝素敏感的APTT白陶土试剂。2020/3/6120国内APTT 白陶土试剂现状国内市场(除长岛能提供液体型 APTT白陶土试剂外)尚无稳定的APTT白陶土试剂。长岛液体型APTT白陶土优势:?对肝素敏感;?非常稳定:常温保存,稳定30天以上;?技术国际领先。2020/3/6121不同APTT 试剂,对肝素敏感性不同2020/3/6122选择APTT 试剂的要点?对肝素的敏感性,对肝素越
9、敏感越好APTT白陶土首选;?对凝血因子的敏感性;?对LA抗凝物的敏感性?开瓶后的稳定性?长岛液体型APTT白陶土试剂:37,30天以上;?库尔特APTT试剂:37,3天左右;?StagoAPTT试剂:37,3天左右。2020/3/6123APTT 检测的结果评估美国CLIA-88 提出APTT 指标的允许误差?没有国际标准;?生产厂家根据自己的试剂给出一个正常范围值;?各个厂家不同试剂的正常范围值均不相同;?评价时,应以超过正常对照的10秒视为异常。APTT总允许误(Tea)靶值15%精密度(CV)批内变异3同一天批间变异3天间变异0.995?开平后试剂的稳定型:?长岛液体Fib试剂:37,
10、稳定20天以上;?其他国产Fib冻干粉试剂:37,稳定24小时。2020/3/6133Fib 检测的注意点?尽量不用衍算法,不准确;?标本中纤维蛋白原含量如超出所用所用试剂的线性范围,必须作适当的稀释后再进行测定,不然对结果影响较大。?当血浆中有肝素或纤维蛋白降解产物(FDP)时,会导致测值偏低。2020/3/61342020/3/6135Fib 检测的结果评估美国CLIA-88 提出Fib 指标的允许误差?为血凝四项检测中的定量检测;?有国际标准:?WHO标准品98/612;?可追溯性?正常值范围:2-4g/L;?美国临床实验室改进修正案?CLIA-88允许误差范围为20%。Fib总允许误(
11、Tea)靶值15%精密度(CV)批内变异2同一天批间变异3天间变异42020/3/6136血凝试剂常见的问题?APTT、PT延长及缩短?TT延长?Fib含量过高及过低2020/3/6137标本的原因?抗凝剂与血液比例不对,如大于1:9;?抗凝剂配制错误,如枸橼酸钠含2个结晶水仍按3.8%配制;?抗凝剂应用枸橼酸钠溶液,不能用干燥品,或其他抗凝剂;?抗凝剂与血浆混合时摇匀过于剧烈,使凝血因子被破坏;?血细胞比容积大于55%,抗凝剂比例没变(仍按1:9);?标本陈旧,超过2小时甚至更长;?口服抗凝药或凝血因子异常;?采血不顺利,有郁滞现象;?标本运输未加盖,致使CO2升高PH升高;?血浆分离应30
12、00rpm,10分钟;?临产妇FBG含量较高,可能会超过正常值;?质控标本2-8超过8小时或失效;2020/3/61382020/3/6139复溶用蒸馏水及材料的原因?复溶蒸馏水质量差;?未用塑料或硅化玻璃管;?实验器材污染;?仪器本身有问题,如灵敏度不够(仪器可用手工操作排除、或凝固终点不对(一般凝固终点在 50%有时需根据试剂不同作相应调整到 30%甚至20%。2020/3/6140试剂本身的原因?复溶后试剂反复使用。如整瓶复溶好的试剂放入预温槽预温,测试完成后,剩余放回冰箱。反复如此试剂在37的时间过长;?复溶后试剂使用时间过长;?试剂储存、运输温度过高,未注意冷藏运输。中间公司未换冰袋
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