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类型血凝的基本知识课件.ppt

  • 上传人(卖家):晟晟文业
  • 文档编号:4943216
  • 上传时间:2023-01-27
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    关 键  词:
    血凝 基本知识 课件
    资源描述:

    1、2020/3/611血凝的基本知识血凝的基本知识倍赛血凝事业部2020/3/612血凝的基本知识血凝的基本知识?血液凝固(凝血):?形态:血液由液体状态凝胶状态。?本质:纤维蛋白原纤维蛋白。?基本学说凝血瀑布学说。2020/3/613凝血瀑布学说凝血瀑布学说血液凝固是一系列凝血因子酶反应过程;每个凝血因子都被其前一因子所激活;最后激活凝血酶原生成凝血酶凝血酶使纤维蛋白原转变成纤维蛋白,生成纤维蛋白凝块。2020/3/614血凝试剂的基本原理及临床应用血凝试剂的基本原理及临床应用?凝血功能的一些检测手段?常规筛选检测(检测凝血功能是否正常)?PT凝血酶原时间测定。?APTT活化部分凝血活酶时间测

    2、定。?TT凝血酶时间测定。特殊物质检测(检测引起凝血功能异常的原因)?纤维蛋白原测定?纤维蛋白降解产物?D二聚体?凝血因子检测?发色底物测定(如蛋白C,蛋白S,等)2020/3/615血凝常规四项检测血凝常规四项检测?PT-凝血酶原时间测定?APTT-活化部分凝血活酶时间测定?TT-凝血酶时间测定?FBG-纤维蛋白原测定2020/3/616PT测定测定?PT试剂中主要含组织因子(TF)和ca离子,试剂中加入血浆后,TF和ca离子与血浆中因子,形成TFca离子复合物,启动外源性凝血途径;?最后使凝血酶原形成凝血酶,凝血酶可使血浆中的纤维蛋白原转变成纤维蛋白。?纤维蛋白的交联,聚合成凝胶状态;?血

    3、浆从流动状态变成凝固状态这个过程短时间内完成,可用仪器检测。这段时间即为凝血酶原时间 PT,一般以秒表示。2020/3/617PT检测临床应用(2)监控口服抗凝药病人的凝血功能?口服抗凝药治疗时间比较长,治疗过程需要监控;?剂量增加或减少,会引起出血或凝血;?口服抗凝药治疗病人的治疗剂量,治疗时间由PT检测决定,一般要控制在INR2.0-3.0之间。2020/3/618INR 国际标准化比值国际标准化比值INR(?正常人血浆PT平均值每一实验室取20个以上正常人血浆测得的PT秒数平均值。不能用质控血浆或参值作为正常人比血浆PT血浆PT平均值不准确?ISI国际敏感指数2020/3/619PT的I

    4、SI 值ISI 国际敏感指数?ISI值是生产厂商生产的PT试剂与国际标准PT试剂测值相比的值,凡出厂的PT试剂必须标明其正确的ISI值。若ISI1则表示该试剂敏感度与国际标准试剂值一致若ISI值越大,则表明该试剂越不敏感。2020/3/6110各种ISI 值的PT试剂ISI值试剂敏感度建议使用试剂ISI值1.0-1.2敏感如长岛液体PT试剂太平洋PT试剂Dade Behring PT试剂ISI值1.2-1.4比较敏感如库尔特PT试剂StagoPT试剂ISI值1.6以上不敏感不建议使用2020/3/6111不同ISI 值的PT试剂的INR 计算举例同一种标本,同一仪器,用不同ISI 值试剂测定,

    5、INR 值应相同。?ISI值:1.02在库尔特仪器上正常人平均值=11.8秒长岛液体PT 异常病人标本测得PT值试剂39秒病人?ISI值:1.36在库尔特仪器上正常人ACL 平均PT值12秒库尔特原装异常病人标本测得PT值PT 29.8秒试剂病人2020/3/6112PST 试剂ISI 值正确标识的重要性?国内有些试剂生产厂商,生产的PT试剂试剂ISI值只有1.8左右,甚至2.0以上,但他们提供给客户的ISI值却是1.22。?举例:国内某公司生产的血凝试剂,正常人PT平均测值为12秒,测得口服抗凝药病人血浆PT22秒,标示的ISI值为1.22,而实际ISI却为1.8。?计算:INR(标本值)I

    6、NR(标本值)PT结果不准确,会导致异常的病人有可能被认为正常;误导口服抗凝药病人用药,严重的会引起出血。实际INR3.0应减少用药,但按标识的ISI值计算结果永远3.0.2020/3/61132020/3/6114部分厂商提供不真实ISI 值的原因原因:技术水平达不到生产ISI1.6 建议不予使用对枸橼酸浓度不敏感(3.2%或3.8%)对凝血因子的敏感2020/3/6117选择PT试剂的要点(2)试剂的成分来源:?重组组织因子(基因工程方法)最好?如长岛液体PT试剂、Dade Behring PT 试剂(Inovin)?人胚胎组织:如Dade Behring PT试剂?新鲜兔脑粉:如库尔特P

    7、T试剂、StagoPT试剂?陈旧兔脑粉:大多数国产的PT冻干试剂(ISI1.6)开瓶后的稳定性:?长岛液体PT试剂:开瓶后,37,稳定30天以上。?其他PT试剂:开瓶后,37,稳定8小时。2020/3/6118PT检测的结果评估美国CLIA-88 提出PT指标的允许误差?有国际标准,以INR表示;?不同厂家根据自己的试剂给出一个正常范围,一般正常范围为:10.5-14.5秒;?同一个标本用不同试剂,在同一仪器上检测,INR值应相同。PT总允许误(Tea)靶值15%精密度(CV)批内变异2同一天批间变异3天间变异42020/3/6119APTT 检测临床应用(2)监控静脉滴注肝素抗凝治疗的病人的

    8、凝血功能?临床上对静脉滴注肝素抗凝治疗的病人必须进行APTT检测以便监控。?APTT的值应控制在1.5-2.5 x基础秒数?基础秒数-肝素治疗前的APTT秒数;?不同的APTT试剂,对肝素敏感性不同,建议使用对肝素敏感的APTT白陶土试剂。2020/3/6120国内APTT 白陶土试剂现状国内市场(除长岛能提供液体型 APTT白陶土试剂外)尚无稳定的APTT白陶土试剂。长岛液体型APTT白陶土优势:?对肝素敏感;?非常稳定:常温保存,稳定30天以上;?技术国际领先。2020/3/6121不同APTT 试剂,对肝素敏感性不同2020/3/6122选择APTT 试剂的要点?对肝素的敏感性,对肝素越

    9、敏感越好APTT白陶土首选;?对凝血因子的敏感性;?对LA抗凝物的敏感性?开瓶后的稳定性?长岛液体型APTT白陶土试剂:37,30天以上;?库尔特APTT试剂:37,3天左右;?StagoAPTT试剂:37,3天左右。2020/3/6123APTT 检测的结果评估美国CLIA-88 提出APTT 指标的允许误差?没有国际标准;?生产厂家根据自己的试剂给出一个正常范围值;?各个厂家不同试剂的正常范围值均不相同;?评价时,应以超过正常对照的10秒视为异常。APTT总允许误(Tea)靶值15%精密度(CV)批内变异3同一天批间变异3天间变异0.995?开平后试剂的稳定型:?长岛液体Fib试剂:37,

    10、稳定20天以上;?其他国产Fib冻干粉试剂:37,稳定24小时。2020/3/6133Fib 检测的注意点?尽量不用衍算法,不准确;?标本中纤维蛋白原含量如超出所用所用试剂的线性范围,必须作适当的稀释后再进行测定,不然对结果影响较大。?当血浆中有肝素或纤维蛋白降解产物(FDP)时,会导致测值偏低。2020/3/61342020/3/6135Fib 检测的结果评估美国CLIA-88 提出Fib 指标的允许误差?为血凝四项检测中的定量检测;?有国际标准:?WHO标准品98/612;?可追溯性?正常值范围:2-4g/L;?美国临床实验室改进修正案?CLIA-88允许误差范围为20%。Fib总允许误(

    11、Tea)靶值15%精密度(CV)批内变异2同一天批间变异3天间变异42020/3/6136血凝试剂常见的问题?APTT、PT延长及缩短?TT延长?Fib含量过高及过低2020/3/6137标本的原因?抗凝剂与血液比例不对,如大于1:9;?抗凝剂配制错误,如枸橼酸钠含2个结晶水仍按3.8%配制;?抗凝剂应用枸橼酸钠溶液,不能用干燥品,或其他抗凝剂;?抗凝剂与血浆混合时摇匀过于剧烈,使凝血因子被破坏;?血细胞比容积大于55%,抗凝剂比例没变(仍按1:9);?标本陈旧,超过2小时甚至更长;?口服抗凝药或凝血因子异常;?采血不顺利,有郁滞现象;?标本运输未加盖,致使CO2升高PH升高;?血浆分离应30

    12、00rpm,10分钟;?临产妇FBG含量较高,可能会超过正常值;?质控标本2-8超过8小时或失效;2020/3/61382020/3/6139复溶用蒸馏水及材料的原因?复溶蒸馏水质量差;?未用塑料或硅化玻璃管;?实验器材污染;?仪器本身有问题,如灵敏度不够(仪器可用手工操作排除、或凝固终点不对(一般凝固终点在 50%有时需根据试剂不同作相应调整到 30%甚至20%。2020/3/6140试剂本身的原因?复溶后试剂反复使用。如整瓶复溶好的试剂放入预温槽预温,测试完成后,剩余放回冰箱。反复如此试剂在37的时间过长;?复溶后试剂使用时间过长;?试剂储存、运输温度过高,未注意冷藏运输。中间公司未换冰袋

    13、;?试剂超过有效期;?购入冒牌试剂;?质控品过期2020/3/6141操作的原因?APTT、PT延长?APTT试剂与标本预温少于3分钟,白陶土最好5分钟;?APTT(白)是混浊液,加前未混匀;?实验测试温度(标本、试剂)未预温至36.5-38的范围;?PT血浆与试剂比例不对;?试剂位误搅拌功能的血凝仪(CA-500)APTT要用鞣化酸;?血凝仪能用半量的最好用半量否则试剂和血浆不易混匀;?枪头和取液器之间要拧紧,不能有空隙。2020/3/6142操作的原因(2)?TT延长?血浆与试剂比例不对;?不同类别专用试剂参考正常值不同(DB专用为14-21秒,太平洋为8秒-14秒);可能出现对应错误;?

    14、试剂不应预温而预温时间较长。2020/3/6143操作原因(3)?Fib含量过高或过低?换新试剂或新批号试剂未重新定标;?虽然重新定标,但新定标曲线未输入仪器,原标准曲线未被修改。?定标时,画标准曲线,横坐标浓度计算错误。2020/3/6144Traceability(溯源性)的定义?定义:溯源性是测量结果或标准的值通过连续的比较链与一定的参考标准相联系的属性,参考标准通常是国家或国际标准,比较链中的每一步比较都有给定的不确定度。2020/3/6145溯源性定量检验结果的描述?溯源性主要用于定量检验结果的描述,不适用于定性检验结果。?血凝四项中,只有Fib检测是定量检验,所以Fib检测具有溯源

    15、性。2020/3/6146长岛Fib 检测试剂的溯源性?以WHO国际标准品编号98/612的纤维蛋白原标准品为参考,我们对长岛FIB试剂盒进行准确性研究实验。连续三批小量生产FIB试剂盒(批号:020708、020805、0208260),每批随机抽取一盒FIB试剂盒,利用CA-530血凝仪(日本Sysmex公司产品)测定WHO98/612纤维蛋白标准品的纤维蛋白原含量和,所得结果在WHO98/612纤维蛋白原标定含量的10%范围内。2020/3/6147对可追溯性理解的缪误?部分人认为进口仪器一定要配原装试剂,才具有可追溯性这其实是错误的理解。?由于经济上或其他原因选择不配套的试剂,认为只要

    16、说明校准品的来源,经过实验标明该检测系统的不精密度、不准确度、病人结果可报告范围、分析灵敏度、分析特异性、参考范围,就具备溯源性。2020/3/61482020/3/6149长岛血凝试剂?长岛公司生产的各类血凝仪专用试剂所组成的新的检测系统(原仪器、方法、检测程序加上长岛公司的试剂和标准品),对原系统进行校准,从而使病人样本的检测结果和原配套检测系统的病人样品结果具有可比性。2020/3/6150长岛血凝试剂特点?血凝四项(PT、APTT、TT、Fib)全套为液体试剂;?测值稳定;?PT试剂ISI值接近1.0;?APTT白陶土对肝素敏感;?能提供各类全自动血凝仪配套试剂。2020/3/6151

    17、全套液体试剂长岛血凝四项试剂,全部为液体试剂?液体试剂,无需复溶,避免了因复溶用水质量不合格及复溶体积不准确而造成的测定偏差;?液体试剂,开瓶即用,免去复溶步骤,使得检测更为简便。2020/3/6152出众的试剂稳定性?长岛血凝试剂,采用专利稳定系统,拥有异常出众的稳定性。?长岛液体PT试剂3730天以上?长岛液体APTT试剂3730天以上?长岛液体TT试剂3730天以上?长岛Fib试剂3720天以上试剂一经开启使用,无需再从试剂位拿出来放回冰箱,直到用完,测值非常稳定,使用极为简单。2020/3/6153ISI 值接近1.0 的PT试剂?长岛液体PT试剂,ISI值接近1.0;?长岛PT试剂的

    18、成分来源为:重组组织因子(基因工程方法),技术国际领先。2020/3/6154对肝素敏感的APTT 白陶土试剂?长岛液体APTT白陶土对肝素敏感;?国内市场上唯一能提供稳定的液体APTT白陶土试剂的生产厂商。2020/3/6155各类全自动血凝仪配套试剂-日本东亚CA长岛提供日本东亚CA血凝仪专用试剂性状开瓶,复溶后的稳定性(37条件下)ISI值试剂成分来源长岛PT试剂液体30天以上1.02重组组织因子原装PT试剂冻干粉8小时1.04人胚胎组织性状开瓶,复溶后的稳定性(37条件下)长岛APTT鞣化酸试剂液体30天以上原装APTT鞣化酸试剂液体30天左右长岛TT试剂液体30天以上原装TT试剂冻干

    19、粉3天左右长岛Fib试剂液体20天以上原装Fib试剂冻干粉3天左右2020/3/6156各类全自动血凝仪配套试剂-美国库尔特ACL长岛提供美国库尔特ACL 血凝仪专用试剂性状开瓶,复溶后的稳定性(37条件下)ISI值试剂成分来源长岛PT试剂液体30天以上1.02重组组织因子原装PT试剂冻干粉8小时1.36兔脑粉性状开瓶,复溶后的稳定性(37 条件下)长岛APTT白陶土试剂液体30天以上原装APTT试剂冻干粉3天左右长岛TT试剂液体30天以上原装TT试剂冻干粉3天左右长岛Fib试剂液体20天以上原装Fib试剂冻干粉3天左右2020/3/6157各类全自动血凝仪配套试剂-德国BE长岛提供德国BE血

    20、凝仪专用试剂性状开瓶,复溶后的稳定性(37条件下)ISI值试剂成分来源长岛PT试剂液体30天以上1.02重组组织因子原装PT试剂冻干粉8小时1.1兔脑粉性状开瓶,复溶后的稳定性(37条件下)长岛APTT白陶土/鞣化酸试剂液体30天以上原装APTT试剂冻干粉3天左右长岛TT试剂液体30天以上原装TT试剂冻干粉3天左右长岛Fib试剂液体20天以上原装Fib试剂冻干粉3天左右2020/3/6158各类全自动血凝仪配套试剂-法国思达高STA长岛提供法国思达高STAGO 血凝仪专用试剂性状开瓶,复溶后的稳定型(37条件下)ISI值试剂成分来源长岛PT试剂液体30天以上1.02重组组织因子原装PT试剂冻干

    21、粉8小时1.32兔脑粉性状开瓶,复溶后的稳定性(37条件下)长岛APTT白陶土试剂液体30天以上原装APTT试剂冻干粉3天左右长岛TT试剂液体30天以上原装TT试剂冻干粉3天左右长岛Fib试剂液体20天以上原装试剂冻干粉3天左右2020/3/6159血凝仪介绍分类(1)?按自动化程度分类?半自动血凝仪一般用于血凝四项的常规测定。其一般构成是:样品试剂预温槽、加样器、检测系统(光学,电磁)、微机系统。一般是手工加样试剂。?全自动血凝仪基本配置是主机(样品传送及处理装置,试剂冷藏位,样品及试剂分配系统,检测系统),电子计算机,输出设备及附件。无需人工加样。?按血凝仪的检测原理分类?磁珠法(粘度法)

    22、?光学发光学法灵敏度高,重复性好,而且易于自动化,目前市场销售的大部分血凝仪采用此原理。2020/3/6160血凝仪介绍分类?磁珠法(粘度法):?采用电磁感应原理,在待测血浆中放入磁珠,在电磁场的作用下,磁珠会转动。当血浆中形成凝块后,由于阻力,磁珠转动发生变化,检测此变化即能确定凝固终点。此法具备精度高,可防止高血脂的影响的优点,但易受血浆粘度的影响。?光学法?透射比浊法:运用样本吸光度的变化判断凝固终点?具体有两种:?吸光度增加为终点。?吸光度降低为终点。?散射比浊法:检测原理与透射法基本相同,只是运用样本散射光密度改变判断凝固终点。2020/3/6161各类血凝仪的原理及特点主要进口血凝

    23、仪名称原理所用试剂血凝仪主要特点东亚系列半自动CA50CA100散射比浊百分比凝固时间检测DADE试剂APTT(仅用鞣化酸 APTT)TT(血浆:试剂为 1:2)四个通道四条检测光路CA100Fib 只能两点定标(较老的 CA仪器)全自动CA500CA530CA1500CA7000CA6000同上同上显示屏为触摸式Fib衍算或单独测均可BE系列半自动光电磁珠法光密度由大变小Biopool试剂TT(血浆:试剂为 2:1)Fib测定需加白陶土悬液的有CL-1,CL-2,TRT-4.不需加白陶土的有 CL-4TRT-1,TRT-2CA-4无显示器,通过打印实现人机对话.TRT-4,四个小显示器,最左

    24、边一个可用来调参数。个型号仪器的血凝杯不能通用。全自动Compeat 共5种Fib测定另加白陶土悬液与电脑相连,通过电脑操作ACL半自动ACL光学法ACL原装目前尚未有 Fib试剂;TT(血浆:试剂为!1:1)其他的 Fib试剂可上此学凝仪全自动ACL-100ACL-200光学法同上反应杯为盘装的ACL-advanceACL-FuturaACL-7000光学法同上反应杯为单个的,全自动的仪器Fib一般进行 PT衍算。2020/3/6162各类血凝仪的原理及特点主要进口血凝仪(2)名称原理所用试剂血凝仪主要特点Stago半自动磁珠法Stago原装APTT试剂只有APTT(白)TT(血浆:试剂为1

    25、:1)半自动血凝仪上其他种的APTT(鞣化酸)全自动磁珠法同上上试剂需有密码,不要定标,Fib校准品校正即太平洋PH1PH2PH4光学法(散射法)太平洋试剂,APTT(鞣)及(白)均有,APTT(白)为液体型,TT(血浆:试剂为2:1)。复溶后稳定时间短,需分装冷冻保存,Fib低浓度时重现性差Fib衍算及单独测试均可德高TECO-BCTECO-BCTECO-M4光学法太平洋试剂类太平洋血凝仪BC-血凝杯大M-型血凝杯小(最小容蓝波BioLaBo半自动全自动涡流密度法(光学机械结合)蓝波试剂。TT(血浆:试剂为2:1),Fib试剂内含量白陶土,其缓冲液内含有纤溶抑制剂美创(MC)半自动类太平洋荷兰欧加侬ORGANON散射光比浊法阿克苏试剂,TT(血浆试剂为2:1)

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