医科大学精品课件:动物实验基本技术.ppt
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- 医科大学 精品 课件 动物 实验 基本 技术
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1、1 动物实验基本技术动物实验基本技术 2 实验动物实验动物抓取与固定抓取与固定 实验动物实验动物分组与标记分组与标记 实验动物实验动物被毛去除方法被毛去除方法 实验动物实验动物给药给药 实验动物实验动物麻醉麻醉 实验动物实验动物取血取血 实验动物实验动物处死处死 动物实验基本技术动物实验基本技术 3 一、实验动物抓取与固定一、实验动物抓取与固定 目的:目的:暴露手术操作部位暴露手术操作部位 小鼠小鼠的抓取保定的抓取保定 大鼠大鼠的抓取保定的抓取保定 豚鼠的抓取保定豚鼠的抓取保定 家兔的抓取保定家兔的抓取保定 4 1.1.小鼠的抓取保定小鼠的抓取保定 抓取:抓取: 右手右手抓住鼠尾并提起,把小鼠
2、置于笼盖或其抓住鼠尾并提起,把小鼠置于笼盖或其 他粗糙面上,向后方他粗糙面上,向后方轻拉轻拉 左手左手拇指和食指捏住拇指和食指捏住其两耳和颈部皮肤其两耳和颈部皮肤 右手右手拉紧小鼠尾部,拉紧小鼠尾部,拉直拉直鼠身,鼠身, 左手左手无名指和小指压紧无名指和小指压紧尾巴和后肢,尾巴和后肢,中指和中指和 手掌心夹住手掌心夹住背部皮肤,使小鼠呈一直线背部皮肤,使小鼠呈一直线 保定:保定:四肢及门牙用棉线固定在解剖台上四肢及门牙用棉线固定在解剖台上 5 1.1.小鼠的抓取保定小鼠的抓取保定 抓取:抓取: 右手右手抓住鼠尾并提起,把小鼠置于笼盖或其抓住鼠尾并提起,把小鼠置于笼盖或其 他粗糙面上,向后方他粗
3、糙面上,向后方轻拉轻拉 左手左手拇指和食指捏住拇指和食指捏住其两耳和颈部皮肤其两耳和颈部皮肤 右手右手拉紧小鼠尾部,拉紧小鼠尾部,拉直拉直鼠身,鼠身, 左手左手无名指和小指压紧无名指和小指压紧尾巴和后肢,尾巴和后肢,中指和中指和 手掌心夹住手掌心夹住背部皮肤,使小鼠呈一直线背部皮肤,使小鼠呈一直线 保定:保定:四肢及门牙用棉线固定在解剖台上四肢及门牙用棉线固定在解剖台上 6 2.2.大鼠的抓取保定大鼠的抓取保定 抓取:抓取:基本同小鼠基本同小鼠 右手右手抓住鼠尾并提起,把大鼠置于笼盖或其抓住鼠尾并提起,把大鼠置于笼盖或其 他粗糙面上,向后方他粗糙面上,向后方轻拉轻拉 左手左手顺序顺序按卡按卡大
4、鼠背部,稍加压力向头部大鼠背部,稍加压力向头部滑滑 行行,拇指和食指捏住拇指和食指捏住其两耳和颈部皮肤其两耳和颈部皮肤 右手右手拉紧大鼠尾部,拉紧大鼠尾部,拉直拉直鼠身,鼠身, 左手左手其余三指固定其余三指固定背部皮肤在大鱼际肌上背部皮肤在大鱼际肌上 保定:保定:同小鼠同小鼠 7 3.3.豚鼠的抓取保定豚鼠的抓取保定 抓取:抓取: 左手左手轻轻轻轻扣扣、按住按住豚鼠背部,顺势抓住其肩豚鼠背部,顺势抓住其肩 胛上方皮肤,胛上方皮肤,拇指和食指环握拇指和食指环握颈部颈部 右手右手托住其臀部托住其臀部 抓取时必须快、准、稳、柔抓取时必须快、准、稳、柔 8 4.4.家兔的抓取保定家兔的抓取保定 抓取:
5、抓取: 右手右手抓住抓住颈背部皮肤,提起家兔颈背部皮肤,提起家兔 左手左手托住其臀部托住其臀部 保定:保定: 四肢和门牙固定在手术台上,其中前肢是交四肢和门牙固定在手术台上,其中前肢是交 叉固定。叉固定。 9 4.4.家兔的抓取保定家兔的抓取保定 抓取:抓取: 右手右手抓住抓住颈背部皮肤,提起家兔颈背部皮肤,提起家兔 左手左手托住其臀部托住其臀部 保定:保定: 四肢和门牙固定在手术台上,其中前肢是四肢和门牙固定在手术台上,其中前肢是交交 叉固定叉固定。 10 二、实验动物分组与标记二、实验动物分组与标记 1.分组:分组: 分组原则分组原则-随机分组随机分组 每只动物都有每只动物都有同等机会同等
6、机会被分配到各个实验组被分配到各个实验组 中去,避免人为因素对实验造成影响。中去,避免人为因素对实验造成影响。 建立对照组建立对照组 11 分组原则分组原则-随机分组随机分组(1)(1) 完全完全随机分组:随机分组: 将全部动物将全部动物编号编号 从随机数表中任取一段随机数字,给各个动从随机数表中任取一段随机数字,给各个动 物依次物依次配号配号 按所配数字的奇偶(按所配数字的奇偶(两组两组)或除以组数后的)或除以组数后的 余数(余数(两组以上两组以上)作为归入的组次)作为归入的组次分组分组 最后随机最后随机调整调整,使各组的动物数达到均等,使各组的动物数达到均等 12 完全完全随机分组随机分组
7、-如如小鼠小鼠20只,分甲、乙两组只,分甲、乙两组 小鼠小鼠编编为为1号号20号号 随机数表中取出随机数表中取出20个随机数依次分个随机数依次分配配给给120 号动物号动物 设单数为甲设单数为甲组组,双数为乙组(下表),结果,双数为乙组(下表),结果 甲组甲组9只,乙组只,乙组11只只 动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 随 机 数 03 47 43 73 86 36 96 47 36 61 68 34 30 13 70 55 74 30 77 12 组 别 甲 甲 甲 甲 乙 乙 乙 甲 乙 甲 乙 乙 乙 甲 乙
8、甲 乙 乙 甲 乙 分组原则分组原则-随机分组随机分组(1)(1) 13 完全完全随机分组随机分组-如如小鼠小鼠20只,分甲、乙两组只,分甲、乙两组 小鼠小鼠编编为为1号号20号号 随机数表中取出随机数表中取出20个随机数依次分个随机数依次分配配给给120 号动物号动物 设单数为甲设单数为甲组组,双数为乙组(表,双数为乙组(表1-3-2),结),结 果甲组果甲组9只,乙组只,乙组11只只 再查随机数表的第再查随机数表的第21个数为个数为13,将,将13111 余余2。则将乙组中的第二位(。则将乙组中的第二位(6号动物)取出号动物)取出 给甲组。若差数给甲组。若差数2,可依次法,可依次法调整调整
9、直至两组直至两组 动物数相等。动物数相等。 分组原则分组原则-随机分组随机分组(1)(1) 14 简化简化随机分组随机分组-实际工作中实际工作中 从随机数表中的任一数字开始顺序取数,把从随机数表中的任一数字开始顺序取数,把 取得的随机数除以组数,将所得余数作为这取得的随机数除以组数,将所得余数作为这 一轮一轮开始分配的组次开始分配的组次,从该组开始,从该组开始顺序分配顺序分配 一只一只 再取下一个随机数,除以组数,所得余数作再取下一个随机数,除以组数,所得余数作 为为下一轮下一轮分配开始的组次分配开始的组次,顺序分配顺序分配每组一每组一 只,直到分完为止。只,直到分完为止。 分组原则分组原则-
10、随机分组随机分组(2)(2) 15 空白对照空白对照-不加任何处理,排除动物本身的不加任何处理,排除动物本身的 影响影响 实验对照实验对照-实验条件对照实验条件对照 标准对照标准对照-标准值对照(标准值对照(阳性对照阳性对照) 自身对照自身对照-自身前后对照自身前后对照 相互对照相互对照-各实验组相互对照各实验组相互对照 建立对照组建立对照组 16 目的目的-将同种动物进行区别,以便于观察。将同种动物进行区别,以便于观察。 要求要求-编号方法不对动物生理或实验反应产编号方法不对动物生理或实验反应产 生影响,且号码清楚、易认和耐久。生影响,且号码清楚、易认和耐久。 常用方法:常用方法: 染色法染
11、色法 耳孔法耳孔法 烙印法烙印法 挂牌法挂牌法 2.2.标记编号标记编号 17 用化学药品在实验动物身体明显部位涂染,用化学药品在实验动物身体明显部位涂染, 以染色部位、颜色标记区分实验动物。以染色部位、颜色标记区分实验动物。 缺点:缺点: 长时间使用,染色剂会自行褪色,需不断补长时间使用,染色剂会自行褪色,需不断补 充和加深染色充和加深染色-慢性实验不适用慢性实验不适用 染色剂的毒性对实验动物的影响染色剂的毒性对实验动物的影响 适用动物适用动物-大、小鼠大、小鼠 染色法染色法 18 3%5%苦味酸苦味酸,染成,染成黄色黄色 0.5%中性红或品红溶液,染成红色中性红或品红溶液,染成红色 2%硝
12、酸银溶液,染成咖啡色硝酸银溶液,染成咖啡色 煤焦油酒精溶液,染成黑色煤焦油酒精溶液,染成黑色 染色法染色法-常用染色剂常用染色剂 19 单色涂染法:单色涂染法: 单一颜色的染色剂涂染单一颜色的染色剂涂染 涂染顺序:从左到右,从上到下涂染顺序:从左到右,从上到下 适用于每组实验动物不超过适用于每组实验动物不超过10只只 染色法染色法-染色方法染色方法 20 双色涂染法:双色涂染法: 两种颜色同时染色标记,一种标记为个位数,两种颜色同时染色标记,一种标记为个位数, 另一种标记为十位数另一种标记为十位数 涂染方法同单色涂染法涂染方法同单色涂染法 可标记可标记100位以内的号码位以内的号码 直接标号法
13、:直接标号法: 染色剂直接在实验动物身上编写号码染色剂直接在实验动物身上编写号码 实验动物太小或号码位数太多不适宜实验动物太小或号码位数太多不适宜 染色法染色法-染色方法染色方法 21 用用打孔机打孔机直接在实验动物的耳朵上直接在实验动物的耳朵上打孔打孔编号,编号, 根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少来区根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少来区 分实验动物。分实验动物。 打孔后须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部,打孔后须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部, 以免伤口愈合将耳孔闭合。以免伤口愈合将耳孔闭合。 也可用也可用剪刀剪刀在实验动物的耳廓上在实验动物的耳廓上剪缺口剪缺口的方的方 法来区分实验动物。法来
14、区分实验动物。 适用动物适用动物-家兔家兔 耳孔法耳孔法 22 用用打孔机打孔机直接在实验动物的耳朵上直接在实验动物的耳朵上打孔打孔编号,编号, 根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少来区根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少来区 分实验动物。分实验动物。 打孔后须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部,打孔后须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部, 以免伤口愈合将耳孔闭合。以免伤口愈合将耳孔闭合。 也可用也可用剪刀剪刀在实验动物的耳廓上在实验动物的耳廓上剪缺口剪缺口的方的方 法来区分实验动物。法来区分实验动物。 适用动物适用动物-家兔家兔 耳孔法耳孔法 23 直接把标记编号直接把标记编号烙印烙印在实验动物身上,如盖在
15、实验动物身上,如盖 印章一样,用来区别实验动物。印章一样,用来区别实验动物。 适用动物适用动物-犬犬 烙印法烙印法 24 将编好的号码烙印在金属牌上,将编好的号码烙印在金属牌上,挂挂在实验动在实验动 物颈部、耳部、肢体或笼具上,用来区别实物颈部、耳部、肢体或笼具上,用来区别实 验动物。验动物。 适用动物适用动物-犬、猴和猫犬、猴和猫 挂牌法挂牌法 25 三、实验动物被毛去除方法三、实验动物被毛去除方法 目的:目的:去除实验操作局部的被毛,可避免去除实验操作局部的被毛,可避免 影响实验操作和观察。影响实验操作和观察。 常用被毛去除方法:常用被毛去除方法: 拔毛法拔毛法 剪毛法剪毛法 剃毛法剃毛法
16、 脱毛法脱毛法 26 1.1.拔毛法拔毛法 方法:方法:固定动物后,用食指和拇指将暴露固定动物后,用食指和拇指将暴露 部位的毛拔去。部位的毛拔去。 优点:优点:刺激局部组织产生扩张血管的作用刺激局部组织产生扩张血管的作用 采用部位:采用部位:血管血管暴露,进行采血或动、静暴露,进行采血或动、静 脉穿刺,如脉穿刺,如兔耳缘静脉兔耳缘静脉、鼠尾静脉鼠尾静脉采血采血 27 2.2.剪毛法剪毛法 方法:方法:固定动物后,用水湿润局部被毛,固定动物后,用水湿润局部被毛, 绷紧局部皮肤,用剪刀紧贴皮肤表面剪去被绷紧局部皮肤,用剪刀紧贴皮肤表面剪去被 毛。毛。 采用部位:采用部位:皮肤皮肤暴露,进行手术操作
17、的需暴露,进行手术操作的需 要,如要,如兔和犬颈部兔和犬颈部手术,手术,兔胸、腹部兔胸、腹部手术手术 注意:注意: 剪毛过程中不可提起被毛剪毛过程中不可提起被毛 剪下的被毛应及时清理剪下的被毛应及时清理 28 3.3.剃毛法剃毛法 方法:方法:固定动物后,用刷子蘸温肥皂水将固定动物后,用刷子蘸温肥皂水将 局部被毛湿润,用剪毛法剪去被毛,然后用局部被毛湿润,用剪毛法剪去被毛,然后用 剃毛刀逆被毛生长方向剃去残余被毛。剃毛刀逆被毛生长方向剃去残余被毛。 采用部位:采用部位:皮肤皮肤暴露,暴露,大动物手术区域皮大动物手术区域皮 肤肤的术前准备的术前准备 注意:注意: 剃毛时必须绷紧局部皮肤剃毛时必须
18、绷紧局部皮肤 29 4.4.脱毛法脱毛法 方法:方法:剪剪去局部被毛,用镊子夹棉球或纱去局部被毛,用镊子夹棉球或纱 布蘸布蘸脱毛剂脱毛剂涂涂抹在已剪去被毛部位,抹在已剪去被毛部位,35min 后用温水后用温水洗洗去脱下的毛和脱毛剂,用干纱布去脱下的毛和脱毛剂,用干纱布 擦擦干后干后涂涂上一层油脂。上一层油脂。 采用部位:采用部位:皮肤皮肤暴露,如大动物无菌手术、暴露,如大动物无菌手术、 局部皮肤刺激性实验和局部血液循环局部皮肤刺激性实验和局部血液循环 常用脱毛剂常用脱毛剂:(鼠和兔用鼠和兔用1、2,犬用,犬用3) 配方配方1:硫化钠硫化钠8g溶于溶于100ml水中水中 配方配方2:硫化钠硫化钠
19、:肥皂粉肥皂粉:淀粉为淀粉为3:1:7,加水成糊状,加水成糊状 配方配方3:硫化钠硫化钠10g和生石灰和生石灰15g溶于溶于100ml水中水中 30 四、实验动物给药四、实验动物给药 灌胃灌胃 皮下注射皮下注射 静脉注射静脉注射 腹腔注射腹腔注射 31 1.1.灌胃灌胃 准备:准备:连接连接灌胃针灌胃针的注射器吸入待灌药液的注射器吸入待灌药液 32 1.1.灌胃灌胃 准备:准备:连接灌胃针的注射器吸入待灌药液连接灌胃针的注射器吸入待灌药液 过程:过程: 一手一手固定动物固定动物,并使体位为,并使体位为头高位头高位 一手一手持注射器持注射器,将灌胃针从动物,将灌胃针从动物口角插入口角插入, 并并
20、紧贴上腭紧贴上腭,经咽后壁经咽后壁插入至预定深度插入至预定深度 深度:深度:小鼠小鼠3cm,大鼠,大鼠5cm 灌胃量:灌胃量:小鼠小鼠0.010.03 ml/g ,大鼠,大鼠0.01 0.02 ml/g 33 1.1.灌胃灌胃 准备:准备:连接灌胃针的注射器吸入待灌药液连接灌胃针的注射器吸入待灌药液 过程:过程: 一手一手固定动物固定动物,并使体位为,并使体位为头高位头高位 一手一手持注射器持注射器,将灌胃针从动物,将灌胃针从动物口角插入口角插入, 并并紧贴上腭紧贴上腭,经咽后壁经咽后壁插入至预定深度插入至预定深度 深度:深度:小鼠小鼠3cm,大鼠,大鼠5cm 灌胃量:灌胃量:小鼠小鼠0.01
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