酵母细胞的固定化课件(自制)1.ppt
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- 关 键 词:
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1、问题由来强强 酸酸 强强 碱碱高高 温温有机溶剂有机溶剂酶的不再利用性酶的不再利用性产物中酶的混合产物中酶的混合应用酶中的应用酶中的实际问题实际问题解决问题将酶固定在载体上将酶固定在载体上对载体的要求对载体的要求三个好处三个好处将酶固定在细胞上将酶固定在细胞上二个方面的提高二个方面的提高与产物接触与产物接触且能分离且能分离反复利用反复利用成本更低成本更低操作更容易操作更容易什么是固定化酶?什么是固定化酶?水溶性酶水溶性酶水不溶性载体水不溶性载体水不溶性酶水不溶性酶(固定化酶)(固定化酶)固定化技术固定化技术直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点高果糖浆的生产固定化酶的反应柱示意图 葡萄糖
2、异构酶葡萄糖异构酶葡萄糖葡萄糖 果糖果糖 果葡糖浆果葡糖浆思考哪一种方法更容易?哪一种方法对酶影响更小?哪一种方法更容易?微生物发酵变成连续的酶反应的方法?大分子反应物采用哪一种方法?不溶于水的多孔性载体明胶琼脂糖醋酸纤维素醋酸纤维素海藻酸钠海藻酸钠聚丙烯酰胺聚丙烯酰胺海藻酸钠与琼脂海藻酸钠与琼脂袋装干酵母袋装干酵母活化的酵母活化的酵母酵母细胞的活化酵母细胞的活化(干酵母加蒸馏水成糊状放置干酵母加蒸馏水成糊状放置1h)酵母细胞活化时体积会变大,因此活化前应该选酵母细胞活化时体积会变大,因此活化前应该选择体积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液择体积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外
3、。溢出容器外。配制物质的量浓度为配制物质的量浓度为0.05mol/l的的CaCL2溶液溶液充分溶解、待用充分溶解、待用配制海藻酸钠溶液小火间断加热促溶解小火间断加热促溶解加热使海藻酸钠溶化是加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,操作中最重要的一环,涉及到实验的成败,教涉及到实验的成败,教师一定要提醒学生按照师一定要提醒学生按照教材的提示进行操作。教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞胶珠所包埋
4、的酵母细胞的数目少,影响实验效的数目少,影响实验效果。果。海藻酸钠与酵母细胞混合溶化的海藻酸钠冷却,加入溶化的海藻酸钠冷却,加入活化的酵母细胞,活化的酵母细胞,搅拌均匀,转移至注射器中。搅拌均匀,转移至注射器中。固定化酵母细胞刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的蒸馏水冲洗凝胶珠25发酵24h(一)观察凝胶珠的(一)观察凝胶珠的颜色和形状
5、颜色和形状(二)观察发酵的(二)观察发酵的葡萄糖溶液葡萄糖溶液如果制作的凝胶珠颜色过如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。要再作尝试。利用固定的酵母细利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,胞发酵产生酒精,可以看到产生了很可以看到产生了很多气泡,同时会闻多气泡,同时会闻到酒味。到酒味。固定化技术得精品 超越想象 85.每一年,我都更加相信生命的浪
6、费是在于:我们没有献出爱,我们没有使用力量,我们表现出自私的谨慎,不去冒险,避开痛苦,也失去了快乐。约翰B塔布 86.微笑,昂首阔步,作深呼吸,嘴里哼着歌儿。倘使你不会唱歌,吹吹口哨或用鼻子哼一哼也可。如此一来,你想让自己烦恼都不可能。戴尔卡内基 87.当一切毫无希望时,我看着切石工人在他的石头上,敲击了上百次,而不见任何裂痕出现。但在第一百零一次时,石头被劈成两半。我体会到,并非那一击,而是前面的敲打使它裂开。贾柯瑞斯 88.每个意念都是一场祈祷。詹姆士雷德非 89.虚荣心很难说是一种恶行,然而一切恶行都围绕虚荣心而生,都不过是满足虚荣心的手段。柏格森 90.习惯正一天天地把我们的生命变成某
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